專利名稱：一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種藥用真菌樺褐孔菌多糖的提取及多糖水溶液的制備方法。
背景技術：
樺褐孔菌Inonotusobliquus (Fr. )Pilat是一種珍稀而且名貴的藥用真菌。在生物分類學上樺褐孔菌屬于擔子菌亞門(Basidiomyco tina)-層菌綱(HymenomyCetes)-非裙菌目(Aphyllophorales)-多孔菌科(Polyporaceae)-揭臥孔菌屬(Poriahy pobrunnea Peteh) ο 樣褐孔菌學名為 Phaeoporusobliquus (pers :Fr. ) J. Schroet.在許多外文資料中，樣褐孔菌寫為 Fuscoporia oblique (Pers. Fr) Aoshi 或 Inontus obliquus (Fr.) Pi Iat。其俗名中的中文名為白樺鸞、黒樺菌、樺菌等，及外文名blaekbirehtuehwood、 Malalonmushroom、力/S'^ 了于夕 > 等,俄語名為Chaga。樺褐孔菌極其耐寒,生活在樺木等木材中的菌絲體能夠耐受_40°C的低溫。樺褐孔菌主要分布在北半球的北緯45° -50°的地區，比如波蘭、芬蘭、北美(北部)、俄羅斯(西西伯利亞、遠東部分地區、勘察加半島)、日本(北海道)等國家、中國(黑龍江、吉林省長白山地區)。樺褐孔菌生長在白樺、榆樹、銀樺、赤楊等活立木的樹皮下或砍伐后樹木的枯干上，樺褐孔菌的菌核在砍伐以后的樹木枯干上可以生存超過六年以上。俄羅斯Komsomlski制藥公司生產的樺褐孔菌精粉對糖尿病的治愈率達93%，降糖作用可持續48h。樺褐孔菌、樺褐孔菌菌核和菌絲體的多糖粗提物，對四氧嘧啶糖尿病小鼠均有降血糖作用，并且三者降糖效果無顯著差異。臨床上糖尿病患者應用樺褐孔菌治療后的全血粘度、血漿粘度、纖維蛋白原、紅細胞壓積、紅細胞聚集指數比治療前明顯降低。樺褐孔菌的菌絲、菌核中的多糖有降低血糖的作用，活性成分主要是其中的β_葡聚糖、雜多糖和蛋白復合物，在給小鼠注射了從樺褐孔菌的菌絲體和菌核中提純的多糖后，其降低血糖的作用可維持3 48h。在樺褐孔菌菌核中含有I種糖蛋白和I種水溶性多糖，均有明顯的降血糖作用，尤其是樺褐孔菌多糖提取液，此外還發現樺褐孔菌的水提物中的栓菌酸對非胰島素依賴型糖尿病有效。樺褐孔菌多糖作為一種極為重要的藥物成分，具有廣闊的開發前景，但樺褐孔菌多糖水溶液在存放過程中產生沉淀、渾濁等現象，從而影響產品的質量與商品價值。
發明內容
針對上述不足，本發明的目的是提供一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法。本發明的技術方案為—種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，包括以下步驟I)三氯乙酸(TCA)脫蛋白向樺褐孔菌提取物中加入三氯乙酸，靜置，然后固液分離，取分離得到的固體物質；2)活性炭脫色向步驟2)所得固體物質按體積加入50 100倍的水，然后加入活性炭脫色，然后固液分離，取所得上清液；
3)用天然澄清劑澄清向步驟3)所得上清液加入天然澄清劑澄清。其中，所述步驟I)中的樺褐孔菌提取物是使用微波浸提方法獲得的。其中，所述微波浸提是將粉碎后的樺褐孔菌加入其體積50 70倍的水，置于微波提取設備中，微波功率600 800W，提取時間20 40分鐘獲得的。其中，所述步驟I)中，所述加入三氯乙酸的體積比例為20% 50%，所述靜置的時間是20 50分鐘，靜置的溫度是60°C 80°C。其中，所述步驟2)中，加入活性炭的質量比例為1% 4%，脫色的溫度50°C 80°C，脫色的時間為90 120分鐘。其中，所述步驟3)中加入的天然澄清劑是ZTC1+1III型澄清劑，先加入ZTC1+1III 型澄清劑的質量比例為1%的B組份溶液，后加入ZTC1+1III型澄清劑的質量比例為1%的 A組份溶液，其中I %的B組份溶液質量為樺褐孔菌溶液質量的4 8 %，I %的A組份溶液質量為樺褐孔菌溶液質量的2 4%，加入B組份的溫度為60 90°C，保溫時間15 35 分鐘；加入A組份的溫度為30 60°C，保溫時間為15 35分鐘。其中，所述I %的B組份溶液用量為6 8 %，I %的A組份溶液用量為3 4 %， 加入B組份的溫度為70°C，保溫時間25分鐘；加入A組份的溫度為50°C，保溫時間為25分鐘。其中，所述步驟3)之后還要固液分離，取上清液。所述的制備方法得到的樺褐孔菌多糖水溶液。所述的樺褐孔菌多糖水溶液在制備保健品或藥品中的應用。本發明的優良效果在于本發明提供的樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，操作簡單，對樺褐孔菌多糖的損失小，得到的多糖水溶液性質穩定，有效成分含量高，適用于保健品或藥品的制備。本發明使用“ZTC1+1III型澄清劑”，是從食品中提取的高分子物質，以天然多糖為原料制成，是替代聚丙烯酰胺，聚合氯化鋁等人工合成絮凝劑的理想品種，使用“ZTC1+1III型澄清劑”的澄清方法成本低、效率高、安全無毒。
具體實施例方式以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。實施例I :ZTC1+1III型天然澄清劑溶液的配制A組分溶液的配制稱取ZTC1+1III型天然澄清劑(天津振天成科技有限公司)A 組分5. 0g，先用少量蒸餾水攪成糊狀，然后加蒸餾水至500mL，溶脹24h，攪勻，雙層紗布濾過，即得1% A組分黏膠狀的溶液。B組分溶液的配制稱取ZTC1+1III型澄清劑B組分5. 0g，用少量I %乙酸溶液溶解并攪成糊狀，然后加1%乙酸至500mL，溶脹24h，攪勻，雙層紗布濾過，即得1% B組分黏膠狀的溶液。實施例2將粉碎過篩的樺褐孔菌加入50倍體積的水，置于微波提取設備中(青島澳柯瑪， AM-C23)，微波功率600W，波長Imm lm，微波提取20min，將提取液體積真空濃縮到原來的 1/10，加入無水乙醇至最終乙醇濃度為80%，靜置過夜，離心收集沉淀，干燥稱重，得到的樺
4褐孔菌提取物是樺褐孔菌粗多糖，得率為18%，其中含有蛋白質、色素、樺褐孔菌多糖等。將提取的樺褐孔菌提取物用三氯乙酸(TCA)法脫蛋白，TCA量20% (體積比)，溫度60°C，加熱時間20min，分析所得溶液，其蛋白脫出率50%，多糖損失率19. 8%。將脫蛋白后的樺褐孔菌提取物加水稀釋50倍并用活性炭進行脫色，活性炭用量 1% (質量比)，脫色溫度50°C，加熱時間90min。脫色率95%，多糖損失率21 %。脫色后的樺褐孔菌提取物水溶液的pH值為5. 3。采用ZTC1+1III型澄清劑澄清，ZTC1+1III型澄清劑用量(1% B組份/1% A組份)為4% /2%，澄清溫度(B/A)為 600C /300C，保溫時間15min，吸光度值O. 75 (在650nm處測得的吸光度值能夠反映口服液的澄清程度)，多糖損失率17%。該多糖水溶液常溫放置3個月后，在同樣波長下溶液的吸光度為O. 75。實施例3將粉碎過篩的樺褐孔菌加入70倍體積的水，置于微波提取設備中(青島澳柯瑪， AM-C23)，微波功率800W，波長Imm lm，微波提取25min，將提取液體積真空濃縮到原來的 1/10，加入無水乙醇至最終乙醇濃度為80%，靜置過夜，離心收集沉淀，干燥稱重，得到的樺褐孔菌提取物是樺褐孔菌粗多糖，粗多糖的得率為24%。將提取的樺褐孔菌提取物用三氯乙酸(TCA)法脫蛋白，TCA量50%，溫度80°C，加熱時間50min，蛋白脫出率48%，多糖損失率21 %。將脫蛋白后的樺褐孔菌提取物用水稀釋60倍并用活性炭進行脫色，活性炭用量 4%，脫色溫度80°C，加熱時間120min。脫色率91 %，多糖損失率25%。將脫色后的樺褐孔菌提取物水溶液的pH值為5. 4。采用ZTC1+1III型澄清劑澄清，ZTC1+1III型澄清劑用量(1% B組份/I % A組份)為8% /4%，澄清溫度(B/A)為 900C /600C，保溫時間35min，吸光度值O. 78 (在650nm處測得的吸光度值能夠反映口服液的澄清程度)，多糖損失率22%。該多糖水溶液常溫放置3個月，在同樣波長下該溶液的吸光度為O. 78。實施例4將粉碎過篩的樺褐孔菌加入60倍體積的水，置于微波提取設備中(青島澳柯瑪， AM-C23)，微波功率750W，波長Imm lm，微波提取40min，將提取液體積真空濃縮到原來的 1/10，加入無水乙醇至最終乙醇濃度為80%，靜置過夜，離心收集沉淀，干燥稱重，得到樺褐孔菌提取物粗多糖的得率為20%。將提取的樺褐孔菌粗多糖用三氯乙酸(TCA)法脫蛋白，TCA量36%，溫度70°C，加熱時間30min，蛋白脫出率79. 3%，多糖損失率17.2%。將脫蛋白后的樺褐孔菌粗多糖加水稀釋50倍并用活性炭進行脫色，活性炭用量 3%，脫色溫度60°C，加熱時間IOOmin0脫色率97. 2%，多糖損失率26. 7。脫色后的樺褐孔菌粗多糖溶液的pH值為5. 2。采用ZTC1+1III型澄清劑澄清，ZTC1+1III型澄清劑用量(1% B組份/1% A組份)為6% /3%，澄清溫度(B/A)為 700C /500C，保溫時間25min，吸光度值O. 69 (在650nm處測得的吸光度值能夠反映口服液的澄清程度)，多糖損失率16. 3%。該多糖水溶液常溫放置3個月，在同樣波長下溶液的吸光度為O. 69。
權利要求
1.一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，包括以下步驟1)三氯乙酸脫蛋白向樺褐孔菌提取物中加入三氯乙酸，靜置，然后固液分離，取分離得到的固體物質；2)活性炭脫色向步驟2)所得固體物質按體積加入50 100倍的水，然后加入活性炭脫色，然后固液分離，取所得上清液；3)用天然澄清劑澄清向步驟3)所得上清液加入天然澄清劑澄清。
2.如權利要求I所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I)中的樺褐孔菌提取物是使用微波浸提方法獲得的。
3.如權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述微波浸提是將粉碎后的樺褐孔菌加入其體積50 70倍的水，置于微波提取設備中，微波功率600 800W，提取時間20 40分鐘獲得的。
4.如權利I要求所述的制備方法，其特征在于，所述步驟I)中，所述加入三氯乙酸的體積比例為20% 50%，所述靜置的時間是20 50分鐘，靜置的溫度是60°C 80°C。
5.如權利I要求所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中，加入活性炭的質量比例為I % 4%，脫色的溫度50°C 80°C，脫色的時間為90 120分鐘。
6.如權利I要求所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中加入的天然澄清劑是 ZTC1+1III型澄清劑，先加入ZTC1+1III型澄清劑的質量比例為1%的B組份溶液，后加入 ZTC1+1III型澄清劑的質量比例為1%的A組份溶液，其中1%的B組份溶液質量為樺褐孔菌溶液質量的4 8%，I %的A組份溶液質量為樺褐孔菌溶液質量的2 4%，加入B組份的溫度為60 90°C，保溫時間15 35分鐘；加入A組份的溫度為30 60°C，保溫時間為 15 35分鐘。
7.如權利6要求所述的制備方法，其特征在于，所述I%的B組份溶液用量為6 8 %，I%的A組份溶液用量為3 4%，加入B組份的溫度為70°C，保溫時間25分鐘；加入A組份的溫度為50°C，保溫時間為25分鐘。
8.如權利I要求所述的制備方法，其特征在于，所述步驟3)之后還要固液分離，取上清液。
9.權利要求I 8任一所述的制備方法得到的樺褐孔菌多糖水溶液。
10.權利要求9所述的樺褐孔菌多糖水溶液在制備保健品或藥品中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，是將粉碎后的樺褐孔菌用微波浸提、脫蛋白、脫色制得的多糖水溶液。選用ZTC1+1III型澄清劑對樺褐孔菌多糖水溶液進行澄清，澄清條件為ZTC1+1III型澄清劑用量(1％B組份/1％A組份)8％/4％～4％/2％，澄清溫度(B/A)90℃/60℃～60℃/30℃，保溫時間15min～35min。本發明提供的樺褐孔菌多糖水溶液的制備方法，操作簡單，對樺褐孔菌多糖的損失小，有效成分含量高，適用于保健品或藥品的制備。
文檔編號C08B37/00GK102603906SQ20111046163
公開日2012年7月25日 申請日期2011年12月30日 優先權日2011年12月30日
發明者李榮杰 申請人:安徽豐原發酵技術工程研究有限公司