專利名稱：從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法
技術領域：
本發明屬于植物提取物生產技術領域，涉及一種迷迭香酸的提取方法，特別是涉及一種以紫蘇葉為提取材料制備迷迭香酸的方法。
背景技術：
迷迭香酸(Rosmarinc acid,簡稱RosA)是一種具有多種生理活性的酹酸類化合物，主要存在于唇形科、傘形科和紫草科植物中。迷迭香酸為咖啡酸的二聚衍生物，分子式C18H16O6，具有多方面的生物活性，包括抗氧化、抗菌、抗炎、抗HIV和抗血小板凝聚等。迷迭香酸含有4個酚羥基，具有極強的清除自由基活性，其抗氧化活性不僅強于天然抗氧化劑維生素E、咖啡酸、葉酸等，而且強于已廣泛應用的人工合成抗氧劑2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)等。 李榮貴等發現迷迭香酸對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、立枯絲核菌的生長有明顯的抑制作用。李麗等研究表明，迷迭香酸能明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳腫脹、乙酸所致的小鼠毛細血管通透性增高、大鼠棉球肉芽腫性炎癥和大鼠佐劑性關節炎。Arda等首先發現迷迭香酸具有抗HIV活性，Mazumder等又進一步研究表明迷迭香酸能抑制HIV-I整合酶。鄒正午等研究表明迷迭香酸具有抑制靜脈血栓形成、阻抑膠原誘導的血小板凝集和促進纖維蛋白溶劑活性。目前對迷迭香酸的研究表明其在食品、醫藥、化妝品、保健品等領域有著重要的應用價值。國內外學者對迷迭香酸的化學和生物合成方法進行了深入的研究，但往往方法繁瑣、成本高昂，難以實現工業化生產。中國專利(CN 1796362A)公開了一種以紫蘇葉為提取材料制備迷迭香酸的方法，該方法利用酸水提取迷迭香酸，經大孔樹脂吸附和石油醚萃取后，上吸附樹脂柱，以乙醇洗脫得到迷迭香酸產品。該方法得到的迷迭香酸產品不僅純度較低，而且產品的收率也很低。
發明內容
本發明的目的是要提供一種從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，以該方法提取的迷
迭香酸產品純度高，收率高。本發明從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法包括以下步驟
1)將切碎的紫蘇葉置于pH值3 4的60 70%(體積)乙醇水溶液中，以功率125 175W的超聲波在50 60°C下提取得到提取液；
其中，優選結實初期采集的紫蘇葉，將其切成條狀物進行提取；
2)將上述提取液減壓濃縮至無醇味，上大孔樹脂吸附，以純凈水洗除雜質，以65 75%(體積)乙醇水溶液解吸，解吸液減壓濃縮得到迷迭香酸粗浸膏，得到的迷迭香酸粗浸膏純度約為20 30wt% ；
其中，所述的大孔樹脂優選AB-8大孔樹脂；
3)將迷迭香酸粗浸膏用pH值3 4的酸水溶解，以正丁醇萃取，有機相濃縮得到迷迭香酸粗品，純度約為60 75wt% ；
4)將迷迭香酸粗品上硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇體積比4:1的混合溶劑洗脫，濃縮洗脫液得到迷迭香酸產品，純度98. O 98. 5wt%。本發明中，以pH值3 4的60 70%(體積)乙醇水溶液超聲提取紫蘇葉的次數應不少于2次。每次洗脫時，紫蘇葉與所述乙醇水溶液的料液比應為1kg: 10 20L。優選地，將每kg紫蘇葉與15L的乙醇水溶液混合。進一步地，所述超生提取優選的乙醇水溶液濃度為65% (體積)，并優選在55°C下以150W的超聲功率提取。本發明在超聲波的輔助作用下，采用酸性乙醇水溶液提取迷迭香酸，并以正丁醇進行萃取，最后制備得到了高純度，高收率的迷迭香酸產品。本發明提供的方法提取時間短、操作簡單、步驟少、生產成本低廉，適合于大規模工業化生產。
具體實施例方式實施例I
采集結實初期的新鮮紫蘇葉10公斤，自來水洗凈，切成約2cm寬的條狀物，按照料液比1:10 (kg/L)放入pH=3. O的60%乙醇水溶液中，置入超聲波提取器，在浸提溫度50°C，功率125W的條件下提取10分鐘，收集提取液，提取后的固體再以相同條件提取I次。合并兩次所得提取液，減壓濃縮至無醇味，上AB-8大孔樹脂，純凈水洗除雜質后，以65%乙醇水溶液解吸，得到2L解吸液，減壓濃縮后得到粗浸膏200克，迷迭香酸含量25%。將粗浸膏用pH=3的酸水IL溶解，正丁醇萃取2次，有機相減壓濃縮得到18克迷迭香酸粗品，純度68%。將18克粗品上300 400目硅膠柱(8X100cm)，乙酸乙酯/乙醇(V/V) =4/1等度洗脫，TLC檢測，合并洗脫液，濃縮得到9克純度為98. 0%的迷迭香酸產品。實施例2
采集結實初期的紫蘇葉10公斤，用自來水洗凈，切成約2cm寬的條狀物后，按照料液比1:10 (kg/L)放入pH=4. O的70%乙醇水溶液中，置入超聲波提取器，在浸提溫度60°C，功率175W的條件下提取10分鐘，收集提取液，提取后的固體再以相同條件提取2次。合并三次所得提取液，減壓濃縮至無醇味，上AB-8大孔樹脂，純凈水洗除雜質后，以75%乙醇水溶液解吸，得到2L解吸液，減壓濃縮后得到粗浸膏220克，迷迭香酸含量28%。將粗浸膏用pH=3的酸水IL溶解，正丁醇萃取3次，有機相減壓濃縮得到20克迷迭香酸粗品，純度66%。將20克粗品上300 400目硅膠柱(8X100cm)，乙酸乙酯/乙醇(V/V) =4/1等度洗脫，TLC檢測，合并洗脫液，濃縮得到10克純度為98. 5%的迷迭香酸產品。
權利要求
1.從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于 1)將切碎的紫蘇葉置于pH值3 4的60 70%乙醇水溶液中，以功率125 175W的超聲波在50 60°C下提取得到提取液； 2)將上述提取液減壓濃縮至無醇味，上大孔樹脂吸附，以純凈水洗除雜質，以65 75%乙醇水溶液解吸，解吸液減壓濃縮得到迷迭香酸粗浸膏； 3)將迷迭香酸粗浸膏用pH值3 4的酸水溶解，以正丁醇萃取，有機相濃縮得到迷迭香酸粗品； 4)將迷迭香酸粗品上硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇體積比4:1的混合溶劑洗脫，濃縮洗脫液得到迷迭香酸產品；· 其中，所述的百分數為體積百分數。
2.根據權利要求I所述的從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于將紫蘇葉與乙醇水溶液按照1kg: 10 20L的料液比混合。
3.根據權利要求I所述的從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于將紫蘇葉與乙醇水溶液按照1kg: 15L的料液比混合。
4.根據權利要求I所述的從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于將紫蘇葉用PH值3 4的60-70%乙醇水溶液超聲提取不少于2次。
5.根據權利要求I所述的從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于所述的大孔樹脂為AB-8大孔樹脂。
6.根據權利要求I所述的從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，其特征在于選擇結實初期的紫蘇葉提取迷迭香酸。
全文摘要
本發明公開了一種從紫蘇葉中提取迷迭香酸的方法，是以結實初期的紫蘇葉為原料，經清洗切片、超聲提取、大孔樹脂吸附、解吸濃縮、酸水溶解、萃取、硅膠柱層析等過程，制得98%以上純度的迷迭香酸產品。本發明不僅可以得到高純度的迷迭香酸產品，且生產過程中可以得到純度20～30%和60～75%的迷迭香酸粗品，以滿足不同的要求。本發明提供的方法提取時間短、操作簡單、步驟少、生產成本低廉，適合于大規模工業化生產。
文檔編號C07C69/732GK102850219SQ20121036681
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月28日 優先權日2012年9月28日
發明者李會珍, 李曉君, 張志軍, 孫子文 申請人:中北大學