蛋白酶體抑制劑的制作方法

專利名稱：：蛋白酶體抑制劑的制作方法
技術領域：
：本發明是關于適用作蛋白酶體抑制劑的硼酸和硼酸酯化合物。本發明還提供含有本發明化合物的藥用組合物以及使用所述組合物治療各種疾病的方法。
背景技術：
：硼酸和硼酸酯化合物展現各種藥學上適用的生物活性。神飛(Shenvi)等人在美國專利第4,499,082號(1985年)中揭示肽硼酸(p印tideboronicacid)是某些蛋白水解酶的抑制劑。克特納(Kettner)和神飛(Shenvi)在美國專利第5，187，157號(1993年)、美國專利第5，2"，卯4號(I993年)和美國專利第5，250，"0號(I993年)中描述了一類抑制胰蛋白酶樣蛋白酶的肽硼酸。克里曼(Kleeman)等人在美國專利第5，169，841號(1992年)中揭示了抑制腎素的作用的N-末端修飾肽硼酸。肯達(Kinder)等人在美國專利第5，106，948號(1992年)中揭示了抑制癌細胞生長的某些硼酸化合物。巴喬夫欽(Bachovchin)等人在WO07/0005991中揭示了抑制成纖維細胞活化蛋白的肽硼酸化合物。硼酸和硼酸酯化合物特別有希望成為蛋白酶體(即一種負責大部分細胞內蛋白質周轉的多催化蛋白酶)的抑制劑。亞當斯(Adams)等人在美國專利第5，780，454號(1998年)中描述了適用作蛋白酶體抑制劑的肽硼酸酯和硼酸化合物。此文獻還描述了硼酸酯和硼酸化合物降低肌肉蛋白降解率、降低細胞中NF-kB的活性、降低細胞中p53蛋白的降解率、抑制細胞中的細胞周期蛋白(cyclin)降解、抑制癌細胞生長和抑制NF-KB依賴性細胞粘附的用途。孚雷(Furet)等人的WO02/096933、查特吉(Chatterjee)等人的WO05/016859以及布拿甸尼(Bernadini)等人的WO05/021558和W006/08660中揭示了據報導具有蛋白酶體抑制活性的其它硼酸酯和硼酸化合物。西查諾瓦(Ciechanover)，細胞(Cell)，79:13-21(1994)揭示蛋白酶體是泛素_蛋白酶體途徑的蛋白水解組分，在此途徑中蛋白質通過與多個泛素分子結合而被靶向降解。西查諾瓦還揭示泛素-蛋白酶體途徑在各種重要生理過程中起關鍵作用。李維特(Rivett)等人，生物化學雜志(Biochem.J.)291:1(1993)揭示蛋白酶體展現出胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和肽基谷氨酰基肽酶活性。構成26S蛋白酶體催化核心的是20S蛋白酶體。麥克馬克(McCormack)等人，生物化學(Biochemistry)37:7792(1998)教示了各種肽底物被20S蛋白酶體所分解，所述底物包括Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC、Z-Leu-Leu-Arg-AMC和Z-Leu-Leu-Glu-2NA，其中Sue為N_琥珀酰基，AMC為7-氨基-4-甲基香豆素，以及2NA為2_萘胺。蛋白酶體抑制體現了癌癥治療的一種重要新策略。金(King)等人，科學(Science)274:1652-1659(1996)描述了泛素_蛋白酶體途徑在調控細胞周期J中瘤生長和轉移方面的重要作用。作者教示在細胞周期期間許多關鍵調控蛋白質(包括細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶p21和p27K1151)通過泛素-蛋白酶體途徑而暫時性地被降解。細胞需要這些蛋白質的有序降解以加快細胞周期并進行有絲分裂。此外，轉錄調控也需要泛素-蛋白酶體途徑。帕羅貝拉(Palombella)等人，細胞(Cell)，78:773(1994)教示轉錄因子NF-kB的活化受到蛋白酶體介導的抑制蛋白IKB降解的調控。NF-KB又對調控涉及免疫反應和炎癥反應的基因起重要作用。瑞德(Read)等人，免疫(Immunity)2:493-506(1995)教示細胞粘附分子(例如E-選擇蛋白、ICAM-1和VCAM-1)的表達需要泛素-蛋白酶體途徑。澤特爾(Zetter)，癌生物學研究文輯(SeminarsinCancerBiology)4:219-229(1993)教示細胞粘附分子通過引導腫瘤細胞向體內遠處組織位點粘附和外滲以及從脈管系統向體內遠處組織位點粘附和外滲而涉及于體內(invivo)腫瘤轉移和血管生成。此夕卜，貝歌(Beg)和巴爾地摩(Baltimore)，科學(Science)274:782(1996)教示NF-kB是一種抗細胞凋亡控制因子，并且對NF-kB活化的抑制使細胞對環境壓力和細胞毒性劑更加敏感。蛋白酶體抑制劑VELCADE⑧(硼替佐米(bortezomib);N_2_吡嗪羰基_L_苯丙氨酸-L-亮氨酸硼酸)是首個得到監管機構批準的蛋白酶體抑制劑。米斯亞德(Mitsiades)等人，當代藥物靶點(CurrentDrugTargets)，7:1341(2006)綜述了使得硼替佐米獲準用于治療已接受至少一種先前療法的多發性骨髓瘤患者的臨床研究。費舍爾(Fisher)等人，臨床腫瘤學雜志(J.Clin.Oncol.)，30:4867描述了一種確認硼替佐米在復發或難治性套細胞淋巴瘤患者中的活性的國際多中心II期研究。石井(Ishii)等人，藥物化學中的抗癌劑(Anti-CancerAgentsinMedicinalChemistry)，7:359(2007)和羅卡羅(Roccaro)等人，當代藥物生物技術(Curr.Pharm.Biotech.)，7:1341(2006)討論了多種可促成硼替佐米抗腫瘤活性的分子機制。由以上參考文獻所證明，蛋白酶體是治療性干預的重要靶點。因此，不斷需要新穎和/或改進的蛋白酶體抑制劑。
發明內容本發明提供作為有效蛋白酶體抑制劑的化合物。這些化合物適用于體外(invitro)和體內(invivo)抑制蛋白酶體活性，并且尤其適用于治療各種細胞增殖性疾病。本發明化合物具有通式(I):或其藥學上可接受的鹽或硼酸酐，其中Z1和Z2各自獨立地為羥基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基；或Z1和Z2—起形成源自硼酸絡合劑的部分；并且環A選自由以下所組成的群組<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(I)的硼酸化合物(其中z工和f各自為羥基)以下列化學名稱來提及。表l.蛋白酶體抑制劑<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>單獨使用或作為較大部分的一部分使用的術語"烷基"是指具有1至12個碳原子的直鏈或支鏈或環狀脂肪族基團。術語"烷氧基"是指-o-烷基。單獨使用或作為較大部分的一部分使用的術語"芳基"和"芳(例如"芳烷基"、"芳烷氧基"或"芳氧基烷基")是指含有1至3個環的C6至C14芳香族烴，所述環各自任選經取代。優選地，芳基為Ce—w芳基。芳基包括(但不限于)苯基、萘基和蒽基。"芳烷基"或"芳基烷基"含有與烷基共價連接的芳基，所述烷基或所述芳基各自獨立地任選經取代。優選地，芳烷基為C6—10芳基(C卜6)烷基、C6—10芳基(C卜4)烷基或C6—10芳基((V3)烷基，包括(但不限于)苯甲基、苯乙基和萘甲基。本文中所用的術語"經取代"意指指定部分的氫基被特定取代基的基團置換，前提是取代作用導致穩定或化學上可行的化合物。合適取代基的非限制性實例包括C卜6烷基、c3—8環焼基、(V6焼基(c3—8)環焼基、c2—8;l;希基、c2—8塊基、氛基、氛基、(V6焼基氛基、三(c卜6)烷基氨基、苯甲基氨基、二苯甲基氨基、硝基、羧基、羰基(c卜6)烷氧基、三氟甲基、鹵素、cv6院氧基丄6_10方基丄6_10方基(Ch)院基丄6_10方基(C卜6)院氧基、輕基、C丄—6院基硫基、C卜6院基亞磺酰基、c卜6烷基磺酰基、c6—1Q芳基硫基、c6—1Q芳基亞磺酰基、c6—1Q芳基磺酰基、c6—1Q芳基、c卜e烷基(c6—10)芳基禾口卣代(c6—10)芳基。本文中所使用的短語"一個或多個取代基"是指一定數目的取代基，其等于基于可利用的成鍵位點的數目有可能的一個至最大數目的取代基，前提是滿足上述穩定性和化學可行性的條件。除非另有說明，否則任選經取代的基團可在所述基團的每個可取代位置具有取代基，并且取代基可相同或不同。本文中所使用的術語"獨立地選定"意指針對單個化合物中指定代號的多種情形可以選擇相同或不同的值。術語"約"在本文中用于表示近似、大約、大致或左右。當術語"約"與數值范圍聯合使用時，其通過將界限擴展至所述數值以上和以下來修飾那一范圍。一般來說，術語"約"在本文中用于修飾高于或低于所述值10%的數值。本文中所使用的術語"包含"意指"包括(但不限于)"。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>在式(1)和(2)中，代號n為O至約10的整數，優選為0、1、2、3或4。在一些實施例中，硼酸酐化合物含有式(2)的環狀三聚體("硼氧烴三聚物(boroxine)")，其中n為1。代號W具有式(3):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>其中環A具有上文關于式(I)所述的值。在一些實施例中，硼酸酐化合物中所存在的至少80%硼酸以單寡聚酸酐形式存在。在一些實施例中，硼酸酐化合物中所存在的至少85%、90%、95%或99%硼酸以單寡聚酸酐形式存在。在某些優選實施例中，硼酸酐化合物由或基本上由具有式(3)的硼氧烴三聚物組成。優選可由相應硼酸通過暴露于脫水條件(包括(但不限于)再結晶、凍干、暴露于熱和/或暴露于干燥劑)下來制備硼酸酐化合物。合適再結晶溶劑的非限制性實例包括乙酸乙酯、二氯甲烷、己烷、乙醚、乙腈、乙醇和其混合物。在一些實施例中，Z1和Z2—起形成源自硼酸絡合劑的部分。就本發明而言，術語8除非另有說明，否則本文中所示的結構意在包括區別僅在于存在一個或多個同位素富集原子的化合物。例如，除了以氖或氚置換氫原子或以13c或14C富集碳置換碳原子之外具有本發明結構的化合物在本發明的范圍之內。本文中所用的術語"硼酸"是指含有_B(0H)2部分的化合物。在一些實施例中，硼酸化合物可通過使硼酸部分脫水而形成寡聚酸酐。舉例來說，斯奈德(Snyder)等人，美國化學會志(J.Am.Chem.Soc.)80:3611(1958)報導了寡聚芳基硼酸。本文中所使用的術語"硼酸酐"是指由兩個或兩個以上硼酸化合物分子結合同時失去一個或多個水分子所形成的化合物。當與水混合時，硼酸酐化合物被水化而釋放游離硼酸化合物。在各種實施例中，硼酸酐可含有兩個、三個、四個或四個以上硼酸單元，并且可具有環狀或線性構型。本發明肽硼酸化合物的寡聚硼酸酐非限制性實例如下所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>"硼酸絡合劑"是指任何具有至少兩個官能團的化合物，所述至少兩個官能團各自可與硼形成共價鍵。合適官能團的非限制性實例包括氨基和羥基。在一些實施例中，至少一個官能團是羥基。術語"源自硼酸絡合劑的部分"是指通過從硼酸絡合劑的兩個官能團去除氫原子所形成的部分。本文中所使用的術語"棚酸酉旨(boronateester/boronicester)，，是指含有-B(Z1)(Z2)部分的化合物，其中Z工或Z2中至少一個是烷氧基、芳烷氧基或芳氧基；或Z1和Z2—起形成源自具有至少一個羥基的硼酸絡合劑的部分。在一些實施例中，Z1和Z2—起形成源自具有至少兩個被鏈或環中的至少兩個相連原子所隔開的羥基的化合物的部分，所述鏈或環含有碳原子和(任選地)可為N、S或0的一個或多個雜原子，其中在各情況下與硼相連的原子是氧原子。本文中所使用的術語"具有至少兩個羥基的化合物"是指任何具有兩個或兩個以上羥基的化合物。就本發明而言，兩個羥基優選被至少兩個相連原子、優選約2至約5個相連原子、更優選2或3個相連原子所隔開。為了方便起見，術語"二羥基化合物"可用于指代上述定義的具有至少兩個羥基的化合物。因此，本文中所使用的術語"二羥基化合物"并不旨在限于僅具有兩個羥基的化合物。源自具有至少兩個羥基的化合物的部分可通過其羥基中任意兩個羥基的氧原子與硼相連。優選地，硼原子、與硼相連的氧原子和連接兩個氧原子的原子一起形成5或6元環。就本發明而言，硼酸絡合劑優選為藥學上可接受的，即適合投與人類。在一些優選實施例中，硼酸絡合劑是糖。術語"糖"包括任何多羥基碳水化合物部分，包括單糖、雙糖、多糖、糖醇和氨基糖。在一些實施例中，糖為單糖、雙糖、糖醇或氨基糖。合適糖的非限制性實例包括葡萄糖、蔗糖、果糖、海藻糖、甘露醇、山梨醇、葡糖胺和^甲基葡糖胺。在某些實施例中，糖是甘露醇或山梨醇。因此，在糖為甘露醇或山梨醇的實施例中，Z1和Z2—起形成式C6H1206的部分，其中兩個去質子化羥基的氧原子與硼形成共價連接而形成硼酸酯化合物。在某些特定實施例中，Z工和Z2—起形成源自D-甘露醇的部分。在一些實施例中，式(I)化合物如普拉蒙東(Plamondon)等人在W002/059131中所描述制備成凍干粉，此案的全文據此以引用的方式并入本文中。在一些實施例中，凍干粉還包含游離二羥基化合物。優選地，游離二羥基化合物與式(I)化合物以在約0.5:l至約ioo:1、更優選為約5:i至約ioo:i范圍內的摩爾比存在于混合物中。在二羥基化合物為甘露醇的各種實施例中，凍干粉包含摩爾比在約io:i至約ioo:1、約20:i至約ioo:l或約40:i至約ioo:i范圍內的游離甘露醇與甘露醇硼酸酯。在一些實施例中，凍干粉包含甘露醇和式(i)化合物，大體上不含其它組分。然而，組合物可進一步含有一種或多種其它藥學上可接受的賦形劑、載劑、稀釋劑、填充劑、鹽、緩沖劑、穩定劑、增溶劑和業界熟知的其它物質。含有這些物質的藥學上可接受制劑的制備描述于(例如)雷明登氏藥學的理論與實踐(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)，第20版，詹納羅(A.Gennaro)編，利平科特威廉斯威爾金斯出版公司(Li卯incottWilliams&Wilkins)，2000或最新版本中。優選根據普拉蒙東(Plamondon)等人在W002/059131中描述的程序制備包含式(I)化合物的凍干粉。因此，在一些實施例中，用以制備凍干粉的方法包含(a)制備包含肽硼酸和二羥基化合物的水性混合物；和(b)凍干所述混合物。9[OO43]—般合成萬法式(I)化合物可通過所屬領域技術人員已知的方法來制備。參見，例如亞當斯(Adams)等人的美國專利第5，780，454號；皮格斯吉爾(Pickersgill)等人的國際專利公開案WO2005/097809。示范性合成途徑如下面流程1中所示。流程1:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>化合物i與N受保護甘氨酸(ii)偶聯，隨后進行N-端脫保護，從而提供化合物iii。合適保護基(PG)的實例包括(但不限于)酰基保護基，例如甲酰基、乙酰基(Ac)、琥珀酰基(Sue)和甲氧基琥珀酰基；和氨基甲酸酯保護基，例如叔丁氧羰基(Boc)、芐氧羰基(Cbz)和芴基甲氧羰基(Fmoc)。肽偶聯反應可通過預先使化合物ii的羧酸部分轉化成活化酯(例如，O-(N-羥基琥珀酰亞胺)酯)，隨后用化合物i處理來進行。或者，可通過使羧酸與肽偶聯試劑相接觸而就地產生活化酯。合適肽偶聯試劑的實例包括(但不限于)碳化二亞胺試劑，例如二環己基碳化二亞胺(DCC)或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDC);磷鎗試劑，例如苯并三唑-l-基氧基三(二甲氨基)磷鎗六氟磷酸鹽(BOP);和脲鎗試劑，例如，O-(IH-苯并三唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基脲鎗四氟硼酸酯(TBTU)。隨后，使化合物iii與經取代的苯甲酸(ArC02H)，偶聯提供化合物iv。上述用于化合物i和ii偶聯的肽偶聯條件也適合于使化合物iii與ArC(^H偶聯。隨后，將硼酸部分脫保護獲得化合物v。優選在包含硼酸酯化合物iv、有機硼酸受體(acc印tor)、低碳烷醇、C5—8烴溶劑和水性無機酸的兩相混合物中通過酯交換作用(transesterification)來實現脫保護步驟。流程2:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>或者，如流程2所示，可顛倒偶聯反應的順序。因而，首先使0受保護甘氨酸(vi)與經取代的苯甲酸(ArC02H)偶聯，然后發生酯水解反應，從而形成化合物vii。隨后，如上文關于流程1所描述，實現與化合物i偶聯和硼酸脫保護而獲得化合物v。用途、調配和投藥本發明提供作為有效蛋白酶體抑制劑的化合物。可在體外或體內測定化合物抑制蛋白酶體介導的肽水解或蛋白質降解的能力。因此，在另一方面中，本發明提供一種抑制細胞中蛋白酶體的一種或多種肽酶活性的方法，其包含使需要蛋白酶體抑制的細胞與本文所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、硼酸酯或硼酸酐相接觸。本發明還提供一種抑制細胞增殖的方法，其包含使需要所述抑制的細胞與本文所述的化合物相接觸。短語"抑制細胞增殖"用來表示與未接觸抑制劑的細胞相比本發明化合物在所接觸的細胞中抑制細胞數目或細胞生長的能力。可通過使用細胞計數器來計數細胞或通過細胞存活力測定(例如，MTT或WST測定)來評估細胞增殖。在細胞呈實體生長(例如，實體腫瘤或器官)時，可通過例如使用測徑器測量生長并比較被接觸細胞與未接觸細胞的生長的尺寸來評估細胞增殖。優選地，與未接觸細胞的生長相比，與抑制劑相接觸的細胞的生長被延遲至少約50%。在各種實施例中，與未接觸細胞相比，被接觸細胞的細胞增殖被抑制了至少約75%，至少約90%，或至少約95%。在一些實施例中，短語"抑制細胞增殖"包括與未接觸細胞相比被接觸細胞的數目減少。因此，在被接觸細胞中抑制細胞增殖的蛋白酶體抑制劑可誘導被接觸細胞經歷生長延遲、生長停滯、程序化細胞死亡(即凋亡)或細胞壞死。在另一方面中，本發明提供一種藥用組合物，其包含式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或硼酸酐，和藥學上可接受的載劑。如果在這些組合物中使用本發明化合物的藥學上可接受的鹽，則所述鹽優選源自無機或有機酸或堿。關于合適鹽的綜述可參見(例如)伯格(Berge)等人，藥物科學雜志(J.Pharm.Sci.)66:1-19(1977)和雷明登氏藥學的理論與實踐(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)，第20版，詹納羅(A.Gennaro)編，利平科特威廉斯威爾金斯出版公司(LippincottWilliams&Wilkins)，2000。合適酸加成鹽的非限制性實例包括以下乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、天門冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環戊烷丙酸鹽、二葡糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙烷磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽(lucoh印tanoate)、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、甲烷磺酸鹽、2_萘磺酸鹽、煙酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3_苯基_丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一酸鹽。合適堿加成鹽包括(但不限于)銨鹽；堿金屬鹽，例如鋰鹽、鈉鹽和鉀鹽；堿土金屬鹽，例如鈣鹽和鎂鹽；其它多價金屬鹽，例如鋅鹽；與有機堿形成的鹽，所述有機堿例如有二環己胺、N-甲基-D-葡糖胺、叔丁胺、乙二胺、乙醇胺和膽堿；以及與氨基酸形成的鹽，所述氨基酸例如有精氨酸、賴氨酸和諸如此類。在一些實施例中，藥學上可接受的鹽是式(I)硼酸化合物的堿加成鹽，其中z1和Z2均為羥基。術語"藥學上可接受的載劑"在本文中用于指與接受個體(優選為哺乳動物，更優選為人類)相容并適合于向目標位置傳遞活性劑而不會使試劑活性終止的物質。為達成活性劑的預期用途，與載劑相關的毒性或不良效應(如果存在)優選與合理的風險/益處比相當。術語"載劑"、"佐劑"或"媒劑"在本文中可互換使用并包括適合于所要特定劑型的任意和所有溶劑、稀釋劑和其它液體媒劑、分散或懸浮助劑、表面活性劑、pH調節劑、等滲劑、增稠劑或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤滑劑和諸如此類。雷明登氏藥學的理論與實踐(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)，第20片反，詹纟內羅(A.Gennaro)編，利平科特*威廉斯'威爾金斯出版公司(LippincottWilliams&Wilkins)，2000揭示了用于調配藥學上可接受組合物的各種載劑和其已知制備技術。除非任何常規載劑介質與本發明化合物不相容(例如由于產生任何不良的生物效應或不然以有害方式與藥學上可接受組合物的任何其它組分發生相互作用)，否則其使用均涵蓋在本發明的范圍內。可充當藥學上可接受載劑的物質的一些實例包括(但不限于)離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)；緩沖物質，例如磷酸鹽、碳酸鹽、氫氧化鎂和氫氧化鋁、甘氨酸、山梨酸或山梨酸鉀；飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物；水、無熱原質水、鹽或電解質，例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉和鋅鹽；硅膠、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂；糖，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖和甘露醇；淀粉，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素和其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；黃蓍膠粉、麥芽、明膠、滑石、賦形劑，例如可可脂和栓劑蠟；油類，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二醇類，例如丙二醇和聚乙二醇；酯類，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂、褐藻酸、等滲鹽水、林格氏溶液(Ringer'ssolution);醇類，例如乙醇、異丙醇、十六醇和甘油；環糊精，例如羥丙基P-環糊精和磺丁基醚P-環糊精；潤滑劑，例如月桂基硫酸鈉和硬脂酸鎂；石油烴，例如礦物油和礦脂(petrolatum)。依照調配者的判斷，著色齊U、釋放齊U、包衣齊U、甜味齊IJ、調味劑和加香劑、防腐劑和抗氧化劑也可存在于組合物中。本發明的藥用組合物可通過業界熟知的方法制造，例如常規制粒、混合、溶解、包囊、凍干或乳化工藝等。組合物可制為各種形式，包括顆粒劑、沉淀物或微粒、粉末(包括冷凍干燥粉末、旋轉干燥粉末或噴霧干燥粉末、無定形粉末)、片劑、膠囊、糖漿、栓劑、注射劑、乳液、酏劑、懸浮液或溶液。根據一個優選實施例，為向哺乳動物(優選人類)投藥對本發明的組合物進行調配。本發明的這些藥用組合物可以口服、以不經腸方式、通過吸入噴霧劑、以局部、經直腸、經鼻、經頰、經陰道方式或經由植入式儲集器投與。本文中所使用的術語"不經腸"包括皮下、靜脈內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、肝內、病灶內和顱內注射或輸注技術。優選地，組合物口服、靜脈內或皮下投與。本發明的制劑可被設計成短效、速釋或長效的。更進一步地，化合物可以局部而非全身性方式投與，例如在腫瘤位點處(例如通過注射)投與。用于口服的液體劑型包括(但不限于)藥學上可接受的乳液、微乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除活性化合物之外，液體劑型還可含有業界通常使用的惰性稀釋劑，例如水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、l，3-丁二醇、環糊精、二甲基甲酰胺、油類(尤其為棉籽油、落花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和山梨醇酐脂肪酸酯，以及其混合物。除了惰性稀釋劑外，口服組合物也可包括佐劑，例如，潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調味劑和加香劑。可根據已知技術使用適合的分散劑或潤濕劑和懸浮劑來調配可注射制劑，例如無菌可注射的水性或油質懸浮液。無菌可注射制劑還可為于無毒、不經腸可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、懸浮液或乳液，例如于1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒劑和溶劑中，可使用的有水、林格氏溶液、U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。此外，常規上使用無菌不揮發油作為溶劑或懸浮介質。為此，可使用任何溫和的不揮發油，包括合成單甘油酯和二甘油酯。此外，在注射劑的制備中使用脂肪酸，例如油酸。可對可注射制劑進行滅菌，例如，通過經由濾菌器過濾，或通過在無菌固體組合物形式中并入殺菌劑，所述組合物可在使用前溶解于或分散于無菌水或其它無菌可注射介質中。經調配用于不經腸投藥的組合物可通過團注或通過定時推注來注射，或可通過連續輸注來投與。用于口服的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉末和顆粒劑。在這些固體劑型中，將活性化合物與至少一種惰性、藥學上可接受的賦形劑或載劑(例如檸檬酸鈉或磷酸二鈣)和/或a)填充劑或增量劑(例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸)、b)粘合劑(例如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠)、c)保濕劑(例如甘油)、d)崩解劑(例如瓊脂_瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉)、e)阻溶劑(例如石蠟)、f)吸收促進劑(例如季銨化合物)、g)潤濕劑(例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯)、h)吸收劑(例如高嶺土和膨潤土)和i)潤滑劑(例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固態聚乙二醇、月桂基硫酸鈉和其混合物混合。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，所述劑型還可包含緩沖劑，例如磷酸鹽或碳酸鹽。還可使用賦形劑(例如，乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇和諸如此類)將相似類型的固體組合物用作軟填充和硬填充明膠膠囊中的填充物。片劑、糖錠劑、膠囊、丸劑和顆粒劑的固體劑型可制備為具有包衣和外殼，例如腸溶衣和藥物調配技術中熟知的其它包衣。其可任選地含有遮光劑，并且還可為僅在或優先在腸道某特定部分任選地以延遲方式釋放活性成分的組合物。可使用的包埋組合物的實例包括聚合物質和蠟。還可使用賦形劑(例如，乳糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇和諸如此類)將相似類型的固體組合物用作軟填充和硬填充明膠膠囊中的填充物。活性化合物還可與一種或多種上述賦形劑一起呈微膠囊形式。片劑、糖錠劑、膠囊、丸劑和顆粒劑的固體劑型可制備為具有包衣和外殼，例如腸溶衣、控釋包衣和藥物調配技術中熟知的其它包衣。在這些固體劑型中，可將活性化合物與至少一種惰性稀釋劑(例如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。如在正常作業中，這些劑型還可包含除惰性稀釋劑之外的其它物質，例如壓片潤滑劑和其它壓片助劑，例如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠囊、片劑和丸劑的情況下，所述劑型還可包含緩沖劑。其可任選地含有遮光劑，并且還可為僅在或優先在腸道某特定部分任選地以延遲方式釋放活性成分的組合物。可使用的包埋組合物的實例包括聚合物質和蠟。用于局部或經皮投與本發明化合物的劑型包括軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、粉末、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼片。在無菌條件下，將活性組分與藥學上可接受的載劑和任何所需的防腐劑或緩沖劑按要求混合。眼用制劑、滴耳劑和滴眼劑也涵蓋于本發明的范圍之內。另外，本發明還涵蓋使用經皮貼片，其具有提供化合物于身體內受控傳遞的額外益處。這些劑型可通過使化合物溶解或分散于合適介質中而制得。也可使用吸收增強劑來增加化合物穿過皮膚的通量。可通過提供速率控制膜或通過將化合物分散于聚合物基質或凝膠中來控制速率。在一些實施例中，式(I)化合物靜脈內投與。在這些實施例中，式(I)化合物(其中Z1和Z2—起形成源自硼酸絡合劑的部分)可制備成上述凍干粉的形式。優選通過添加適合于藥物投與的水性溶劑來復配凍干粉。合適復配溶劑的實例包括(但不限于)水、鹽水和磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)。優選地，使用標準(0.9%)鹽水來復配凍干粉。復配后，在硼酸酯化合物與相應游離硼酸化合物之間建立平衡。在一些實施例中，在添加水性介質后很快達到平衡，例如在10-15分鐘之內。平衡時所存在的硼酸酯與硼酸的相對濃度取決于諸多參數，例如溶液pH值、溫度、硼酸絡合劑的性質以及凍干粉中存在的硼酸絡合劑與硼酸酯化合物的比率。本發明的藥用組合物優選為了投與患有蛋白酶體介導性病癥或處于患上蛋白酶體介導性病癥或經歷蛋白酶體介導性病癥復發的風險之中的患者而調配。本文中所使用的術語"患者"意指動物，優選為哺乳動物，更優選為人類。本發明的優選藥用組合物是經調配用于口服投藥、靜脈內投藥或皮下投藥的那些組合物。然而，含有治療有效量的本發明化合物的上述任一種劑型都完全在常規試驗的范圍之內，并因此，完全在本發明的范圍之內。在一些實施例中，本發明的藥用組合物可進一步含有另一治療劑。在一些實施例中，所述另一治療劑是通常向患有所治療疾病或病狀的患者投與的治療劑。"治療有效量"意指足以引起蛋白酶體活性或蛋白酶體介導性病癥嚴重程度可檢測到的降低的量。所需蛋白酶體抑制劑的量應取決于抑制劑對給定細胞種類的有效性以及治療所述病癥所需的時間長度。還應了解，對于任何特定患者而言，具體劑量和治療方案應取決于各種因素，包括所使用具體化合物的活性、患者的年齡、體重、總體健康情況、性別和飲食、投藥時間、排泄率、藥物組合、治療醫師的判斷以及所治療特定疾病的嚴重程度。本發明組合物中所存在的其它治療劑的量通常應不超過就含有這一治療劑作為唯一活性劑的組合物而言通常將投與的量。優選地，其它治療劑的量的范圍可為含有這一治療劑作為唯一治療活性劑的組合物中通常所存在量的約50%至約100%。在另一方面中，本發明提供一種治療患有蛋白酶體介導性病癥或處于患上蛋白酶體介導性病癥或經歷蛋白酶體介導性病癥復發的風險之中的患者的方法。本文中所使用的術語"蛋白酶體介導性病癥"包括由蛋白酶體表達或活性的增加所引起、或特征在于蛋白酶體表達或活性的增加、或需要蛋白酶體活性的任何病癥、疾病或病狀。術語"蛋白酶體介導性病癥"還包括對蛋白酶體活性的抑制有益處的任何病癥、疾病或病狀。舉例來說，本發明化合物和藥用組合物適用于治療經由受蛋白酶體活性調控的蛋白質(例如，NFKB、p27KiP、p2lw感，p53)所介導的病癥。相關病癥包括炎性病癥(例如，類風濕性關節炎、炎癥性腸病、哮喘、慢性阻塞性肺病(C0PD)、骨關節炎、皮膚病(例如，異位性皮炎、牛皮癬))、血管增殖性病癥(例如，動脈粥樣硬化癥、再狹窄)、眼部增殖性病癥(例如，糖尿病性視網膜病變)、良性增殖性病癥(例如，血管瘤)、自身免疫疾病(例如，多發性硬化、組織和器官排斥反應)，以及與感染相關的炎癥(例如，免疫反應)、神經退行性病癥(例如，阿爾茨海默氏病(Alzheimer'sdisease)、帕金森氏病(Parkinson'sdisease)、運動神經元疾病、神經病理性疼痛、三聯體重復病癥(tripletr印eatdisorder)、星形細胞瘤和由酒精性肝病導致的神經退化)、缺血性損傷(例如，中風)和惡病質(例如，伴隨各種生理病理狀態的加速肌肉蛋白降解(例如，神經損傷、絕食、發燒、酸中毒、HIV感染、癌癥和某些內分泌病))。本發明化合物和藥用組合物特別適用于治療癌癥。本文中所使用的術語"癌癥"是指一種細胞病癥，其特征為不受控制或失調的細胞增殖、降低的細胞分化、不適當地侵襲周圍組織的能力和/或在異位位點形成新的生長的能力。術語"癌癥"包括(但不限于)實體腫瘤和血液腫瘤。術語"癌癥"涵蓋皮膚、組織、器官、骨、軟骨、血液和血管的疾病。術語"癌癥"還包括原發癌和轉移癌。可用所揭示的蛋白酶體抑制劑治療的實體腫瘤的非限制性實例包括胰腺癌；膀胱癌；結腸直腸癌；乳腺癌，包括轉移性乳腺癌；前列腺癌，包括雄激素依賴性前列腺癌和雄激素非依賴性前列腺癌；腎癌，包括(例如)轉移性腎細胞癌；肝細胞癌；肺癌，包括(例如)非小細胞肺癌(NSCLC)、細支氣管肺泡癌(BAC)和肺腺癌；卵巢癌，包括(例如)進行性上皮癌或原發性腹膜癌；子宮頸癌；胃癌；食道癌；頭頸部癌，包括(例如)頭頸部鱗狀細胞癌；黑色素瘤；神經內分泌癌，包括轉移性神經內分泌腫瘤；腦部腫瘤，包括(例如)神經膠質瘤、間變少枝膠質細胞瘤、成人多形性膠質母細胞瘤和成人間變星形細胞瘤；骨癌；和軟組織肉瘤。可用所揭示的蛋白酶體抑制劑治療的血液惡性腫瘤的非限制性實例包括急性骨髓白血病(AML);慢性骨髓性白血病(CML)，包括加速期CML和急變期CML(CML-BP);急性淋巴母細胞白血病(ALL);慢性淋巴細胞白血病(CLL);霍奇金病(Hodgkin'sdisease，HD);非霍奇金淋巴瘤(NHL)，包括濾泡性淋巴瘤和套細胞淋巴瘤；B細胞淋巴瘤；T細胞淋巴瘤；多發性骨髓瘤(匪)；瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥(Waldenstrom'smacroglobulinemia);骨髓發育不良綜合癥(MDS)，包括難治性貧血(RA)、難治性貧血伴有環形鐵粒幼細胞(RARS)、難治性貧血伴有原始細胞過多(RAEB)和轉變中的RAEB(RAEB-T);和骨髓增殖性綜合癥。在一些實施例中，本發明化合物或組合物用于治療患有癌癥或處于患上癌癥或經歷癌癥復發的風險之中的患者，所述癌癥選自由多發性骨髓瘤和套細胞淋巴瘤組成的群組。在一些實施例中，本發明的蛋白酶體抑制劑與另一治療劑聯合投與。所述另一治療劑也可抑制蛋白酶體，或可以不同機制起作用。在一些實施例中，所述另一治療劑是通常向患有所治療疾病或病狀的患者投與的治療劑。本發明的蛋白酶體抑制劑可與另一治療劑一起以單一劑型或以獨立劑型投與。當以獨立劑型投與時，所述另一治療劑可在投與本發明的蛋白酶體抑制劑之前、同時或之后投與。在一些實施例中，式(I)的蛋白酶體抑制劑與抗癌劑聯合投與。本文中所使用的術語"抗癌劑"是指出于治療癌癥的目的向患癌癥的個體投與的任何藥劑。DNA損傷化療劑的非限制性實例包括拓撲異構酶I抑制劑(例如，伊立替康(irinotecan)、拓撲替康(topotecan)、喜樹堿(camptothecin)和其類似物或代謝物和阿霉素(doxorubicin));拓撲異構酶II抑制劑(例如，足葉乙甙(etoposide)、替尼泊武(teniposide)和柔紅霉素(daunorubicin));烷基化劑(例如，美法侖(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulfan)、噻替派(thiot印a)、異環磷酰胺(ifosfamide)、卡氮芥(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、司莫司汀(semustine)、鏈脲佐菌素(str印tozocin)、氮烯咪胺(decarbazine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、絲裂霉素C(mitomycinC)和環磷酰胺(cyclophosphamide));DNA嵌入劑(例如，順鉑(cisplatin)、奧沙利鉬(oxaliplatin)和卡鉬(carboplatin));DNA嵌入劑和自由基產生劑，例如博萊霉素(bleomycin);以及核苷模擬物(例如，5-氟尿嘧啶(5_fluorouracil)、卡培他濱(capecitibine)、吉西他濱(gemcitabine)、氟達拉濱(fludarabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、巰基嘌呤(mercaptopurine)、硫鳥嘌呤(thioguanine)、噴妥司汀(pentostatin)禾口羥基脈(hydroxyurea))。破壞細胞復制的化療劑包括紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)和相關類似物；長春新堿(vincristine)、長春堿(vinblastin)和相關類似物；沙利度胺(thalidomide)、來那度胺(lenalidomide)和相關類似物(例如，CC-5013和CC-4047);蛋白酪氨酸激酶抑制劑(例如甲磺酸伊馬替尼(i腿tinibmesylate)和吉非替尼(gefitinib));蛋白酶體抑制劑(例如，硼替佐米)；NF-kb抑制齊U，包括IkB激酶抑制劑；與過表達于癌癥中的蛋白質結合并進而下調細胞復制的抗體(例如，曲妥珠單抗(trastuzumab)、利妥昔單抗(rituximab)、西妥昔單抗(cetuximab)和貝伐單抗(bevacizumab));和已知在癌癥中被上調、過表達或活化的蛋白質或酶的其它抑制劑，所述抑制會下調細胞復制。為了更充分地理解本發明，陳述以下制備實例和測試實例。這些實施例說明如何制備或測試特定化合物，但不應視為以任何方式限制本發明的范圍。具體實施方式實例縮寫DCM二氯甲烷DIEA二異丙基乙胺EDCIN-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽EtOAc乙酸乙酯h小時HPLC高效液相色譜TBTUo-苯并三唑-N，N，N'，N'-四甲基脲鎗四氟硼酸酯HOBt1-羥基苯并三唑水合物LCMS液相色譜質譜min分鐘tr二極管陣列光譜的滯留時間分析型LC-MS方法使用下列梯度在SymmetryC18-3.5ym_4.6X50mm柱上進行光譜溶劑A:2%異丙醇、98%水、10慮NH4OAc溶劑B:75%乙腈、25%甲醇、10慮NH4OAc<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實例1:[(1R)-1-({[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸20D-甘露醇(1-1)的合成.20D-甘露醇步驟l:[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酸甲酯向2，3-二氟苯甲酸(0.190g，1.2mmo1)的四氫呋喃(5mL)溶液中添加甘氨酸甲酯鹽酸鹽(0.150g，1.2mmo1)、HOBt(O.162g，1.2mmo1)、DIEA(O.209mL，1.2mmo1)和EDCI(0.252g，1.3mmo1)。使反應混合物攪拌過夜。用飽和碳酸氫鈉溶液中止反應混合物反應，并使產物分配于DCM中。分離有機層，繼而去除溶劑，得到[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酸甲酯，其不經純化即用于下一步驟。乙酸向[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酸甲酯(0.250g，1.lmmol)的甲醇(7mL)溶液中添加氫氧化鋰(0.053g，2.2mmo1)和水(3mL)。使反應混合物攪拌過夜。混合物用水(20mL)稀釋并用1NHCl(5mL)酸化。使產物于DCM/甲醇(4:1)中分配。用硫酸鈉干燥有機層，并去除溶劑，得到[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酸，其不經純化即用于下一步驟。步驟3:2，3-二氟-N-[2-({(1R)_3_甲基-1-[(3aR，4R，6R，7aS)-3a，5，5_三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]苯甲酰胺向[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酸(O.205g，0.95mmo1)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加TBTU(O.337g，1.0,1)和(1R)_3-甲基+[(3aS，4S，6S，7aR)_3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-1，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁-l-胺的三氟乙酸鹽(0.362g，0.95,1)。使混合物冷卻到(TC，并滴加DIEA(0.498mL，2.9,1)。使反應混合物升溫到室溫并攪拌過夜。用100mL水中止反應，并使產物分配于DCM中。用硫酸鈉干燥有機層，并去除溶劑，得到2，3-二氟-N-[2-({(1R)-3-甲基-l-[(3aR，4R，6R，7aS)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]苯甲酰胺。步驟4:[(lR)-l-(([(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸向2，3-二氟-N-[2-({(lR)-3-甲基+[(3aR，4R，6R，7aS)_3a，5，5_三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]苯甲酰胺(0.536g，1.2mmo1)的甲醇/lNHC1(1:1)(1.5mL)溶液中添加庚醇(lmL)和硼酸異丁酯(0.207g，2.0mmo1)。使反應混合物攪拌過夜。將庚醇層分離并濃縮甲醇/HC1層。通過反相HPLC純化粗產物，得到[(1R)-l-(([(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸。步驟5:[(lR)-l-(([(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸20D-甘露醇(1-1)向[(1R)-l-(([(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸(0.085g，0.26mmo1)于叔丁醇(2mL)和水(5mL)中的溶液中添加D-甘露醇(0.943g，5.2mmo1)。溫熱溶液并使之攪拌直到全部溶解。接著將溶液冷凍并通過凍干法去除溶劑，得到[(1R)-l-(([(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸*20D-甘露醇(1-1)(0.98g，97%)。實例2:[(1R)-1-({[(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸20D-甘露醇(1-5)的合成步驟1:[2-({(lR)-3-甲基-l-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯經15分鐘向(1R)_3-甲基-l-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁-l-胺的三氟乙酸鹽(4.9g，10.8mmo1)、N---(叔丁氧羰基)甘氨酸(1.98g，11.3mmo1)和TBTU(3.81g，11.9mmo1)于DCM(100mL)中的混合物中滴加DIEA(5.64mL，32.4mmo1)的DCM(25mL)溶液。使反應混合物攪拌過夜并濃縮。通過柱色譜純化粗產物，得到[2-({(lR)-3-甲基-l-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.5g，55%)。步驟2:2-氨基-N-KlR)-3-甲基-l-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}乙酰胺向[2-({(lR)_3-甲基-l-[(3aS，4S，6S，7aR)_3a，5，5-三甲基六氫-4，6_亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.5g，5.9mmo1)的DCM(15mL)溶液中添加二噁烷(5.9mL)中的4MHC1。使反應混合物攪拌2小時并濃縮，得到2-氨基-N-{(1R)-3-甲基-1-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫_4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}乙酰胺，其不經純化即用于下一步驟。步驟3:2-溴-N-[2-({(lR)-3-甲基(3aS，4S，6S，7aR)_3a，5，5_三甲基六氫-4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]苯甲酰胺向2-溴苯甲酸(0.124g，0.62mmo1)的DCM(2.25mL)溶液中添加EDCI(0.119g，0.62,1)、HOBt(O.084g，0.62,1)、N-甲基嗎啉(0.185mL，1.68,1)和2_氨基-N-{(1R)-3-甲基-1-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫_4，6-亞甲基-1，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}乙酰胺(0.2g，0.56mmo1)。使反應混合物攪拌2小時并濃縮。將殘余物用水稀釋并用EtOAc萃取。將有機溶液合并，用鹽水洗滌，經MgS(^干燥，過濾并濃縮。通過柱色譜純化粗產物，得到2-溴-N-[2-({(1R)-3-甲基-1-[(3aS，4S，6S，7aR)-3a，5，5-三甲基六氫-4，6-亞甲基-1，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)_2-氧代乙基]苯甲酰胺(0.22g，78%)。步驟4:[(lR)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸向2-溴_N-[2-({(lR)-3-甲基(3aS，4S，6S，7aR)_3a，5，5_三甲基六氫_4，6-亞甲基-l，3，2-苯并二氧硼烷-2-基]丁基}氨基)-2-氧代乙基]苯甲酰胺(0.220g，0.44mmo1)于甲醇/己烷(1:1)(2.2mL)中的溶液中添加INHC1(lmL，1.Ommol)和硼酸異丁酯(0.078g，0.76rnrno1)。將反應混合物攪拌過夜。濃縮反應混合物并通過反相HPLC純化，得到[(1R)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸(0.119g，73%)。步驟5:[(lR)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸20D-甘露醇(1-5)向[(1R)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸(0.103g，0.28mmol)于叔丁醇(9mL)和水(1SmL)中的溶液中添加D-甘露醇(1.Olg，5.5rnmo1)。溫熱溶液并使之攪拌直到全部溶解。接著將溶液冷凍并通過凍干法去除溶劑，得到[(1R)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸'20D-甘露醇(1-5)(0.92g，84%)。以與實例1或2類似的方法由適當的起始物質制備下表中的化合物。1-1LCMS:ES-327.3，tr=3.36min。1-2LCMS:ES-343.2，tr=3.62min。1-3LCMS:ES-327.3，tr=3.49min。20<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實例2:20S蛋白酶體分析在37°C向384孔黑色微量滴定板中溶于匿SO的1yL測試化合物中添加25yL含有人類PA28活化子(BostonBiochem，終濃度12nM)與Ac-WLA-AMC(P5選擇性底物)(終濃度15yM)的測定緩沖液，隨后在37t:再添加25L含有人類20S蛋白酶體(BostonBiochem，終濃度0.25nM)的測定緩沖液。測定緩沖液由20mMHEPES、0.5mMEDTA和0.01%BSA組成，pH值為7.4。用BMGGalaxy讀板器(37°C，380nm激發，460nm發射，20增益)跟蹤反應。相對于0%抑制(DMS0)和100%抑制(10iiM硼替佐米)對照組計算抑制百分比。當以此測定測試時，化合物1-1至1-21均展現IC5。值小于50nM。實例3:抗增殖測定將100iiL補充有10%胎牛血清(英杰公司(Invitrogen))的適當細胞培養基(McCoy's5AforHCT-116，英杰公司)中的HCT-116(1000)或其它腫瘤細胞接種于96孔細胞培養板的孔中，并在37t:培育過夜。將測試化合物加入到孔內并將板在37t:培育96小時。向各孔中添加MTT或WST試劑(10iiL，羅氏公司(Roche))，并按制造商所述在37t:培育4小時。針對MTT，根據制造商說明書(羅氏公司)使所代謝的染料增溶過夜。對于MTT使用分光光度計(分子裝置公司(MolecularDevices))在595nm(主波長)和690nm(參比波長)下讀取各孔的光密度，對于WST則在450nm下讀取各孔的光密度。對于MTT，從主波長的光密度值減去參比光密度值。使用設為100X的匿S0對照組的值來計算抑制百分比。實例4:體內腫瘤功效模型使用lmL263/8號針(碧迪公司(BectonDickinson)Ref#309625)將100iiLRPMI-1640培養基(西格瑪_奧德里奇(Sigma-Aldrich))中的新鮮分離的HCT-116(2-5X1()6個)或其它腫瘤細胞無菌注射至雌性CD-1裸小鼠(5-8周齡，查爾斯河公司(CharlesRiver))右背側的皮下間隙內。或者，一些異種移植模型需要腫瘤片段的連續傳代。在這些情況中，經由13號套管針(波普爾&森斯公司(Popper&Sons)7927)將腫瘤組織的小片段(約lmm3)經皮下植入到經麻醉(3-5X異氟烷/氧混合物)C.B-17/SCID小鼠(5-8周齡，查爾斯河公司)的右背側。自接種后第7天開始，使用游標卡尺每周2次測量腫瘤。使用標準程序(0.5X(長度X寬度2))計算腫瘤體積。當腫瘤體積達到約200mm3時，將小鼠隨機分為若干治療組并開始接受藥物治療。基于先前從藥物動力學/藥效學和最大耐受劑量研究中獲得的結果確定各實驗的給藥劑量和時程。對照組將接受不含任何藥物的媒劑。通常，以不同劑量和時程將測試化合物(100-200PL)經由靜脈(27號針)、口服(20號管飼針)或皮下(27號針)途徑投與。每周兩次測量腫瘤尺寸和體重，并且當對照腫瘤達到約2000mm3時終止研究。盡管前文已出于清晰性和理解的目的相當詳細地描述了本發明，但這些特定實施例應被視為說明性的而非具限制性。所屬領域技術人員在閱讀本揭示案后應了解，在不脫離本發明真實范圍的情況下可對形式和細節作各種改變，本發明的真實范圍應由隨附權利要求書而非具體實施例來界定。本文中所提及的專利和科技文獻為所屬領域技術人員提供了可利用的知識。除非另有定義，否則本文中所用的所有科技術語具有與本發明所屬領域技術人員通常所理解相同的含義。本文中所引用的已授權專利、申請案和參考文獻以引用的方式并入本文中，其引用程度就如同特定地和個別地指示將各個已授權專利、申請案和參考文獻以引用的方式并入一般。在矛盾的情況下，應以本揭示案(包括定義)為準。權利要求一種式(I)化合物，或其藥學上可接受的鹽或硼酸酐，其中Z1和Z2各自獨立地為羥基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基；或Z1和Z2一起形成源自硼酸絡合劑的部分；并且環A選自由以下所組成的群組FPA00001011141000011.tif,FPA00001011141000012.tif2.根據權利要求1所述的化合物，其選自由以下所組成的群組(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(5-氯-2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(2，5-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(2-氯-5-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(4-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(3，4-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(3-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(2，5-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(3，4-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(3-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(2-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(2，3-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(2-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；(2，4-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；(4-氯-2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(IR)-1-、{[[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)-1-〔K[(IR)—1-〔{[[(1R)-l-(([(4-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，4-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；禾口[(1R)-1-({[(3，5-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；或其藥學上可接受的鹽或硼酸酐。3.根據權利要求1所述的化合物，其是選自由以下所組成的群組的硼酸化合物的甘露醇酯[(1R)-1-({[(2，3-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(5-氯-2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(3，5-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，5-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-l-(([(2-溴苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2-氯-5-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-l-(([(4-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(3，4-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(3-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，5-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(3，4-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(3-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2-氯-4-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，3-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，4-二氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(4-氯-2-氟苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-l-(([(4-氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)_3-甲基丁基]硼酸；[(1R)-1-({[(2，4-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸；禾口[(1R)-1-({[(3，5-二氯苯甲酰基)氨基]乙酰基}氨基)-3-甲基丁基]硼酸。4.一種藥用組合物，其包含根據權利要求1所述的化合物和藥學上可接受的載劑。5.—種治療癌癥的方法，其包含向需要此治療的患者投與根據權利要求3所述的藥用組合物。全文摘要本發明提供適用作蛋白酶體抑制劑的新穎化合物。本發明還提供含有本發明化合物的藥用組合物以及使用所述組合物治療各種疾病的方法。文檔編號C07F5/02GK101772507SQ200780100142公開日2010年7月7日申請日期2007年8月6日優先權日2007年8月6日發明者愛德華·J·奧爾哈瓦,米海阿拉·D·丹卡申請人:米倫紐姆醫藥公司