一種樺褐孔菌中有效物質提取方法和茶包的制備方法
【專利摘要】本發明公開了一種樺褐孔菌中有效物質提取方法和茶包的制備方法，包括：選用樺褐孔菌原料經過破碎處理、水浸泡、加熱水煮、熱水浸提輔助超聲提取并離心過濾得到以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖；濾渣用乙醇浸泡、乙醇恒溫浴、再輔助超聲提取并離心過濾得到樺褐孔菌中的齊墩果酸三萜類化合物。將得到的以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖提取液和齊墩果酸三萜類化合物提取液以1∶1均勻混合得到樺褐孔菌混合提取液；樺褐孔菌混合提取液經過旋轉蒸發得到濃縮液；濾渣經過烘干，篩選，炒制，提取液一次附型，一次鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得成品。其最終制的茶包中的有效成份含量最高。該方法開發的樺褐孔菌茶包利于功效成分的利用，飲用方便。
【專利說明】一種樺褐孔菌中有效物質提取方法和茶包的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種樺褐孔菌袋泡茶及其配方的研究，此外，本發明還公開這種樺褐孔菌中以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖及齊墩果酸三萜類化合物的提取工藝。
【背景技術】
[0002]樺褐孔菌，又叫白樺茸、樺癌褐孔菌、斜管纖孔菌、褐多孔菌。生于白樺、銀樺、榆樹、赤楊等活立木的樹皮下或砍伐后樹木的枯干上，其菌核可以在砍伐后的枯干上生存達6年之久。在國內主要分布于黑龍江省、吉林省長白山地區、等地區。其成分主要含有羊毛甾醇型三萜類、樺褐孔菌醇和樺褐孔菌素、黑色素類、葉酸衍生物，以及芳香物質、木質素、栓菌酸、單寧等化學成分，其中起主要藥理作用的為羊毛留醇型三萜類、樺褐孔菌醇、樺褐孔菌素和木質素.具有抵抗肝癌、胃癌、肺癌、宮頸癌、乳腺癌、皮膚癌、直腸癌、淋巴等多種腫瘤細胞，以及抗艾滋病病毒、抗感染、治療糖尿病、降血壓調節血脂、抗機體衰老、增強免疫力等藥理作用。
[0003]袋泡茶，可以長期儲存，使用開水沖泡，簡單方便，易于攜帶。樺褐孔菌茶包中不添加任何其他材料，濾渣烘干炒熟再與濃縮液混合，原滋原味，保持了樺褐孔菌最原始的狀態，堅持純天然的飲用。
【發明內容】
[0004]本發明針對樺褐孔菌中有效物質營養價值高，利用樺褐孔菌和茶包結合而開發新型產品，本發明公開了樺褐孔菌中有效物質提取方法和茶包的制備方法。
[0005]根據本發明的第一目的，本發明提供了一種樺褐孔菌中有效物質提取方法，其主要包括以下的步驟:
[0006]選用樺褐孔菌原料經過破碎處理、水浸泡、加熱水煮、熱水浸提輔助超聲提取并離心過濾得到以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖；
[0007]濾渣用乙醇浸泡、乙醇恒溫浴、再輔助超聲提取并離心過濾得到樺褐孔菌中的齊墩果酸三萜類化合物。
[0008]優選的是，對樺褐孔菌原料經過破碎處理中，選取非機械化處理工藝。
[0009]優選的是，水浸泡的條件:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時。
[0010]優選的是，乙醇浸泡的條件:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時，乙醇濃度是90%。
[0011]優選的是，加熱水煮和熱水浸提輔助超聲提取的條件:
[0012]水浸泡后的樺褐孔菌原料與水混合直至煮沸后持續IOmin ;超聲提取的條件是60°C，1 小時。
[0013]優選的是，乙醇恒溫浴和超聲提取的條件是:
[0014]濾渣與乙醇水溶液混合，70°C恒溫加熱30min ;超聲提取條件是60°C，I小時。
[0015]根據本發明的第二目的，本發明提供了一種樺褐孔菌茶包的制備方法，其主要步驟包括:
[0016]將以上方法得到的以β_葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖提取液和齊墩果酸三萜類化合物提取液以1:1均勻混合得到樺褐孔菌混合提取液；
[0017]樺褐孔菌混合提取液經過旋轉蒸發得到濃縮液；濾渣經過烘干，篩選，炒制，提取液一次附型，一次鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得成品。
[0018]優選的是，樺褐孔菌提取液經過旋轉蒸發濃縮，濃縮液濃度為2.2波美度。
[0019]優選的是，濾渣經過60°C恒溫干燥4h，篩選顆粒大小在0.2-0.3mm后經過低溫炒制。
[0020]優選的是，將樺褐孔菌提取液浸泡在炒制后的樺褐孔菌顆粒上，進行一次付型，顆粒與提取液的比例為料液比1: 2.5，進行一次干燥后，再進行樺褐孔菌提取液二次付型，比例也為料液比1: 2.5，再經過二次鼓風干燥后即得成品。
[0021]本發明采取了上述方案以后，其最終制的茶包中的有效成份含量最高，具有降糖，降血壓，抗癌等功效，而且袋泡茶經過溫水沖泡后，其中有效成份容易被人體吸收，并能起到良好的功效。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0022]下面結合附圖對本發明進行詳細的描述，以使得本發明的上述優點更加明確。
[0023]圖1是本發明樺褐孔菌中有效成分提取方法及茶包制備工藝方法的流程示意圖；
[0024]圖2是本發明原料手動切丁和超微粉碎處理比較示意圖；
[0025]圖3是本發明一個實施例中乙醇浸泡中四種方案提取含量比較-C18色譜柱檢測比較圖；
[0026]圖4是本發明一個實施例中乙醇浸泡中四種方案提取含量比較-氨基柱色譜柱檢測比較圖；
[0027]圖5是本發明一個實施例中水浸泡中四種方案提取含量比較-C18色譜柱檢測比較圖；
[0028]圖6是本發明一個實施例中水浸泡中四種方案提取含量比較-氨基柱色譜柱檢測比較圖。
【具體實施方式】
[0029]以下將結合附圖及實施例來詳細說明本發明的實施方式，借此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題，并達成技術效果的實現過程能充分理解并據以實施。需要說明的是，只要不構成沖突，本發明中的各個實施例以及各實施例中的各個特征可以相互結合，所形成的技術方案均在本發明的保護范圍之內。
[0030]如圖1所示，圖1是本發明樺褐孔菌中有效成分提取方法及茶包制備工藝方法的流程示意圖，根據流程圖所示，其主要方案如下:
[0031]選用樺褐孔菌原料經過破碎處理、水浸泡、加熱水煮、熱水浸提輔助超聲提取并離心過濾得到以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖； [0032]濾渣用乙醇浸泡、乙醇恒溫浴、再輔助超聲提取并離心過濾得到樺褐孔菌中的齊墩果酸三萜類化合物。[0033]優選的是，對樺褐孔菌原料經過破碎處理中，選取非機械化處理工藝。
[0034]優選的是，水浸泡的條件:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時。
[0035]優選的是，乙醇浸泡的條件:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時，乙醇濃度是90%。
[0036]優選的是，加熱水煮和熱水浸提輔助超聲提取的條件:
[0037]水浸泡后的樺褐孔菌原料與水混合直至煮沸后持續IOmin ;超聲提取的條件是60°C，1 小時。
[0038]優選的是，乙醇恒溫浴和超聲提取的條件是:
[0039]濾渣與乙醇水溶液混合，70°C恒溫加熱30min ;超聲提取條件是60°C，I小時。
[0040]其中，根據圖1所示，一種樺褐孔菌茶包的制備方法，其主要步驟包括:
[0041]將以上方法得到的以β_葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖提取液和齊墩果酸三萜類化合物提取液以1:1均勻混合得到樺褐孔菌混合提取液；
[0042]樺褐孔菌混合提取液經過旋轉蒸發得到濃縮液；濾渣經過烘干，篩選，炒制，提取液一次附型，一次 鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得成品。
[0043]優選的是，樺褐孔菌提取液經過旋轉蒸發濃縮，濃縮液濃度為2.2波美度。
[0044]優選的是，濾渣經過60°C恒溫干燥4h，篩選顆粒大小在0.2-0.3mm后經過低溫炒制。
[0045]優選的是，將樺褐孔菌提取液浸泡在炒制后的樺褐孔菌顆粒上，進行一次付型，顆粒與提取液的比例為料液比1: 2.5，進行一次干燥后，再進行樺褐孔菌提取液二次付型，比例也為料液比1: 2.5，再經過二次鼓風干燥后即得成品。
[0046]本發明采取了上述方案以后，其最終制的茶包中的有效成份含量最高，具有降糖，降血壓，抗癌等功效，而且袋泡茶經過溫水沖泡后，其中有效成份容易被人體吸收，并能起到良好的功效。
[0047]具體來說，在具體的實施例中，所選用樺褐孔菌原料經過破碎處理，先以一定料液比進行水浸泡，之后采用加熱一定時間，熱水浸提輔助超聲提取樺褐孔菌多糖，其中以β -葡聚糖為主，離心過濾處理得到上清液即為樺褐孔菌多糖，濾渣用乙醇浸泡，采用加熱保溫一定時間，再輔助超聲提取樺褐孔菌中齊墩果酸三萜類化合物，經離心過濾得到上清液即為含有齊墩果酸的提取液。
[0048]其中，為了使得破碎處理對樺褐孔菌多糖和齊墩果酸三萜類化合物的成份影響較少，因此選用非機械化處理工藝。
[0049]為了證明上述的實驗事實，在一個實施例中，所選用樺褐孔菌原料經過破碎處理，分別以一定料液比進行水浸泡和乙醇浸泡，并分別用四種提取方法分別處理提取其中多糖類及三萜類組分，通過高效液相色譜技術作為檢測手段對其中的有效成分的含量進行評價。
[0050]其中，樺褐孔菌茶包制備具體步驟包括:將以β_葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖提取液和齊墩果酸三萜類物質提取液以1:1混合得到樺褐孔菌提取液，混合提取液經過旋轉蒸發得到濃縮液，濾渣經過烘干，篩選，炒制，提取液一次附型，一次鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得樺褐孔菌茶包成品。
[0051]根據本發明的一個實例，所述樺褐孔菌前期處理如下:[0052]樺褐孔菌破碎處理進行非機械處理和機械處理兩種方法比較。
[0053]并根據高效液相色譜法檢測選擇一種提取成份含量較高的提取方法；之后并且分別針對不同提取成分選用水浸泡和醇浸泡。水浸泡的條件為:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時；乙醇浸泡的條件:比例是1: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時，乙醇濃度是90%。
[0054]根據本發明的第二個實例，最終確定有效成份的提取工藝采用加熱水煮再超聲方法提取樺褐孔菌多糖，濾渣乙醇浸泡后再進行醇浴超聲方法提取樺褐孔菌中齊墩果酸三萜類化合物。加熱水煮再超聲工藝條件:原料與水混合直至煮沸后持續lOmin，超聲條件是60°C,60min ;醇浴超聲工藝條件:原料與乙醇水溶液混合，70°C恒溫加熱30min，超聲條件是 60°C，60min。
[0055]根據本發明的第三個實例，提取液經過高效液相檢測，分別用氨基柱和C18兩種型號的色譜柱進行檢測，其中氨基柱主要針對樺褐孔菌多糖成份進行檢測，而C18主要針對樺褐孔菌中齊墩果酸三萜類化合物進行檢測。
[0056]根據本發明的第四個實例，上述方案中選擇最有效的提取方法進行有效物質提取方法，分別提取多糖類和三萜類物質，均勻混合，進而進行旋轉蒸發濃縮使得濃縮液波美度為 2.2。
[0057]根據本發明的第五個實例，所述樺褐孔菌茶包制備方法中，濾渣經過烘干，炒制，篩選，提取液一次附型，一次鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得樺褐孔菌袋泡茶成品。將樺褐孔菌提取液浸泡在炒制后的樺褐孔菌顆粒上，進行一次附型，顆粒與提取液的比例為1: 2.5。以保證提取液能夠充分被吸附到樺褐孔菌顆粒內部，進行一次干燥后，再進行樺褐孔菌提取液二次附型，比例同上，再經過二次鼓風干燥后即得成品。
[0058]根據本發明的第六個實例，取3g樺褐孔菌茶包泡于200ml水中，采用高效液相技術對樺褐孔菌茶水進行定性和定量分析。
[0059]試驗樣品:
[0060]主要原料:
[0061]樺褐孔菌，食品級乙醇，蒸餾水，色譜級乙腈，色譜級甲醇
[0062]試驗設備:超聲提取儀器
[0063]高效液相色譜儀
[0064]C18色譜柱
[0065]氨基柱
[0066]旋轉蒸發儀
[0067]超微粉碎機
[0068]電磁爐
[0069]樺褐孔菌原料前處理條件優化:
[0070]分別采用超微粉碎處理和非機械方法處理樺褐孔菌原料，如下所述:
[0071]1.超微粉碎處理:將樺褐孔菌超微粉碎lmin，得到樺褐孔菌粉末。
[0072]2.非機械處理:采用人工方法將樺褐孔菌進行一定力度的破碎。
[0073]根據圖1可知，非機械處理與超微粉碎處理相比，樺褐孔菌原材料采用非機械處理，其中有效成份損失較少。
[0074]樺褐孔菌多糖提取條件優化:[0075]采用以下方案分別提取以以β_葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖:
[0076]方案1:樺褐孔菌水浸泡后過濾直接對提取液進行高效液相檢測；
[0077]方案2:樺褐孔菌水浸泡后，加熱直至煮沸持續lOmin，對提取液進行高效液相檢測；
[0078]方案3:樺褐孔菌水浸泡后，進行輔助超聲提取，提取條件為60°C，60min ；
[0079]方案4:樺褐孔菌水浸泡后，加熱直至煮沸持續lOmin，輔助超聲提取，提取條件為6(TC，60min。
[0080]根據圖6得到方案四中樺褐孔菌多糖提取量最高。
[0081 ] 樺褐孔菌三萜類化合物提取條件優化:
[0082]根據上述方案四提取樺褐孔菌多糖后，經過離心過濾得到濾渣，分別進行以下四種方案提取以齊墩果酸三萜類化合物:
[0083]方案1:樺褐孔菌濾渣經過乙醇水溶液浸泡后過濾直接對提取液進行高效液相檢測；
[0084]方案2:樺褐孔菌濾渣經過乙醇水溶液浸泡后，加熱直至70°C維持30min，進過離心過濾后，對提取液進行聞效液相檢測；
[0085]方案3:樺褐孔菌濾渣經過乙醇水溶液浸泡后，進行輔助超聲提取，提取條件為60°C,60min ；
[0086]方案4:樺褐孔菌濾渣經過乙醇水溶液浸泡后，加熱直至70°C維持30min，輔助超聲提取，提取條件為60°C，60min。
[0087]根據圖3得到方案四中樺褐孔菌多糖提取量最高。
[0088]最終確定有效成份的提取工藝采用加熱水煮再超聲方法提取樺褐孔菌多糖，濾渣乙醇浸泡后再進行醇浴超聲方法提取樺褐孔菌中齊墩果酸三萜類化合物。加熱水煮再超聲工藝條件:原料與水混合直至煮沸后持續lOmin，超聲條件是60°C，60min ;醇浴超聲工藝條件:原料與乙醇水溶液混合，70°C恒溫加熱30min，超聲條件是60°C，60min。
[0089]結論:
[0090]根據附圖2可以看出，其為非機械處理和超微粉碎處理比較圖，其中，原料經過手動切丁檢測其中的有效成分的峰高要遠高于超微粉碎，說明超微粉碎對于樺褐孔菌中有效成分損失很大。因此手動切丁是首選處理方法。
[0091]根據附圖3，其采用C18色譜柱檢測，I號表示先水浴再超聲處理；2號表示超聲處理；3號表示水浴；4號表示浸泡后未經過處理，其中，可以發現，乙醇浸泡樺褐孔菌，經過四種提取方法處理后，經過C18色譜柱進行檢測，發現提取量由大到小依次如下:先水浴再超聲處理 > 超聲處理 > 水浴處理 > 浸泡后未經過處理。而C18色譜柱能夠檢測出在紫外光下具有一定吸收峰的物質。說明所檢測的吸收峰中可能是提取出的三萜類物質。根據出峰時間，
6.5和12.5min左右和溶劑峰的出峰時間相同，可以判斷此為雜質，可以判斷在20，27，31.5及41.5min左右出峰的物質可能是從樺褐孔菌中提取出來的有效物質。
[0092]根據附圖4，其采用氨基柱色譜柱檢測，I號表示先水煮再超聲處理；2號表示超聲處理；3號表示水煮；4號表示浸泡后未經過處理，醇浸泡樺褐孔菌，經過氨基柱色譜柱檢測沒有峰出現，也就是說醇提沒有將其中的多糖有效成分提取出來。
[0093]根據附圖5，其采用C18色譜柱檢測，I號表示先水煮再超聲處理；2號表示超聲處理；3號表示水煮；4號表示浸泡后未經過處理。水浸泡樺褐孔菌，經過C18色譜柱檢測沒有峰出現，因為在紫外光下沒有吸收峰，也就是說水提沒有將其中的三萜類有效成分提取出來。
[0094]根據附圖6，其采用氨基柱色譜柱檢測，I號表示先水煮再超聲處理；2號表示超聲處理；3號表不水煮；4號表不浸泡后未經過處理。經過氨基柱檢測，在IOmin左右有峰出現，說明水提后溶液中有糖類成分，而且發現提取量由大到小依次如下:先水煮再超聲處理>超聲處理 > 水煮處理 > 浸泡后未經過處理。
[0095]由此可見，醇提能夠將樺褐孔菌中三萜類物質提取出來，而水提能夠將樺褐孔菌中多糖類成分提取出來，而且樺褐孔菌經過浸泡后經過水煮再超聲和醇提水浴再超聲提取效果最好。
[0096]最后應說明的是:以上所述僅為本發明的優選實施例而已，并不用于限制本發明，盡管參照前述實施例對本發明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之 內。
【權利要求】
1.一種樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，包括: 選用樺褐孔菌原料經過破碎處理、水浸泡、加熱水煮、熱水浸提輔助超聲提取并離心過濾得到以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖； 濾渣用乙醇浸泡、乙醇恒溫浴、再輔助超聲提取并離心過濾得到樺褐孔菌中的齊墩果酸三萜類化合物。
2.根據權利要求1所述的樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，對樺褐孔菌原料經過破碎處理中，選取非機械化處理工藝。
3.根據權利要求1或2所述的樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，水浸泡的條件:比例是I: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時。
4.根據權利要求1或2所述的樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，乙醇浸泡的條件:比例是I: 10 (w/v)，常溫浸泡，24小時，乙醇濃度是90%。
5.根據權利要求1所述的樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，加熱水煮和熱水浸提輔助超聲提取的條件: 水浸泡后的樺褐孔菌原料與水混合直至煮沸后持續IOmin ;超聲提取的條件是60°C，I小時。
6.根據權利要求1所述的樺褐孔菌中有效物質提取方法，其特征在于，乙醇恒溫浴和超聲提取的條件是: 濾渣與乙醇水溶液混合，70°C恒溫加熱30min ;超聲提取條件是60°C，I小時。
7.—種樺褐孔菌茶包的制備方法,其特征在于，將按照權利要求1~6任一方法得到的以β-葡聚糖為主的樺褐孔菌多糖提取液和齊墩果酸三萜類化合物提取液以1:1均勻混合得到樺褐孔菌混合提取液； 樺褐孔菌混合提取液經過旋轉蒸發得到濃縮液；濾渣經過烘干，篩選，炒制，提取液一次附型，一次鼓風干燥，二次附型，二次鼓風干燥，稱量包裝即得成品。
8.根據權利要求7所述的樺褐孔菌茶包制備方法，其特征在于，樺褐孔菌提取液經過旋轉蒸發濃縮，濃縮液濃度為2.2波美度。
9.根據權利要求7所述的樺褐孔菌茶包制備方法，其特征在于，濾渣經過60°C恒溫干燥4h,篩選顆粒大小在0.2-03mm后經過低溫炒制。
10.根據權利要求9所述的樺褐孔菌茶包制備方法，其特征在于，將樺褐孔菌提取液浸泡在炒制后的樺褐孔菌顆粒上，進行一次付型，顆粒與提取液的比例為料液比1: 2.5，進行一次干燥后，再進行樺褐孔菌提取液二次付型，比例也為料液比1: 2.5，再經過二次鼓風干燥后即得成品。
【文檔編號】C07J63/00GK104004106SQ201410184814
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年4月28日 優先權日:2014年4月28日
【發明者】劉俊梅, 楊慶賀, 李琢偉, 王丹, 王輝, 王璐, 王慶, 楊盼盼, 吳杰 申請人:楊慶賀