專利名稱：一種提取制備長葉松酸的方法
技術領域：
本發明屬于天然藥物領域，具體涉及一種提取制備長葉松酸的方法。
背景技術：
長葉松酸(Palustricacid),分子式為 C2tlH3tlO2,分子量為 302. 46, CAS 號為1945-53-5，是二萜酸類化合物，mp. 162-167 °C。藥理研究表明，長葉松酸具有拒食作用，對鋸角葉鋒等有強的拒食作用。長葉松酸還可抗血小板聚集，可抑制兔血小板由PAF、ADP和隹丐離子甾體誘導的血小板聚集。長葉松酸廣泛存在于柏科植物刺檜Juniperus axycedrusL.和松科植物馬尾松massoniana Lamb.和長葉松ZY/ws palustris Mill.中。 現有文獻中還沒有檢索到從馬尾松樹脂中提取制備高純度長葉松酸的工藝報道。
發明內容
本發明的目的就是提供一種提取制備長葉松酸的方法，以填補目前高純度長葉松酸提取制備技術的空白。本發明的目的是通過以下技術方案實現的
一種提取制備長葉松酸的方法，其特征在于包括以下步驟
1)乙醇提取將馬尾松樹脂粉碎，投入提取罐，加入體積百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或連續提取等方法提取2-4小時，收集提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇得到浸膏；
2)大孔樹脂吸附將所得浸膏用去離子水稀釋，經大孔吸附樹脂柱純化，先用去離子水，再用50-70%乙醇洗脫，減壓回收乙醇得到提取物；
3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統，得到純度95%以上的長葉松酸。步驟3)所述溶劑系統為甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其體積比為(15-17):(20-24)(3-6) : (12-15)。本發明的有益效果是本發明以大孔吸附樹脂為載體，乙醇為溶劑，經高速逆流色譜進一步分離純化，得到純度大于95%的長葉松酸產品，所用試劑為安全無毒試劑，可回收重復利用。本發明方法工序簡單、綠色環保，產品純度高。
具體實施例方式 實施例I:
將馬尾松樹脂藥材粉碎，取5kg加入20L70%乙醇溶液加熱回流提取2小時，過濾，濾渣再加入12L70%乙醇溶液回流提取I. 5小時，過濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過預處理好的DlOl大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再用70%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:24:3. 5:14)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集長葉松酸流分，回收溶劑得到長葉松酸，經HPLC法測定，其純度為96. 8%。實施例2
將馬尾松樹脂藥材粉碎，取5kg加入22L60%乙醇溶液加熱回流提取3小時，過濾，濾渣再加入18L60%乙醇溶液回流提取2小時，過濾，藥渣再加入12L60%乙醇回流提取I. 5小時，過濾，合并三次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過預處理好的DlOl大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再用65%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:20:6:12)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集長葉松酸流分，回收溶劑得到長葉松酸，經HPLC法測定，其純度為96. 4%。實施例3
將馬尾松樹脂藥材粉碎，取5kg加入18L55%乙醇溶液加熱回流提取4小時，過濾，濾渣再加入14L55%乙醇溶液回流提取2. 5小時，過濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過預處理好的DlOl大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再用50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(16:23:5:15)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集長葉松酸流分，回收溶劑得到長葉松酸，經HPLC法測定，其純度為97. 2%。實施例4:
將馬尾松樹脂藥材粉碎，取5kg加入24L65%乙醇溶液加熱回流提取3. 5小時，過濾，濾渣再加入18L65%乙醇溶液回流提取I. 5小時，過濾，藥渣再加入15L65%乙醇提取I. 5小時，過濾，合并三次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過預處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再用60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(17:21:4:13)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集長葉松酸流分，回收溶劑得到長葉松酸，經HPLC法測定，其純度為98. 1%。實施例5:
將馬尾松樹脂藥材粉碎，取5kg加入25L75%乙醇溶液加熱回流提取2小時，過濾，濾渣再加入20L75%乙醇溶液回流提取I. 5小時，過濾，合并兩次提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇，再用去離子水稀釋到7L，通過預處理好的HPD100大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再用55%乙醇洗脫，收集55%乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮液干燥得到總二萜提取物。將總二萜提取物用高速逆流色譜法進行純化，以甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水(15:22:3:14)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集長葉松酸流分，回收溶劑得到長葉松酸，經HPLC法測定，其純度為97. 6%。
權利要求
1.一種提取制備長葉松酸的方法，其特征在于包括以下步驟 1)乙醇提取將馬尾松樹脂粉碎，投入提取罐，加入體積百分比55-75%的乙醇，采用回流提取或連續提取等方法提取2-4小時，收集提取液，用2%藥用活性炭脫色，過濾，回收乙醇得到浸膏； 2)大孔樹脂吸附將所得浸膏用去離子水稀釋，經大孔吸附樹脂柱純化，先用去離子水，再用50-70%乙醇洗脫，減壓回收乙醇得到提取物； 3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進一步純化，采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統，得到純度95%以上的長葉松酸。
2.根據權利要求I所述的提取制備長葉松酸的方法，其特征在于，步驟3)所述溶劑系統為甲基叔丁基醚-正丁醇-甲醇-水，其體積比為(15-17) :(20-24) :(3-6) :(12-15)。
全文摘要
本發明涉及天然藥物的分離，具體的說是一種提取制備長葉松酸的方法，將馬尾松樹脂粉碎后，用乙醇提取、脫色、過濾、濃縮得到浸膏，再用去離子水稀釋，經大孔吸附樹脂柱純化、洗脫、濃縮，干燥得粗品，粗品用高速逆流色譜法進一步純化，結晶干燥得到純度95%以上的長葉松酸。本發明實現后與傳統工藝相比，具有簡便、快速、制備量大、產品純度高等優點，易于推廣使用。
文檔編號C07C61/29GK102875365SQ201210360010
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月25日 優先權日2012年9月25日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司