專利名稱：透明質酸和/或其鹽的溶解方法
技術領域：
本發明涉及由含透明質酸和/或其鹽的液體制備適于藥品的透明質酸和/或其鹽(以下統稱為透明質酸類)注射液的技木。
背景技術：
透明質酸是N-こ酰基-D-葡糖胺和D-葡萄糖醛酸結合而得的ニ糖単元重復成鏈的、分子量達到500萬的高分子量多糖類。通常來講，分離提純 為該葡萄糖醛酸形成的鈉鹽形式的透明質酸鈉。已知分子量約為200萬的透明質酸鈉與分子量約為80萬的透明質酸鈉相比，作為藥品對變形性膝關節癥、肩周炎、慢性類風濕關節炎等的治療發揮更優異的效果(薬理と治療 Vol.22No.9 289，(1994);薬理と治療 Vol. 22 No. 9 319，(1994))。進而，已知作為外科手術后的防粘連用途或作為皮膚科領域、眼科領域中的藥品效果，也存在可實際應用的物質。通過微生物發酵法制備的透明質酸鈉是如下獲取的例如使用某種鏈球菌屬培養，稀釋得到的培養液經過各種提純エ序以粉末狀來獲取。若利用微生物發酵法，則可以直接以高分子量來提純獲取透明質酸鈉，但在大量制備透明質酸鈉注射液時存在各種難題。即，難以在短時間高效地溶解高分子量的透明質酸鈉；該溶液的粘度非常高，因此難以處理；進而對熱等不穩定而難以過濾或滅菌等。因此，顯然不存在大量制備高分子量的透明質酸鈉注射液的方法。本發明人在將含透明質酸類的液體作為注射液來大量地制備時，對從含透明質酸類的液體中高效地分離除去雜質、獲取高純度藥品等級的透明質酸類的方法進行了反復研究，在該研究過程中明確在使透明質酸類溶解于注射溶液時，若在通常條件下使用普通的攪拌槽，則透明質酸類會不充分地溶解而產生凝聚物，或者會在溶解時導致透明質酸類的分子量下降，攪拌溶解エ序成為瓶頸。
發明內容
本發明鑒于上述事實而完成，其目的在于提供在通常制備透明質酸類的注射液時可以適合實施的透明質酸類的溶解方法。此外，本發明的目的在于，提供能夠在盡可能地抑制高分子量的透明質酸類凝聚的同時、充分地使其分散在注射用溶解液中，從而獲得澄清溶解液的透明質酸類的溶解方法。進而，本發明的目的在于，提供可以將高分子量的透明質酸類在盡可能不降低其分子量的情況下溶解在注射用溶解液中的透明質酸類的溶解方法。根據本發明的第一方式，提供下面的方法。即，(I)透明質酸和/或其鹽的溶解方法，所述方法使用裝備有選自渦輪式、分散(Disper)式、分散(Disper)渦輪式、錨式、和帶槳葉鋸齒葉片中的攪拌葉片的攪拌槽，使透明質酸和/或其鹽溶解在選自注射用水、生理鹽水、及緩沖生理鹽水中的ー種注射用溶解液中；(2)如(I)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片的軸處于容器中央或偏心位置的攪拌槽；(3)如(2)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片為單層或多層的攪拌槽；(4)如(3)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片的轉速為100 5000rpm的攬祥槽；(5)如(4)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，攪拌槽及管線的內表面材質為 特氟龍、特氟龍內襯或特氟龍涂層；(6)如(I) (5)中任一項所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，透明質酸和/或其鹽的平均分子量為150萬 400萬；(7)如(I) (6)中任一項所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，透明質酸和/或其鹽通過使用馬鏈球菌FM-100或馬鏈球菌FM-300的發酵法來制備；根據該方法，可以獲得能夠在制備注射液時使用的高品質透明質酸類溶解液。根據本發明的其他方式，提供下面的方法。即，(8)透明質酸和/或其鹽的溶解方法，所述方法使用裝備有大斜葉渦輪葉片或分散式渦輪葉片的攪拌葉片的攪拌槽，使透明質酸和/或其鹽溶解在選自注射用水、生理鹽水、及緩沖生理鹽水中的ー種注射用溶解液中；(9)如(8)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，攪拌槽為大致立式的圓筒狀，對攪拌葉片進行配置以使其軸位于從槽中心向徑向外方偏心的位置；(10)如(9)所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，攪拌葉片的軸的偏心位置是將中心線分為I :2的位置；(11)如(8) (10)中任一項所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，攪拌槽具備攪拌葉片直徑與槽內徑之比為0. 3^0. 5的攪拌葉片；(12)如(8廣(11)中任一項所述的溶解方法，使攪拌葉片以150(Tl800rpm的轉
速來工作；(13)如(8) (12)中任一項所述的溶解方法，將攪拌時間設為45分鐘以上；(14)如(8) (13)中任一項所述的溶解方法，至少攪拌槽內表面和與攪拌槽連接的管線的內表面為不銹鋼制且經電解研磨精加工而成；(15)如(8) (14)中任一項所述的溶解方法，透明質酸和/或其鹽的平均分子量為150萬 400萬；(16)如(8) (15)中任一項所述的溶解方法，溶解透明質酸和/或其鹽使其濃度達到 0. 75 I. 25w/v% ；(17)如(8) (16)中任一項所述的溶解方法，透明質酸和/或其鹽通過使用馬鏈球菌FM-100或馬鏈球菌FM-300的發酵法來制備。根據該方法，可以將高分子量的透明質酸類在盡可能地抑制其凝聚、分子量下降的同時，使其充分地分散在注射用溶解液中，從而可以大規模制備注射液。
圖I是在用于實施本發明的一個實施方式的溶解方法的攪拌槽中設置的分散渦輪式攪拌葉片的俯視示意圖。圖2是圖I的分散渦輪式攪拌葉片的側視圖。圖3是表示分散渦輪式攪拌葉片的其他實例的、與圖I同樣的圖。圖4是圖3的分散渦輪式攪拌葉片的側視圖。圖5是表示在攪拌槽中配置了大斜葉渦輪葉片的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖。 圖6是表示在攪拌槽中配置了雙層斜葉渦輪葉片的狀態的圖，Ca)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖，(C)是(a)中的c-c矢向視圖。圖7是表示在攪拌槽中配置了斜葉渦輪葉片和槳的組合葉片的狀態的圖，Ca)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖，(C)是(a)中的c_c矢向視圖。圖8是表示在攪拌槽中配置了分散式渦輪葉片的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖。圖9是表示在攪拌槽中配置了“Maxblend”葉片的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖。圖10是表示在攪拌槽中配置了溶解器葉片的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是溶解器葉片的俯視圖。
具體實施例方式下面對用于實施本發明的方式進行說明。本發明中使用的透明質酸類包含游離態的透明質酸、透明質酸鹽、或游離的透明質酸與透明質酸鹽的混合物。作為透明質酸鹽，例如可以舉出鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋰鹽等，但鈉鹽的使用最為普遍。進而，本發明中使用的含透明質酸類液體，可以從動物組織提取，或者可以用發酵法制備，但優選使用由發酵法制備的含透明質酸類液體。利用發酵法得到透明質酸類，例如可以使用鏈球菌屬等具有透明質酸產生能力的細菌等的微生物通過已知方法來獲得。作為發酵法中使用的菌株，可以舉出從自然界分離的具有透明質酸產生能力的微生物、或者日本特開昭63-123392號公報中記載的馬鏈球菌FM-100 (微エ研菌寄第9027號)、日本特開平2-234689號公報中記載的馬鏈球菌FM-300(微エ研菌寄第2319號)之類的以高收率穩定地產生透明質酸的變異株，可適當地使用該變異株。通過上述發酵法制備的可以在本發明中使用的透明質酸類是高分子量物質，通常平均分子量為150萬 400萬。這是由于在平均分子量低于150萬時，作為藥品的功效降低；而平均分子量超過400萬的透明質酸類難以通過上述方法獲得。其中，本發明中的溶解方法并不是無法在溶解低分子量的透明質酸時使用。作為在溶解透明質酸類的エ序中使用的注射用溶解液，可以使用注射用水、生理鹽水及緩沖生理鹽水，特別是可以使用加入了含酸、堿、磷酸鹽之類的緩沖劑的PH調節劑等在日本藥典的制劑總則注射劑項中被認可的注射用溶解液。
作為溶解エ序中的透明質酸類的添加量，透明質酸類濃度設定為0. 75^1. 25w/v%。在透明質酸類濃度為0. 75w/v%以下吋，透明質酸類溶液的粘度低，容易制備。另外在
1.25w/v%以上時，從透明質酸類的溶解度的角度出發難以大量地制備。因此，成為高粘度溶液的透明質酸類濃度0. 75^1. 25w/v%符合以本發明的溶解方法為對象的制備條件。優選將要溶解的透明質酸類預先填充在帶閥的氣密容器中，通過閥的裝料槽投入攪拌槽中。裝料槽的角度優選設為50°以上的陡斜率，將該容器倒過來，則在投入透明質酸類時，損失減少。閥優選使用蝶形閥，通過對其切換能夠使透明質酸類不與外部氣體接觸且無菌地投入攪拌槽中。需要說明的是，關于上述帶閥的氣密容器的材質，從洗滌性、操作簡便程度等方面出發，優選不銹鋼材質或在其內表面有特氟龍涂層的材質或對內表面進行電解研磨精加工的材質。溶解時使用的攪拌槽，是在普通的大致立式圓筒狀的槽本體中增設有縱軸型的攪拌裝置而成的攪拌槽，攪拌裝置具有軸線朝上下方向配置在槽本體內部的軸，在該軸的下端(及因情況不同在中段部位)大致水平地安裝的攪拌葉片，以及在該軸的上端安裝的、在 槽本體的遮蓋部上設置的驅動裝置。在上述攪拌槽的攪拌溶解エ序中，透明質酸類在注射用溶解液中的溶解性不良、溶液為高粘度、進而在溶解時往往導致分子量的下降，因此存在前述那樣應予解決的問題。因此，本發明人在上述攪拌槽中將各種型號的攪拌機在各種條件下使用，深入地進行了比較研究。結果明確了，優選將特定類型的攪拌機在特定的條件下使用。S卩，作為攪拌裝置，可以使用裝備有選自渦輪式、分散式、分散渦輪式、錨式、帶葉輪鋸齒葉片中的攪拌葉片的攪拌機，但如果在它們之間進ー步進行比較研究，則可知優選裝備有渦輪式、分散式、分散渦輪式的攪拌葉片，特別優選大斜葉渦輪葉片及分散渦輪葉片。此外，可知配置攪拌葉片的位置(攪拌葉片的軸的位置)，按照慣例，可以是槽本體的大致中央位置，但如果將攪拌葉片的軸設置在槽本體的徑向外方的偏心位置，則透明質酸類的溶解速度加快，因而優選。例如，偏心位置可以是將槽本體的中心線上的槽直徑分為
I2的位置、分為I :3的位置、分為I :4的位置、分為I :5的位置等，其中優選分為I :2的位置。進而，對于攪拌葉片的轉速，可知通常是10(T5000rpm，例如80(T2000rpm是適當的，特別是攪拌葉片中最為優選的大斜葉渦輪葉片及分散渦輪葉片，優選轉速為1500^1800rpmo如果轉速過低，則透明質酸類在注射用溶解液中的分散性變得不良。相反地，即使想要增大轉速，也會因為透明質酸類的分子量過高而使攪拌葉片變得不旋轉。此夕卜，在溶解時，在攪拌的同時進行加溫在很多情況下是有效果的，但在透明質酸類的情況下，經加溫可能引起分子量下降等不理想的物性變化。進而，在攪拌不充分時，雖可以考慮延長攪拌時間，但即使是延長攪拌時間的情況仍可能會產生分子量下降等的物性變化。但是，在對攪拌葉片形狀、位置、其他運轉條件等進行調節的基礎上，進ー步通過將轉速設定在上述范圍內，可以在不進行加溫的緩和條件下，以短時間進行溶解。進而，對于攪拌葉片的尺寸，也明確了最佳的范圍。即，攪拌葉片優選將攪拌葉片直徑(d)與槽內徑(D)之比(d/D)設為0. 3^0. 5。這是由于如果該比小于0. 3，則攪拌效果不充分，溶解性、分散性變差，而如果超過0. 5，則產生分子量下降等的不理想狀況。
此外，對于攪拌時間而言也是同樣的，如果短，則攪拌效果不充分，溶解性、分散性變差，而如果過長，則產生分子量下降等的不理想狀況。例示地，優選為45分鐘以上且到100分鐘左右為止、特別是到60分鐘左右為止。此外，攪拌葉片如上述那樣，若適當地設計攪拌葉片的種類、大小、設置位置、轉速等等，則ー層就足矣，但也不排除為多層。在溶解操作中，優選適當地對攪拌槽內進行減壓。這是為了除去透明質酸類及液體中的氣泡，但對加快溶解速度也是有效的。透明質酸類溶液是高粘度的，為了使其脫泡，優選使用真空泵等通常的減壓手段減壓至5 20kPa abs。如果提高溫度，或組合使用溶液的攪拌來進行，則效果會進ー步提高。關于溶解用攪拌槽內表面的材質，從對食鹽水的耐腐蝕性、溶解后的內表面的洗滌性等出發，可以舉出不銹鋼、玻璃、特氟龍(注冊商標)等，但從透明質酸類溶液對材質表面附著的觀點出發，優選特氟龍(注冊商標)、特氟龍(注冊商標)內襯或特氟龍(注冊商標)涂 層。這是由于特氟龍(注冊商標)與其他材質相比，透明質酸類溶液的附著少，因此適合于從攪拌槽排出溶解液或洗滌攪拌槽。或者，使用不銹鋼、特別是SUS316L來代替特氟龍(注冊商標)也是優選的，在該情況下如果對內表面進行電解研磨精加工，則可獲得與特氟龍(注冊商標)同等或更好的性倉^:。攪拌溶解后，實施滅菌、雜質過濾、脫泡、填充的各エ序。如果對這些エ序進行簡單說明，則透明質酸類溶液的滅菌在雜質除去之前、或在填充在小瓶等容器之后進行。雜質過濾通過過濾處理來進行。過濾中使用的過濾膜優選孔徑為0.2 50i!m。在孔徑小于該范圍時，由前面エ序得到的滅菌液是粘度非常高的溶液，因此難以使液體通過膜，而在孔徑小于該范圍時，雜質過濾變得不完全，在注射液中會混合存在用目視可以辨別的不溶性雜質，因此不優選。過濾膜的材質可以從聚四氟こ烯、聚酷、特氟龍(注冊商標)、聚丙烯、聚偏氟こ烯及尼龍等中選定，但優選聚四氟こ烯、聚丙烯或尼龍。作為過濾膜的形狀，可以是平膜、濾筒、一次性過濾器中的任一個，但在進行大量處理時，優選濾筒或一次性過濾器。作為可以在本發明中使用的過濾膜的具體例，有Nihon Millipore公司制Millipak、DuraporeMillidisk 等。含透明質酸類的液體在pH為2 10、溫度為5 100°C中可選擇任意條件。對于液體通過時的流量及壓力，根據過濾器的種類考慮耐壓性進行設定，如果施加壓力，則也有時從過濾器流出雜質，因此必須加以注意。對于Millidisk40，優選流量5(T300L/hr、處理壓力0. oro. 50MPa。過濾液也可用注射用溶解液進行稀釋，進行濃度調節。在填充エ序中，使用由將透明質酸類溶液填充到容器中的部分和在填充后的容器中將橡膠塞進行打栓或對容器進行熔封的密封部分構成的填充機。作為所填充的注射液用容器，可使用普通的安瓶、小瓶、Dupharject型、載藥注射器。接著，利用實施例更詳細地說明本發明，但本發明不限于該實施例的記載內容。實施例<實施例1>
將使用馬鏈球菌FM-100 (微エ研菌寄第9027號)并通過發酵法得到的分子量237萬的透明質酸鈉1580g填充在20L的帶有蝶形閥的氣密容器中。在內表面有特氟龍涂層的不銹鋼制的容量200L的攪拌槽中安裝分散渦輪式攪拌槳，將含有pH7. 3的2mM磷酸鈉緩沖液的生理食鹽液(注射用溶解液)149L加入攪拌槽。將填充有前述的透明質酸鈉的氣密容器反向安裝在攪拌槽的原粉投入ロ，打開蝶形閥，將透明質酸鈉投入攪拌槽中。在圖廣2中示出分散渦輪式攪拌槳(由溶解器葉片直徑275mm的12片槳和斜葉槳片的6片槳構成)的俯視圖。以ISOOrpm進行攪拌50分鐘，將透明質酸鈉完全地溶解。為了除去液體中的氣泡，將攪拌槽內壓力在真空度15kPa abs維持20分鐘，除去氣泡后，返回常壓。利用咔唑硫酸法對該溶液的透明質酸鈉濃度進行測定，結果是I. 00%。如果將該液體的極限粘度按照第 十五次修改的日本藥典進行測定，則為33. 8dL/g，如果換算成分子量則為237萬。將溶解液用KIKK0MAN公司制“KID’S COOKER”連續滅菌機進行連續滅菌。該裝置由套管構成，內管的內徑為23mm，內藏有固定的攪拌機，加熱部的容積為3. 4L，保持部容積為0. 6L，冷卻部容積為2. 6し調節加熱部外管的熱水以使保持部的溫度達到135°C，控制加熱部入口的定量泵以使在保持部中的滯留時間達到34秒。冷卻部對冷卻部外管的水進行調節以使出口溫度達到40°C以下。用壓カ調節閥進行控制使冷卻部出ロ壓カ達到0. 33MPa，將冷卻的透明質酸鈉溶解液用孔徑5 ii m的由聚偏氯こ烯制的過濾膜構成的Nihon Millipore公司制Millidisk40以流量60L/hr進行過濾。將過濾液以144rpm攪拌混合30分鐘。接著，用具有填充部、橡膠塞的打栓、卷繞機構的小瓶填充密封機，在小瓶中每次填充2. 85L上述液體，上述填充部具有隔膜式填充泵。用丁基橡膠(大協精エ社制)進行橡膠塞打栓。按照第十五次修改的日本藥典、制劑總則/注射劑項進行產品質量試驗對不溶性雜質進行檢查，結果合格率為99. 9%以上。此外，使用圖:T4中示出的那類分散渦輪式攪拌槳(由葉片直徑243_的12片槳和葉片直徑170_的4片槳構成)代替圖廣2中示出的分散渦輪式攪拌槳，在同樣的條件下進行操作時，確認到其同樣有效。<實施例2>將攪拌槽中的攪拌機的構成進行各種變更以尋求最佳的攪拌葉片、攪拌條件，進行溶解試驗。在溶解試驗中,在加入生理鹽水149L的槽內徑550mm的攪拌槽中，加入透明質酸鈉(極限粘度35. OdL/g) 1580g,使攪拌機工作，使其溶解。關于溶解試驗的結果,對透明質酸鈉的分散性、可否溶解、分子量下降按照以下記載的各標準進行評價。[分散性]目視確認透明質酸類的變化，按照下面的判定標準進行評價。〇在整個槽內分散有透明質酸類的狀態A :在槽底附近分散有透明質酸類，未分散在整個槽的狀態X :大部分的透明質酸類處于槽底，幾乎未見分散的狀態[可否溶解]綜合地判定下面的判定標準a c，若滿足所有的標準則記作〇、若不滿足一個則記作A、若所有條件均未滿足則記作X。
a :在透明質酸類溶解中，以目視水平未確認凝聚物(凝聚物團)b :透明質酸類溶解液為無色透明c :在攪拌槽的壁面以目視水平未確認未溶解的透明質酸類[分子量下降度(A分子量)]A分子量(=(溶解前極限粘度-溶解后極限粘度)/溶解前極限粘度)，按照以下的判定標準進行判定。〇A分子量彡0. 03A 0. 03〈 A 分子量< 0. 15
X 0. 15〈 A 分子量[針對攪拌葉片形狀的試驗]作為攪拌葉片，準備大斜葉渦輪葉片、雙層斜葉渦輪葉片、斜葉渦輪葉片和槳的組合、分散式渦輪葉片、“Maxblend”葉片、溶解器葉片，安裝在攪拌槽中，以攪拌轉速1800rpm進行溶解試驗。將結果示于以下的表I。此外，這里將本實施例中使用的上述各攪拌葉片的形狀和該攪拌槽中的安裝位置示于圖5 10。圖5是表示在攪拌槽4中配置了大斜葉渦輪葉片5的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的 b-b 矢向視圖，圖中，H=754mm、h=522mm、D=550mm、d=180mm (d/D=0. 33)。需要說明的是，在關于攪拌葉片的形狀的所述試驗中，將大斜葉渦輪葉片5安裝在攪拌槽4的偏心位置(e=90mm)。該偏心位置相當于后述的偏心(I :2)。圖6是表示在攪拌槽4中配置了雙層斜葉渦輪葉片6的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖，(c)是(a)中的c_c矢向視圖，圖中，H=754mm、hl=290mm、h2=232mm>D=550mm>d1 (上)=155mm、d2 (下)=180mm Cd1ZD=O. 28 (上);d2/D=0. 33 (下))。在該試驗中，雙層斜葉渦輪葉片6安裝在偏心位置(e=90mm)。圖7是表示在攪拌槽4中配置了斜葉渦輪葉片和槳的組合葉片7的狀態的圖，Ca)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b-b矢向視圖，(c)是(a)中的c_c矢向視圖，圖中，H=754mm> h1=283mm> h2=85mm (獎高)、h3=154mm、D=550mm、Cl1 (獎直徑)=155mm、d2 (潤輪葉片直徑)=180mm Cd1ZD=O. 28 (槳)；d2/D=0. 33 (渦輪葉片))。在該試驗中，組合葉片7安裝在偏心位置(e=90mm)。圖8是表示在攪拌槽4中配置了分散式渦輪葉片8的狀態的圖，(a)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的 b-b 矢向視圖，圖中，H=754mm、h=522mm、D=550mm、d=180mm (d/D=0. 33)。在該試驗中，分散式渦輪葉片8安裝在偏心位置(e=90mm)。圖9是表示在攪拌槽4中配置了“Maxblend”葉片9的狀態的圖，Ca)是側剖面示意圖，(b)是(a)中的b_b矢向視圖，圖中，H=677mm、h (葉片高度)=450mm、D=550mm、d=290mm(d/D=0. 53)。圖10是表示在攪拌槽4中配置了溶解器葉片10的狀態的圖，Ca)是側剖面示意圖、(b)是溶解器葉片 10 的俯視圖，圖中，H=677mm、e=137. 5mm、D=550mm> d=250mm Cd/D=O. 53)。[表 I]
權利要求
1.ー種透明質酸和/或其鹽的溶解方法，所述方法使用裝備有選自渦輪式、分散式、分散渦輪式、錨式、和帶槳葉鋸齒葉片中的攪拌葉片的攪拌槽，使透明質酸和/或其鹽溶解在選自注射用水、生理鹽水、及緩沖生理鹽水中的ー種注射用溶解液中。
2.根據權利要求I所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片的軸處于容器中央或偏心位置的攪拌槽。
3.根據權利要求2所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片為單層或多層的攪拌槽。
4.根據權利要求3所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，其使用攪拌葉片的轉速為100 5000rpm的攬祥槽。
5.根據權利要求4所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，攪拌槽及管線的內表面材質為特氟龍、特氟龍內襯或特氟龍涂層。
6.根據權利要求f5中任ー權利要求所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，透明質酸和/或其鹽的平均分子量為150萬 400萬。
7.根據權利要求f6中任ー權利要求所述的透明質酸和/或其鹽的溶解方法，透明質酸和/或其鹽通過使用馬鏈球菌FM-100或馬鏈球菌FM-300的發酵法來制備。
全文摘要
本發明公開了溶解透明質酸和/或其鹽的方法，其中當透明質酸和/或其鹽溶解于選自注射用水、生理鹽水、及磷酸緩沖生理鹽水中的一種注射用溶解液中時，使用裝備有攪拌葉片的攪拌槽，所述攪拌葉片選自渦輪式、分散(Disper)式、分散(Disper)渦輪式、錨式、和帶槳葉鋸齒葉片。通過使用該方法，可以大規模制備分子量為150萬~400萬的透明質酸類注射液。
文檔編號C08B37/08GK102812051SQ201080065518
公開日2012年12月5日 申請日期2010年3月17日 優先權日2010年3月17日
發明者萩原丈士, 服部裕司, 星加博光 申請人:電氣化學工業株式會社