本發明涉及抑制磷酸肌醇酯3-激酶(下文的PI3K)的化合物；具體地，本發明涉及為吲嗪衍生物的化合物，制備這類化合物的方法，包含它們的藥物組合物及其治療用途。
更具體地，本發明的化合物是PI3K I類的活性或功能的抑制劑，且更具體地，它們是I類PI3K的PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ和/或PI3Kγ同種型的活性或功能的抑制劑。
因此，本發明的化合物可以用于治療許多與PI3K酶機制相關的障礙，例如呼吸性疾病，包括哮喘，慢性阻塞性肺病(COPD)特發性肺纖維化(IPF)和咳嗽；過敏性疾病，包括過敏性鼻炎和特應性皮炎；自身免疫性疾病，包括系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎和多發性硬化；炎癥性疾病，包括炎性腸病；心血管疾病，包括血栓形成和動脈粥樣硬化；惡性血液病；囊性纖維化；神經變性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；腎病；血小板聚集；癌癥；精子能動性；器官移植且特別是移植排斥；移植排斥；肺損傷；和疼痛，包括與類風濕性關節炎或骨關節炎相關的疼痛、背痛、全身炎癥性疼痛、皰疹后神經痛(post hepatic neuralgia)、糖尿病神經病變、炎癥性神經性疼痛、三叉神經痛、中樞性疼痛和呼吸道感染、氣道損傷、PI3Kδ突變患者的氣道損傷。
發明背景
在生物化學中，激酶是將磷酸基團從高能供體分子例如ATP轉移至特異性底物上即稱作磷酸化過程的酶類型。具體地，PI3K酶是脂質酶激酶，其可以使肌醇環的3'-羥基基團上的磷肌醇類(PI)磷酸化(Panayotou等人，Trends Cell Biol 2：358-60(1992))。眾所周知，位于質膜上的PI可以作為信號傳導級聯中的第二信使通過包含普列克底物蛋白-同源性(PH)，FYVE、PX和其他磷脂-結合結構域的停靠蛋白起作用(Vanhaesebroeck B等人，Annu.Rev.Biochem 70，535-602，2001；Katso R等人，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17，615-675，2001)。
因此，PI可以作為許多細胞過程中的第二信使起作用，包括信號轉導、膜運輸和轉運調節、細胞骨架組織化、細胞存活和死亡以及許多另外的功能。
PI可通過兩種經甘油磷酸連接基連接至細胞溶質肌醇環的脂肪酸結合細胞膜的脂雙層。PI肌醇環可以被PI3K酶磷酸化，導致細胞生長、存活和增殖調節。由于這一原因，PI3K酶使PI磷酸化是與哺乳動物細胞表面受體活化相關的大部分相關信號轉導事件之一(Cantley LC，Science 296，1655-7，2002；Vanhaesebroeck B等人，Annu.Rev.Biochem 70，535-602，2001)。
已經基于序列同源性、結構、結合配偶體、活化模式和底物優先性將PI3K酶分成3類：I類PI3K、II類PI3K和III類PI3K(Vanhaesebroeck B等人，Exp.Cell Res.253(1)、239-54，1999；和Leslie NR等人，Chem.Rev.101(8)、2365-80，2001)。
I類PI3K將磷酸肌醇-(4,5)-二磷酸(PI(4,5)P2)轉化成磷酸肌醇-(3,4,5)-三磷酸(PI(3,4,5)P3)，其作為第二信使起作用。因PI(3,4,5)P3胞內水平增加活化的信號傳導級聯通過5'-特異性和3'-特異性磷酸酶的作用被負面調節(Vanhaesebroeck B等人，Trends Biochem.Sci.22(7)、267-72，1997；Katso R等人，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17，615-75，2001；和Toker A，Cell.Mol.Life Sci.59(5)、761-79，2002)。
II類PI3K酶是最近期鑒定的PI3K類型且其確切功能仍然不清楚。
III類PI3K酶由單一家族成員組成，它們在結構上與I類PI3K酶相關并且顯然在胞吞作用和囊泡運輸方面是重要的。然而，存在一些證據表明III類PI3K可能涉及免疫細胞過程，例如吞噬作用和Toll-類受體(TLR)信號傳導。
I類PI3K酶可以基于其活化機制進一步被分入IA類和IB類。
更詳細地，IA類PI3K酶包含3種密切相關的同種型：PI3Kα、PI3Kβ和PI3Kδ，而IB類僅包含PI3Kγ同種型。這些酶是由稱作p110的具有4種類型：alpha(α)、beta(β)、delta(δ)和gamma(γ)同種型的催化亞單位組成的雜二聚體，它們在組成上與調節亞單位相關。前2種p110同種型(α和β)遍在表達且牽涉細胞分化和增殖。因此，PI3Kα和PI3Kβ酶被廣泛地作為研發新化療劑的靶標研究。
另外，p110δ和p110γ同種型主要在白細胞中表達且在免疫應答活化中是重要的，例如白細胞遷移、B和T細胞活化和肥大細胞脫粒。因此，PI3Kδ和PI3Kγ同種型與炎性呼吸性疾病和癌癥極為相關。
近期，本領域已知的PI3K酶的抑制劑衍生物一般可以抑制所述同種型(α、β、δ和γ同種型)，且它們可以對各種疾病中所述特異性同種型起的各個作用起作用。
PI3Kδ同種型的許多遺傳變異體已經在文獻中描述(Angulo等人，Science 2013，342，866-871；Kracker等人，J.Clinic.Immunol.2014，134，233-234；Lucas等人，Nature Immunology 2014，15，88-97)。它們中的一些涉及催化結構域(例如E1021K)，而其他發生在不同的酶區域(例如C2結構域的N334K)。考慮到PI3K激活似乎取決于域-域相互作用或與其他蛋白的相互作用，這些突變可能導致酶穩定性的變化并影響酶活化。此外，已經描述了PI3K突變在免疫缺陷中的作用(參見上面的參考文獻)。具有這些突變的患者可能發展成呼吸道感染，氣道壁和肺實質(lung parenchima)的損傷。
因此，已經研發了用于一種特異性PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ和PI3Kγ同種型的IA類抑制劑的特異性活性測定法，以分辨用于治療與PI3K酶機制相關的障礙的適合的特性。這類障礙可以包括，例如呼吸性疾病，其選自特發性慢性咳嗽、咳嗽-變異性哮喘、與胸部腫瘤或肺癌相關的咳嗽、病毒性或病毒后咳嗽、上氣道咳嗽綜合征(UACS)或滴鼻后咳嗽；或與酸和非酸的胃食管反流病相關的咳嗽、哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、間質性肺病、特發性肺纖維化(IPF)、充血性心臟病、結節病、感染(例如百日咳)、病毒感染，包括病毒性呼吸道感染以及呼吸性疾病的病毒性加劇；非病毒性呼吸道感染，包括曲霉菌病和利什曼病；過敏性疾病，包括過敏性鼻炎和特應性皮炎；自身免疫性疾病，包括系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎和多發性硬化；炎癥性疾病，包括炎性腸病；心血管疾病，包括血栓形成和動脈粥樣硬化；惡性血液病；神經變性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；腎病；血小板聚集；癌癥；精子能動性；移植排斥；移植物排斥；肺損傷；和疼痛，包括與類風濕性關節炎或骨關節炎相關的疼痛、背痛、全身炎癥性疼痛、皰疹后神經痛、糖尿病神經病變、炎癥性神經性疼痛(創傷)、三叉神經痛和中樞性疼痛。
鑒于由PI3K酶介導的病理性響應的數量，所以持續需要可以用于治療許多障礙的PI3K酶抑制劑。因此，本發明涉及新化合物，其是I類PI3K酶的PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ和PI3Kγ同種型的抑制劑，由于上述原因，所以它們通常可以具有期望的治療特性。
具體地，本發明的化合物可以具有對于PI3K酶的δ同種型或對于PI3K酶的γ和δ同種型遠超過對于同一酶的其他同種型選擇性。
發明簡述
本發明涉及式(I)化合物，
其中X1，X2，X3和X4，R，R1，R2，R3，R4，Cy，Z，m，n和p如下文本發明的詳細描述中所報道，所述化合物作為磷酸肌醇3-激酶的抑制劑起作用；本發明涉及用于制備它們的方法，包含與一種或多種藥學上可接受的載體混合的單獨的它們或它們與一種或多種活性成分的組合的藥物組合物。
在一個方面，本發明提供本發明的化合物在制備藥劑中的用途。
在另一個方面，本發明提供本發明的化合物在制備用于預防和/或治療任意疾病的藥劑中的用途，所述疾病的特征在于磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)活動過度和/或其中抑制PI3K活性是期望的，且特別是通過選擇性抑制δ或δ和γ酶同種型超過α和β同種型。
本發明還提供用于預防和/或治療任意疾病的方法，其中PI3K酶抑制是期望的，該方法包括對有這類治療需要的患者施用治療有效量的本發明的化合物。
具體地，可以將本發明的化合物單獨或與另外的活性成分組合施用，以便預防和/或治療呼吸道疾病，其特征在于炎癥性氣道阻塞，例如，咳嗽、哮喘、COPD和IPF。
發明詳述
本發明涉及一類作為磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制劑起作用的化合物。
該類化合物抑制I類PI3K的活性或功能，且更具體地，它們是I類PI3K的PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ和/或PI3Kδ同種型的活性或功能的抑制劑衍生物。本發明涉及式(I)化合物，
其中
X1，X2，X3和X4全部是CH基團，或X1，X2，X3和X4的至少一個是氮原子且其他是CH基團
每個R當存在時選自：-OR5，-SR5，-S(O)q-R7，鹵素,-NR10R11，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，(C3-C7)環烷基，(C2-C6)烯基，(C5-C7)環烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基；它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素，-OH，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，(C3-C7)環烷基，(C2-C6)烯基，(C5-C7)環烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基；
R1選自-H，-OR6，-SR6，-S(O)q-R8，鹵素，-NR12R13，-CN，-C(O)NR12R13，-C(O)OR16，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，(C3-C7)環烷基，(C2-C6)烯基，(C5-C7)環烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基，(C2-C6)氨基炔基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基；它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素，-NR22R23，-(CH2)nNR22R23，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)氨基烷氧基(C3-C6)雜環烷基氧基或(C3-C6)雜環烷基(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基；
R2選自-H，-OR9，-SR9，-S(O)q-R17，鹵素，-NR14R15，-CN，-C(O)NR14R15，-C(O)OR18，-(C1-C6)烷基，-(C1-C6)鹵代烷基，-(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，(C3-C7)環烷基，(C5-C7)環烯基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基；它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素；-NR24R25，-(CH2)nNR24R25，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基；
R3和R4相同或不同，選自-H，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基；
Cy選自芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基；它們各自任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素，-OH，-NR19R20，-CH2NR19R20；-CN，-CH(O)，-CH＝NOH，-C(O)NR19R20，-C(O)OR21，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基，，它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自-OH，鹵素，-CN，-S(O)2NRIRIII，-NRIIIS(O)2RII，-NRIRIII，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)烷氧基，芳基，雜芳基，(C3-C6)雜環烷基；
其中RI，RII和RIII相同或不同，獨立地選自-H，(C1-C6)烷基和烷酰基；
R5，R6，R9，R16，R18和R21相同或不同，獨立地選自-H，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，烷酰基和芳基烷酰基；
R7，R8和R17相同或不同，獨立地選自NR12R13，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)氨基烷基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基，它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素，-NR22R23，-CH2NR22R23，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基；
R10，R11，R12，R13，R14，R15，R19，R20，R22，R23，R24和R25相同或不同，獨立地選自-H，(C1-C6)烷基(C1-C6)羥基烷基和烷酰基，或者R10和R11，R12和R13，R14和R15，R19和R20，R22和R23，R24和R25的任一對與它們所連接的氮原子一起可以形成5-6元雜環，該雜環任選地含有一個額外的選自O，S，N，NH的雜原子或雜原子基團；
Z當存在時是原子或基團，選自-O-，-NH-，-C(O)-，-NHC(O)-，-C(O)NH-，-S-，-S(O)-和-S(O)2-；
m是0或1；
n是1或2，
p是0或1-3的整數；
q是1-2的整數；
或其藥學上可接受的鹽。
定義
本文所用的術語“藥學上可接受的鹽”是指式(I)化合物的衍生物，其中母體化合物通過用任意通常預期為藥學上可接受的堿或酸將任意的游離酸或堿性基團(如果存在)轉化成相應的加成鹽被適當地修飾。
所述鹽的適合的實例由此可以包括堿性殘基例如氨基基團的無機酸或有機酸加成鹽以及酸性殘基例如羧基基團的無機堿或有機堿加成鹽。
可以適合地用于制備本發明范圍內的鹽的無機堿的陽離子包含堿金屬或堿土金屬例如鉀、鈉、鈣或鎂的離子。
通過使作為堿起作用的主要化合物與無機酸或有機酸反應成鹽得到的那些包含，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、甲磺酸鹽、樟腦磺酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽和檸檬酸鹽。
本文所用的術語“鹵原子”包括氟、氯、溴和碘，優選氯或氟。
術語“(C1-C6)烷基”是指直鏈或支鏈烷基基團，其中組成的碳原子數為1-6的范圍。特別的烷基基團是甲基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。
表述“(C1-C6)鹵代烷基”是指上述定義的“(C1-C6)烷基”基團，其中一個或多個氫原子被一個或多個鹵原子替代，所述鹵原子彼此可以相同或不同。
所述(C1-C6)鹵代烷基基團的實例由此可以包括鹵化、多鹵化和全鹵化烷基(其中所有氫原子被鹵素院子替代)基團，例如三氟甲基或二氟甲基基團。
通過類比，術語“(C1-C6)羥基烷基”或“(C1-C6)氨基烷基”是指上述定義的“(C1-C6)烷基”基團，其中一個或多個氫原子分別被一個或多個羥基(OH)或氨基基團替代。
在本說明書中，除非另有提供，否則氨基烷基的定義涵蓋被一個或多個(NR10R11)取代的烷基基團。
涉及的如上述定義的取代基R10，R11，R12，R13，R14，R15，R19，R20，R22，R23，R24和R25，在本文中可以進一步解釋為，當R10和R11或者R12和R13等與它們所連接的氮原子一起形成5-6元雜環基團時，所述雜環基團上的至少另一個環碳原子可以被至少一個雜原子或雜-基團(例如N、NH、S或O)替代和/或可以帶有-氧代(＝O)取代基基團。所述雜環基團可以進一步在環中可利用的點上、即碳原子上或在可利用于取代的雜原子或雜-基團上任選地被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在兩個相鄰碳原子上的取代，在兩種情況下因此形成另外的5-6元雜環。因此，所述雜環基團的實例是1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、4-嗎啉基、哌嗪-4基-2-酮、4-甲基哌嗪-1-基、4-甲基哌嗪-1-基-2-酮、7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]癸-2-基、2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基、9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基和(3aR,6aS)-5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基。
術語“(C3-C7)環烷基”是指包含3-7個環碳原子的飽和環烴基團。非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基和環庚基。
術語“(C2-C6)烯基”是指具有一個或多個、共軛或非共軛的順式或反式構型的雙鍵的直鏈或支鏈碳鏈，其中原子數為2-6。
通過類比，術語“(C5-C7)環烯基”是指包含5-7個環碳原子和一個或兩個雙鍵的環烴基。
術語“(C2-C6)炔基”是指具有一個或多個三鍵的直鏈或支鏈碳鏈，其中原子數為2-6。
術語“(C2-C6)羥基炔基”是指上述定義的“(C1-C6)炔基”基團，其中一個或多個氫原子被一個或多個羥基(OH)基團替代。
術語“(C2-C6)氨基炔基”是指上述定義的“(C1-C6)炔基”基團，其中一個或多個氫原子被一個或多個(NR10R11)基團替代。
表述“芳基”是指具有6-20個、優選6-15個環原子的單環、雙環或三環碳環系，其中至少一個環是芳族的。表述“雜芳基”是指具有5-20個、優選5-15個環原子的單環、雙環或三環環系，其中至少一個環是芳族的，且其中至少一個環原子是雜原子或雜芳族基團(例如N、NH、S或O)。
適合的芳基或雜芳基單環環系的實例包括，例如苯基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、異噻唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、呋喃基基團等。
適合的芳基或雜芳基雙環環系的實例包括萘基、亞聯苯基(biphenylenyl)、嘌呤基、蝶啶基、吡唑并嘧啶基、苯并三唑基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、異吲哚基、苯并噻吩基、苯并二噁英基、二氫苯并二噁英基、茚基、二氫-茚基、二氫苯并二吖庚因基、苯并噁嗪基基團等。
適合的芳基或雜芳基三環環系的實例包括芴基基團和上述舉出的雜芳基雙環環系的苯并稠合的衍生物。
衍生的表述“(C3-C6)雜環烷基”是指飽和或部分不飽和的單環(C3-C6)環烷基基團，其中至少一個環碳原子被至少一個雜原子或雜基團(例如N，NH，S或O)替代或可帶有-氧代(＝O)取代基。所述雜環基團可以進一步任選地在環中的可用點上，即在碳原子上，或在可用于取代的雜原子或雜基團上被取代。在碳原子上的取代包括螺二取代以及在兩個相鄰碳原子上的取代，在兩種情況下因此形成額外的5-6元雜環。因此，所述雜環基團的實例是1-吡咯烷基，1-甲基-2-吡咯烷基，1-哌啶基，1-哌嗪基，4-嗎啉基，哌嗪-4基-2-酮，4-甲基哌嗪-1-基，1-甲基哌啶-4基，4-甲基哌嗪-1-基-2-酮，7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]癸-2-基，2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基，9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基和(3aR,6aS)-5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基。
(C3-C6)雜環烷基的非限制性實例表示為：吡咯烷基，咪唑烷基，噻唑烷基，哌嗪基，哌啶基，嗎啉基，硫嗎啉基，二氫-或四氫-吡啶基，四氫吡喃基，吡喃基，2H-或4H-吡喃基，二氫-或四氫呋喃基，二氫異噁唑基，吡咯烷-2-酮-基等。
術語“芳基(C1-C6)烷基”是指與直鏈或支鏈烷基連接的芳基環，其中組成的碳原子數在1-6的范圍內，例如苯基甲基，苯基乙基或苯基丙基。
術語“烷酰基”是指HC(O)-或烷基羰基基團(例如(C1-C6)烷基(CO)-)，其中基團“烷基”具有上述定義的含義。非限制性實例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基。
術語“烷氧基”是指通過氧橋連接的指定碳數的直鏈或支鏈烴。
通過類比，衍生的表達(C3-C6)雜環烷基氧基和(C3-C6)雜環烷基(C1-C6)烷氧基是指通過氧橋連接的雜環烷基和鏈接的雜環烷基-烷氧基。這種(C3-C6)雜環烷氧基和(C3-C6)雜環烷基(C1-C6)烷氧基的非限制性實例分別是(哌啶-4-基)氧基，1-甲基哌啶-4-基)氧基，2-(哌啶-4-基)乙氧基，2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基和2-(4-嗎啉代)乙氧基。
同樣衍生的表述“(C1-C6)氨基烷氧基”是指通過氧橋連接的如上定義的(C1-C6)氨基烷基，非限制性實例是(2-(二甲基氨基)乙氧基。
術語“芳基烷酰基”是指芳基C(O)或芳基烷基羰基基團[例如芳基(C1-C6)烷基C(O)-]，其中芳基和烷基具有上述定義。非限制性實例表示為苯甲酰基、苯基乙酰基、苯基丙酰基或苯基丁酰基。
表述“飽和、部分不飽和的或芳族的五元或六元環烷烴二基，亞芳基-二基或雜環-二基”是指具有五個或六個元素的合適的鄰位二取代的環烷烴或雜環殘基，包括1,2-亞苯基；2,3-，3,4-，4,5-或5,6-吡啶-二基；3,4-，4,5-或5,6-噠嗪-二基；4,5-或5,6-嘧啶-二基；2,3-吡嗪二基；2,3-，3,4-或4,5-噻吩-二基/呋喃-二基/吡咯-二基；4,5-咪唑-二基/噁唑-二基/噻唑二基；3,4-或4,5-吡唑-二基/異噁唑二基/異噻唑-二基，它們的飽和或部分不飽和類似物等。
本文所用的表述“環系”是指單環或雙環環系，其可以是飽和的、部分飽和的或不飽和的，例如芳基、(C3-C7)環烷基、(C3-C6)雜環烷基或雜芳基。
如本文中所使用的，術語“基團”、“基”或“片段”或“取代基”是同義的，并且旨在表示可連接于鍵或其他片段或分子的分子的官能團或片段。不在兩個字母或符號之間的短劃線(“-”)意在表示取代基的連接點。當以圖形表示時，環狀官能團(例如式I-1至I-9)中的連接點用位于可用環原子之一中的點(“·”表示)，其中所述官能團可連接到鍵或其他分子片段上。
本文中所使用的氧代部分由(O)表示，作為其他常見表示例如(＝O)的替代。因此，就通式而言，本文中的羰基優選表示為-C(O)-，作為其他常見表示例如-CO-，-(CO)-或-C(＝O)-的替代。一般來說，括號中的基團是側鏈基團，不包括在鏈中，并且當認為有用時，使用括號來幫助消除線性化學式的歧義；例如磺酰基-SO2-也可以表示為-S(O)2-以消除例如相對于亞磺酸基團-S(O)O-的歧義。
當堿性氨基或季銨基團存在于式I化合物中時，可存在選自氯化物，溴化物，碘化物，三氟乙酸鹽，甲酸鹽，硫酸鹽，磷酸鹽，甲磺酸鹽，硝酸鹽，馬來酸鹽，乙酸鹽，檸檬酸鹽，富馬酸鹽，酒石酸鹽，草酸鹽，琥珀酸鹽，苯甲酸鹽，對甲苯磺酸鹽，雙羥萘酸鹽和萘二磺酸鹽的生理可接受的陰離子。同樣，在酸性基團如COOH基團存在下，也可存在相應的生理陽離子鹽，例如包括堿金屬或堿土金屬離子。
本領域技術人員顯而易見的是式(I)化合物可以至少包含一個立體中心，即由(IA)中帶有星號(*)的碳原子表示，且由此可以作為光學立體異構體存在。
如果本發明的化合物具有至少一個立體中心，則它們由此可以作為對映異構體存在。如果本發明的化合物具有兩個或多個立體中心，則它們還可以作為非對映異構體存在。應當理解，所有這類單一對映異構體、非對映異構體及其任意比例的混合物均被本發明范圍所涵蓋。基于以基團的優先性為基礎的Cahn-Ingold-Prelog命名法，分配碳(*)的絕對構型(R)或(S)。
阻轉異構體是由圍繞單鍵旋轉受阻產生的立體異構體，其中對選址的空間張力屏障高至足以能夠分離構象異構體(Bringmann G等人，Angew.Chemie中間體Ed.44(34)、5384-5427，2005.doi：10.1002/anie.200462661)。
Oki定義的阻轉異構體為構象異構體，其在指定溫度下在半衰期大于1000秒下互變(Oki M，Topics in Stereochemistry 14，1-82，1983)。
阻轉異構體不同于其他手性化合物的方面在于在許多情況下，它們可以發生熱平衡，而手性異構化的其他形式通常僅可能是化學上的。
通過手性拆分法例如選擇性結晶分離阻轉異構體是可能的。在阻轉-對映異構體選擇性或阻轉選擇性合成中，一種阻轉異構體在損耗另一種阻轉異構體的情況下形成。阻轉選擇性合成可通過使用手性助劑進行，如Corey Bakshi Shibata(CBS)催化劑，即一種衍生自脯氨酸的不對稱催化劑；或在異構化反應有利于一種阻轉異構體超過另一種阻轉異構體時通過基于熱力學平衡的方法進行。
式(I)化合物的外消旋形式和各阻轉異構體(基本上不含其相應的對映異構體)和富含立體異構體的阻轉異構體混合物包括在本發明范圍內。
應當理解，下文對式I化合物所描述的所有優選基團或實施方案可以彼此組合并且也可以作必要的修改。
在優選的實施方案中，本發明涉及如上定義的式(I)化合物，其中n＝1，R3具有與上述相同的含義，除了H，R4是H，并且手性碳(*)的絕對構型是(R)。
在另一個實施方案中，碳(*)的優選構型是(S)。
在優選的實施方案中，本發明中所述的式(I)化合物以非對映異構體的混合物存在。
第一組優選的化合物是式(I)化合物，其中：
R3選自H和(C1-C6)烷基；
R4是H；
R，R1，R2，m，n，p，Z，Cy和X1-4如上所定義。
更優選的一組化合物是式(I)化合物，其中：
R3選自H和(C1-C6)烷基；
R4是H；
Cy是選自I-1至I-9的雜芳基，其中(I-1)是3H-嘌呤-3-基，(I-2)是9H-嘌呤-9-基，(I-3)是9H-嘌呤-6-基，(I-4)是1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，(I-5)是6-氧代-5H-,6H,7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基，(I-6)是嘧啶-4-基，(I-7)是嘧啶-2-基，(I-8)是吡嗪-2-基，(I-9)是1,3,5-三嗪-2-基；它們各自任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自鹵素，-OH，-NR19R20，-CH2NR19R20，-CN，-CH(O)，-CH＝NOH，-C(O)NR19R20，-C(O)OR21，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C2-C6)烯基，(C2-C6)炔基，(C2-C6)羥基炔基，芳基，雜芳基和(C3-C6)雜環烷基，它們各自進而任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自-OH，鹵素，-CN，-S(O)2NRIRIII，-NRIIIS(O)2RII，-NRIRIII，(C1-C6)烷基，(C1-C6)鹵代烷基，(C1-C6)羥基烷基，(C1-C6)烷氧基，芳基，雜芳基，(C3-C6)雜環烷基；所有其他變量如上所定義，
及其藥學上可接受的鹽。
I-1至I-9可以如下圖示
如上所述，當圖形表示時，單價符號“·”位于可用環原子之一上，表示官能團可連接到鍵或分子的其他片段。這不是將范圍僅限于圖形表示的結構；本發明還包括官能團中連接點的其他化學上可接受的定位。
優選的芳基，雜芳基，(C3-C6)雜環烷基基團是苯基，吡啶基，噻唑基和四唑基基團，一些特別優選的是3-氟-5-羥基苯基，2-氨基-1,3-噻唑-5-基，5-羥基吡啶-3基，1-甲基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基；對應于以下報告的結構(CHEMAXON 6.0.4名稱結構工具)。
在一個實施方案中:
X1，X2，X3和X4全部是CH基團；
R選自C1-C6烷基如甲基，C1-C6鹵代烷基如三氟甲基，和鹵素，更優選氟，氯和溴；
R1選自氫，C2-C6炔基如3-戊-1-炔-1-基，C2-C6氨基炔基如3-二甲基氨基丙-1-炔-1-基和C2-C6羥基炔基如3-羥基丙-1-炔-1-基，芳基如苯基，雜芳基如吡啶基，吡嗪基，噻吩基和噻唑基，C3-C6雜環烷基如3,6-二氫-2H-吡喃-4-基，1,2,3,6-四氫吡啶-4-基，吡咯烷-1-基-2-酮和4-甲基哌嗪-1-基-2-酮，基團-(CH2)nN22N23如4-嗎啉代甲基，2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基甲基，9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基}甲基，7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基}甲基和5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲基，其中芳基和雜芳基各自可以任選地被一個或兩個獨立地選自以下的基團取代：鹵素如氯和氟，氰基，(C1-C6)烷基如甲基，-C(O)NR12R13如4-嗎啉代羰基，(C3-C6)雜環烷基如1-甲基吡咯烷-1-基，-NR22R23如二甲基氨基，-(CH2)nR22R23如2-二甲基氨基甲基，N,N-雙(2-羥基乙基)氨基，4-嗎啉代甲基，2-(4-嗎啉代)乙基，1-吡咯烷甲基和(4-甲基哌嗪-i-基)甲基，(C3-C6)雜環烷氧基如1-甲基哌啶-4-基-氧基，(C3-C6)雜環烷基(C1-C6)烷氧基如2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基，2-(4-嗎啉代)乙氧基，2-二甲基氨基乙氧基和2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基；
R2選自氫，氰基，(C1-C6)鹵代烷基如三氟甲基，芳基如苯基，其任選地被鹵素如氟和甲基取代，雜芳基如吡啶基；
R3選自H和(C1-C6)烷基如甲基和乙基；
R4是H；
Cy是選自下組的雜芳基：9H-嘌呤-6-胺-9-基，3H-嘌呤-6-胺-3-基，9H-嘌呤-6-基，4-氨基-5-氰基嘧啶-6-基，4-氨基-5-甲酰基嘧啶-6-基，4-氨基-5-溴嘧啶-6-基，4-氨基-5-三氟甲基嘧啶-6-基，4-氨基-5-甲基嘧啶-6-基，4-氨基-5-(N-甲基氨基甲酰基)嘧啶-6-基，4-氨基-5-氨基甲酰基嘧啶-6-基，4-氨基-5-羧基嘧啶-6-基，2-氨基-3-吡嗪基，4-氨基-5-羥基甲基嘧啶-6-基，4-氨基-5-(4-嗎啉代甲基)嘧啶-6-基，4-氨基-5-(羥基亞氨基甲基)嘧啶-6-基，4-氨基-5-(3-羥基丙炔-1-基)嘧啶-6-基，4-氨基-3-(3-氟-5-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-乙酰基氨基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-羥基甲基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(5-羥基-3-三氟甲基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-甲磺酰基氨基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-吡啶基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(5-羥基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氟-4-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(4-氟-3-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氯-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氨基磺酰基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-磺酰基氨基-5-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氨基磺酰基-5-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氨基-5-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氰基-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氟-5-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，4-氨基-3-(3-羥基丙炔-1-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基和4-氨基-3-(2-氨基噻唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基；
m是1；
n是1；
p是1；
Z不存在或選自-NH-或-NHC(O)-；
并且所有其他變量如上所定義。
第二組優選的化合物是式(I)，其中：
R3是甲基；
R4是H；
Cy是1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基，其任選且獨立地被一個或多個基團取代，所述基團選自-NR19R20和芳基，其任選被一個或多個基團取代，所述基團選自OH和鹵素；
及其藥學上可接受的鹽。
更優選的一組化合物是式(I)，其中：
R1選自4-嗎啉代甲基，2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基}甲基，9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基}甲基，7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基}甲基和5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲基；
R3是甲基；
R4是H；
CY是1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基(I-4)，其在4位被-NH2取代并且在3位被3-氟-5-羥基苯基取代；
或其藥學上可接受的鹽。
根據具體實施方案，本發明提供了下表中所列的化合物及其藥學上可接受的鹽。
包括所有上文列出的化合物的式(I)化合物通常可以根據下面所示的方案概述的方法使用本領域技術人員可以容易地應用的一般已知的方法或稍微修改的方法來制備。
以下方案中描述和報道的制備方法不應視為限制可用于制備本發明化合物的合成方法的范圍。
方案1-4連同下文方案5-11一般性地涵蓋了本發明化合物的合成方法。所述方法是特別有利的，因為它們易于通過本領域技術人員已知的任何適當的變體進行適當的調節，以獲得所需的任何本發明化合物。這些變體包括在本發明的范圍內。當具體細節或步驟不同于一般方案時，其已在具體實施例和/或另外的方案中詳述。
方案1
該方案提供了用于制備式(4a)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH，R(p)是如上所定義的變量，且烷基是(C1-C6)烷基。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(3a)化合物可根據方案1通過式(1)化合物與丙烯酸烷基酯(2)的反應來制備。典型的反應條件包括使式(1)的吡啶-2-甲醛(其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH)與丙烯酸烷基酯(2)如丙烯酸乙基酯在堿如DABCO存在下，在溶劑如二噁烷和水的混合物中，在適當的溫度例如室溫下反應。式(1)的醛是可商購的或根據文獻中描述的眾所周知的方法來制備。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(4a)化合物可根據方案1通過式(3a)化合物與乙酸酐的反應來制備。典型的反應條件包括使式(3a)化合物(其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH)在乙酸酐中在適當的溫度例如130℃下在熱或微波加熱條件下加熱反應。
方案2
該方案提供了用于制備式(4c)化合物的合成路線，其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH，R(p)是如上所定義的變量，且烷基是(C1-C6)烷基。
其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH的式(4b)化合物可通過水解其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH的式(5)化合物來制備。典型的水解條件包括使式(5)化合物與金屬氫氧化物如KOH在水中的溶液在適當的溫度例如60℃下反應，然后加入HCl，在適當的溫度例如80℃下加熱。式5的化合物可以根據J.Mat.Chem.，1999，9，2133-2188中所報道的方法來制備。
其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH的式(4c)化合物可通過式(4b)化合物與合適的醇的反應來制備。典型的反應條件包括使式(4b)化合物與醇如MeOH在催化量的硫酸存在下，在適當的溫度如在80℃下加熱反應。
方案3
該方案提供了用于制備式(6)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH，且R(p)是如上所定義的變量。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(3b)化合物可根據方案3通過其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(1)化合物與丙烯腈的反應來制備。典型的反應條件包括使式(1)的吡啶-2-甲醛與丙烯腈在堿如DABCO存在下，在適當的溫度例如0℃下反應。式(1)的醛是可商購的或根據文獻中描述的眾所周知的方法來制備。其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(6)化合物可根據方案3通過式(3b)化合物與乙酸酐的反應來制備。典型的反應條件包括使式(3b)化合物在乙酸酐中在適當的溫度例如130℃下，在微波加熱條件下加熱反應。
方案4
該方案提供了用于制備式(10a，b，c，d)和(13a，b，c，d)化合物的合成路線，其中所有變量如上文所述，且Hal為鹵素原子。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(4a)化合物或其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH的式(4c)化合物可通過與適當的N-鹵代琥珀酰亞胺如N-氯代琥珀酰亞胺或N-碘代琥珀酰亞胺或N-溴代琥珀酰亞胺在極性溶劑如乙腈中，在適當的溫度如0℃至室溫下反應而轉化成式(7a)化合物。
式(4a)化合物可以例如通過與溴在極性非質子溶劑如DCM中，在適當的溫度例如-78℃下反應而轉化成式(7b)化合物。
式(8a)化合物可通過其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(4a)化合物或其中X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH的式(4c)化合物與合適的芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Heck交叉偶聯條件下反應來制備。典型的Heck反應條件包括使式(4a)化合物與芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Pd催化劑如Pd(OAc)2與三烷基膦配體如三環戊基膦四氟硼酸鹽或PdCl2(PPh3)2存在下，使用堿如Cs2CO3或乙酸鉀，在合適的溶劑如甲苯或NMP與水中，在適當的溫度如100℃-130℃下反應。
可供選擇地，式(8a)化合物可以通過使式(7a)化合物在交叉偶聯反應(如Suzuki交叉偶聯，或Stille交叉偶聯，或Ullmann交叉偶聯，或Sonogashira交叉偶聯)中反應來制備。典型的Suzuki交叉偶聯條件包括使式(7a)化合物與合適的硼酸或硼酸酯在Pd催化劑如[1,1'-雙(二叔丁基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)存在下，使用堿如磷酸二氫鉀和磷酸鉀，在水和有機溶劑如二噁烷的混合物中，在適當的溫度如65℃下反應。典型的Stille交叉偶聯條件包括使式(7a)化合物與合適的有機錫試劑在Pd催化劑如PdCl2(PPh3)2存在下，在極性溶劑如二噁烷中，在適當的溫度如65℃-90℃下反應。典型的Ullmann條件包括使式(7a)化合物與合適的酰胺在CuI與配體如N,N'-二甲基乙二胺和堿如碳酸銫或K3PO4存在下,在極性溶劑如DMF中，在適當的溫度例如65℃下反應。典型的Sonogashira交叉偶聯條件包括使式(7a)化合物與適當的末端炔在CuI和Pd催化劑如PdCl2(PPh3)2存在下，在極性溶劑例如DMF與烷基胺如二乙胺的混合物中，在適當的溫度如室溫下反應。可以進行進一步的保護步驟以根據Greene's Protective Groups in Organic Synthesis中報道的一般方案在OH或NH或NH2部分上引入保護基。
式(8b)化合物可通過使式(7b)化合物在交叉偶聯反應如Suzuki交叉偶聯或Stille交叉偶聯中反應來制備。典型的Suzuki交叉偶聯條件包括使式(7b)化合物與合適的硼酸或硼酸酯或環硼氧烷在Pd催化劑如[1,1'-雙(二叔丁基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)或Pd(PPh3)4存在下，使用堿如磷酸二氫鉀和磷酸鉀或碳酸鉀，在水和有機溶劑如二噁烷的混合物中，在適當的溫度如65℃-110℃下反應。典型的Stille交叉偶聯條件包括使式(7b)化合物與合適的有機錫試劑在Pd催化劑如Pd(PPh3)4存在下，在適當的溶劑或溶劑如甲苯和甲醇的混合物中，在適當的溫度如80℃-110℃下反應。
式(8c)化合物可通過可商購的其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(4d)化合物與合適的芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Heck交叉偶聯條件下反應來制備。典型的Heck反應條件包括使式(4d)化合物與芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Pd催化劑例如Pd(OAc)2與三烷基膦配體例如三環戊基膦四氟硼酸鹽存在下，使用堿例如Cs2CO3，在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度如130℃下反應。
式(9a)化合物可通過使式(6)化合物與合適的芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Heck交叉偶聯條件下反應來制備。典型的Heck反應條件包括使式(6)化合物與芳基鹵化物或雜芳基鹵化物在Pd(II)催化劑如Pd(OAc)2與三烷基膦配體例如三環戊基膦四氟硼酸鹽存在下，使用堿如Cs2CO3，在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度如130℃下反應。
式(10a，b，c，d)化合物可分別通過還原式(8a，b，c)和(4a)化合物來制備。典型的還原條件包括使式(8a，b，c)或(4a)化合物與DIBAL在合適的極性非質子溶劑如DCM中，在適當的溫度如-78℃下反應，或與LiBH4在合適的溶劑如THF與MeOH中，在適當的溫度如50℃下反應，或與NaBH4在質子溶劑如MeOH中，在適當的溫度如0℃下反應。
可供選擇地，式(10d)化合物可通過式(11a)化合物與合適的格氏試劑的反應來制備。典型的反應條件包括使式(11a)化合物與合適的烷基鎂鹵化物如甲基溴化鎂在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度如0℃下反應。式(11a)化合物可通過氧化式(10a)化合物來制備。典型的氧化條件包括使式(10a)化合物與氧化體系例如MnO2在DCM中，在適當的溫度如50℃下反應。
式(12a，b，c)化合物可分別通過式(10a，b，d)化合物與二苯基磷酰基疊氮化物的反應來制備。典型的反應條件包括使式(10a，b，d)化合物與二苯基磷酰基疊氮化物在堿如DBU存在下，在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度如0℃-室溫下反應。
式(13a，b，c)化合物可分別通過在Staudinger還原條件下還原式(12a，b，c)化合物來制備。典型的反應條件包括使式(12a，b，c)化合物與三芳基膦如三苯基膦在合適的極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度例如室溫下反應，并隨后加入水并在適當的溫度例如室溫至50℃下攪拌。
可供選擇地，式(13a)化合物可通過使式(9a)化合物與適當的格氏試劑反應并還原所得加合物來制備。典型地式(9a)化合物可以與烷基鹵化鎂例如MeMgBr或EtMgBr在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度如100℃下在微波加熱下反應，然后所得的加合物可以用合適的氫化物例如NaBH4在合適的溶劑如MeOH中，在適當的溫度例如0℃至室溫下還原。
式(13d)化合物可通過還原式(6)化合物來制備。典型的反應條件包括用氫化物試劑如LiAlH4在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度下還原式(6)化合物。
方案4a
該方案提供了用于制備式(8c1)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且烷基＝甲基，其中所有變量如上所述。
在一些情況下，式(8c1)化合物可通過使其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且烷基＝甲基的式(8a)化合物與三甲基鋁和N,N'-二甲基乙二胺在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度如加熱至回流下反應來制備。
根據方案4，通式8c如8c1的化合物可通過還原步驟轉化成醇10d。
方案4a已經用于制備實施例125的化合物。
方案4b
該方案提供了用于制備式(8b1)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R2＝CF3，且所有變量如上所述。
在一些情況下，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Hal＝Br的式(7b)化合物例如通過與KI和CuI在極性非質子溶劑如DMF中，在適當的溫度例如130℃下反應(步驟1)，可以轉化成其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Hal＝I的式(7b1)化合物。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R2＝CF3的式(8b1)化合物可通過式(7b1)化合物與三甲基(三氟甲基)硅烷在KF和CuI存在下，在合適的極性非質子溶劑如DMF和NMP的混合物中，在適當的溫度如在室溫下的三氟甲基化反應來制備(步驟2)。根據方案5，化合物8b1(通式8b的具體實例)可通過Heck步驟至8d，還原步驟至醇10e，氧化步驟至醛11b，以及最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10f，而轉化成醇10f。
方案4b已經用于制備實施例124的化合物。
方案4c
該方案提供了用于制備其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝-NR12R13的式(10a1)化合物的合成路線，其中R12和R13可以連接形成如上所解釋的環，所有其他變量如上所述。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝NR12R13的式(17)化合物可通過水解式(8a)化合物來制備。典型的水解條件包括使式(8a)化合物與金屬氫氧化物如LiOH在水和合適的溶劑如THF的混合物中，在適當的溫度例如60℃下反應(步驟2)。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝NR12R13的式(10a1)化合物可通過還原式(17)化合物來制備。典型的還原條件包括使式(17)化合物與合適的還原體系例如NaBH4和BF3·Et2O在合適的極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度如10℃至室溫的溫度下反應(步驟3)。
根據方案4，通式10a如10a1化合物可通過氧化成醛11a，最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。
方案4c已經用于制備實施例132的化合物。
方案4d
該方案提供了用于制備式(8a3)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝雜芳基，該雜芳基是被-(CH2)2NR22R23N-取代的1,2-二氫吡啶-4-基-2-酮，且所有變量如上所述。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a1)化合物可通過Heck交叉偶聯由式(4a)化合物來制備。典型的條件包括使式(4a)化合物與合適的芳基或雜芳基鹵化物如4-氯-2-甲氧基吡啶在Pd催化劑如Pd(OAc)2與三烷基膦配體例如三環戊基膦四氟硼酸鹽存在下，使用堿如Cs2CO3，在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度例如130℃下反應(步驟1)。其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a2)化合物可以從式(8a1)化合物使用脫甲基反應來制備。脫甲基化步驟的典型反應條件包括使式(8a1)化合物與Me3SiI在合適的極性非質子溶劑如乙腈中，在適當的溫度如60℃下反應(步驟2)。其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a3)化合物可以由式(8a2)化合物用烷基化反應來制備。用于烷基化步驟的典型反應條件包括使式(8a3)化合物與合適的氨基烷基鹵化物如2-氯-N,N-二甲基乙胺鹽酸鹽在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如丙酮中，在適當的溫度如50℃下反應，得到化合物8a3(步驟3)。根據方案4，通式8a如8a3化合物可通過還原步驟至醇10a，氧化步驟至醛11a，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。
方案4d已經用于制備實施例121，122和133的化合物。
方案4e
該方案提供了用于制備式(8a6)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝雜芳基，該雜芳基是被-(CH2)2NR22R23N-取代的2,3-二氫噠嗪-6-基-3-酮，所有的變量如上所述。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a4)化合物可以由式(4a)化合物在Friedel Crafts反應條件下來制備。典型的反應條件包括使式(4a)化合物與3,6-二氯噠嗪在AlCl3存在下，在合適的極性非質子溶劑如二氯乙烷中，在適當的溫度例如80℃下反應(步驟1)。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a5)化合物可通過在適當的溫度例如加熱至回流下，用乙酸和乙酸鈉水解式(8a4)化合物來制備(步驟2)。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a6)化合物可通過如下方式來制備(步驟3，方法A)：在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如DMF中，在適當的溫度例如60℃下，用1-溴-2-氯乙烷使式(8a5)化合物烷基化，然后與合適的仲胺例如吡咯烷或1-甲基哌嗪在堿例如K2CO3和KI存在下，在合適的極性非質子溶劑如乙腈中，在適當的溫度例如85℃下反應。可供選擇地，式(8a6)化合物可通過如下方式來制備(步驟3，方法B)：在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如DMF中，在適當的溫度例如室溫下，用合適的氨基烷基鹵化物如4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽使式(8a5)化合物烷基化。根據方案4，通式8a如8a6化合物可通過還原步驟至醇10a，氧化步驟至醛11a，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。
方案4e已經用于制備實施例134，135和136的化合物。
方案4f
該方案提供了用于制備式(8a7)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且R1＝雜芳基，該雜芳基是被基團-O烷基取代的噠嗪，所述-O烷基選自進一步任選取代的(C1-C6)烷氧基，(2-(二甲基氨基)乙氧基，(C3-C6)雜環烷基氧基或(C3-C6)雜環烷基(C1-C6)烷氧基。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a7)化合物可通過式(8a4)化合物與合適的醇在堿如叔丁醇鉀存在下，在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度例如室溫下進行親核芳族取代來制備(方法A)。
可供選擇地，式(8a7)化合物可通過對應于式(8a4)化合物的羧酸與合適的醇進行親核芳族取代，然后與醇如MeOH在硫酸存在下，在適當的溫度例如80℃下進行Fischer酯化來制備(方法B)。根據方案4，通式8a如8a7化合物可通過還原步驟至醇10a，氧化步驟至醛11a，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。
方案4f已經用于制備實施例137，138，139和140的化合物。
方案4g
該方案提供了用于制備其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝H的式(8a9)化合物，或其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝R2的式(8d1)化合物(方案5中式8d化合物的具體實例)，所有變量如上所述。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝H的式(8a8)化合物可通過式(4a)化合物的Vilsmeier甲酰化來制備。類似地，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝R2的式(18)化合物可通過式(8b)化合物的Vilsmeier甲酰化來制備。典型的Vilsmeier反應條件包括使式(4a)或(8b)化合物與DMF和POCl3在合適的極性非質子溶劑如DCM中，在適當的溫度如0℃至室溫下反應(步驟1)。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝H的式(8a9)化合物可通過式(8a8)化合物的還原氨基化來制備。類似地，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH且Y＝R2的式(8d1)化合物可通過式(18)化合物的還原氨基化來制備。典型的還原氨基化條件包括式(8a8)或(18)與合適的胺和乙酸在還原劑如三乙酰氧基硼氫化鈉存在下，在極性溶劑如DCM中，在室溫下反應(步驟2)。
根據方案4，通式8a如8a9化合物可通過還原步驟至醇10a，氧化步驟至醛11a，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。根據方案5，通式8d如8d1的化合物可通過還原步驟至醇10e，氧化步驟至醛11b，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10f，而轉化成醇10f。
方案4g已經用于制備實施例141，142，143，144，145和146的化合物。
方案4h
該方案提供了用于制備式(8a-11)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝H，且R1＝雜芳基，如用-(CH2)2NR22R23N1-取代的1H-吡唑-3-基，所有變量如上文所述。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a9)化合物可通過將式(4a)化合物用乙酸鈉在乙酸中，在適當的溫度如140℃下酰化來制備(步驟1)。
其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH的式(8a10)化合物可通過式(8a9)化合物與Bredereck試劑在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度如110℃下反應，然后與肼一水合物在合適的溶劑如乙醇中，在適當的溫度如80℃下反應來制備(步驟2)。
式(8a11)化合物可通過如下方式來制備(步驟3，方法A)：將式(8a10)化合物用1-溴-2-氯乙烷在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如DMF中，在適當的溫度例如60℃下進行烷基化，然后與合適的仲胺在堿例如K2CO3和KI存在下，在合適的極性非質子溶劑如乙腈中，在適當的溫度例如85℃下反應。在一些情況下(實施例149)，還需要將OH基保護為TBS的保護步驟：對于保護條件，參見Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Peter G.M.Wuts，Theodora W.Greene；Editor Wiley&Sons，2006年12月第4版。
可供選擇地，式(8a11)化合物可通過使式(8a10)化合物用合適的氨基烷基鹵化物例如4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽，在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度例如60℃下進行烷基化來制備(步驟3，方法B)。根據方案4，通式8a如8a11化合物可通過還原步驟至醇10a，氧化步驟至醛11a，和最后通過與合適的格氏試劑反應轉化成醇10d，而轉化成醇10d。
方案4h已經用于制備實施例147，148，149和150的化合物。
方案5
該方案提供了用于制備式(10f)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH，且R1，R2和R3以及R(p)和烷基是如上所定義的變量。式(10f)化合物可以如下面的方案6和10中所提供的轉化成本發明所需的化合物。
其中R1是雜芳基的式(8d)化合物可通過使式(8b)化合物與合適的雜芳基鹵化物如2-氯吡啶在Heck交叉偶聯條件下反應來制備。典型的Heck反應條件包括使式(8b)化合物與(雜)芳基鹵化物在Pd催化劑如Pd(OAc)2與三烷基膦配體例如三環戊基膦四氟硼酸鹽存在下，使用堿如Cs2CO3，在合適的溶劑如甲苯中，在適當的溫度例如130℃下反應。
式(10e)化合物可通過還原式(8d)化合物來制備。典型的反應條件包括使式(8d)化合物與還原劑如DIBAL在極性非質子溶劑如DCM中，在適當的溫度例如-78℃下反應。
式(11b)化合物可通過氧化式(10e)化合物來制備。典型的氧化條件包括使式(10e)化合物在Swern氧化條件下，如與草酰氯和DMSO在合適的溶劑例如DCM中，在適當的溫度例如-78℃下反應。
式(10f)化合物可通過式(11b)化合物與合適的格氏試劑反應來制備。典型的反應條件包括使式(11b)化合物與烷基鎂鹵化物如甲基溴化鎂在極性非質子溶劑如THF中，在適當的溫度如0℃下反應。
方案6
該方案提供了由式(10)化合物制備式(14a)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH或X1＝N，X2＝X3＝X4＝CH，且R1，R2和R3和R(p)是如上文所述的變量。
通式(14a)化合物可根據方案6通過使式(10)化合物與基于氮的親核試劑CyH(15)如腺嘌呤在Mitsunobu反應條件下反應來制備。典型的反應條件包括使式(10)化合物與(15)如腺嘌呤在極性非質子溶劑如THF中，在偶氮二甲酸二烷基酯如DIAD和三芳基膦如三苯基膦存在下，在適當的溫度例如室溫至50℃下反應。該方案提供了用于制備實施例1-12的化合物的合成路線。
在一些特定情況下，其中CyH是3-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(15a)時，式(14a)化合物可以在Mitsunobu反應條件下制備，隨后對TBS部分進行脫保護。典型的反應條件包括使式(10)化合物與3-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(15a)在非極性非質子溶劑如THF中，在偶氮二羧酸二烷基酯如DIAD和三芳基膦如三苯基膦存在下，在適當的溫度例如室溫下反應。除去TBS基團的典型脫保護條件包括在合適的溶劑如EtOH中，在適當的溫度如室溫下用強酸如HCl處理。對于脫保護條件，參見Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Peter G.M.Wuts，Theodora W.Greene；Editor Wiley&Sons，2006年12月第4版中所報道的一般方法。
方案6a
該方案提供了用于制備式(15a)化合物的合成路線。
式(15a)化合物可通過兩步Suzuki偶聯\保護順序從可商購的3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來制備。典型的Suzuki交叉偶聯條件包括使可商購的3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺與合適的硼酸或硼酸酯如(3-氟-5-羥基苯基)硼酸在Pd催化劑如PdCl2(dppf)存在下，使用堿如磷酸鉀水溶液，在極性溶劑中或在極性溶劑如DMF的混合物中，在適當的溫度如在120℃下反應。對于保護條件，參見Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Peter G.M.Wuts，Theodora W.Greene；Editor Wiley&Sons，2006年12月第4版中所報道的一般方法。
方案6a已經用于制備實施例124的化合物。
方案7
該方案提供了用于由式(13)化合物制備式(14b)化合物的合成路線，其中所有變量如上所述。
通式(14b)化合物可根據方案7通過使式(13)化合物與合適的鹵化物Cy-Hal(16)反應來制備，其中“Cy”具有上述定義的含義，例如6-溴嘌呤，4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈，4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲醛，6-氯-5-甲基嘧啶-4-胺。典型的反應條件包括使式(13)化合物與6-溴嘌呤在極性溶劑如t-BuOH中，在堿如DIPEA存在下，在適當的溫度例如80℃-100℃下反應。
該方案提供了用于制備實施例13-21的化合物(其中Cy-Hal是嘌呤衍生物)的合成路線；以及實施例22-44和47-53和59(其中Cy-Hal是嘧啶衍生物)的合成路線。
方案8
該方案提供了由式(13)化合物制備式(14c)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH，且R1，R2和R3以及R(p)是如上所述的變量。
式(14c)化合物可根據方案8通過式(13)化合物與3-氨基-2-吡嗪甲酸的縮合來制備。典型的反應條件包括使式(13)化合物與3-氨基-2-吡嗪甲酸在HOBt和二烷基碳二亞胺如ECD HCl存在下，在極性非質子溶劑如DMF中，在適當的溫度如室溫下反應。
該方案提供了用于制備實施例54和55的化合物的合成路線。
方案9
該方案提供了從式14d的化合物制備式(14e，f，g)化合物的合成路線，其中所有變量如上所述(例如，從實施例47的化合物開始)。特別地，烷基也可以是H或是(C1-C6)烷基，并且烷基1和烷基2可以與它們所連接的氮原子一起形成5-6元雜環基，如1-吡咯烷基，1-哌啶基，1-哌嗪基，4-嗎啉基；
式(14e)化合物(例如實施例56化合物)可根據方案9通過還原式(14d)化合物來制備。典型的反應條件包括使(14d)與還原劑如NaBH4在極性質子溶劑如MeOH中在適當的溫度如0℃下反應。式(14d)化合物可以如方案7中所報道的從13和CyHal＝4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲醛來制備。
式(14g)化合物可根據方案9使式(14d)化合物在還原氨基化條件下反應來制備。典型的反應條件包括使式(14d)化合物與仲胺例如嗎啉(例如在實例57中)在還原劑例如三乙酰氧基硼氫化鈉存在下，在極性溶劑例如DCM中，在pH～5-6下，在適當的溫度如室溫下反應。
式(14f)化合物(例如實施例58化合物)可根據方案9通過式(14d)化合物與羥胺鹽反應來制備。典型的反應條件包括使式(14d)化合物與羥胺鹽如羥胺鹽酸鹽在吡啶存在下，在極性溶劑如乙醇中，在適當的溫度如室溫下反應。
方案10
該方案提供了用于從式(10)化合物和3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺來制備式14h和14i的化合物的合成路線，其中所有變量如上所述。
通式(14h)化合物可根據方案10通過使式(10)化合物與3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺在Mitsunobu反應條件下反應來制備。典型的反應條件包括使式(10)化合物與3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺在非極性非質子溶劑如THF中，在偶氮二羧酸二烷基酯如DIAD和三芳基膦如三苯基膦存在下，在適當的溫度例如室溫下反應。
通式(14i)化合物可根據方案10通過式(14h)化合物在交叉偶聯反應如Suzuki交叉偶聯或Sonogashira交叉偶聯或Stille交叉偶聯反應中與合適的試劑反應來制備。典型的Suzuki交叉偶聯條件包括使式(14h)化合物與合適的硼酸或硼酸酯在Pd催化劑如Pd(PPh3)4存在下，使用堿如碳酸氫鈉水溶液，在極性溶劑中或在極性溶劑如DME和EtOH的混合物中，在適當的溫度例如80℃下反應。典型的Sonogashira交叉偶聯條件包括使式(14i)化合物與適當的末端炔在CuI存在下，使用催化劑如PdCl2(PPh3)2，在極性溶劑如DMF和烷基胺如二乙胺的混合物中，在適當的溫度如室溫下反應。典型的Stille交叉偶聯條件包括使式(14i)化合物與合適的有機錫試劑在LiCl和催化劑例如Pd(PPh3)4存在下，在極性非質子溶劑如二噁烷中，在適當的溫度如100℃下反應。
該方案提供了用于制備實施例60-102的化合物的合成路線。
可能需要額外的脫保護步驟以從OH或NH或NH2部分除去保護基團。除去Boc保護基團的典型脫保護條件包括用強酸如TFA在極性溶劑如DCM中，在適當的溫度如0°至室溫下進行處理。除去TIPS保護基團的典型脫保護條件包括用氟化物鹽如TBAF在非極性溶劑如THF中，在適當的溫度如室溫下進行處理。除去TBS基團的典型脫保護條件包括用強酸如HCl在合適的溶劑如EtOH中在適當的溫度如室溫下進行處理。對于脫保護條件，參見Greene's Protective Groups in Organic Synthesis，Peter G.M.Wuts，Theodora W.Greene；Editor Wiley&Sons，2006年12月第4版。該脫保護步驟用于制備實施例45，46和103和117，149。
在一些其他特定情況下，需要額外的步驟將Boc保護基轉化成甲基。典型的條件包括用還原劑如LiAlH4在極性溶劑中或在極性溶劑如THF的混合物中，在適當的溫度如65℃下進行處理。
方案11
該方案提供了用于制備式(14i1)化合物的合成路線，其中X1＝X2＝X3＝X4＝CH，R1＝雜芳基，如用-(CH2)2NR22R23N-取代的2,3-二氫吡啶基-2-酮。
式(14h2)化合物可以由其中X1＝X2＝X3＝X4＝C的式(14h1)化合物采用脫甲基化/烷基化順序來制備。脫甲基化步驟的典型反應條件包括使式(14h1)化合物與Me3SiI在合適的極性非質子溶劑如乙腈中，在適當的溫度如50℃-60℃下反應。用于烷基化步驟的典型反應條件包括使所得物質與合適的氨基烷基鹵化物如4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽在堿如K2CO3存在下，在合適的極性非質子溶劑如丙酮中，在適當的溫度如60℃下反應，以得到化合物(14h2)。
通式(14i1)化合物可根據方案11通過式(14h)化合物在交叉偶聯反應(例如Suzuki交叉偶聯)中的反應來制備。典型的Suzuki交叉偶聯條件包括使式(14h2)化合物與合適的硼酸或硼酸酯在Pd催化劑如Pd(PPh3)4存在下，使用堿如碳酸氫鈉水溶液，在極性溶劑中或在極性溶劑如DME和EtOH的混合物中，在適當的溫度如80℃下反應。
本發明的化合物是激酶活性、特別是PI3-激酶活性的抑制劑。一般而言，為PI3K抑制劑的化合物可以用于治療與PI3K酶機制相關的許多障礙。
在一個實施方案中，可以用本發明化合物治療的障礙包括：呼吸性疾病，其選自特發性慢性咳嗽、咳嗽-變異性哮喘、與胸部腫瘤或肺癌相關的咳嗽、病毒性或病毒后咳嗽、上氣道咳嗽綜合征(UACS)；或滴鼻后咳嗽；或與胃食管反流病(酸和非酸反流)相關的咳嗽、哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、間質性肺病(例如特發性肺纖維化(IPF))、充血性心臟病、結節病、感染(例如百日咳)；病毒感染(包括病毒性呼吸道感染以及呼吸性疾病的病毒性加劇；非病毒性呼吸道感染，包括曲霉菌病和利什曼病；過敏性疾病，包括過敏性鼻炎和特應性皮炎；自身免疫性疾病，包括類風濕性關節炎和多發性硬化；炎癥性疾病，包括炎性腸病；心血管疾病，包括血栓形成和動脈粥樣硬化；惡性血液病；神經變性疾病；胰腺炎；多器官衰竭；腎病；血小板聚集；癌癥；精子能動性；移植排斥；移植物排斥；肺損傷；和疼痛，包括與類風濕性關節炎或骨關節炎相關的疼痛、背痛、全身炎癥性疼痛、皰疹后神經痛、糖尿病神經病變、炎癥性神經性疼痛(創傷)、三叉神經痛和中樞性疼痛。
在另一個實施方案中，可以用本發明化合物治療的障礙選自特發性慢性咳嗽、咳嗽-變異性哮喘、與胸部腫瘤或肺癌相關的咳嗽、病毒性或病毒后咳嗽、上氣道咳嗽綜合征(UACS)、滴鼻后咳嗽、與胃食管反流病(酸和非酸反流)相關的咳嗽、哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)和間質性肺病(例如特發性肺纖維化(IPF)。
在另一個實施方案中，所述障礙選自哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、特發性肺纖維化(IPF)、咳嗽和慢性咳嗽。
本發明的治療方法包括對有此需要的患者施用安全和有效量的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽。本文所用的“安全和有效量”在涉及式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或其他藥物活性劑時是指足以治療患者病癥、但足以低至避免嚴重副作用、而由本領域技術人員通過常規方式確定的化合物用量。式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽可以一次性或根據給藥方案施用，其中在不同的時間間隔施用多次劑量，持續指定的時間期限。典型的每日劑量可以根據所選擇的特定施用途徑的不同而改變。
本發明還提供與一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑混合的式(I)化合物的藥物組合物，所述藥學上可接受的載體或賦形劑例如為Remington's Pharmaceutical Sciences Handbook，XVII Ed.，Mack Pub.，N.Y.，U.S.A中所述的那些。
可以根據患者要求施用本發明的化合物及其藥物組合物，例如通過口服、鼻內、胃腸外(皮下、靜脈內、肌內、胸骨內和通過輸注)、吸入、直腸、陰道、局部、透皮和通過眼部施用。
可以將各種固體口服劑型用于施用本發明的化合物，包括例如片劑、囊形片、膠囊、囊片、顆粒、錠劑和散裝粉末等固體形式。可以將本發明的化合物單獨施用，或與本領域已知的各種藥學上可接受的載體、稀釋劑(例如蔗糖、甘露醇、乳糖、淀粉)和賦形劑組合施用，所述賦形劑包括、但不限于助懸劑、增溶劑、緩沖劑、粘合劑、崩解劑、防腐劑、著色劑、調味劑、潤滑劑等。定時釋放膠囊、片劑和凝膠劑對于本發明化合物的施用也是有利的。
還可以將各種液體口服劑型用于施用本發明的化合物，包括水性和非水性溶液、乳劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。這些劑型還可以包含本領域已知的適宜的惰性稀釋劑(如水)以及本領域已知的適宜的賦形劑(如防腐劑、潤濕劑、甜味劑、調味劑)以及用于乳化和/或懸浮本發明的化合物的試劑。例如，可以以等滲無菌溶液的形式靜脈內注射本發明的化合物。其他制劑也是可能的。
通過將化合物與適合的賦形劑例如可可脂、水楊酸鹽和聚乙二醇混合，可以制備用于本發明化合物的直腸施用的栓劑。
用于陰道施用的制劑可以為乳膏劑、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧劑形式，其除了活性成分之外還包含如本領域已知這樣的適合的載體。
對于局部施用，藥物組合物可以為適合施用至皮膚、眼、耳或鼻的乳膏劑、軟膏劑、搽劑、洗劑、乳劑、混懸劑、凝膠、溶液、糊劑、粉劑、噴霧劑和滴劑的形式。局部施用還可以包括通過例如透皮貼劑方式進行的透皮施用。
對于治療呼吸道疾病，根據本發明的化合物優選地通過吸入來施用。
可吸入的制劑包括可吸入的散劑、包含推進劑的定量氣霧劑或不含推進劑的可吸入制劑。
對于作為干粉施用，可以使用根據現有技術已知的單或多劑量吸入器。在該情況下，該粉末可以填充在明膠、塑料或其他膠囊、藥筒或泡罩包裝中或在貯庫中。
可以將通常無毒且對本發明化合物是化學惰性的稀釋劑或載體(例如乳糖)或適于改善可吸收分數(respirable fraction)的任意其他添加劑加入到粉末化的本發明的化合物中。
包含推進氣體(如氫氟烷烴)的吸入氣霧劑可以包含溶液或分散形式的本發明的化合物。推進劑驅動的制劑還可以包含其他成分，例如共溶劑、穩定劑或任選的其他賦形劑。
包含本發明化合物的不含推進劑的可吸入制劑可以是在水性、醇性或水醇性介質中的溶液或混懸劑形式，且它們可通過從現有技術已知的噴射或超聲霧化器或通過軟薄霧霧化器例如來遞送。
本發明的化合物可以作為唯一活性劑來施用，或與其他藥物活性成分的組合產品(combination)來施用，所述其他藥物活性成分包括目前用于治療呼吸障礙的那些，例如，β2-激動劑、抗毒蕈堿藥、皮質類固醇、絲裂原激活蛋白激酶類(P38MAP激酶)抑制劑、人嗜中性細胞彈性蛋白酶(HNE)抑制劑、磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑、白三烯調節劑、非類固醇抗炎藥(NSAIDs)和粘液調節劑。
本發明的化合物的劑量取決于多種因素，包括要治療的具體疾病、癥狀的嚴重性、施用途徑、劑量間隔頻率、使用的具體化合物、化合物的效能、毒理學特性和藥代動力學特性。
有利地，可以在例如0.001至1000mg/天、優選0.1至500mg/天的劑量，施用式(I)化合物。
當通過吸入途徑施用它們時，式(I)化合物的劑量有利地被包含在0.001至500mg/天之間，優選0.1至200mg/天之間。
下列實施例示例本發明，但不限制其范圍。
中間體的制備和實施例
化合物的化學名稱用CHEMAXON 6.0.4工具生成。
在后處理中使用的普通無機鹽的溶液是水溶液。
縮寫：
一般實驗細節
NMR表征:
使用氘代溶劑(DMSO-d6，CDCl3)在25℃下在Agilent VNMRS-500，Agilent VNMRS-400和Bruker Avance 400上收集核磁共振(1H NMR)光譜。
化學位移以四甲基硅烷的低場的百萬分之幾份(ppm)表示(δ單位)。多重性表示如下：(s)單峰，(d)雙峰，(dd)雙雙峰，(ddd)三重雙峰，(t)三重峰，(dt)雙三重峰，(q)四重峰，(m)多重峰，(br s)寬信號。耦合常數J以赫茲(Hz)為單位表示。
LC/UV/MS分析方法
LCMS可以在以下條件下記錄：二極管陣列檢測器DAD色譜圖，質量色譜圖和質譜可以在與Micromass ZQTM或Waters SQD單四極桿質譜儀耦合的UPLC/PDA/MS AcquityTM系統上進行，其以正和/或負電子噴霧ES電離模式和/或用于以正和/或負ES電離模式操作的與ZQTM單四極桿耦合的分析模式中的Fractionlynx系統操作。
所使用的質量控制方法是四個，兩個在低pH條件下操作，且另外的在高pH條件下操作：
方法A，低pH條件：柱：Acquity CSH C18,1.7μm，2.1×50mm，柱溫度為40℃；流動相溶劑A為milliQ水+0.1％HCOOH，流動相溶劑B MeCN+0.1％HCOOH。流速為1ml/min。梯度表為t＝0分鐘97％A-3％B，t＝1.5分鐘0.1％A-99.9％B，t＝1.9分鐘0.1％A-99.9％B，t＝2分鐘97％A-3％B。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-1000amu。
方法B，低pH條件：柱：Acquity UPLC BEH C18，1.7μm，50mm×2.1mm，柱溫度為40℃；流動相溶劑A為milliQ水+0.1％HCOOH，流動相溶劑B MeCN+0.1％HCOOH。流速為1ml/min。梯度表為t＝0分鐘97％A-3％B，t＝1.5分鐘0.1％A-99.9％B，t＝1.9分鐘0.1％A-99.9％B，t＝2分鐘97％A-3％B。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-1000amu。
方法C，高pH條件：柱：Acquity BEH C18,1.7μm，2.1×50mm，柱溫度為40℃；流動相溶劑A是用氨調節至pH＝10的10mM NH4HCO3水溶液，流動相溶劑B MeCN。流速為1ml/min。梯度表為t＝0分鐘97％A-3％B，t＝1.5分鐘0.1％A-99.9％B，t＝1.9分鐘0.1％A-99.9％B，t＝2分鐘97％A-3％B。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-1000amu。
方法D，高pH條件：柱：XBridge C18，5μm，50mm×4.6mm，柱溫度為40℃；流動相溶劑A是用氨調節至pH＝10的10mM NH4HCO3水溶液，流動相溶劑B MeCN。流速為2ml/min。梯度表為t＝0分鐘97％A-3％B，t＝6.5分鐘0.1％A-99.9％B，t＝8.5分鐘0.1％A-99.9％B和t＝8.6分鐘97％A-3％B。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-1000amu。
方法J，高pH條件：柱：Acquity BEH C18，1.7μm，2.1×50mm，柱溫度為40℃；流動相溶劑A是pH 10的0.1％v/v氨水溶液，流動相溶劑B MeCN。流速為1ml/min。梯度表為t＝0分鐘97％A-3％B，t＝1.5分鐘0.1％A-99.9％B，t＝1.9分鐘0.1％A-99.9％B，t＝2分鐘97％A-3％B。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-1000amu。
使用在低或高pH色譜條件下在以下條件下操作的Waters FractionlynxTM系統進行半制備質量定向自動純化(MDAP)。用于收集目標物質的觸發器是在TIC MS信號中存在目標m/z比值。所有的純化都用保持在室溫T下的柱子進行。
所用的半制備條件組是三種：
方法E，低pH條件：固定相：XSelect CSH Prep.C18，5μm，OBD 30×100mm，在室溫下；流動相溶劑A為milliQ水+0.1％HCOOH，流動相溶劑B MeCN；流速為43ml/min；梯度時間表是根據目標物質的Rt行為定制的。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-900amu。
方法F，高pH條件：固定相：Gemini 5um C18 110A AXIA(100×30mm)；流動相溶劑A為用氨調節至pH＝10的10mM NH4HCO3水溶液，流速為43ml/min；流動相溶劑B MeCN；梯度時間表是根據目標物質的Rt行為定制的。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-900amu。
方法G，高pH條件：固定相：Gemini 5um C18 110A AXIA(100×30mm)；流動相溶劑A是用氨調節至pH＝10的10mM NH4HCO3水溶液，流速為40ml/min；流動相溶劑B MeCN；梯度時間表是根據目標物質的Rt行為定制的。UV檢測范圍為210-350nm，ES+/ES-范圍為100-900amu。
使用半制備型Waters 600系統或半制備型HPLC Agilent 1100進行手性分離用于半制備型分離。條件在實施例中報道。
通過在配備有6位切換閥的HPLC Agilent 1100上的手性HPLC分析來測定對映異構體過量。其配備了DA和CD檢測器。使用以下方法：
方法H：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)80/20v/v；UV檢測：220nM；流量：0.8mL/min；循環：10uL。
方法I：柱：Chiralpak IC(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(2-丙醇+0.1％異丙基胺)60/40％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：20uL。
方法K：柱：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)85/15％v/v；UV檢測：220nM；流速：0.8mL/min；循環：15uL。
方法L：柱：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)70/30％v/v；UV檢測：220nM；CD：240nM；流速：0.8mL/min；循環：3uL。
方法M：柱：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)80/20％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：20uL。
方法N：柱：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇/甲醇1/1+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：20uL。
方法O：柱：Chiralpak IC(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：15uL。
方法P：柱：Chiralpak AD-H(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：20uL。
方法Q：柱：Chiralpak IC(25×0.46cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)70/30％v/v；UV檢測：220nM；流速：1.0mL/min；循環：15uL。
在微波照射下進行的實驗使用Biotage Initiator 2.0系統進行。
使用Biotage Isolera或Biotage SP1快速色譜系統進行快速色譜純化，兩種儀器均使用Biotage KP-SIL柱和Biotage KP-NH柱工作，或者使用Isolute Flash硅膠預填充柱或Varian Bond Elut預填充柱手動進行色譜純化。
反相快速色譜法在預填充的Biotage C18 SNAP柱或Varian Bond Elut C18柱上進行。
SPE-SCX柱是Varian提供的離子交換固相萃取柱。
以下實施例中描述的許多化合物由立體化學純例如95％ee的原料制備。
鹽水是指飽和NaCl水溶液。除非另有規定。
如果未描述原料的制備，則它們是可商購的、文獻中已知的或易于由本領域技術人員使用標準方法得到。
如果指示，基于如下推定指定實施例中的化合物的立體化學：在任意隨后的反應條件的自始至終維持原料的拆分的立體中心上的絕對構型。
在如下方法中，在每種原料后，有時提供涉及的化合物編號。提供它僅是為了輔助化學領域普通技術人員。原料可能不一定由涉及的批量制備。
當涉及使用“類似”或“類似的”方法時，正如本領域技術人員可以理解的，這類方法可能牽涉少量改變，例如反應溫度、試劑/溶劑量、反應時間、后處理條件或色譜純化條件。
中間體的制備
中間體A1：2-[羥基(吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯
向吡啶-2-甲醛(從Sigma Aldrich可商購的，9.0g，84mmol)和丙烯酸乙基酯(27.42mL，252mmol)在二噁烷/水≈1/1(840mL)的混合物中的溶液中，添加DABCO(9.42g，84mmol)并將所得混合物在室溫攪拌1h。將混合物分配在Et2O和水之中并將水相用Et2O萃取。將合并的有機相用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱(340g)上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(17.9g，86.4mmol，91.2％收率)。MS/ESI+208.1.[MH]+，Rt＝0.35min(方法A)。
中間體A2：2-[羥基(5-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯
與中間體A1類似地制備，從在二噁烷/水1/1(70mL)的混合物中的5-甲基吡啶-2-甲醛(1.0g，8.25mmol)起始，在室溫下攪拌3h并通過快速色譜法在硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為淡黃色固體(0.862g，3.89mmol，47％收率)。MS/ESI+222.1[MH]+，Rt＝0.39min(方法A)。
中間體A3：2-{羥基[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]甲基}丙-2-烯酸乙基酯
與中間體A1類似地制備，從5-(三氟甲基)吡啶-2-甲醛(3.66mmol)起始，并在室溫下攪拌過夜，并通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.450g，1.64mmol，45％收率)。MS/ESI+276.1[MH]+，Rt＝0.88min(方法A)。
中間體A4：2-[(3-氟吡啶-2-基)(羥基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯
與中間體A1類似地制備，從3-氟吡啶-2-甲醛(0.5g，4.0mmol)起始并在室溫下攪拌1.5h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至50:50)，得到標題化合物(0.900g，4.00mmol，定量收率)。MS/ESI+226.0[MH]+，Rt＝0.62min(方法A)。
中間體A5：2-[羥基(吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈
向吡啶-2-甲醛(4.72g，44mmol)在丙烯腈(17.4mL，264mmol)中的溶液中，添加DABCO(4.95g，44mmol)并將所得混合物在0℃攪拌30分鐘。將混合物分配在Et2O和水之中并將水相用Et2O萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為白色固體(5.88g，4.7mmol，83％收率)。MS/ESI+161.0[MH]+，Rt＝0.35min(方法A)。
中間體A6：2-[羥基(6-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈
與中間體A5類似地制備，從6-甲基吡啶-2-甲醛(1.211g，10mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為白色固體(1.0g，5.75mmol，57％收率)。MS/ESI+175.0[MH]+，Rt＝0.33min(方法A)。
中間體A8：2-[(4-氯吡啶-2-基)(羥基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯
與中間體A1類似地制備，從4-氯吡啶-2-甲醛(1.0g，7.06mmol)起始并在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為無色油狀物(1.75g，定量收率)。MS/ESI+242.1[MH]+，Rt＝0.74min(方法A)。
中間體A9：2-[羥基(4-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯
與中間體A1類似地制備，從4-甲基吡啶-2-甲醛(1.0g，8.26mmol)起始，在室溫下攪拌過夜并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.970g，4.38mmol，53％收率)。MS/ESI+222.2[MH]+，Rt＝0.39min(方法A)。
中間體A7：2-[羥基(3-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈
與中間體A5類似地制備，從3-甲基吡啶-2-甲醛(0.500g，4.12mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至70:30)，得到標題化合物，為白色固體(0.380g，2.18mmol，53％收率)。MS/ESI+175.0[MH]+，Rt＝0.31min(方法A)。
中間體B1：吲嗪-2-甲酸乙基酯
將2-[羥基(吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯A1(17.9g，86.4mmol)在乙酸酐(150mL)中的溶液分到10個小瓶中并在MW輻射下在130℃下加熱45分鐘(每一個)。將批料合并，在減壓下除去揮發物并將粗品分配在之間EtOAc和飽和NaHCO3水溶液。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑蒸發并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(340g)(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃白色固體(10.91g，57.6mmol，67％收率)。MS/ESI+190.1[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
中間體B2：6-甲基吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體B1類似地制備，從2-[羥基(5-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯A2(0.860g，3.88mmol)和乙酸酐(6.6mL)起始，在MW輻射下在130℃下加熱1h。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至80:20)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.410g，2.01mmol，52％收率)。MS/ESI+204.1[MH]+，Rt＝1.12min(方法A)。
中間體B3：6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
將2-{羥基[5-(三氟甲基)吡啶-2-基]甲基}丙-2-烯酸乙基酯A3(0.450g，1.64mmol)在乙酸酐(5mL)中的溶液在130℃下加熱過夜。在減壓下除去揮發物并將粗品分配在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間；將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑在減壓下除去。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝85:15)，得到標題化合物(0.240g，0.933mmol，60％收率)。MS/ESI+258.1[MH]+，Rt＝1.19min(方法A)。
中間體B4：8-氟吲嗪-2-甲酸乙基酯
將2-[(3-氟吡啶-2-基)(羥基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯A4(0.900g，4.00mmol)在乙酸酐(7mL)中的溶液在MW輻射下在130℃下加熱45min。在減壓下除去揮發物并將粗品分配在EtOAc和飽和NaHCO3之間。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑蒸發并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至80:20)，得到標題化合物(0.228g，1.10mmol)。將粗起始中間體A4回收并在乙酸酐中(3mL)進一步反應，在MW輻射下在130℃下加熱下加熱45min。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在硅膠(25g)Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至80:20)，得到標題化合物(0.230g，1.11mmol)。將兩個批料合并，得到標題化合物(0.458g，2.21mmol，55％總收率)。MS/ESI+208.0[MH]+，Rt＝1.05min(方法A)。
中間體B5：吲嗪-2-甲腈
與中間體B1類似地制備，從在乙酸酐(62.5mL)中的2-[羥基(吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈A5(5.88g，36.7mmol)起始，在MW輻射下在130℃下加熱1.5h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(2.588g，18.2mmol，50％收率)。MS/ESI+143.0[MH]+，Rt＝0.88min(方法A)。
中間體B6：5-甲基吲嗪-2-甲腈
與中間體B1類似地制備，從2-[羥基(6-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈A6(1.0g，5.74mmol)和乙酸酐(8mL)起始，在MW輻射下在130℃下加熱2.5h。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為白色固體(0.567g，3.63mmol，63％收率)。MS/ESI+157.0[MH]+，Rt＝0.98min(方法A)。
中間體B7：8-甲基吲嗪-2-甲腈
與中間體B1類似地制備，從2-[羥基(3-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯腈A7(0.380g，2.18mmol)和乙酸酐(3.8mL)起始，在MW輻射下在130℃下加熱1h。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為白色固體(0.245g，1.56mmol，72％收率)。MS/ESI+157.0[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
中間體B8：吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸
將根據J.Mat.Chem.，1999，9，2183-2188中報道的方法制備的吡咯并[1,2-b]噠嗪-5,6,7-三甲酸7-叔丁基5,6-二甲基酯(3.25g，9.72mmol)懸浮于KOH(2.727g，48.6mmol)在水(12mL)中的溶液中，并將反應在60℃下加熱過夜。通過添加濃HCl水溶液將混合物酸化(9.41mL)，直到pH＝1并在80℃下攪拌過夜。冷卻至室溫后，將沉淀物通過過濾收集，得到標題化合物(1.52g，9.37mmol，96％收率)。MS/ESI+163.1[MH]+，Rt＝0.61min(方法A)。
中間體B9：吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯
向吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸B8(1.52g，9.37mmol)在MeOH(110mL)中的溶液中，添加濃硫酸(6滴)并將混合物在80℃下攪拌6h。將溶劑在減壓下蒸發并將殘余物溶于DCM并用飽和NaHCO3水溶液洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝85:15至80:20)，得到標題化合物(1.0g，5.67mmol，61％收率)。MS/ESI+177.1[MH]+，Rt＝0.81min(方法A)。
中間體B10：7-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯
在此并在下面的實施例中，當標題化合物通過合并由多于1個合成批料(例如2個批料)獲得的粗品而得到時，每個批料中任何前體的量有時表示為括號中的總和(例如，批料2中的前體量批料1中的前體量)。
來自各個批料的粗品最終在“合并的粗品”中混合，并記錄兩個(或多個)批料的總產率。
將2-[(4-氯吡啶-2-基)(羥基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯A8(0.500g+1.25g)在乙酸酐(5mL+7mL)中的溶液在120℃下加熱1h。在減壓下除去揮發物并將粗品分配在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間；將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑在減壓下除去。將合并的粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物(1.07g，4.78mmol)。MS/ESI+224.2[MH]+，Rt＝1.15min(方法A)。
中間體B11：7-甲基吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體B10類似地制備，從在乙酸酐(98mL+1mL)中的2-[羥基(4-甲基吡啶-2-基)甲基]丙-2-烯酸乙基酯A9(0.7500.850g，3.393.842mmol+0.100g，0.452mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為白色固體(0.280g，1.38mmol，36％收率)。MS/ESI+204.1[MH]+，Rt＝1.12min(方法A)。
中間體BA1：4-[(6-氯吡啶-2-基)甲基]嗎啉
向6-氯吡啶-2-甲醛(1.0g，7.06mmol)在DCM(28mL)中的溶液中，添加嗎啉(0.93mL，10.59mmol)和30滴的AcOH。將混合物在室溫下攪拌過夜，然后天際Na(OAc)3BH(2.24g，10.59mmol)，并將將混合物攪拌6h。將反應用飽和NaHCO3淬滅，將有機層分離，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.45g，6.82mmol，97％)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.60-7.76(m，1H)，7.41(d，1H)，7.22(d，1H)，3.70-3.79(m，4H)，3.65(s，2H)，2.49-2.58(m，4H)。
中間體BA2：4-[(2-氯吡啶-4-基)甲基]嗎啉
與中間體BA1類似地制備，從2-氯吡啶-4-甲醛(1.0g，7.06mmol)和嗎啉(0.93mL，10.59mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.4g，6.58mmol，93％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.32(d，1H)，7.34-7.37(m，1H)，7.22(d，1H)，3.70-7.77(m，4H)，3.49(s，2H)，2.42-2.50(m，4H)。
中間體BA3：[(2-氯吡啶-4-基)甲基]二甲基胺
與中間體BA1類似地制備，從2-氯吡啶-4-甲醛(1.0g，7.06mmol)和2M在THF(5.30mL，10.59mmol)中的二甲基胺起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.20g，7.03mmol，99％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.68(d，1H)，7.75(s，1H)，7.66-7.70(m，1H)，3.78(s，2H)，2.50(s，6H)。
中間體BA4：2-氯-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶
與中間體BA1類似地制備，從6-氯吡啶-3-甲醛(1.0g，7.06mmol)和吡咯烷(0.88mL，10.59mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為無色油狀物(0.972g，4.94mmol，70％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.32(d，1H)，7.70-7.79(m，1H)，7.30(d，1H)，3.65(s，2H)，2.49-2.62(m，4H)，1.77-1.89(m，4H)。
中間體BA5：1-[(6-氯吡啶-3-基)甲基]-4-甲基哌嗪
與中間體BA1類似地制備，從6-氯吡啶-3-甲醛(3.0g，21.19mmol)和1-甲基哌嗪(4.7mL，42.38mmol)起始，得到標題化合物，為橙色油狀物(4.8g)，其未經純化而使用。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.30(d，1H)，7.76(dd，1H)，7.47(d，1H)，3.48(s，2H)，2.21-2.44(m，8H)，2.14(s，3H)。
中間體BA6：1-[(6-氯吡啶-2-基)甲基]-4-甲基哌嗪
與中間體BA1類似地制備，從6-氯吡啶-2-甲醛(1.0g，7.06mmol)和1-甲基哌嗪(1.18mL，10.6mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.54g，6.82mmol，97％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.80-7.85(m，1H)，7.42(d，1H)，7.38(d，1H)，3.54(s，2H)，2.20-2.48(m，8H)，2.15(s，3H)。
中間體BA7：1-[(2-氯吡啶-4-基)甲基]-4-甲基哌嗪
與中間體BA1類似地制備，從2-氯吡啶-4-甲醛(1.0g，7.06mmol)和1-甲基哌嗪(1.18mL，10.6mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.37g，6.07mmol，86％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.29-8.33(m，1H)，7.33-7.36(m，1H)，7.18-7.23(m，1H)，3.50(s，2H)，2.33-2.65(m，8H)，2.31(s，3H)。
中間體BA8：2-氯-5-[(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)甲基]吡啶
步驟1：2-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-羥基乙基)氨基}乙-1-醇BA8a
與中間體BA1類似地制備，從6-氯吡啶-3-甲醛(1.2g，8.48mmol)和2-[(2-羥基乙基)氨基]乙-1-醇(1.22mL，12.72mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為無色油狀物(0.680g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.35(d，1H)，7.83(dd，1H)，7.45(d，1H)，4.37(t，2H)，3.67(s，2H)，3.40-3.48(m，4H)，2.52(t，4H)。
步驟2：2-氯-5-[(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)甲基]吡啶BA8
2-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-羥基乙基)氨基}乙-1-醇BA8a(0.880g)溶于DCM(10mL)；添加咪唑(1.3g，19.05mmol)和叔丁基(氯)二甲基硅烷(1.44g，9.53mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用水、然后用鹽水洗滌，將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑在減壓下除去。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為無色油狀物(1.3g)。MS/ESI+459.5[MH]+，Rt＝1.24min(方法A)。
中間體BA9：2-(3-溴苯基)-1-甲基吡咯烷
向2-(3-溴苯基)吡咯烷(4.0g，17.69mmol)在MeOH(120mL)中的溶液中，添加甲醛水溶液(37wt.％)(2.63mL，35.38mmol)和20滴的AcOH，隨后添加Na(OAc)3BH(7.5g，35.38mmol)，并將混合物在室溫下攪拌2h。將混合物然后用飽和NaHCO3水溶液淬滅并用DCM萃取；將有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并濃縮，得到標題化合物，為無色油狀物(4.06g，16.91mmol，96％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.49-7.51(m，1H)，7.40-7.44(m，1H)，7.25-7.34(m，2H)，3.11-3.17(m，1H)，3.07(t，1H)，2.23(q，1H)，2.10-2.20(m，1H)，2.08(s，3H)，1.68-1.88(m，2H)，1.48-1.58(m，1H)。
中間體BA10：4-{2-[(6-氯吡啶-3-基)氧基]乙基}嗎啉
向PPh3(4.22g，16.1mmol)在THF(55mL)中在0℃下冷卻的攪拌溶液中，添加DEAD 97％(3mL，16.1mmol)并將混合物攪拌15min。然后添加4-(2-羥基乙基)嗎啉(1.96mL，16.1mmol)在THF(16mL)中的溶液，隨后添加2-氯-5-羥基吡啶(1.5g，11.5mmol)。將混合物升溫至室溫并攪拌4h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為粉色油狀物(2.722g，11.2mmol，97％收率)。MS/ESI+243.3[MH]+，Rt＝0.71min(方法J)。
中間體BA11：[(3-氯苯基)甲基]二甲基胺
與中間體BA1類似地制備，從3-氯苯甲醛(4.0mL，35.28mmol)和2M二甲基胺在THF(35.28mL，70.56mmol)中的溶液起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(5.8g，34.18mmol，97％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.28-7.37(m，3H)，7.22-7.27(m，1H)，3.38(s，2H)，2.14(s，6H)。
中間體BB1：4-{[4-(三甲基錫烷基)-1,3-噻唑-2-基]甲基}嗎啉
將4-[(4-溴-1,3-噻唑-2-基)甲基]嗎啉(根據專利US2009/143372A1中所報道的方法來制備，2.18g，8.28mmol)，六甲基二錫(17.2mL，82.8mmol)和Pd(PPh3)4(0.957g，0.828mmol)在甲苯(83mL)中的混合物在100℃下加熱3h。將溶劑在減壓下除去并將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(2.18g，6.28mmol，76％收率)。MS/ESI+349.1[MH]+，Rt＝0.59min(方法A)。
中間體C：3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯
將吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(2.00g，10.5mmol)和N-氯琥珀酰亞胺(1.69g，12.7mmol)溶于MeCN(320mL)并將反應在室溫下攪拌30min。將混合物在減壓下濃縮，將殘余物用水稀釋并用EtOAc萃取。將有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)；通過反相快速色譜法在60g Biotage C-18柱上進一步純化。(H2O+0.1％HCOOH：CH3CN+0.1％HCOOH＝95:5至50:50)。得到標題化合物，為黃綠色油狀物(1.642g，7.34mmol，70％收率)。MS/ESI+224.1[MH]+，Rt＝1.17min(方法A)。
中間體D：3-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯
將吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.400g，2.11mmol)和N-碘琥珀酰亞胺(0.523g，2.3mmol)溶于MeCN(65mL)并將反應在0℃下攪拌30min。將反應混合物用DCM稀釋并用硫代硫酸鈉水溶液洗滌。將所得的有機相用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.626g，1.98mmol，94％收率)。MS/ESI+316.1[MH]+，Rt＝1.21min(方法A)。
中間體DA1：3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯
將POCl3(4.07mL，44.85mmol)在DMF(146mL)中的溶液在0℃下攪拌1h。在0℃下向吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(5.000g，26.4mmol)在干DCM(588mL)的攪拌溶液中，添加2/3之前制備的POCl3在DMF(1.1eq.)中的溶液。在室溫下攪拌1h之后，將反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(350mL)淬滅并用DCM(200mL)稀釋。將有機層用水(300mL)洗滌，用硫酸鈉干燥并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為黃綠色固體(4.342g，19.99mmol，76％收率)。MS/ESI+218.0[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
中間體DA2：1-氰基-3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體DA1類似地制備，從1-氰基吲嗪-2-甲酸乙基酯(如在Journal of the Chemical Society，1965，2948-2951所報道的制備，1.4g，6.1mmol)起始并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為淺黃色固體(1.21g，4.99mmol，81％收率)。MS/ESI+243.2[MH]+，Rt＝0.97min(方法A)。
中間體DB：3-乙酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯
將吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(2.0g，10.5mmol)和乙酸鈉(4.3g，52.5mmol)在乙酸酐(60mL)中的溶液在140℃下加熱過夜。添加額外的乙酸鈉(1eq)并將反應在相同溫度下攪拌另外的4h。將反應用EtOAc稀釋并用水和鹽水洗滌。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用硫酸鈉干燥。將溶劑蒸發并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(1.78g，7.7mmol，73％收率)。MS/ESI+232.2[MH]+，Rt＝1.03min(方法A)。
中間體E：7-溴吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯
將吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯B9(0.500g，2.83mmol)和N-溴琥珀酰亞胺(0.606g，3.4mmol)溶于MeCN(85.5mL)并將反應在室溫下攪拌30min。將混合物在減壓下濃縮，將殘余物用水稀釋并用EtOAc萃取。將有機層用飽和硫代硫酸鈉溶液洗滌，用無水硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過反相快速色譜法在Biotage C18柱上純化(H2O+0.1％HCOOH:MeCN+0.1％HCOOH＝90:10至50:50)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.425g，1.66mmol，58％收率)。MS/ESI+255.0-257.0[MH]+，Rt＝0.91min(方法A)。
中間體F：1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯
在-78℃下將0.5M在DCM中溴(9.5mL，4.75mmol)緩慢添加至吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(1.00g，5.28mmol)在DCM中的溶液中。0.5h之后，將反應用水淬滅；將有機相分離，用10％硫代硫酸鈉水溶液洗滌并用硫酸鈉干燥。在減壓下除去揮發物并將粗品混合物通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.908g，3.38mmol，64％收率)。將該中間體在-20℃下在氮氣氣氛下存儲。MS/ESI+268.0-270.0[MH]+，Rt＝1.13min(方法A)。
中間體FA：1-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯
向1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(0.700g，2.61mmol)在無水DMF(7ml)中的溶液中，添加KI(1.299g，7.84mmol)和CuI(1.490g，7.84mmol)，并將混合物在130℃下攪拌過夜。將混合物冷卻至RT，用EtOAc稀釋并用10％硫代硫酸鈉水溶液洗滌。將有機相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮；將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷:EtOAc＝98:2至95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.595g)，將其在-20℃下在氮氣氣氛下存儲。MS/ESI+316.1[MH]+，Rt＝1.24min(方法A)。
中間體G：1-甲基吲嗪-2-甲酸乙基酯
將1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(1.156g，4.31mmol)分到3個小瓶中；在每個小瓶中在室溫下添加三甲基環硼氧烷(0.390ml，2.87mmol)，碳酸鉀(0.597g，4.32mmol)，Pd(PPh3)4(0.173g，0.15mmol)和4.4mL二噁烷/H2O(10/1)，將混合物脫氣，然后在110℃下加熱過夜。將混合物合并并用DCM萃取；將有機相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物(0.396g，1.95mmol，45％收率)。MS/ESI+204.1[MH]+，Rt＝1.14min(方法A)。
中間體GA：1-(三氟甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
將KF(0.369g，6.38mmol)和CuI(1.214g，6.38mmol)在Schlenk管中充分混合并在減壓下在輕微搖動下加熱火焰直至出現綠色。添加1-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯FA(0.670g)，無水DMF(2.7mL)和NMP(2.7ml)，隨后添加三甲基(三氟甲基)硅烷(0.943ml，6.38mmol)并將漿液在室溫下攪拌過夜。將混合物用水淬滅并用Et2O萃取，將有機相用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至90:10)，得到標題化合物(0.360g，1.4mmol)。MS/ESI+258.2[MH]+，Rt＝1.17min(方法A)。
中間體H1：3-苯基吲嗪-2-甲酸乙基酯
將在NMP(5.3mL)中的吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.500g，2.645mmol)，溴苯(0.338mL，3.175mmol)，KOAc(0.519g，5.29mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.093g，0.132mmol)在氮氣下在100℃反應10min，然后添加水(0.095mL，5.29mmol)并將反應進一步攪拌6.5h。添加額外的溴苯(0.170mL，1.59mmol)，添加隨后Pd(PPh3)2Cl2(0.045g，0.064mmol)并將混合物在該溫度下攪拌過夜。添加另外的Pd(PPh3)2Cl2(0.045g，0.064mmol)并繼續加熱3h。將混合物冷卻至室溫，然后分配在EtOAc和鹽水之間。將有機相用鹽水洗滌幾次并用硫酸鈉干燥。將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色固體(0.477g，1.80mmol，68％收率)。MS/ESI+266.1[MH]+，Rt＝1.25min(方法B)。
中間體H2：3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
將吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.567g，3.00mmol)，Pd(OAc)2(0.034g，0.15mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.098g，0.30mmol)和Cs2CO3(2.932g，9.00mmol)的混合物用氮氣吹掃并添加甲苯(5.5mL)，隨后添加2-氯吡啶(0.568mL，6.00mmol)。將混合物在室溫下攪拌10min，然后在130℃下加熱過夜。在室溫下添加額外的Pd(OAc)2(0.034g，0.15mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.098g，0.30mmol)，隨后添加2-氯吡啶(0.085mL，0.9mmol)并將反應在130℃下加熱另外的24h。將混合物用DCM稀釋并通過C鹽墊過濾。將濾液蒸發至干并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝85:15)，得到標題化合物，為黃色固體(0.555g，2.08mmol，69％收率)。MS/ESI+267.1[MH]+，Rt＝0.91min(方法A)。
中間體H3：3-(3-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，在130℃從吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.200g，1.06mmol)，Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.035g，0.106mmol)，Cs2CO3(1.036g，3.18mmol)，甲苯(3mL)和1-溴-3-氟苯(0.236mL，2.12mmol)起始20h。添加額外的三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.035g，0.106mmol)，Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)和1-溴-3-氟苯(0.080mL，0.716mmol)并將反應在相同溫度下加熱另外的4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.255g，0.900mmol，85％收率)。MS/ESI+284.1[MH]+，Rt＝1.26min(方法B)。
中間體H4：3-(2-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.500g，2.643mmol)，Pd(OAc)2(0.030g，0.132mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.086g，0.265mmol)，Cs2CO3(2.583g，7.935mmol)，甲苯(5.2mL)和1-氯-2-氟苯(0.555mL，5.29mmol)，在130℃下40h。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)得到標題混合物，為黃色油狀物(0.640g，2.26mmol，85％收率)。MS/ESI+284.1[MH]+，Rt＝1.22min(方法A)。
中間體H5：3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.500g，2.645mmol)，Pd(OAc)2(0.030g，0.132mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.086g，0.265mmol)，Cs2CO3(2.583g，7.935mmol)，甲苯(5.2mL)和2-氯甲苯(0.618mL，5.29mmol)，在130℃下過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)得到標題混合物，為黃色油狀物(0.770g)。MS/ESI+280.2[MH]+，Rt＝1.32min(方法A)。
中間體H6：3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.300g，1.585mmol)，Pd(OAc)2(0.018g，0.079mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.052g，0.158mmol)，Cs2CO3(1.549g，4.755mmol)，甲苯(1.8mL)和3-氯吡啶(0.302mL，3.171mmol)，在130℃下過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.346g，1.299mmol，82％收率)。MS/ESI+267.1[MH]+，Rt＝0.81min(方法A)。
中間體H7：3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.300g，1.585mmol)，Pd(OAc)2(0.018g，0.079mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.052g，0.158mmol)，Cs2CO3(1.549g，4.755mmol)，甲苯(3mL)和2-氯吡嗪(0.283mL，3.171mmol)，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.018g，0.079mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.052g，0.158mmol)和2-氯吡嗪(0.283mL，3.171mmol)，繼續加熱另外的24h。添加額外的Pd(OAc)2(0.018g，0.079mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.052g，0.158mmol)和2-氯吡嗪(0.283mL，3.171mmol)，在相同溫度下加熱另外的48h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至70:30)，得到標題化合物，為黃色固體(0.100g，0.374mmol，24％收率)。MS/ESI+268.1[MH]+，Rt＝0.98min(方法A)。
中間體H8：3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.250g，1.32mmol)，Pd(OAc)2(0.015g，0.066mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.043g，0.132mmol)，Cs2CO3(1.290g，3.96mmol)，甲苯(2.5mL)和4-氯吡啶(0.300g，2.64mmol)，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.015g，0.066mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.043g，0.132mmol)，繼續加熱另外的24h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色固體(0.250g，0.939mmol，71％收率)。MS/ESI+267.2[MH]+，Rt＝0.66min(方法A)。
中間體H9：6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用6-甲基吲嗪-2-甲酸乙基酯B2(0.410g，2.01mmol)，Pd(OAc)2(0.045g，0.201mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.131g，0.402mmol)，Cs2CO3(1.964g，6.03mmol)，甲苯(3.5mL)和2-氯吡啶(0.380mL，4.02mmol)，在130℃下過夜。在室溫下添加額外的Pd(OAc)2(0.045g，0.201mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.131g，0.402mmol)并將混合物在130℃下加熱另外的2h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至90:10)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.115g，0.41mmol，20％收率)。MS/ESI+281.2[MH]+，Rt＝1.00min(方法A)。
中間體H10：3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯B3(0.240g，0.933mmol)，Pd(OAc)2(0.011g，0.047mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.030g，0.093mmol)，Cs2CO3(0.912g，2.800mmol)，甲苯(1.5mL)和2-氯吡啶(0.177mL，1.866mmol)，在130℃下過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(0.255g，0.763mmol，82％收率)。MS/ESI+335.2[MH]+，Rt＝1.24min(方法A)。
中間體H11：8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用8-氟吲嗪-2-甲酸乙基酯B4(0.458g，2.21mmol)，Pd(OAc)2(0.025g，0.11mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.073g，0.22mmol)，Cs2CO3(2.160g，6.63mmol)，甲苯(3mL)和2-氯吡啶(0.418mL，4.42mmol)，在130℃下過夜。在室溫下添加額外的Pd(OAc)2(0.050g，0.22mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.146g，0.44mmol)并將混合物在130℃下加熱另外的24h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝85:15)；通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上進一步純化(DCM:EtOAc＝98:2)，得到標題混合物，為淺黃色固體(0.140g，0.49mmol，22％收率)。MS/ESI+285.1[MH]+，Rt＝1.05min(方法A)。
中間體H12：1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H2類似地制備，使用1-甲基吲嗪-2-甲酸乙基酯G(0.206g，0.96mmol)，Pd(OAc)2(0.011g，0.048mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.031g，0.096mmol)，Cs2CO3(0.938g，2.88mmol)，甲苯(1.76mL)和2-氯吡啶(0.181mL，1.91mmol)，在130℃下48h。在室溫下添加額外的Pd(OAc)2(0.011g，0.048mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.031g，0.096mmol)并將混合物在130℃下加熱另外的48h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色固體(0.088g，0.31mmol，32％收率)。MS/ESI+281.2[MH]+，Rt＝0.98min(方法A)。
中間體H13：3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯C(0.400g，1.79mmol)在二噁烷(14mL)和水(1.79mL)中的溶液中，在氮氣氣氛下在室溫下添加(5-(嗎啉代甲基)-2-噻吩硼酸頻哪醇酯(1.217g，3.93mmol)，磷酸二氫鉀(0.487g，3.58mmol)，磷酸鉀(0.759g，3.58mmol)和PdCl2(dtbpf)，(0.233g，0.358mmol)，將混合物脫氣并將反應在65℃下加熱過夜。將混合物用DCM萃取，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.569g，1.53mmol，86％)。MS/ESI+371.2[MH]+，Rt＝0.67min(方法A)。
中間體H14：3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H13類似地制備，從3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯C(0.300g，1.34mmol)和4-(4-嗎啉代甲基)苯基硼酸頻哪醇酯(0.894g，2.95mmol)起始，在65℃下18h。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.488g，1.34mmol，定量收率)。MS/ESI+365.3[MH]+，Rt＝0.66min(方法A)。
中間體H15：3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H13類似地制備，從3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯C(0.300g，1.34mmol)和二甲基-[4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧雜硼雜戊環-2-基)-芐基]-胺(0.769g，2.95mmol)起始，在65℃下過夜。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.421g，1.30mmol，97％)。MS/ESI+323.3[MH]+，Rt＝0.65min(方法A)。
中間體H16：3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H13類似地制備，從3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯C(0.400g，1.79mmol)和二甲基({[3-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲基})胺(1.027g，3.93mmol)起始，在65℃下過夜。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.457g，1.42mmol，79％收率)。MS/ESI+323.3[MH]+，Rt＝0.67min(方法A)。
中間體H17：3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H13類似地制備，從3-氯吲嗪-2-甲酸乙基酯C(0.150g，0.67mmol)和3,6-二氫-2H-吡喃-4-硼酸頻哪醇酯(0.309g，1.47mmol)起始，在65℃下過夜。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.106g，0.39mmol，58％)。MS/ESI+272.1[MH]+，Rt＝1.10min(方法A)。
中間體H18：3-{1-[(叔丁氧基)羰基]-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H13類似地制備，從3-氯吲嗪-2-甲酸酯C(0.300g，1.34mmol)和N-Boc-1,2,3,6-四氫吡啶-4-硼酸頻哪醇酯(0.912g，2.95mmol)起始，在65℃下18h。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.254g，0.68mmol，51％)。MS/ESI+371.3[MH]+，Rt＝1.34min(方法A)。
中間體H19：3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-碘吲嗪-2-甲酸酯D(0.346g，1.1mmol)在二噁烷(4.1ml)中的溶液中，在氮氣氣氛下添加Pd(PPh3)2Cl2(0.077g，0.11mmol)和5-(三丁基甲錫烷基)-1,3-噻唑(0.617g，1.65mmol)并將混合物在65℃下加熱過夜。添加額外的Pd(PPh3)2Cl2(0.077g，0.11mmol)和5-(三丁基甲錫烷基)-1,3-噻唑(0.205g，0.55mmol)并在65℃繼續加熱另外的6h。將混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋并通過墊過濾。將濾液濃縮并將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.169g，0.62mmol，57％)。MS/ESI+273.1[MH]+，Rt＝1.04min(方法A)。
中間體H20：3-(2-氧代吡咯烷-1-基)吲嗪-2-甲酸甲基酯
向密封管加入CuI(0.010g，0.053mmol)，N,N'-二甲基亞乙基二胺(0.009g，0.107mmol)，2-吡咯烷酮(0.127g，1.49mmol)和Cs2CO3(0.488g，1.49mmol)；添加3-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯D(0.337g，1.07mmol)和無水DMF(2.1mL)并將反應在65℃下加熱過夜。添加額外的CuI碘化物(0.010g，0.053mmol)和N,N'-二甲基亞乙基二胺(0.009g，0.107mmol)并將反應在65℃下加熱另外的24h。將混合物冷卻至室溫并用DCM和水稀釋。分離各相，將水相用DCM萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.127g，0.47mmol，43％收率)。MS/ESI+273.2[MH]+，Rt＝0.88min(方法A)。
中間體H21：3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
將3-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯D(0.626g，1.98mmol)，1-戊炔(0.674g，9.9mmol)，CuI(0.132g，0.693mmol)和二乙基胺(2.23mL，21.58mmol)在DMF(7.9mL)中的混合物脫氣，添加Pd(PPh3)2Cl2(0.236g，0.336mmol)并將反應在室溫下攪拌1h。將混合物用EtOAc稀釋并通過墊過濾；將濾液用水和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)。通過反相快速色譜法在Biotage C18柱上進一步純化(H2O+0.1％HCOOH：CH3CN+0.1％HCOOH＝95:5至30:70)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.263g，1.03mmol，52％收率)。MS/ESI+256.2[MH]+，Rt＝1.34min(方法A)。
中間體H22：3-(3-羥基丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H21類似地制備，從3-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯D(0.688g，2.18mmol)和炔丙醇(0.611g，10.9mmol)起始，在室溫下攪拌30分鐘。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.332g，1.36mmol，63％收率)。MS/ESI+243.9[MH]+，Rt＝0.90min(方法A)。
中間體H23：3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-(3-羥基丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H22(0.332g，1.36mmol)和咪唑(0.231g，3.40mmol)在DMF(1.6mL)中的攪拌混合物中，在室溫下添加三異丙基甲硅烷基氯(0.270g，1.40mmol)并將反應攪拌過夜。將混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl水溶液洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.501g，1.25mmol，92％收率)。MS/ESI+400.3[MH]+，Rt＝1.71min(方法C)。
中間體H24：1-苯基吲嗪-2-甲酸乙基酯
向1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(0.780g，2.9mmol)在二噁烷/H2O＝10/1(22.6mL)中的溶液中，在室溫下添加苯基硼酸(0.780g，6.38mmol)，磷酸二氫鉀(0.790g，5.8mmol)，磷酸鉀(1.23g，5.8mmol)和PdCl2(dtbpf)，(0.378g，0.6mmol)，將混合物脫氣并將反應在65℃下加熱18h。將混合物用DCM稀釋，用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥；將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化用于下一步(0.475g，1.79mmol，62％收率)。MS/ESI+266.1[MH]+，Rt＝1.25min(方法A)。
中間體H25：1-(3-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H24類似地制備，使用1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(0.700g，2.6mmol)和(3-氟苯基)硼酸(0.400g，2.86mmol)，在65℃下18h。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95：15)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.585g，2.06mmol，70％收率)。MS/ESI+284.1[MH]+，Rt＝1.25min(方法A)。
中間體H26：1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H24類似地制備，使用1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(0.500g，1.86mmol的中間體)和(2-甲基苯基)硼酸(0.556g，4.09mmol)，在65℃下18h，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.350g,1.25mmol，67％收率)。MS/ESI+280.1[MH]+，Rt＝1.30min(方法A)。
中間體H27：1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(1.4g，5.22mmol)在甲苯/MeOH＝20/1(25.27mL)中的溶液中，添加Pd(PPh3)4(0.090g，0.078mmol)和2-(三丁基甲錫烷基)吡啶(2.53mL，7.83mmol)并將反應回流24h。
在不同的燒瓶中，向1-溴吲嗪-2-甲酸乙基酯F(0.100g，0.37mmol)在甲苯/MeOH＝20/1(1.84mL)中的溶液中，在氮氣氣氛下添加Pd(PPh3)4(0.0043g，0.0037mmol)和2-(三丁基甲錫烷基)吡啶(0.121mL，0.37mmol)并將反應加熱至回流24h。將兩種混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋，合并并通過墊過濾。將濾液濃縮并將所得的粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝96:4)。通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上進一步純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝60:40)，得到標題化合物(0.446g，1.67mmol，32％收率)。MS/ESI+267.1[MH]+，Rt＝0.49min(方法A)。
中間體H28：7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯
向7-溴吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯E(0.425g，1.66mmol)在二噁烷(6.15mL)中的混合物中，在氮氣氣氛下添加Pd(PPh3)2Cl2(0.116g，0.16mmol)和2-(三丁基甲錫烷基)吡啶(0.806mL，2.5mmol)，并將反應在90℃下加熱16h。將混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過墊過濾。將濾液濃縮并將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物(0.287g，1.13mmol，68％收率)。MS/ESI+254.2[MH]+，Rt＝0.52min(方法A)。
中間體H52：3-(1,3-噻唑-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H19類似地制備，從3-碘吲嗪-2-甲酸酯D(1.00g)和4-(三丁基甲錫烷基)-1,3-噻唑(1.78g，4.76mmol)起始，在65℃下過夜；添加額外的Pd(PPh3)2Cl2和4-(三丁基甲錫烷基)-1,3-噻唑(0.220g)并將混合物在65℃下加熱過夜。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝85:15)，得到標題化合物(0.200g，0.734mmol)，為棕色固體。MS/ESI+273.3[MH]+，Rt＝1.08min(方法A)。
中間體H53：3-[2-(嗎啉-4-基甲基)-1,3-噻唑-4-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H19類似地制備，從3-碘吲嗪-2-甲酸酯D(1.097g+0.236g)和4-{[4-(三甲基錫烷基)-1,3-噻唑-2-基]甲基}嗎啉BB1(1.943g，5.6mmol+0.432g，1.24mmol)起始，在65℃下過夜。添加額外的Pd(PPh3)2Cl2和4-{[4-(三甲基錫烷基)-1,3-噻唑-2-基]甲基}嗎啉XX12(0.230g，0.66mmol)并將混合物在65℃下加熱另外的48h。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)；將所得的產物溶于EtOAc，添加KF并將混合物在室溫下攪拌3h。將混合物過濾并將濾液在減壓下濃縮；將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上進一步純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.485g)。MS/ESI+372.3[MH]+，Rt＝0.76min(方法A)。
中間體H54：3-[3-(二甲基氨基)丙-1-炔-1-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H21類似地制備，從3-碘吲嗪-2-甲酸乙基酯D(0.800g，2.54mmol)和3-二甲基氨基-1-丙炔(1.37mL，12.69mmol)起始，在室溫下攪拌1h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為深黃色油狀物(0.687g)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+271.2[MH]+，Rt＝0.61min(方法A)。
中間體H55：3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向燒瓶中裝入3-碘吲嗪-2-甲酸酯D(1.641g)，1-甲基-3-氧代哌嗪(0.594g，5.2mmol)，K3PO4(2.207g，10.4mmol)和碘化銅(I)(0.050g，0.26mmol)并將燒瓶用N2吹掃并回充。添加無水DMF(4.9mL)，隨后添加N,N'-二甲基亞乙基二胺(0.056mL，0.52mmol)并將混懸液在65℃下加熱過夜。添加額外的碘化銅(I)(0.050g，0.26mmol)，N,N'-二甲基亞乙基二胺(0.056mL，0.52mmol)并將反應在65℃下加熱另外的24h。將反應混合物冷卻至室溫并用EtOAc和水稀釋。將水層用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色固體(0.694g)。MS/ESI+302.2[MH]+，Rt＝0.51min(方法A)。
中間體H56：3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯和3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸甲基酯
步驟1：3-(2-羥基吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H56a
將碘三甲基硅烷(4.00mL，28.6mmol)添加至3-(2-甲氧基吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H45(1.00g，3.37mmol)在干乙腈(59mL)中的溶液中并將所得混合物在60℃下加熱3h。然后在該溫度下添加MeOH(59mL)并攪拌另外的15分鐘。在冷卻至室溫后，將混合物用DCM稀釋并用Na2S2O5水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌。將有機相在減壓下濃縮，得到標題化合物，為黃色固體(0.951g，3.37mmol，100％收率)。MS/ESI+283.3[MH]+，Rt＝0.85min(方法A)。
步驟2：3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯和3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸甲基酯H56
將K2CO3(1.78g，12.88mmol)添加至3-(2-羥基吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H56a(0.800g，2.8mmol)在丙酮(42.0mL)中的溶液中并將混合物在50℃下在氮氣氣氛下攪拌2h。在50℃下添加2-氯-N,N-二甲基乙基胺鹽酸鹽(1.209g，8.4mmol)并將所得混合物攪拌過夜。添加額外的K2CO3(1.16g，8.4mmol)和2-氯-N,N-二甲基乙基胺鹽酸鹽(0.806g，5.6mmol)，并將反應在相同溫度下攪拌另外的24h。將反應混合物用稀釋MeOH并將溶劑除去；添加水并將混合物用DCM萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝80:20)，得到3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯和3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸甲基酯的混合物(≈1:1比例)(0.621g)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+354.3和340.3[MH]+，Rt＝0.59min和0.53min(方法A)。
中間體H57：3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
將AlCl3(0.990g，7.42mmol)添加至3,6-二氯噠嗪(1.105g，7.42mmol)在1,2-二氯乙烷(10ml)中的溶液中，并將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后添加吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(1.00g，5.3mmol)并將混合物在80℃下攪拌24h。將反應混合物傾入冰中并用DCM萃取。將有機層用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至80:20)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.425g，1.41mmol，26％收率)。MS/ESI+302.2[MH]+，Rt＝1.09min(方法A)。
中間體H58：3-(6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H57(0.425g，1.4mmol)在22ml乙酸中的溶液中，添加乙酸鈉(0.231g，2.81mmol)并將混合物在攪拌下加熱至回流3h。將反應混合物傾入冷水中并用DCM萃取。將有機層用硫酸鈉干燥并將溶劑除去，得到標題化合物，為為淺橙色固體，將其未經任何額外的純化而使用(0.395g)。MS/ESI+284.2[MH]+，Rt＝0.85min(方法A)。
中間體H59：3-[1-(2-氯乙基)-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
將3-(6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H58(0.175g)溶于2ml DMF，添加K2CO3(0.389g，1.85mmol)，隨后添加1-溴-2-氯乙烷(0.154ml，1.85mmol)并將混合物在60℃下攪拌2h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液用鹽水洗滌。將有機相然后用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至60:40)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.134g)。MS/ESI+346.3[MH]+，Rt＝1.08min(方法A)。
中間體H60：3-{6-氧代-1-[2-(吡咯烷-1-基)乙基]-1,6-二氫噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-[1-(2-氯乙基)-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H59(0.134g)在乙腈(7mL)中的溶液中，添加KI(69.4mg，0.42mmol)和K2CO3(0.157g，1.14mmol)，隨后添加吡咯烷(0.64ml，0.77mmol)并將混合物在85℃下攪拌4h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液蒸發至干；將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.114g，0.3mmol)。MS/ESI+381.2[MH]+，Rt＝0.60min(方法A)。
中間體H61：3-{1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H60類似地制備，從3-[1-(2-氯乙基)-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H59(0.193g)和1-甲基哌嗪(0.125ml，1.12mmol)起始，在85℃下5h并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.179g，0.43mmol)。MS/ESI+410.4[MH]+，Rt＝0.59min(方法A)。
中間體H62：3-{1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
將3-(6-氧代-1,6-二氫噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H58(0.202g+0.043g)溶于9.5ml(+2mL)DMF，添加K2CO3(0.3435g，2.48mmol+0.0725g，0.52mmol)，隨后添加4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(0.1725g，0.92mmol+0.0335g，0.18mmol)，并將混合物在室溫下攪拌48h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液用鹽水洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至30:70)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.265g，0.67mmol，2批)。MS/ESI+397.3[MH]+，Rt＝0.60min(方法A)。
中間體H63：3-{6-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基]噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙-1-醇(0.2676g，1.85mmol)溶于5.5ml THF，添加叔丁醇鉀(0.309g，2.76mmol)并將混合物在室溫下攪拌30min。添加3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H57(0.280g，0.92mmol)并將混合物在室溫下攪拌5min。將混合物用乙酸乙酯稀釋并用鹽水洗滌，分離各相并將有機層用硫酸鈉干燥。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物(0.187g，0.45mmol，49％收率)。MS/ESI+410.4[MH]+，Rt＝0.57min(方法A)。
中間體H64：3-{6-[2-(二甲基氨基)乙氧基]噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H63類似地制備，從3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H57(0.500g，1.65mmol)和2-二甲基氨基乙醇(0.333ml，3.30mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物(0.341g)。MS/ESI+355.3[MH]+，Rt＝0.62min(方法A)。
中間體H65：3-{6-[(1-甲基哌啶-4-基)氧基]噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸甲基酯
將3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H57(0.255g，0.84mmol)和1-甲基哌啶-4-醇(0.390g，3.38mmol)溶于10.5ml THF；添加叔丁醇鉀(0.380g，3.38mmol)并將混合物在室溫下攪拌30min。將混合物分配在乙酸乙酯和水之間，分離各相并將水層蒸發。將殘余物溶于MeOH(25mL)，添加濃硫酸(10滴)并將混合物在80℃下攪拌16h。將溶劑蒸發并將殘余物溶于DCM并用飽和NaHCO3溶液堿化(pH＝8)。分離各相并將水層用DCM/MeOH＝9/1溶液萃取3次。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，將溶劑蒸發并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.110g，0.3mmol，35％收率)。MS/ESI+367.4[MH]+，Rt＝0.58min(方法A)。
中間體H66：3-{6-[2-(1-甲基哌啶-4-基)乙氧基]噠嗪-3-基}吲嗪-2-甲酸甲基酯
與中間體H65類似地制備，從3-(6-氯噠嗪-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H57(0.510g，1.69mmol)和2-(1-甲基哌啶-4-基)乙-1-醇(0.970g，6.77mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.140g)。MS/ESI+395.4[MH]+，Rt＝0.64min(方法A)。
中間體H67：3-(嗎啉-4-基甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA1(1.05g，4.83mmol+0.100g，0.46mmol)在DCM(19.3mL+1.84mL)中的溶液中，添加嗎啉(0.63mL，7.25mmol+0.060mL，0.69mmol)和21滴(+2)AcOH。將混合物在室溫下攪拌過夜，然后添加Na(OAc)3BH(1.536g，7.25mmol+0.146g，0.69mmol)。6h之后，將混合物用飽和NaHCO3(20mL+2mL)淬滅；將有機層分離，用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.218g，4.2mmol，79％兩個批料的收率)。MS/ESI+289.3[MH]+，Rt＝0.51min(方法A)。
中間體H68：3-({2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-9-基}甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H67類似地制備，從3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA1(0.786g，3.62mmol)和2-甲基-2,9-二氮雜螺[5.5]十一烷(0.730g，4.34mmol，在SCX處理和用液氨洗脫之后，得自可商購的二鹽酸鹽)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物(1.10g，2.98mmol，82％收率)。MS/ESI+370.4[MH]+，Rt＝0.39min(方法A)。
中間體H69：9-{[2-(乙氧基羰基)吲嗪-3-基]甲基}-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁基酯
與中間體H67類似地制備，從3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA1(0.610g，2.81mmol)和3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁基酯(1g，3.93mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物(0.975g，2.14mmol，76％收率)。MS/ESI+456.6[MH]+，Rt＝0.79min(方法A)。
中間體H70：2-{[2-(乙氧基羰基)吲嗪-3-基]甲基}-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁基酯
與中間體H67類似地制備，從3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA1(0.600g，2.72mmol)和2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁基酯(在通過PL-HCO3柱(3x1g)過濾之后，得自1g，3.8mmol可商購的鹽酸鹽)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至45：55)，得到標題化合物，為油狀物(0.537g，1.25mmol，46％)。MS/ESI+428.2[MH]+，Rt＝0.74min(方法A)。
中間體H71：3-{[(3aR,6aS)-5-[(叔丁氧基)羰基]-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H67類似地制備，從3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA1(0.500g，2.3mmol)和內消旋-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁基酯(0.733g，3.45mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.951g，2.3mmol，100％)。MS/ESI+414.5[MH]+，Rt＝0.71min(方法A)。
中間體H72：1-氰基-3-(嗎啉-4-基甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H67類似地制備，從1-氰基-3-甲酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DA2(0.605g，2.49mmol)和嗎啉(0.436ml，4.98mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1)，得到標題化合物(0.750g，2.39mmol，96％收率)。MS/ESI+314.3[MH]+，Rt＝0.54min(方法A)。
中間體H73：3-(1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯
步驟1：3-[3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H73a
向3-乙酰基吲嗪-2-甲酸乙基酯DB(1.780g，7.7mmol)在甲苯(30ml)中的溶液中，添加叔丁氧基雙(二甲基氨基)甲烷(3.18ml，15.4mmol)并將混合物在110℃下攪拌2h。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝60:40至40:60)，得到標題化合物，為黃色油狀物(2.120g，7.4mmol，96％收率)。MS/ESI+287.3[MH]+，Rt＝0.89min(方法A)。
步驟2：3-(1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H73
向3-[3-(二甲基氨基)丙-2-烯酰基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H73a(1.580g，5.5mmol)在乙醇(14ml)中的溶液中，添加一水合肼(0.267ml，5.5mmol)并將混合物在80℃下攪拌1h。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為淺黃色固體(1.165g，4.5mmol，83％收率)。MS/ESI+256.2[MH]+，Rt＝0.95min(方法A)。
中間體H74：3-[1-(2-氯乙基)-1H-吡唑-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯
將3-(1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H73(1.165g，4.5mmol)溶于11ml DMF，添加K2CO3(1.897g，13.5mmol)，隨后添加1-溴-2-氯乙烷(1.12ml，13.5mmol)并將混合物在60℃下攪拌6h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液用鹽水洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.995g，3.13mmol，69％收率)。MS/ESI+317.9[MH]+，Rt＝1.15min(方法A)。
中間體H75：3-{1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
向3-[1-(2-氯乙基)-1H-吡唑-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H74(0.300g，0.94mmol)在乙腈(24mL)中的溶液中，添加KI(0.312g，1.88mmol)和K2CO3(0.391g，2.83mmol)，隨后添加在THF(1.41ml，2.83mmol)中的2M二甲基胺并將混合物在85℃下攪拌48h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液用鹽水洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM:MeOH＝99:1至90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.212g，0.65mmol，70％收率)。MS/ESI+327.3[MH]+，Rt＝0.61min(方法A)。
中間體H76：3-{1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
與中間體H75類似地制備，從3-[1-(2-氯乙基)-1H-吡唑-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H74(0.300g，0.94mmol+0.025mg，0.078mmol)，KI(0.234g，1.41mmol+0.014g，0.086mmol)，K2CO3(0.390g，2.82mmol+0.032g，0.234mmol)和1-甲基哌嗪(0.208ml，1.88mmol+0.017mL，0.15mmol)起始，在85℃下24h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.316g，0.82mmol，81％收率)。MS/ESI+382.4[MH]+，Rt＝0.61min(方法A)。
中間體H77：3-{1-[2-(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
步驟1：3-(1-{2-[雙(2-羥基乙基)氨基]乙基}-1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H77a
與中間體H75類似地制備，從3-[1-(2-氯乙基)-1H-吡唑-3-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H74(0.200g，0.63mmol)，KI(0.314g，1.89mmol)，K2CO3(0.348g，2.52mmol)和2-[(2-羥基乙基)氨基]乙-1-醇(0.181ml，1.89mmol)起始，在85℃下24h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.076g，0.19mmol，31％收率)。MS/ESI+387.4[MH]+，Rt＝0.59min(方法A)。
步驟2：3-{1-[2-(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯H77
將3-(1-{2-[雙(2-羥基乙基)氨基]乙基}-1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H77a(0.121g，0.31mmol)溶于DCM(3mL)；添加咪唑(0.1055g，1.55mmol)和叔丁基(氯)二甲基硅烷(0.117g，0.77mmol)，并將混合物在室溫下攪拌2h。將混合物用水洗滌，然后用鹽水洗滌，將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑在減壓下除去。將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.165g，0.27mmol，86％收率)。MS/ESI+615.6[MH]+，Rt＝1.25min(方法A)。
中間體H78：3-{1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯
將3-(1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H73(567.4mg，1.54mmol)溶于8ml THF，添加K2CO3(0.866g，6.16mmol)，隨后添加4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(0.573g，3.08mmol)并將混合物在60℃下攪拌2h。將混合物用乙酸乙酯稀釋，將固體過濾掉并將濾液用鹽水洗滌。然后將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.068g，0.18mmol)。MS/ESI+369.4[MH]+，Rt＝0.65min(方法A)。
中間體I1：1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-酮
將可商購的1-(吲嗪-2-基)乙-1-酮(0.250g，1.57mmol)，Pd(OAc)2(0.018g，0.0785mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.051g，0.157mmol)和Cs2CO3(1.530g，4.71mmol)的混合物用氮氣吹掃并添加甲苯(3mL)，隨后添加氯苯(0.320mL，3.52mmol)。將反應在室溫下攪拌10min，然后在130℃下加熱16h。將混合物冷卻至RT，用DCM稀釋并通過墊過濾。將濾液蒸發至干并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝93:7)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.095g，0.40mmol，26％收率)。MS/ESI+236.1[MH]+，Rt＝1.11min(方法A)。
中間體I2：1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-酮
將1-(吲嗪-2-基)乙-1-酮(0.250g，1.57mmolmmol)，Pd(Oac)2(0.018g，0.0785mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.051g，0.157mmol)和Cs2CO3(1.535g，4.71mmol)的混合物用氮氣吹掃并添加甲苯(3mL)，隨后添加2-氯吡啶(0.223mL，2.36mmol)。將混合物在室溫下攪拌10分鐘，然后在130℃下加熱過夜。在室溫下添加額外的Pd(Oac)2(0.018g，0.0785mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.051g，0.157mmol)，隨后添加2-氯吡啶(0.148mL，1.57mmol)并將混合物在130℃下加熱24h。在室溫下添加額外的Pd(Oac)2(0.018g，0.0785mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.051g，0.157mmol)并將混合物在130℃下加熱另外的8h。將混合物用DCM稀釋并通過墊過濾。將濾液蒸發至干并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.055g，0.233mmol，15％收率)。MS/ESI+237.1[MH]+，Rt＝0.66min(方法A)。
中間體I3：1-{3-[5-(嗎啉-4-羰基)吡啶-2-基]吲嗪-2-基}乙-1-酮
向在氮氣氣氛下冷卻至0℃的N,N'-二甲基亞乙基二胺(0.250mL，2.32mmol+0.062mL，0.580mmol)在甲苯(6mL+1.5mL)中的溶液中，逐滴添加2M三甲基鋁在甲苯(3.27mL，6.54mmol+0.817mL，1.63mmol)中的溶液并將所得混合物在室溫下攪拌1h。添加3-[5-(嗎啉-4-羰基)吡啶-2-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H47(0.800g，2.11mmol+0.200g，0.527mmol)在甲苯(6mL+1.5mL)中的溶液，并將反應加熱至回流4h。將混合物冷卻至室溫，用1N HCl水溶液淬滅并用EtOAc萃取；將有機層用硫酸鈉干燥，過濾并在減壓下濃縮。
將合并的粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色泡沫(0.140g，0.401mmol，15％收率)。MS/ESI+350.2[MH]+，Rt＝0.78min(方法A)。
中間體J1：3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈
將吲嗪-2-甲腈B5(1.3g，9.14mmol)，Pd(OAc)2(0.102g，0.46mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.298g，0.914mmol)和Cs2CO3(8.93g，27.42mmol)的混合物用氮氣吹掃并添加甲苯(5mL)，隨后添加2-氯吡啶(1.7mL，18.28mmol)。將反應在130℃下加熱過夜。將混合物用DCM稀釋并通過墊過濾；將濾液蒸發至干并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:DCM＝61:39)，得到標題化合物，為淡黃色固體(1.226g，5.59mmol，61％收率)。MS/ESI+220.1[MH]+，Rt＝1.05min(方法A)。
中間體J2：3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲腈
與中間體J1類似地制備，從吲嗪-2-甲腈B5(0.150g，1.05mmol)，Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.034g，0.105mmol)，Cs2CO3(1.026g，3.15mmol)，甲苯(1.8mL)和4-氯吡啶(0.240g，2.11mmol)起始，在130℃下加熱過夜。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色固體(0.095g，0.433mmol，41％收率)。MS/ESI+220.1[MH]+，Rt＝0.53min(方法A)。
中間體J3：3-(噻吩-2-基)吲嗪-2-甲腈
與中間體J1類似地制備，從吲嗪-2-甲腈B5(0.150g，1.05mmol)，Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.034g，0.105mmol)，Cs2CO3(1.026g，3.15mmol)，甲苯(2mL)和2-氯噻吩(0.195mL，2.11mmol)起始，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.034g，0.105mmol)和2-氯噻吩(0.195mL，2.11mmol)，在相同的溫度下加熱另外的24h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5)；通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上進一步純化(環己烷:DCM＝95:5至80:20)，得到標題化合物(0.072g)。MS/ESI+225.0[MH]+，Rt＝1.13min(方法A)。
中間體J4：3-(噻吩-3-基)吲嗪-2-甲腈
與中間體J1類似地制備，從吲嗪-2-甲腈B5(0.150g，1.05mmol)，Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.034g，0.105mmol)，Cs2CO3(1.026g，3.15mmol)，甲苯(2mL)和3-氯噻吩(0.196mL，2.11mmol)起始，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.012g，0.053mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.034g，0.105mmol)和3-氯噻吩(0.195mL，2.11mmol)，在相同的溫度下加熱另外的24h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化用于下一步(0.097g)。MS/ESI+225.0[MH]+，Rt＝1.12min(方法A)。
中間體J5：5-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈
與中間體J1類似地制備，從5-甲基吲嗪-2-甲腈B6(0.567g，3.63mmol)，Pd(OAc)2(0.081g，0.363mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.236g，0.726mmol)，Cs2CO3(3.55g，10.89mmol)，甲苯(7mL)和2-氯吡啶(0.687mL，7.26mmol)起始，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.0081g，0.363mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.236g，0.0.726mmol)，并將混合物在130℃下加熱另外的48h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(0.084g，0.036mmol，10％收率)。MS/ESI+234.1[MH]+，Rt＝0.95min(方法A)。
中間體J6：8-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈
與中間體J1類似地制備，從8-甲基吲嗪-2-甲腈B7(0.245g，1.57mmol)，Pd(OAc)2(0.035g，0.157mmol)，三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.102g，0.314mmol)，Cs2CO3(1.530g，4.71mmol)和2-氯吡啶(0.296mL，3.13mmol)起始，在130℃下過夜。添加額外的Pd(OAc)2(0.035g，0.157mmol)和三環戊基膦四氟硼酸鹽(0.102g，0.314mmol)，并將混合物在130℃下加熱另外的12h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)。通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上進一步純化(環己烷:DCM＝50:50至100％DCM)，得到標題化合物，為白色固體(0.164g，0.70mmol，45％收率)。MS/ESI+234.1[MH]+，Rt＝1.16min(方法A)。
中間體K1：(3-苯基吲嗪-2-基)甲醇
在氮氣下向在-78℃下冷卻的3-苯基吲嗪-2-甲酸乙基酯H1(0.475g，1.79mmol)在DCM(19mL)中的溶液中，經15分鐘逐滴添加1M DIBAL的甲苯(5.37mL，5.37mmol)溶液并將反應在-78℃下攪拌1.5h。將反應混合物通過逐滴添加飽和氯化銨溶液淬滅并逐漸溫熱至室溫。將混合物用萃取DCM幾次并將合并的有機層通過相分離試管過濾，用DCM洗滌，用硫酸鈉干燥并真空濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為熒光黃綠色固體(0.360g，1.61mmol，90％收率)。MS/ESI+224.1[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
中間體K2：[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸酯H2(0.554g，2.08mmol)起始，攪拌1h并通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.402g，1.79mmol，86％收率)。MS/ESI+225.1[MH]+，Rt＝0.54min(方法A)。
中間體K3：[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(3-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H3(0.674g，2.38mmol)起始，攪拌1.5h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.400g，1.66mmol，70％收率)。MS/ESI+242.1[MH]+，Rt＝1.01min(方法A)。
中間體K4：[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(2-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H4(0.638g，2.25mmol)起始，攪拌1h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為淡綠色油狀物(0.448g，1.857mmol，82％收率)。MS/ESI+242.1[MH]+，Rt＝0.96min(方法B)。
中間體K5：[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H5(2.65mmol)起始，攪拌1h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為熒光淡綠色固體(0.443g，1.867mmol，71％收率)。MS/ESI+238.2[MH]+，Rt＝1.05min(方法A)。
中間體K6：[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H6(0.344g，1.29mmol)起始，攪拌1h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至100％EtOAc)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.234g，1.04mmol，81％收率)。MS/ESI+225.1[MH]+，Rt＝0.48min(方法A)。
中間體K7：[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H7(0.098g，0.367mmol)起始，攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝40:60)，得到標題化合物，為黃色固體(0.042g，0.186mmol，51％收率)。MS/ESI+226.1[MH]+，Rt＝0.74min(方法A)。
中間體K8：[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H8(0.250g，0.939mmol)起始，攪拌2h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.200g，0.892mmol，95％收率)。MS/ESI+225.1[MH]+，Rt＝0.38min(方法A)。
中間體K9：[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H9(0.197g，0.70mmol)起始，攪拌30min并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.136g，0.57mmol，81％收率)。MS/ESI+239.2[MH]+，Rt＝0.63min(方法A)。
中間體K10：[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H10(0.255g，0.763mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物，其為淡黃色固體(0.197g，0.674mmol，88％收率)。MS/ESI+239.3[MH]+，Rt＝1.02min(方法A)。
中間體K11：[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H11(0.140g，0.49mmol)起始，攪拌1h，并未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.120g，0.49mmol，定量收率)。MS/ESI+243.1[MH]+，Rt＝0.71min(方法A)。
中間體K12：[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從1-甲基-3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H12(0.088g，0.314mmol)起始，攪拌2h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.061g，0.256mmol，82％收率)。MS/ESI+239.1[MH]+，Rt＝0.60min(方法A)。
中間體K13：{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H13(0.569g，1.53mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.364g，1.11mmol，72％收率)。MS/ESI+328.2[MH]+，Rt＝0.50min(方法A)。
中間體K14：{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-甲酸乙基酯H14(0.488g，1.34mmol)起始，攪拌3h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝100:0至0:100)，得到標題化合物，為深黃色油狀物(0.271g，0.84mmol，63％收率)。MS/ESI+323.3[MH]+，Rt＝0.50min(方法A)。
中間體K15：(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲酸乙基酯H15(0.421g，1.30mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.235g，0.83mmol，64％收率)。MS/ESI+281.2[MH]+，Rt＝0.49min(方法A)。
中間體K16：(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲酸乙基酯H16(0.457g，1.42mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.285g，1.02mmol，71％收率)。MS/ESI+281.3[MH]+，Rt＝0.52min(方法A)。
中間體K17：[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H17(0.134g，0.49mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.078g，0.34mmol，70％收率)。MS/ESI+230.1[MH]+，Rt＝0.79min(方法A)。
中間體K18：4-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與中間體K1類似地制備，從3-{1-[(叔丁氧基)羰基]-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基}吲嗪-2-甲酸乙基酯H18(0.370g，0.91mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.194g，0.59mmol，65％收率)。MS/ESI+329.3[MH]+，Rt＝1.08min(方法A)。
中間體K19：[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H19(0.169g，0.62mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.143g，0.62mmol，定量收率)。MS/ESI+231.1[MH]+，Rt＝0.75min(方法A)。
中間體K20：1-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮
與中間體K1類似地制備，從3-(2-氧代吡咯烷-1-基)吲嗪-2-甲酸甲基酯H20(0.315g，1.16mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝100:0至0:100)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.057g，0.27mmol，21％收率)。MS/ESI+231.2[MH]+，Rt＝0.61min(方法A)。
中間體K21：[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸酯H21(0.260g，1.02mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.217g，1.02mmol，定量收率)。MS/ESI+214.2[MH]+，Rt＝1.09min(方法A)。
中間體K22：[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H23(0.501g，1.25mmol)起始，攪拌1h并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅；未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.393g，1.10mmol，88％收率)。MS/ESI+358.1[MH]+，Rt＝1.55min(方法A)。
中間體K23：吲嗪-2-基甲醇
與中間體K1類似地制備，從吲嗪-2-甲酸乙基酯B1(0.500g，2.642mmol)起始，攪拌1h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為白色固體(0.334g，2.269mmol，86％收率)。MS/ESI+148.0[MH]+，Rt＝0.30min。(方法A)。
中間體K24：(1-苯基吲嗪-2-基)甲醇
與中間體K1類似地制備，從1-苯基吲嗪-2-甲酸乙基酯H24(0.475g，1.79mmol)起始，攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM:環己烷＝90:10至100％DCM)，得到標題化合物，為黃色固體(0.230g，1.03mmol，57％收率)。MS/ESI+224.1[MH]+，Rt＝0.97min(方法A)。
中間體K25：[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從1-(3-氟苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H25(0.585g，2.06mmol)起始，攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM:環己烷＝90:10至100％DCM)，得到標題化合物，為藍色油狀物(0.330g，1.36mmol，66.3％收率)。MS/ESI+242.1[MH]+，Rt＝1.02min(方法A)。
中間體K26：[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H26(0.547g，1.95mmol)起始，攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM:環己烷＝90:10至100％DCM)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.230g，0.96mmol，50％收率)。MS/ESI+238.1[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
中間體K27：[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇
與中間體K1類似地制備，從1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H27(0.446g，1.67mmol)起始，攪拌15min，并未經任何額外的純化而使用后處理之后得到的粗品標題化合物(0.358g，1.59mmol，96％收率)。MS/ESI+225.1[MH]+，Rt＝0.38min(方法A)。
中間體K28：[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲醇
向在氮氣下在-78℃下冷卻的7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯H28(0.120g，0.47mmol)在DCM(3.7mL)中的溶液中，經10min逐滴添加1M DIBALH的甲苯(0.95mL，0.95mmol)溶液，并將反應在-78℃下攪拌1h。經10min逐滴添加額外的1M DIBAL的甲苯(0.23mL，0.23mmol)溶液，并將反應在-78℃下攪拌另外的1h。將反應混合物通過逐滴添加飽和氯化銨溶液淬滅并逐漸溫熱至室溫。將混合物用DCM萃取并將合并的有機層通過相分離試管過濾，用硫酸鈉干燥并真空濃縮。經殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.078g，0.35mmol，74％收率)。MS/ESI+226.1[MH]+，Rt＝0.39min(方法A)。
中間體K46：2-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]芐腈
向3-(2-氰基苯基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H46(0.240g，0.827mmol)在THF(12mL)中的攪拌溶液中，添加2M LiBH4的THF(0.83mL，1.654mmol)溶液和MeOH(0.4mL)，并將反應在50℃下攪拌2h。添加額外的2M LiBH4的THF溶液(0.83mL，1.654mmol)并將溶液在相同溫度下攪拌過夜。將反應混合物用EtOAc稀釋并用H2O洗滌。將有機相在減壓下濃縮并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝60:40)，得到標題化合物(0.140g，0.56mmol，68％收率)。MS/ESI+249.2[MH]+，Rt＝0.89min(方法A)。
中間體K48：3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}-2-(羥基甲基)吲嗪-1-甲腈
與中間體K28類似地制備，從1-氰基-3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲酸乙基酯H50(2.7g，7.77mmol)起始，并將反應通過逐滴添加飽和四水合酒石酸鉀鈉溶液淬滅，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(理論值7.77mmol，收率認為是定量的)。MS/ESI+306.3[MH]+，Rt＝0.97min(方法J)。
中間體K49：(7-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基)甲醇
與中間體K28類似地制備，從7-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲酸甲基酯H51(0.713g，2.3mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物(0.530g，1.88mmol，82％收率)。MS/ESI+282.3[MH]+，Rt＝0.42-0.44min(方法A)。
中間體K53：1-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]-4-甲基哌嗪-2-酮
步驟1：3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)吲嗪-2-甲酸K53a
將3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H55(0.694g，2.3mmol)溶于THF(11.4mL)和水(5.5mL)，添加氫氧化鋰(0.110g，4.6mmol)并將混合物在60℃下加熱24h。將有機溶劑在減壓下除去并將含水殘余物用1N HCl酸化并用DCM萃取；將合并的有機層用硫酸鈉干燥并蒸發。將水相蒸發并將殘余物用DCM和MeOH溶解并過濾；將濾液在減壓下蒸發。合并兩個級分，得到標題化合物，為棕色固體(0.598g)。MS/ESI+274.2[MH]+，Rt＝0.35min(方法A)。
步驟2：1-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]-4-甲基哌嗪-2-酮K53
將NaBH4(0.166g，4.4mmol)添加至個THF(4mL)中并將混合物在10℃下冷卻，之后逐滴添加BF3·Et2O(0.70mL，5.72mmol)。然后小心地添加3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)吲嗪-2-甲酸K53a(0.598g)的THF(2.6mL)溶液并將混合物在室溫下攪拌4h。將反應用甲醇淬滅；添加10％HCl水溶液并將混合物在60℃下加熱1h。將反應混合物的pH用50％的NaOH水溶液調節到中性并將揮發物在減壓下蒸發。將含水殘余物用DCM萃取并將合并的有機層用硫酸鈉干燥并真空濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.122g)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+260.2[MH]+，Rt＝0.31min(方法A)。
中間體K67：2-(羥基甲基)-3-(嗎啉-4-基甲基)吲嗪-1-甲腈
向在氮氣下在0℃下冷卻的1-氰基-3-(嗎啉-4-基甲基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H72(0.382g，1.21mmol)的THF(24mL)溶液中，逐滴添加LiAlH4 1M的THF溶液(0.30mL，0.3mmol)并將反應在0℃下攪拌30min。逐滴添加額外的LiAlH4 1M的THF溶液(0.12mL，0.12mmol)并將反應在0℃下攪拌30min。逐滴添加一部分新的LiAlH4 1M的THF溶液(0.12mL，0.12mmol)并將反應在0℃下攪拌另外的30min。將反應混合物通過分批加入硫酸鈉十水合物淬滅，將混合物過濾并將濾液真空濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.145g，0.53mmol，44％收率)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.18-8.23(m，1H)，7.62-7.67(m，1H)，7.08-7.13(m，1H)，6.80-6.86(m，1H)，4.88(s，2H)，3.85(s，2H)，3.66-3.72(m，4H)，2.47-2.53(m，4H)。
中間體L1：3-苯基吲嗪-2-甲醛
向(3-苯基吲嗪-2-基)甲醇K1(0.227g，1.016mmol)在DCM(5mL)中的溶液中，添加MnO2(1.061g，12.20mmol)并將混合物在50℃下加熱2h。將混合物用DCM稀釋并通過墊過濾。將濾液蒸發至干，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.189g，0.854mmol，85％收率)。MS/ESI+222.1[MH]+，Rt＝1.11min(方法A)。
中間體L2：3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K2(0.185g，0.825mmol)起始，并添加MnO2(1.08g，12.37mmol)并將混合物在50℃下加熱4h。將混合物用DCM稀釋并通過墊過濾。將濾液蒸發至干，得到標題化合物，為黃色固體(0.170g，0.765mmol，93％收率)。MS/ESI+223.1[MH]+，Rt＝0.84min(方法A)。
中間體L3：3-(2-氟苯基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K4(0.202g，0.837mmol)和MnO2(1.114g，12.813mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.169g，0.706mmol，84％收率)。MS/ESI+240.1[MH]+，Rt＝1.11min(方法A)。
中間體L4：3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲醇K6(0.200g，0.892mmol)和MnO2(0.930g，10.70mmol)起始，在50℃下2h，得到標題化合物，為黃色固體(0.168g，0.756mmol，85％收率)。MS/ESI+223.1[MH]+，Rt＝0.67min(方法A)。
中間體L5：3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K7(0.042g，0.186mmol)和MnO2(0.194g，2.232mmol)起始，在50℃下2h，得到標題化合物，為黃色固體(0.037g，0.165mmol，89％收率)。MS/ESI+224.0[MH]+，Rt＝0.79min(方法A)。
中間體L6：3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲醇K8(0.130g，0.580mmol)和MnO2(0.762g，8.70mmol)起始，在50℃下4h；后處理之后，將粗品通過快速色譜法在10g Biotage硅膠SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.100g，0.450mmol，78％收率)。MS/ESI+223.1[MH]+，Rt＝0.51min(方法A)。
中間體L7：6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K9(0.136g，0.57mmol)和MnO2(0.744g，8.56mmol)起始，在50℃下1h，得到標題化合物，為黃色固體(0.127g，0.53mmol，94％收率)。MS/ESI+237.1[MH]+，Rt＝0.93min(方法A)。
中間體L8：3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]甲醇K10(0.197g，0.674mmol)和MnO2(0.879g，10.11mmol)起始，在50℃下2h，得到標題化合物，為黃色固體(0.150g，0.517mmol，77％收率)。MS/ESI+291.3[MH]+，Rt＝1.12min(方法A)。
中間體L9：8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K11(0.120g，0.49mmol)和MnO2(0.521g，6.00mmol)起始，在50℃下3h，得到標題化合物，為黃色固體(0.103g，0.43mmol，85％收率)。MS/ESI+241.1[MH]+，Rt＝0.93min(方法A)。
中間體L10：1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛
在-78℃下并在氮氣氣氛下向草酰氯(0.033mL)在DCM(1.5mL)中的攪拌溶液中，緩慢添加DMSO(0.055mL)。將混合物攪拌10min，然后緩慢添加[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K12(0.061g，0.256mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液。將反應混合物攪拌0.5h，然后逐滴添加TEA(0.107mL，0.768mmol)并將混合物在-78℃下攪拌另外的2h。添加飽和碳酸氫鈉水溶液并將混合物用DCM萃取。將有機相用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并將溶劑在減壓下除去，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.046g，0.195mmol，76％收率)。MS/ESI+237.1[MH]+，Rt＝0.94min(方法A)。
中間體L11：3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}甲醇K13(0.364g，1.11mmol)和MnO2(1.447g，16.65mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.337g，1.03mmol，93％收率)。MS/ESI+327.2[MH]+，Rt＝0.54min(方法A)。
中間體L12：3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}甲醇K14(0.271g，0.84mmol)和MnO2(1.095g，12.6mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為深黃色油狀物(0.240g，0.75mmol，89％收率)。MS/ESI+321.2[MH]+，Rt＝0.54min(方法A)。
中間體L13：3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)甲醇K15(0.235g，0.83mmol)和MnO2(1.082g，12.45mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.196g，0.70mmol，84％收率)。MS/ESI+279.2[MH]+，Rt＝0.53min(方法A)。
中間體L14：3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)甲醇K16(0.285g，1.02mmol)和MnO2(1.330g，15.3mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.199g，0.71mmol，70％收率)。MS/ESI+279.2[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體L15：3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]甲醇K17(0.078g，0.34mmol)和MnO2(0.440g，5.06mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為黃色固體(0.057g，0.25mmol，74％收率)。MS/ESI+228.1[MH]+，Rt＝0.89min(方法A)。
中間體L16：4-(2-甲酰基吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與中間體L1類似地制備，從4-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯K18(0.193g，0.58mmol)和MnO2(0.888g，10.21mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為黃色固體(0.135g，0.41mmol，71％收率)。MS/ESI+327.3[MH]+，Rt＝1.17min(方法A)。
中間體L17：3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]甲醇K19(0.143g，0.62mmol)和MnO2(0.808g，9.3mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為橙色固體(0.097g，0.42mmol，68％收率)。MS/ESI+229.1[MH]+，Rt＝0.83min(方法A)。
中間體L18：3-(2-氧代吡咯烷-1-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從1-[2-(羥基甲基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮K20(0.057g，0.25mmol)和MnO2(0.326g，3.75mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.036g，0.16mmol，63％收率)。MS/ESI+229.1[MH]+，Rt＝0.70min(方法A)。
中間體L19：3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從{[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]甲醇K21(理論值1.02mmol)和MnO2(1.330g，15.3mmol)起始，在50℃下4h。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(0.158g，0.74mmol，73％)。MS/ESI+212.1[MH]+，Rt＝1.22min(方法A)。
中間體L20：3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲醛
與中間體L1類似地制備，從3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]甲醇K22(0.392g，1.09mmol)和MnO2(1.09g，16.35mmol)起始，在50℃下4h，得到標題化合物，為深黃色油狀物(0.332g，0.93mmol，86％收率)。MS/ESI+356.1[MH]+，Rt＝1.66min(方法A)。
中間體L21：7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲醛
與中間體L1類似地制備，從[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲醇K28(0.078g，0.35mmol)和MnO2(0.456g，5.25mmol)起始，在50℃下1h，得到標題化合物，為黃色固體(0.072g，0.32mmol，92％收率)。MS/ESI+224.2[MH]+，Rt＝0.63min(方法A)。
中間體L41：2-甲酰基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-1-甲腈
向在氮氣下在-78℃下冷卻的1-氰基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲酸乙基酯H49(0.100g，0.34mmol)在DCM(3.5mL)中的溶液中，經10min逐滴添加DIBALH 1M的甲苯(1.02mL，1.02mmol)溶液，并將反應在-78℃下攪拌10min。將反應混合物通過分批加入硫酸鈉十水合物淬滅，將混合物通過C鹽墊過濾并將有機相真空濃縮。將粗品混合物溶于DCM(3ml)，添加MnO2(0.295g，3.4mmol)并將反應在50℃下加熱3h。將混合物用DCM稀釋并通過C鹽墊過濾。將濾液蒸發至干并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM:EtOAc＝98:2至95:5)，得到標題化合物，為黃色固體(0.033g，0.13mmol，40％收率)。MS/ESI+248.2[MH]+，Rt＝0.83min(方法A)。
中間體M1：1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-醇
向冷卻至0℃的3-苯基吲嗪-2-甲醛L1(0.188g，0.850mmol)在THF(8mL)中的溶液中，逐滴添加3M MeMgBr在Et2O(0.420mL，1.27mmol)中的溶液并將反應在該溫度下攪拌30min。將混合物用1ml MeOH淬滅，然后用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl水溶液和水的混合物洗滌。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑蒸發并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至60:40)，得到標題化合物，為綠棕色油狀物(0.190g，0.80mmol，94％收率)。MS/ESI+238.1[MH]+，Rt＝1.07min(方法A)。
中間體M2：1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛L2(0.990g，4.45mmol)起始，在0℃下攪拌30min并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝65:35)，得到標題化合物，為黃色油狀物(1.02g，4.28mmol，96％收率)。MS/ESI+239.2[MH]+，Rt＝0.64min(方法A)。
中間體M3：1-[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(2-氟苯基)吲嗪-2-甲醛L3(0.169g，0.706mmol)起始，在0℃下攪拌30min并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至60:40)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.171g，0.669mmol，95％收率)。MS/ESI+256.2[MH]+，Rt＝1.09min(方法A)。
中間體M4：1-[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-甲醛L4(0.167g，0.751mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝50:50至100％EtOAc)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.179g，0.751mmol，定量收率)。MS/ESI+239.1[MH]+，Rt＝0.50min(方法A)。
中間體M5：1-[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-甲醛L5(0.037g，0.166mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝30:70)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.033g，0.138mmol，83％收率)。MS/ESI+240.1[MH]+，Rt＝0.78min(方法A)。
中間體M6：1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲醛L6(0.100g，0.450mmol)起始，在0℃下攪拌1h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.100g，0.420mmol，93％收率)。MS/ESI+239.2[MH]+，Rt＝0.43min(方法A)。
中間體M7：1-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛L7(0.127g，0.53mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至70:30)，得到標題化合物，為黃色固體(0.092g，0.36mmol，70％收率)。MS/ESI+253.1[MH]+，Rt＝0.72min(方法A)。
中間體M8：1-[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-甲醛L8(0.150g，0.517mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.145g，0.473mmol，92％收率)。MS/ESI+307.3[MH]+，Rt＝1.06min(方法A)。
中間體M9：1-[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛L9(0.103g，0.43mmol)起始，在0℃下攪拌10min，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.094g，0.37mmol，85％收率)。MS/ESI+257.1[MH]+，Rt＝0.78min(方法A)。
中間體M10：1-[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲醛L10(0.071g，0.30mmol)起始，在0℃下攪拌30min，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.052g，0.21mmol，68％收率)。MS/ESI+253.1[MH]+，Rt＝0.63min(方法A)。
中間體M11：1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-甲醛L11(0.337g，1.03mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.324g，0.94mmol，92％收率)。MS/ESI+343.3[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體M12：1-{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-甲醛L12(0.240g，0.75mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.203g，0.60mmol，80％收率)。MS/ESI+337.3[MH]+，Rt＝0.54min(方法A)。
中間體M13：1-(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲醛L13(0.196g，0.70mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.186g，0.63mmol，90％收率)。MS/ESI+295.2[MH]+，Rt＝0.53min(方法A)。
中間體M14：1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-甲醛L14(0.199g，0.71mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.197g，0.67mmol，94％收率)。MS/ESI+295.3[MH]+，Rt＝0.56min(方法A)。
中間體M15：1-[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-甲醛L15(0.057g，0.25mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.043g，0.177mmol，71％收率)。MS/ESI+244.2[MH]+，Rt＝0.85min(方法A)。
中間體M16：4-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與中間體M1類似地制備，從4-(2-甲酰基吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯L16(0.134g，0.41mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.100g，0.29mmol，71％)。MS/ESI+343.3[MH]+，Rt＝1.13min(方法A)。
中間體M17：1-[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-甲醛L17(0.097g，0.42mmol)起始，在0℃下攪拌1h，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.104g，0.42mmol，定量收率)。MS/ESI+245.1[MH]+，Rt＝0.81min(方法A)。
中間體M18：1-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮
與中間體M1類似地制備，從3-(2-氧代吡咯烷-1-基)吲嗪-2-甲醛L18(0.036g，0.15mmol)起始，在0℃下攪拌1h；添加額外的3M MeMgBr在Et2O(0.08mL，0.24mmol)中的溶液，并將反應混合物在0℃下攪拌另外的5h。后處理之后，將殘余物通過快速色譜法在硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝100:0至0:100)，得到標題化合物，為深色油狀物(0.028g，0.11mmol，76％收率)。MS/ESI+244.9[MH]+，Rt＝0.65min(方法A)。
中間體M19：1-[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲醛L19(0.156g，0.74mmol)起始，并未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.168g，0.74mmol，定量收率)。MS/ESI+228.2[MH]+，Rt＝1.15min(方法A)。
中間體M20：1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-甲醛L20(0.330g，0.93mmol)起始，在0℃下攪拌4h，并未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物(0.328g，0.88mmol，95％收率)。MS/ESI+372.1[MH]+，Rt＝1.60min(方法A)。
中間體M21：1-[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]乙-1-醇
與中間體M1類似地制備，從7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-甲醛L21(0.072g，0.32mmol)起始，在0℃下攪拌15min，并通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.060g，0.25mmol，78％收率)。MS/ESI+240.0[MH]+，Rt＝0.47min(方法A)。
中間體M40：1-{3-[5-(嗎啉-4-羰基)吡啶-2-基]吲嗪-2-基}乙-1-醇
向冷卻至0℃的1-{3-[5-(嗎啉-4-羰基)吡啶-2-基]吲嗪-2-基}乙-1-酮I3(0.140g，0.401mmol)在MeOH(4.5mL)中的溶液中，以兩部分添加NaBH4(0.030g，0.802mmol)。添加完成后，將溶液在0℃下攪拌30min，然后在減壓下濃縮。將殘余物用水稀釋并用EtOAc萃取。將有機層用Na2SO4干燥并將溶劑除去，得到標題化合物，將其未經純化而使用(0.140g，0.398mmol，99％收率)。MS/ESI+352.3[MH]+，Rt＝0.76min(方法A)。
中間體N1：2-(疊氮基甲基)-3-苯基吲嗪
在氮氣下向(3-苯基吲嗪-2-基)甲醇K1(0.150g，0.672mmol)在THF(10mL)中的溶液中，添加DPPA(0.289mL，1.344mmol)，隨后添加DBU(0.201mL，1.344mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。在真空下將溶劑除去并將殘余物分配在EtOAc和水之間。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥，過濾并蒸發。
在不同的燒瓶中，在氮氣下向(3-苯基吲嗪-2-基)甲醇K1(0.050g，0.224mmol)在THF(4mL)中的溶液中，添加DPPA(0.096mL，0.448mmol)隨后添加DBU(0.067mL，0.448mmol)并將反應在室溫下攪拌過夜。將混合物用EtOAc稀釋，用水和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾并蒸發。
將兩個批料合并并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.166g，0.668mmol，75％收率)。MS/ESI+249.1[MH]+，Rt＝1.33min(方法A)。
中間體N2：2-(疊氮基甲基)-3-(吡啶-2-基)吲嗪
在氮氣下向[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K2(0.245g，1.09mmol)在THF(10mL)中的溶液中，添加DPPA(0.471mL，2.18mmol)，隨后在0℃下添加DBU(0.326mL，2.18mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。將溶劑在真空下除去并將殘余物分配在EtOAc和水之間。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.272g，1.09mmol，定量收率)。MS/ESI+250.2[MH]+，Rt＝1.07min(方法A)。
中間體N3：2-(疊氮基甲基)-3-(3-氟苯基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K3(0.250g，1.04mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.250g，0.939mmol，90％收率)。MS/ESI+267.2[MH]+，Rt＝1.32min(方法A)。
中間體N4：2-(疊氮基甲基)-3-(2-氟苯基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K4(0.293g，1.21mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.279g，1.05mmol，86％收率)。MS/ESI+267.1[MH]+，Rt＝1.28min(方法A)。
中間體N5：2-(疊氮基甲基)-3-(2-甲基苯基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇K5(0.278g，1.17mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.262g，1.00mmol，85％收率)。MS/ESI+263.2[MH]+，Rt＝1.37min(方法A)。
中間體N6：2-(疊氮基甲基)-1-苯基吲嗪
與中間體N2類似地制備，從(1-苯基吲嗪-2-基)甲醇K24(0.180g，0.80mmol)起始，攪拌1.5h，并未經純化而使用粗品。MS/ESI+249.1[MH]+，Rt＝1.29min(方法A)。
中間體N7：2-(疊氮基甲基)-1-(3-氟苯基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K25(0.165g，0.68mmol)起始，攪拌1.5h，并未經純化而使用粗品。MS/ESI+267.1[MH]+，Rt＝1.30min(方法A)。
中間體N8：2-(疊氮基甲基)-1-(2-甲基苯基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇K26(0.100g，0.42mmol)起始，攪拌1.5h，并未經純化而使用粗品。MS/ESI+263.1[MH]+，Rt＝1.34min(方法A)。
中間體N9：2-(疊氮基甲基)-1-(吡啶-2-基)吲嗪
與中間體N2類似地制備，從[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K27(0.200g，0.90mmol)起始，攪拌1.5h，并未經純化而使用粗品。MS/ESI+250.1[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體O1：2-(1-疊氮基乙基)-3-苯基吲嗪
在氮氣下向1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-醇M1(0.078g，0.329mmol)在THF(3mL)中的溶液中，添加DPPA(0.142mL，0.657mmol)，隨后添加DBU(0.098mL，0.657mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。將溶劑在減壓下除去并將殘余物分配在EtOAc和水之間。將水相用EtOAc萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝98:2)，得到標題化合物，為淡綠色油狀物(0.050g，0.191mmol，56％收率)。MS/ESI+263.1[MH]+，Rt＝1.38min(方法A)。
中間體O2：2-(1-疊氮基乙基)-3-(吡啶-2-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M2(0.085g，0.357mmol)起始，并將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.085g，0.323mmol，90％收率)。MS/ESI+264.1[MH]+，Rt＝1.16min(方法A)。
中間體O3：2-(1-疊氮基乙基)-3-(吡啶-3-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M4(0.175g，0.734mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至60:40)，得到標題化合物，為淡綠色油狀物(0.141g，0.535mmol，73％收率)。MS/ESI+264.1[MH]+，Rt＝0.97min(方法A)。
中間體O4：2-(1-疊氮基乙基)-3-(吡嗪-2-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M5(0.033g，0.138mmol)起始；在室溫下攪拌過夜之后，需要添加另一當量的DPPA和DBU，并繼續攪拌額外的24h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至80:20)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.030g，0.114mmol，82％收率)。MS/ESI+265.1[MH]+，Rt＝1.11min(方法A)。
中間體O5：2-(1-疊氮基乙基)-8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M9(0.094g，0.37mmol)起始，在室溫下攪拌6h并未經任何額外的純化而使用粗品標題化合物。MS/ESI+282.1[MH]+，Rt＝1.23min(方法A)。
中間體O6：2-(1-疊氮基乙基)-3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M15(0.043g，0.177mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.047g，0.177mmol，定量收率)。MS/ESI+269.2[MH]+，Rt＝1.22min(方法A)。
中間體O7：4-[2-(1-疊氮基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與中間體O1類似地制備，從4-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯M16(0.099g，0.29mmol)起始；在室溫下攪拌過夜之后，添加額外0.6當量的DPPA和0.6當量的DBU并繼續攪拌另外的24h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.106g，0.29mmol，定量收率)。MS/ESI+368.3[MH]+，Rt＝1.43min(方法A)。
中間體O8：2-(1-疊氮基乙基)-3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M19(0.168g，0.74mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.130g，0.51mmol，70％收率)。MS/ESI+253.0[MH]+，Rt＝1.46min(方法A)。
中間體O9：2-(1-疊氮基乙基)-3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪
與中間體O1類似地制備，從1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M20(0.328g，0.88mmol)起始，并未經純化而使用(0.349g，0.88mmol，定量收率)。MS/ESI+397.2[MH]+，Rt＝1.78min(方法A)。
中間體P1：(3-苯基吲嗪-2-基)甲胺
在氮氣下向2-(疊氮基甲基)-3-苯基吲嗪N1(0.166g，0.668mmol)在THF(10mL)中的溶液中，添加PPh3(0.350g，1.336mmol)并將混合物在室溫下攪拌2h。添加額外的PPh3(0.088g，0.334mmol)并將反應在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在室溫下攪拌3h。將溶劑在減壓下除去并將殘余物溶于MeOH并在SCX柱上純化(2g)，用MeOH洗滌。將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.148g，0.665mmol，定量收率)。MS/ESI+223.2[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體P2：[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺
在氮氣下向2-(疊氮基甲基)-3-(吡啶-2-基)吲嗪N2(0.272g，1.09mmol)在THF中(10mL)的溶液中，添加PPh3(0.572g，2.18mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在室溫下攪拌3h。將溶劑在減壓下除去并將殘余物溶于MeOH并在scx柱(5g)上純化，用MeOH洗滌。將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.204g，0.914mmol，84％收率)。MS/ESI+224.2[MH]+，Rt＝0.42min(方法A)。
中間體P3：[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從2-(疊氮基甲基)-3-(3-氟苯基)吲嗪N3(0.248g，0.931mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.217g，0.903mmol，97％收率)。MS/ESI+241.1[MH]+，Rt＝0.58min(方法A)。
中間體P4：[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從2-(疊氮基甲基)-3-(2-氟苯基)吲嗪N4(0.277g，1.04mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.250g，1.04mmol，定量收率)。MS/ESI+241.1[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體P5：[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從起始，2-(疊氮基甲基)-3-(2-甲基苯基)吲嗪N5(0.260g，0.991mmol)起始，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.226g，0.956mmol，96％收率)。MS/ESI+237.0[MH]+，Rt＝0.70min(方法B)。
中間體P6：(1-苯基吲嗪-2-基)甲胺
與中間體P2類似地制備，從粗2-(疊氮基甲基)-1-苯基吲嗪N6(0.80mmol)起始，得到標題化合物，為藍色油狀物(0.170g，0.76mmol，96％收率)。MS/ESI+223.1[MH]+，Rt＝0.56min(方法A)。
中間體P7：[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從粗2-(疊氮基甲基)-1-(3-氟苯基)吲嗪N7(0.68mmol)起始，得到標題化合物，為綠色油狀物(0.124g，0.51mmol，75％收率)。MS/ESI+241.1[MH]+，Rt＝0.59min(方法A)。
中間體P8：[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從粗2-(疊氮基甲基)-1-(2-甲基苯基)吲嗪N8(0.42mmol)起始，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.093g，0.39mmol，93％收率)。MS/ESI+237.1[MH]+，Rt＝0.62min(方法A)。
中間體P9：[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺
與中間體P2類似地制備，從2-(疊氮基甲基)-1-(吡啶-2-基)吲嗪N9(0.90mmol)起始，得到標題化合物(0.088g，0.39mmol，44％收率)。MS/ESI+224.1[MH]+，Rt＝0.40min(方法A)。
中間體P10：吲嗪-2-基甲胺
在-25℃下向吲嗪-2-甲腈B5(0.241g，1.7mmol)在無水THF(17mL)中的溶液中，添加1M LiAlH4在THF中(2.55mL，2.55mmol)的溶液并將得到的溶液在相同溫度下攪拌2h。將反應通過逐滴添加水(97μl)、隨后15％NaOH水溶液(97μl)和水(291μl)淬滅并逐漸升溫至室溫。將混合物過濾并將濾液在減壓下濃縮；將殘余物與上述粗批料合并并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1.0)，得到標題化合物，為淺粉色固體(0.139g，0.95mmol，46％收率)。MS/ESI+147.0[MH]+，Rt＝0.27min(方法A)。
中間體Q1：1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-胺
在氮氣下向2-(1-疊氮基乙基)-3-苯基吲嗪O1(0.050g，1.191mmol)在THF中(3mL)中的溶液中，添加PPh3(0.100g，0.382mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在室溫下攪拌1h。添加額外的PPh3(0.050g，0.191mmol)并將混合物在室溫下攪拌5h，然后在50℃下加熱1h。將溶劑在真空下除去并將殘余物溶于MeOH，并在SCX柱(2g)上純化，用MeOH洗滌。將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.041g，0.174mmol，91％收率)。MS/ESI+237.1[MH]+，Rt＝0.60min(方法A)。
中間體Q2：1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
向在0℃下冷卻的3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈J1(0.800g，3.6mmol)在THF中(10.8mL)的溶液中，添加3M MeMgBr在Et2O(4.25mL，12.7mmol)中的溶液，并將所得混合物在微波輻射下在100℃下加熱45min。在冷卻至室溫后，將混合物小心添加到新鮮制備的NaBH4(0.272g，7.2mmol)在MeOH(18mL)中的溶液中，并將反應在室溫下攪拌30min。將混合物蒸發至干。
在不同的燒瓶中，向在0℃下冷卻的3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈J1(0.100g，0.45mmol)在THF(1.35mL)中的溶液中，添加3M MeMgBr在Et2O(0.525mL，1.575mmol)中的溶液，并將所得混合物在微波輻射下在100℃下加熱45min。在冷卻至室溫后，將混合物小心添加到新鮮制備的NaBH4(0.034g，0.9mmol)在MeOH(2.25mL)中的溶液中并將反應在室溫下攪拌30min。將混合物蒸發至干。
將兩個批料合并并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98.5:1.5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.779g，3.3mmol，81％收率)。MS/ESI+238.1[MH]+，Rt＝0.47min(方法A)。
中間體Q3：1-[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
在氮氣下向2-(1-疊氮基乙基)-3-(吡啶-3-基)吲嗪O3(0.140g，0.532mmol)在THF(5mL)中的溶液中，添加PPh3(0.279g，1.06mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加額外的PPh3(0.140g，0.532mmol)并將混合物在室溫下攪拌1h。添加水并將反應在50℃下加熱1h。將溶劑在真空下除去并將殘余物溶于DCM/MeOH并在SXC柱(5g)上純化，用MeOH洗滌。將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物，為棕色油狀物，將其未經任何進一步的純化而用于下一步(0.130g)。MS/ESI+238.1[MH]+，Rt＝0.37min(方法A)。
中間體Q4：1-[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
在氮氣下向2-(1-疊氮基乙基)-3-(吡嗪-2-基)吲嗪O4(0.030g，0.114mmol)在THF(2.5mL)中的溶液中，添加PPh3(0.060g，0.227mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在50℃下加熱2h。將溶劑在真空下除去并將殘余物溶于DCM/MeOH并在SCX柱(1g)上純化，用MeOH洗滌。將產物用1M NH3在MeOH中的溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物，為棕色油狀物，將其未經任何額外的純化而使用(0.030g)。MS/ESI+239.1[MH]+，Rt＝0.43min(方法A)。
中間體Q5：1-[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
在氮氣下向2-(1-疊氮基乙基)-8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪O5(0.104g，0.37mmol)在THF(4.8mL)中的溶液中，添加PPh3(0.194g，0.74mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在室溫下攪拌2h。將溶劑在真空下除去并將殘余物溶于MeOH并裝載到SCX柱(5g)上，用MeOH洗滌。將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫并在減壓下除去揮發物，得到標題化合物(0.084g，0.32mmol，88％收率)，將其未經進一步純化而使用。MS/ESI+256.1[MH]+，Rt＝0.51min(方法A)。
中間體Q6：1-[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
與化合物Q4類似地制備，從2-(1-疊氮基乙基)-3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪O6(0.047g，0.177mmol)起始，并在添加水之后在50℃下加熱1h，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.033g，0.137mmol，收率78％)。MS/ESI+256.1[MH-NH3]+，Rt＝0.49min(方法A)。
中間體Q7：4-[2-(1-氨基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與化合物Q4類似地制備，從4-[2-(1-疊氮基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯P7(0.106g，0.29mmol)起始，并在添加水之后在50℃下加熱1h，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.041g，0.12mmol，41％收率)。MS/ESI+325.1[MH-NH3]+，Rt＝0.70min(方法A)。
中間體Q8：1-[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
在氮氣下向2-(1-疊氮基乙基)-3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪O8(0.129g，0.51mmol)在THF(4.8mL)中的溶液中，添加PPh3(0.267g，1.02mmol)并將混合物在室溫下攪拌過夜。添加水并將反應在50℃下加熱1h。將溶劑在減壓下除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:AcOEt＝95:5)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+210.2[MH-NH3]+，Rt＝0.65min(方法A)。
中間體Q9：1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
與化合物Q8類似地制備，從2-(1-疊氮基乙基)-3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪O9(0.349g，0.88mmol)起始，在添加水之后在50℃下加熱5h。將粗殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM)，隨后通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至50:50)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.089g，0.24mmol，27％收率)。MS/ESI+371.4[MH]+，Rt＝1.02min(方法A)。
中間體Q10：1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
向在0℃下冷卻的3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-甲腈J2(0.094mg，0.424mmol)在THF(2mL)中的混懸液中，逐滴添加3M MeMgBr的Et2O溶液(0.495mL，1.485mmol)并將所得混合物在MW輻射下在100℃下加熱1h。在冷卻至室溫后將混合物添加至新鮮制備的在0℃下冷卻的NaBH4(0.032g，0.848mmol)在MeOH中的混懸液(2mL)中并將反應在相同溫度下攪拌30min。將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.064g，0.270mmol，64％收率)。MS/ESI+238.1[[MH]+，Rt＝0.28min(方法A)。
中間體Q11：1-[3-(噻吩-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
向在0℃下冷卻的3-(噻吩-2-基)吲嗪-2-甲腈J3(0.072)在THF(0.96mL)中的溶液中，添加3M MeMgBr的Et2O溶液(0.37mL，1.12mmol)并將所得混合物在微波輻射下在100℃下加熱1h。在冷卻至室溫后將所得混合物小心地添加到新鮮制備的NaBH4(0.0242g，0.64mmol)在MeOH(1.6ml)中的溶液中并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。將溶劑蒸發并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至50:50)，得到標題化合物，將其未經進一步純化而用于下一步(0.058g)。MS/ESI+243.0[MH]+，Rt＝0.58min(方法A)。
中間體Q12：1-[3-(噻吩-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
與中間體Q11類似地制備，從3-(噻吩-3-基)吲嗪-2-甲腈J4(0.095g)起始，并在添加至NaBH4溶液之后在室溫下攪拌15min。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，將其未經進一步純化而用于下一步(0.067g)。MS/ESI+243。[MH]+，Rt＝0.58min(方法A)。
中間體Q13：1-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
與中間體Q11類似地制備，從5-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈J5(0.083g，0.35mmol)起始。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.045g，0.18mmol，51％收率)。MS/ESI+252.1[MH]+，Rt＝0.43min(方法A)。
中間體Q14：1-[8-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺
與中間體Q11類似地制備，從8-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈J6(0.083g，0.35mmol)起始。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.051g，0.20mmol，58％收率)。MS/ESI+252.1[MH]+，Rt＝0.55min(方法A)。
中間體Q15：1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]丙-1-胺
向在0℃下冷卻的3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-甲腈J1(0.150g，0.68mmol)在THF(2.04mL)中的溶液中，添加1M EtMgBr的THF溶液(2.39mL，2.39mmol)并將所得混合物在MW輻射下在100℃下加熱1h。添加額外的1M EtMgBr的THF溶液(1.5mL，1.5mmol)并將所得混合物在微波輻射下在100℃下加熱45min。在室溫下將所得混合物小心地添加到新鮮制備的NaBH4(0.051g，1.36mmol)在MeOH中(3.4mL)中的溶液中。在攪拌1h之后，將混合物蒸發至干并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1)，得到標題化合物，為橙色油狀物(0.102g，0.40mmol，60％收率)。MS/ESI+252.1[MH]+，Rt＝0.53min(方法A)。
中間體AA1：3-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇
將6-氯-5-碘嘧啶-4-胺(根據在Tetrahedron Letters，2010，51，27，3597-3598中所報道的方法來制備，0.200g，0.78mmol)，3-三甲基甲硅烷氧基-1-丙炔(0.500g，3.94mmol)，CuI(0.052g，0.273mmol)和二乙基胺(0.95mL，8.57mmol)在DMF(3.3mL)中的混合物脫氣，然后添加Pd(PPh3)2Cl2(0.097g，0.14mmol)。將反應在室溫下攪拌2h，然后用EtOAc稀釋并通過墊過濾。將濾液用水和鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝100:0至0:100)，得到標題化合物，為黃色固體(0.078g，0.42mmol，54％收率)。MS/ESI+184.0[MH]+，Rt＝0.46min(方法A)。
中間體AA2：6-氯-5-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)嘧啶-4-胺
在室溫下向3-(4-氨基-6-氯嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇AA1(0.078g，0.42mmol)和咪唑(0.071g，1.05mmol)在DMF(0.5mL)中的攪拌混合物中，添加三異丙基甲硅烷基氯(0.083g，0.43mmol)并將反應攪拌過夜。將混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl溶液洗滌；將有機相用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為白色固體(0.075g，0.22mmol，53％收率)。MS/ESI+340.2[MH]+，Rt＝1.45min(方法A)。
中間體AA3：4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酸
在室溫下向可商購的4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲醛(0.500g，3.17mmol)在THF(10mL)中的溶液中，添加氨基磺酸(0.493g，5.07mmol)并將混合物冷卻至0℃。添加氯化鈉(0.860g，9.51mmol)水溶液(5mL)并將反應混合物升溫至室溫并攪拌30min。然后將混合物真空濃縮并將粗品在Biotage C18柱上純化(H2O:MeOH＝99:1至1:99)，得到標題化合物，為白色固體(0.400g，2.3mmol，73％收率)。MS/ESI+173.9[MH]+，Rt＝0.39min(方法A)。
中間體AA4：4-氨基-6-氯-N-甲基嘧啶-5-甲酰胺
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酸AA3J3(0.030g，0.173mmol)在DCM(2mL)中的溶液中，添加SOCl2(0.251mL，3.457mmol)并將混合物加熱至回流1h。添加額外的SOCl2(0.251mL，3.457mmol)并將混合物加熱至回流另外的30min。在真空下將揮發物除去并將殘余物懸浮于DCM(3mL)。添加2M MeNH2的THF溶液(0.260mL，0.519mmol)并將混合物在室溫下攪拌15min。將溶劑在減壓下除去并將粗品未經任何額外的純化而用于下一步。MS/ESI+187.0[MH]+，Rt＝0.29min(方法A)。
中間體AA5：4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酰胺
向4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酸AA3R3(0.025g，0.144mmol)在DCM(2mL)中的混懸液中，添加SOCl2(0.104mL，1.44mmol)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。添加額外的SOCl2(0.104mL，1.44mmol)并將混合物加熱至回流1h。將揮發物除去在真空下并將殘余物懸浮于DCM(3mL)；添加30％濃氫氧化銨水溶液(0.200mL，1.54mmol)并將混合物在室溫下攪拌1h。在真空下將揮發物除去并且未經任何額外的后處理和純化而使用粗固體，為與一些起始材料的混合物。MS/ESI+173.0[MH]+，Rt＝0.24min(方法A)。
]+，Rt＝0.24min(方法A)。
中間體AA6：3-{4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
將3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.00g，3.83mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.896g，5.7mmol)，PdCl2(dppf)(0.700g，0.95mmol)和K3PO4(1.625g，7.66mmol)溶于DMF(10ml)和水(6mL)的混合物中并將反應在120℃下加熱20h。將混合物用EtOAc和2M HCl稀釋并將所得混懸液過濾。分離各相并將有機層用2M HCl萃取2次。將合并的水層用飽和Na2CO3水溶液堿化至pH 10并用EtOAc萃取。將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑蒸發，得到標題化合物，為粗品(收率認為是定量的)，將其未經任何額外的純化而用于下一步。MS/ESI+246.2[MH]+，Rt＝0.40min(方法A)。
中間體AA7：3-{3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-氟苯基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
向粗3-{4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚AA6(理論值3.83mmol)在DMF(13ml)中的溶液中，添加咪唑(1.30g，19.15mmol)和叔丁基(氯)二甲基硅烷(2.88g，19.15mmol)并將混合物在室溫下攪拌1h。將混合物用EtOAc稀釋并用飽和NH4Cl溶液洗滌，然后用鹽水洗滌。將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑在減壓下除去選自將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(環己烷:EtOAc＝50:50至20：80)，得到標題化合物，為白色固體(0.220g，0.61mmol)。MS/ESI+360.3[MH]+，Rt＝1.07min(方法A)。
中間體S1：N-(3-溴-5-氟苯基-甲磺酰胺
將可商購的3-溴-5-氟苯胺(0.500g，2.64mmol)在吡啶(9.4mL)中的溶液冷卻至0℃并逐滴添加甲磺酰氯(0.265mL，3.43mmol)；將所得溶液升溫至室溫并攪拌2h。將溶劑在減壓下除去并將粗品分配在EtOAc和1N HCl水溶液之間。將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑除去；將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為白色固體(0.543g，2.03mmol，77％收率)。MS/ESI+可檢測的[MH]+，Rt＝0.91min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.29(s，1H)，7.23-7.30(m，1H)，7.19(s，1H)，6.99-7.06(m，1H)，3.12(s，3H)。
中間體S2：3-溴-5-氟苯-1-磺酰氯
向在冰浴中冷卻的3-溴-5-氟苯胺(0.500g，2.63mmol)在冰醋酸(0.70mL)中的溶液中，添加濃鹽酸(2.15mL)。然后，緩慢添加亞硝酸鈉(0.199g，2.89mmol)在水(0.45mL)中的溶液，保持溫度在0℃左右。添加完成之后，將反應混合物進一步攪拌20min。在室溫下將所得的溶液緩慢添加至新鮮制備的～40％亞硫酸氫鈉誰溶液(1.915mL，7.36mmol)，氯化銅(0.052g，0.526mmol)，冰醋酸(5.0mL)和濃鹽酸(1mL)的混合物中，并將反應在室溫下攪拌2.5h。然后將混合物冷卻至0℃，添加額外的亞硝酸鈉(0.5eq)并在室溫下繼續攪拌1h。將混合物用EtOAc萃取并將有機層用無水硫酸鈉干燥，然后在減壓下濃縮，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.450g，1.65mmol，63％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.54-7.58(m，1H)，7.50-7.54(m，1H)，7.30-7.36(m，1H)。
中間體S3：3-溴-5-氟苯-1-磺酰胺
將30％NH4OH水溶液(17mL)添加至3-溴-5-氟苯-1-磺酰氯S2(0.450g，1.65mmol)在二噁烷(14mL)中的溶液中，并在室溫下使反應進行過夜。添加水并將混合物用EtOAc萃取2次并DCM萃取2次。將合并的有機層用硫酸鈉干燥并將溶劑蒸發，得到標題化合物，為橙色固體(0.320g，1.26，76％收率)，將其未經任何進一步純化而是用。MS/ESI-252.0-254.0[M-H]-，Rt＝0.76min。(254.1-256.1)(方法A)。
中間體T1：N-[3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲磺酰胺
將N-(3-溴-5-氟苯基-甲磺酰胺S1(0.100g，0.37mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.190g，0.74mmol)，KOAc(0.145g，1.48mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.027g，0.037mmol)在二噁烷(3.7mL)中的混合物在90℃攪拌2h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到不純的產物。
在不同的燒瓶中，將N-(3-溴-5-氟苯基-甲磺酰胺S1(0.315g，1.18mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.599g，2.36mmol)，乙酸鉀(0.463g，4.72mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.086g，0.118mmol)在無水二噁烷(11.8mL)中的混合物在90℃下攪拌1h。將溶劑在減壓下除去并將殘余物與上述批次中獲得的不純產物合并。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物(0.438g，1.39mmol，89％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.01(s，1H)，7.33(d，J＝1.5Hz，1H)，7.11-7.18(m，1H)，7.04-7.10(m，1H)，3.02(s，3H)，1.29(s，12H)。
中間體T2：3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯-1-磺酰胺
將3-溴-5-氟苯-1-磺酰胺S3(0.050g，0.197mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.100g，0.394mmol)，KOAc(0.077g，0.788mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(14.4mg，0.0197mmol)在二噁烷中(2mL)的混合物在90℃下攪拌3h。然后將溶劑在減壓下除去并將殘余物通過快速色譜法在10g Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到不純的產物。
在不同的燒瓶中，將3-溴-5-氟苯-1-磺酰胺S3(0.170g，0.669mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.340g，1.338mmol)，KOAc(0.263g，2.676mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.049g，0.0669mmol)在無水二噁烷(7mL)中的混合物在90℃下攪拌1.5h。然后將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在25g Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝90:10)，得到不純的產物。將兩個批料合并并通過快速色譜法在50g Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝75:25)，得到標題化合物(0.070g，0.232mmol，27％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.98(s，1H)，7.69-7.75(m，1H)，7.56-7.62(m，1H)，7.52(s，2H)，1.34(s，12H)。
中間體T3：3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯胺
將3-溴-5-氟苯胺(0.200g，1.05mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.535g，2.11mmol)，KOAc(0.361g，3.68mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.077g，0.105mmol)在二噁烷中(10mL)中的混合物用N2吹掃并在密封管中在90℃下加熱過夜。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物(0.270g)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+238.2[MH]+，Rt＝1.02min(方法A)。
中間體T4：3-羥基-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)芐腈
向微波小瓶中裝入3-氯-5-羥基芐腈(0.300g，1.95mmol)，Pd2(dba)3(0.055g，0.06mmol)，三環己基膦(0.066g，0.234mmol)，KOAc(0.288g，2.93mmol)和雙(頻哪醇合)二硼(0.546g，2.15mmol)，添加DME(3mL)并將混合物用N2吹掃并在微波輻射下在150℃下加熱1h。冷卻至室溫后，將混合物用水稀釋并用Et2O萃取。將合并的有機層真空濃縮并通過快速色譜法在50g硅膠Biotage柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)，得到標題化合物，為白色固體(0.340g，1.39mmol，71％收率)。將該混合物未經任何額外的純化而使用。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.23(s，1H)，7.36-7.40(m，2H)，7.24-7.28(m，1H)，1.31(s，12H)。
中間體T5：3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)芐腈
將3-溴-5-氟芐腈(0.300g，1.5mmol)，雙(頻哪醇合)二硼(0.762g，3mmol)，KOAc(0.589g，6.0mmol)和[1,1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.110g，0.15mmol)在二噁烷(15mL)中的混合物在90℃下攪拌2h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠50g柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物(0.360g，1.46mmol，97％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.98-8.03(m，1H)，7.81-7.85(m，1H)，7.68-7.73(M，1H)，1.33(s，12H)。
中間體T6：5-[3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1H-1,2,3,4-四唑
向3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)芐腈T5(0.200g，0.809mmol)在DME(1.5mL)中的溶液中，添加疊氮基三甲基硅烷(0.186g，1.618mmol)和二丁基氧化錫(0.020g，0.0809mmol)并將反應在MW輻射下在150℃下加熱10min。冷卻至室溫后，將混合物在減壓下濃縮并將殘余物分配在Et2O和2N NaOH水溶液之間；將有機相用2N NaOH水溶液萃取并將合并的水層用Et2O洗滌，用6N HCl水溶液酸化至pH 3-4并用DCM萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥，過濾并濃縮，得到標題化合物，為白色固體(0.150g，0.517mmol，64％收率)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.21(s，1H)，7.94-8.00(m，1H)，7.53-7.60(m，1H)，1.35(s，12H)。
中間體U1：4-(2-{1-[(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基]乙基}吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
向4-[2-(1-氨基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯Q7(0.039g，0.11mmol)在t-BuOH(1.5mL)中的溶液中，添加4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.017g，0.11mmol)，隨后添加DIPEA(0.038mL，0.22mmol)并將所得混合物加熱至回流3h。將溶劑除去并將粗品分配在DCM/MeOH≈4/1和水之間；將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:AcOEt＝50:50)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.045g，0.098mmol，89％收率)。MS/ESI+460.4[MH]+，Rt＝1.14min(方法A)。
中間體U2：4-氨基-6-({1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與中間體U1類似地制備，使用1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q9(0.089g，0.24mmol)和4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.037g，0.24mmol)，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝85：25)，得到標題化合物，為黃色固體(0.062g，0.13mmol，53％收率)。MS/ESI+489.4[MH]+，Rt＝1.61min(方法A)。
中間體V：4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-5-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)嘧啶-4,6-二胺
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.052g，0.22mmol)在n-BuOH(3mL)中的溶液中，添加6-氯-5-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)嘧啶-4-胺AA2J2(0.075g，0.22mmol)，隨后添加DIPEA(0.077mL，0.44mmol)并將所得混合物加熱至回流48h。將溶劑除去并將粗品分配在DCM和水之間，將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝70:30)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.057g，0.106mmol，48％收率)。MS/ESI+541.4[MH]+，Rt＝1.16min(方法A)。
中間體W1：3-碘-1-[1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在室溫下向1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-醇M1(0.190g，0.80mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.252g，0.96mmol)和PPh3(0.273g，1.04mmol)在干THF(9mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.19mL，0.96mmol)的THF溶液(5mL)并將反應攪拌2h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱(環己烷:EtOAc＝95:5至100％EtOAc)，得到標題化合物，為淺棕色固體(0.110g，0.23mmol，29％收率)。MS/ESI+481.2[MH]+，Rt 1.17min(方法A)。
中間體W2：3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M2(1.02g，4.28mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.34g，5.14mmol)和PPh3(1.46g，5.56mmol)在干THF(70mL)中的混合物中，在室溫下逐滴添加DIAD(1.01mL，5.14mmol)在THF(10mL)中的溶液并將反應攪拌2h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物(0.950g，1.97mmol，46％收率)。MS/ESI+482.1[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
中間體W3：1-{1-[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]乙基}-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M3(0.171g，0.669mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝95:5至100％EtOAc)，得到標題化合物，為淺棕色固體(0.114g,)。MS/ESI+499.2[MH]+，Rt 1.11min(方法A)。
中間體W4：3-碘-1-{1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M6(0.300g，1.26mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH 98:2)，得到標題化合物(0.216g，0.45mmol，36％收率)。MS/ESI+482.2[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。
中間體W5：3-碘-1-{1-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M7(0.092g，0.36mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到粗標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.130g)。MS/ESI+496.2[MH]+，Rt 0.89min(方法A)。
中間體W6：3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M8(0.145g，0.473mmol)起始，在室溫下攪拌1h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)。將殘余物在SCX柱(1g)上純化，用MeOH洗滌并將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物(0.085g，0.155mmol，33％收率)。MS/ESI+550.1[MH]+，Rt 1.13min(方法A)。
中間體W7：3-碘-1-{1-[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從[1-[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M10(0.052g，0.21mmol)起始，在室溫下攪拌過夜并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至60:40)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化用于下一步(0.106g)。MS/ESI+496.2[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
中間體W8：3-碘-1-(1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}乙-1-醇M11(0.324g，0.94mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.319g，1.22mmol)，PPh3(0.370g，1.41mmol)和DIAD(0.252mL，1.22mmol)起始，在室溫下攪拌4h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.325g)。MS/ESI+586.2[MH]+，Rt 1.24min(方法C)。
中間體W9：3-碘-1-(1-{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}乙-1-醇M12(0.203g，0.60mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.203g，0.78mmol)，PPh3(0.236g，0.90mmol)和DIAD(0.153mL，0.78mmol)起始，在室溫下攪拌4h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.320g)。MS/ESI+580.3[MH]+，Rt 0.66min(方法A)。
中間體W10：1-[1-(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙-1-醇M13(0.186g，0.63mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.214g，0.82mmol)，PPh3(0.248g，0.94mmol)和DIAD(0.161mL，0.82mmol)起始，并在室溫下攪拌1h并通過快速色譜法在5g硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.188g)。MS/ESI+538.3[MH]+，Rt 0.66min(方法A)。
中間體W11：1-[1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙-1-醇M14(0.197g，0.67mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.227g，0.87mmol)，PPh3(0.264g，1.0mmol)和DIAD(0.171mL，0.87mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)；將化合物進一步在SCX柱(1g)純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物，為棕色固體(0.091g)。MS/ESI+538.3[MH]+，Rt 1.07min(方法C)。
中間體W12：3-碘-1-{1-[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M17(0.104g，0.42mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.142g，0.546mmol)，PPh3(0.165g，0.63mmol)和DIAD(0.107mL，0.546mmol)起始，在室溫下攪拌4h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)；在SCX柱上進一步純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物，為棕色固體(0.042g，0.086mmol，20％收率)。MS/ESI+488.1[MH]+，Rt 0.93min(方法A)。
中間體W13：1-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮
與中間體W1類似地制備，從1-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮M18(0.028g，0.11mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.037g，0.143mmol)，PPh3(0.043g，0.165mmol)和DIAD(0.028mL，0.143mmol)起始，在室溫下攪拌4h并通過快速色譜法在5g硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為棕色油狀物(0.034g)。MS/ESI+488.2[MH]+，Rt 0.80min(方法A)。
中間體W14：4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
與中間體W1類似地制備，從4-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯M16(0.066g，0.19mmol)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(0.065g，0.247mmol)，PPh3(0.075g，0.285mmol)和DIAD(0.049mL，0.247mmol)起始，并在室溫下攪拌3h并通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物，為黃色油狀物，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+586.3[MH]+，Rt 1.23min(方法A)。
中間體W15：3-碘-1-{1-[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從1-[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]乙-1-醇M21(0.060g，0.25mmol)起始，在室溫下攪拌16h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，將其未經任何額外的純化而使用(0.060g)。MS/ESI+483.2[MH]+，Rt 0.65min(方法A)。
中間體W16：3-碘-1-{[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K2(0.060g，0.268mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.020g，0.043mmol，16％收率)。MS/ESI+468.0[MH]+，Rt 0.79min(方法A)。
中間體W17：3-碘-1-{[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲醇K6(0.120g，0.53mmol)起始，在室溫下攪拌過夜并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝50:50至100％EtOAc)，得到標題化合物，為黃色油狀物(0.035g，0.075mmol，14％收率)。MS/ESI+468.2[MH]+，Rt 0.71min(方法A)。
中間體W18：3-碘-1-{[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲醇K8(0.070g，0.312mmol)起始，在室溫下攪拌2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠SNAP柱上純化(EtOAc至EtOAc:MeOH 70:30)，得到標題化合物(0.055g，0.118mmol，38％收率)。MS/ESI+468.2[MH]+，Rt 0.57min(方法A)。
中間體和化合物W19：3-碘-1-{[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與中間體W1類似地制備，從[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲醇K28(0.050g，0.22mmol)起始，在室溫下攪拌過夜并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.026g，0.055mmol，25％收率)。MS/ESI+469.1[MH]+，Rt 0.61min(方法A)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.71-8.78(m，1H)，8.49(d，J＝8.0Hz，1H)，8.36(s，1H)，8.12-8.17(m，1H)，7.80-7.89(m，1H)，7.66-8.71(m，1H)，7.20-7.26(m，1H)，6.61(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)，6.18-6.24(m，3H)，6.01(br.s.，2H)。
中間體W35：5-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮
步驟1：5-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡啶-2-醇W35b
將碘三甲基硅烷(0.583mL，4.1mmol)添加至3-碘-1-{1-[3-(6-甲氧基吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W35a(0.210g，0.41mmol)在干乙腈(8.3mL)中的溶液中，并將所得混合物在50℃下加熱3h。然后，在該溫度下，添加MeOH(8.3mL)并攪拌另外的15分鐘。在冷卻至室溫后，將混合物用DCM稀釋并用Na2S2O5水溶液洗滌，然后用鹽水然后。將有機相在減壓下濃縮并將殘余物通過快速色譜法在SNAP C18柱上純化(H2O:MeCN＝95:5+0.1％HCOOH至H2O:MeCN＝50:50+0.1％HCOOH)，得到標題化合物，為黃色固體(0.144g，0.28mmol，68％收率)。MS/ESI+498.3[MH]+，Rt 0.79min(方法A)。
步驟2：5-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮W35
向5-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡啶-2-醇W35b(0.144g，0.28mmol)在丙酮(2.5mL)中的溶液中，添加K2CO3(0.178g，1.28mmol)和4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(0.155g，0.83mmol)并將所得混合物加熱至60℃過夜。添加水并將混合物用DCM/MeOH 4/1萃取；將合并的有機層濃縮并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為透明的半固體(0.069g)。MS/ESI+611.4[MH]+，Rt 0.62min(方法A)。
中間體W36：4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮
步驟1：4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡啶-2-醇W36b
與中間體W35b類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(2-甲氧基吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W36a(1.27g)起始，并在60℃下3h，得到粗標題化合物，為棕色固體(1.09g，2.19mmol)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+498.3[MH]+，Rt 0.77min(方法A)。
步驟2：4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮W36
與中間體W35步驟2類似地制備，從4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡啶-2-醇W36b(1.09g，2.19mmol)和4-(2-氯乙基)嗎啉鹽酸鹽(1.21g，6.52mmol)起始，并通過快速色譜法在SNAP C18柱上純化(從H2O:MeCN＝95:5和0.1％HCOOH至H2O:MeCN＝50:50和0.1％HCOOH)。將乙腈蒸發，將含水殘余物用碳酸氫鈉中和并用DCM和MeOH 4:1的混合物萃取。將有機層蒸發，得到標題化合物，為透明半固體(0.380g，0.62mmol，28％收率)。MS/ESI+611.3[MH]+，Rt 0.61min(方法A)。
中間體W48：6-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-2-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-2,3-二氫噠嗪-3-酮
在室溫下向6-[2-(1-羥基乙基)吲嗪-3-基]-2-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]-2,3-二氫噠嗪-3-酮M51(24mg)，3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(16.4mg，0.094mmol)和PPh3(28.1mg，0.10mmol)在干THF(1mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.01mL，0.05mmol)并將反應攪拌30min。在室溫下逐滴添加額外的DIAD(0.01mL，0.05mmol)并將反應在室溫下攪拌30min。那時之后，添加PPh3(10mg，0.038mmol)，隨后添加DIAD(0.01mL，0.05mmol)并將混合物在室溫下攪拌另外的30min。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物(24.5mg)，將其未經任何進一步純化而用于下一步。MS/ESI+625.4[MH]+，Rt 0.60min(方法A)。
中間體X：4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯
將粗4-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯W14(0.19mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.032g，0.209mmol)和Pd(PPh3)4(0.010g，0.0095mmol)DME(7.7mL)，乙醇(1.37mL)和飽和碳酸鈉水溶液(2.60mL)的混合物在80℃下加熱4h。將混合物分配在水和DCM之間，將水相用DCM萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑在減壓下除去并將殘余物通過快速色譜法在5g硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝94:6)，得到標題化合物，為淺黃色油狀物(0.021g，0.037mmol)。MS/ESI+570.5[MH]+，Rt 1.17min(方法A)。
中間體Y：N-[5-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-1,3-噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁基酯
將3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.070g，0.145mmol)，4-(三丁基甲錫烷基)噻唑-2-基氨基甲酸叔丁基酯(0.142g，0.291mmol)，Pd(PPh3)4(0.017g，0.0145mmol)和氯化鋰(6.15mg，0.145mmol)在二噁烷中(1.5mL)的混合物用N2吹掃并在100℃下加熱3h。將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色固體(0.060g，0.108mmol，75％收率)。MS/ESI+554.4[MH]+，Rt＝0.97min(方法A)。
化合物的制備
實施例1：9-[(3-苯基吲嗪-2-基)甲基]-9H-嘌呤-6-胺
在室溫下向(3-苯基吲嗪-2-基)甲醇K1(0.100g，0.449mmol)，腺嘌呤(0.073g，0.537mmol)和PPh3(0.153g，0.584mmol)在干THF(8mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.106mL，0.537mmol)在THF中(1mL)中的溶液并將反應攪拌1h。添加額外的PPh3(0.059g，0.225mmol)和DIAD(0.026mL，0.135mmol)并將攪拌繼續40min。將溶劑在減壓下除去，將殘余物溶于DCM并過濾。將濾液蒸發至干并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH 28g SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)。收集含有不同異構體的兩個級分。蒸發第一洗脫級分，得到殘余物，將其用Et2O研磨。將所得的固體(0.040g)進一步通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝10:90)，得到標題化合物，為米色固體(0.032g)。MS/ESI+341.2[MH]+，Rt＝0.76min(LC/MS方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.11(s，1H)，8.01(d，1H)，7.99(s，1H)，7.53-7.63(m，4H)，7.44-7.51(m，1H)，7.40(d，1H)，7.17(br.s，2H)，6.69-6.76(m，1H)，6.51-6.59(m，1H)，6.30(s，1H)，5.39(s，2H)。
實施例2：3-[(3-苯基吲嗪-2-基)甲基]-3H-嘌呤-6-胺
將從實施例1中所述的反應獲得的第二洗脫級分濃縮，并通過反相半制備型MDAP在酸性條件下進一步純化(方法E)，隨后蒸發并用DCM萃取，用飽和NaHCO3水溶液洗滌，得到標題化合物，為灰白色固體。MS/ESI+341.1[MH]+，Rt＝0.63min(LC/MS方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.16(s，1H)，7.99(d，1H)，7.76-7.95(m，2H)，7.72(s，1H)，7.63-7.70(m，2H)，7.55-7.63(m，2H)，7.45-7.52(m，1H)，7.39(d，1H)，6.69-6.76(m，1H)，6.51-6.58(m，1H)，6.31(s，1H)，5.57(s，2H)。
實施例3：9-{[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
在室溫下向乙基[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲醇K2(0.150，0.669mmol)，腺嘌呤(0.117g，0.869mmol)和PPh3(0.263g，1.00mmol)在干THF(12mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.171mL，0.869mmol)在THF中(1mL)中的溶液并將反應攪拌2h。將反應混合物過濾并將濾液在減壓下蒸發。將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至100％EtOAc)，得到標題化合物，為白色固體(0.065g)。MS/ESI+342.1[MH]+，Rt＝0.51min(方法A)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.90(d，1H)，8.77(d，1H)，8.16(s，1H)，8.11(s，1H)，7.96(td，1H)，7.78(d，J＝7.8Hz，1H)，7.44(d，1H)，7.37(dd，1H)，7.21(s，2H)，6.83(dd，1H)，6.65(t，1H)，6.16(s，1H)，5.61(s，2H)。
實施例4：9-{[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例3類似地制備，從[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K3(0.165g，0.684mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至100％EtOAc)；得到第一洗脫異構體，為灰白色固體(0.047g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt＝0.79min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.12(s，1H)，8.07(d，1H)，8.05(s，1H)，7.58-7.66(m，1H)，7.48-7.54(m，1H)，7.40-7.47(m，2H)，7.27-7.35(m，1H)，7.20(s，2H)，6.74-6.81(m，1H)，6.55-6.63(m，1H)，6.33(s，1H)，5.43(s，2H)。
實施例5：3-{[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-3H-嘌呤-6-胺
從實施例4中描述的反應中獲得，為次要異構體，并通過反相半制備型MDAP在堿性條件下純化(方法F)，得到灰白色固體。MS/ESI+359.2[MH]+，Rt＝0.89min(方法C)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.23(s，1H)，8.04(d，1H)，7.78-7.96(m，2H)，7.71(s，1H)，7.58-7.68(m，2H)，7.50(d，1H)，7.39(d，1H)，7.30(td，1H)，6.71-6.77(m，1H)，6.57(t，1H)，6.31(s，1H)，5.58(s，2H)。
實施例6：9-{[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與化合物實施例3類似地制備，從[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K4(0.150g，0.622mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠-NH上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至100％EtOAc)，隨后用Et2O研磨，得到標題化合物，為白色固體(0.050g)。MS/ESI+359.2[MH]+，Rt＝0.80min(方法B)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.10(s，1H)，8.00(s，1H)，7.64-7.75(m，2H)，7.55-7.63(m，1H)，7.36-7.50(m，3H)，7.18(s，2H)，6.77-6.82(m，1H)，6.58-6.64(m，1H)，6.39(s，1H)，5.36(s，2H)。
實施例7：9-{[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例3類似地制備，從[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇K5(0.150g，0.632mmol)起始。將粗品混合物通過反相半制備型MDAP在酸性條件下(方法E)純化。將收集的含有主要產物(在反相UPLC條件下較慢的化合物)的級分在減壓下濃縮，用飽和NaHCO3水溶液堿化并用DCM萃取。將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑蒸發。并將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage 11g SNAP柱上進一步純化(環己烷:EtOAc＝90:10至10:90)，得到標題化合物，為白色固體(0.044g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt＝0.82min(方法A)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.07(s，1H)，7.85(s，1H)，7.40-7.45(m，3H)，7.32-7.37(m，3H)，7.14(s，2H)，6.69-6.75(m，1H)，6.50-6.55(m，1H)，6.41(s，1H)，5.18-5.29(m，2H)，1.88(s，3H)。
實施例8：3-{[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}-3H-嘌呤-6-胺
從實施例7中所述的純化中獲得，為少量異構體(在反相UPLC條件下更快的化合物)。將收集的級分在減壓下濃縮，用飽和NaHCO3堿化并用DCM萃取。將有機相用硫酸鈉干燥并蒸發。將殘余物通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage柱上進一步純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為白色固體(0.021g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt＝0.65min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.99(s，1H)，7.83(br.s.，2H)，7.71(s，1H)，7.32-7.50(m，6H)，6.70-6.77(m，1H)，6.51-6.57(m，1H)，6.47(s，1H)，5.44(s，2H)，1.89(s，3H)。
實施例9：9-(吲嗪-2-基甲基)-9H-嘌呤-6-胺
與實施例3類似地制備，從吲嗪-2-基甲醇K23(0.150g，1.02mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠-NH 28g Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，隨后通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至100％EtOAc)。在堿性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法G)，得到標題混合物，為白色固體(0.011g)。MS/ESI+265.1[MH]+，Rt＝0.68min(方法C)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.16(s，1H)，8.14(dd，1H)，8.11(s，1H)，7.44(s，1H)，7.27(d，1H)，7.14(br.s，2H)，6.59-6.62(m，1H)，6.44(t，1H)，6.28(s，1H)，5.36(s，2H)。
實施例10：9-[(1-苯基吲嗪-2-基)甲基]-9H-嘌呤-6-胺
在室溫下向(1-苯基吲嗪-2-基)甲醇K24(0.050g，0.22mmol)，腺嘌呤(0.0356g，0.29mmol)和PPh3(0.075g，0.286mmol)在干THF(4.5mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.052mL，0.26mmol)在THF(1mL)中的溶液，并將反應在50℃下攪拌48h。將溶劑除去并將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝96:4)。通過反相半制備MDAP在酸性條件下(方法A)進一步純化，隨后用DCM萃取,用飽和NaHCO3水溶液洗滌，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.003g)。MS/ESI+341.1[MH]+，Rt＝0.75min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.22(d，J＝7.0Hz，1H)，8.12(s，1H)，7.95(s，1H)，7.39-7.51(m，5H)，7.27-7.36(m，2H)，7.21(s，2H)，6.72-6.78(m，1H)，6.54-6.59(m，1H)，5.52(s，2H)。
實施例11：9-{[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例10類似地制備，從[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲醇K25(0.165g，0.68mmol)起始，并通過快速色譜法在硅膠-NH 25g Biotage柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)。通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱進一步純化(環己烷:EtOAc＝30:70至100％EtOAc)，得到標題化合物(0.015g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt＝0.79min(方法A)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.23(d，1H)，8.11(s，1H)，7.98(s，1H)，7.45-7.50(m，1H)，7.44(d，1H)，7.34(s，1H)，7.30(d，1H)，7.25-7.28(m，1H)，7.19(br.s，2H)，7.11(td，1H)，6.75-6.81(m，1H)，6.56-6.61(m，1H)，5.52(s，2H)。
實施例12：9-{[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例10類似地制備，從[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲醇K26(0.085g，0.36mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH10g SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝97:3)。通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱進一步純化(環己烷:EtOAc＝30:70至100％EtOAc)，得到標題化合物(0.007g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt＝0.77min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.24(d，1H)，8.08(s，1H)，7.66(s，1H)，7.49(s，1H)，7.15-7.35(m，6H)，6.88(d，1H)，6.64-6.70(m，1H)，6.52-6.57(m，1H)，5.19-5.34(m，2H)，1.99(s，3H)。
實施例13：N-[(3-苯基吲嗪-2-基)甲基]-9H-嘌呤-6-胺
向(3-苯基吲嗪-2-基)甲胺P1(0.070g，0.315mmol)在t-BuOH(4mL)中的溶液中，添加6-溴嘌呤(0.063g，0.315mmol)，隨后添加DIPEA(0.110mL，0.630mmol)并將所得混合物加熱至回流1h。將溶劑在減壓下除去并將粗品分配在DCM/MeOH≈3/1和水之間；將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在真空下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.067g)。MS/ESI+341.1[MH]+，Rt＝0.76min(方法A)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 12.06-13.46(m，1H)，8.15-8.18(m，1H)，8.08-8.10(m，1H)，8.04(d，1H)，7.77-7.98(m，1H)，7.59-7.64(m，2H)，7.53-7.59(m，2H)，7.37-7.46(m，2H)，6.67-6.71(m，1H)，6.48-6.54(m，2H)，4.63-4.88(m，2H)。
實施例14：N-{[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺P2(0.103g，0.461mmol)起始，加熱至回流5h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.110g)。MS/ESI+342.2[MH]+，Rt＝0.56min(方法B)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.81(br.s.，1H)，9.04(d，1H)，8.73-8.78(m，1H)，8.18(s，1H)，8.12(s，1H)，8.06(br.s.，1H)，7.95(td，1H)，7.78(d，1H)，7.46(d，1H)，7.30-7.38(m，1H)，6.79-6.86(m，1H)，6.60-6.67(m，1H)，6.54(s，1H)，4.97(br.s.，2H)。
實施例15：N-{[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺(
與實施例13類似地制備，從[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P3(0.100g，0.416mmol)起始，加熱至回流4h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.087g)。MS/ESI+359.2[MH]+，Rt＝0.85min(方法B)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.80(br.s.，1H)，8.18(s，1H)，8.06-8.15(m，2H)，7.96(br.s.，1H)，7.50-7.66(m，2H)，7.38-7.50(m，2H)，7.23-7.32(m，1H)，6.69-6.77(m，1H)，6.50-6.60(m，2H)，4.79(br.s.，2H)。
實施例16：N-{[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P4(0.115g，0.476mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.115g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt＝0.77min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.79(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，8.10(s，1H)，7.89(br.s.，1H)，7.65-7.77(m，2H)，7.51-7.61(m，1H)，7.35-7.50(m，3H)，6.72-7.79(m，1H)，6.52-6.61(m，2H)，4.73(br.s.，2H)。
實施例17：N-[(1-苯基吲嗪-2-基)甲基]-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從(1-苯基吲嗪-2-基)甲胺P6(0.050g，0.224mmol)起始，加熱至回流6h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝94:6)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.030g)。MS/ESI+341.1[MH]+，Rt＝0.77min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.85(br.s.，1H)，8.24(d，1H)，8.19(s，1H)，8.12(s，1H)，7.97(br.s.，1H)，7.50-7.55(m，3H)，7.41-7.49(m，3H)，7.25-7.33(m，1H)，6.68-6.75(m，1H)，6.50-6.55(m，1H)，4.86(br.s.，2H)。
實施例18：N-{[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P7(0.074g，0.31mmol)起始，加熱至回流3h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝97:3)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.044g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt＝0.82min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.92(br.s.，1H)，7.93-8.37(m，4H)，7.41-7.57(m，3H)，7.26-7.40(m，2H)，7.05-7.14(m，1H)，6.70-6.81(m，1H)，6.50-6.61(m，1H)，4.74-4.97(m，2H)。
實施例19：N-{[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲胺P8(0.047g，0.20mmol)起始，加熱至回流5h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為灰白色固體，為異構體的混合物(0.040g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt＝0.96min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.91-12.94(m，1H)，8.02-8.30(m，3H)，7.74-7.89(m，1H)，7.46-7.71(m，1H)，7.15-7.40(m，4H)，6.83-6.94(m，1H)，6.58-6.70(m，1H)，6.44-6.57(m，1H)，4.45-4.72(m，2H)，2.08-2.14(m，3H)。
實施例20：N-{[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺P9(0.044g，0.20mmol)起始，加熱至回流6h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺棕色固體(0.025g)。MS/ESI+342.1[MH]+，Rt＝0.43min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.97(br.s.，1H)，8.70(d，1H)，8.03-8.41(m，4H)，7.93(d，1H)，7.86(t，1H)，7.69(d，1H)，7.56(br.s.，1H)，7.20-7.26(m，1H)，6.84-6.93(m，1H)，6.59-6.67(m，1H)，5.00(br.s.，2H)。
實施例21：N-(吲嗪-2-基甲基)-9H-嘌呤-6-胺
與實施例13類似地制備，從吲嗪-2-基甲胺P10(0.065g，0.44mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.057g)。MS/ESI+264.9[MH]+，Rt＝0.66min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.79(br.s.，1H)，8.14-8.28(m，2H)，8.11(s，1H)，7.94(br.s.，1H)，7.46(s，1H)，7.31(d，1H)，6.58-6.66(m，1H)，6.41-6.49(m，1H)，6.35(s，1H)，4.77(br.s.，2H)。
實施例22：4-氨基-6-{[(3-苯基吲嗪-2-基)甲基]氨基}嘧啶-5-甲腈
向(3-苯基吲嗪-2-基)甲胺P1(0.076g，0.342mmol)在t-BuOH(4mL)中的溶液中，添加4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.053g，0.342mmol)，隨后添加DIPEA(0.119mL，0.742mmol)并將所得混合物加熱至回流1h。將溶劑除去并將粗品分配在DCM和水之間；將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至60:40)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.065g)。MS/ESI+341.1[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.01-8.05(m，1H)，8.00(s，1H)，7.76(t，1H)，7.53-7.61(m，4H)，7.40-7.48(m，2H)，7.21(br.s.，2H)，6.67-6.75(m，1H)，6.49-6.55(m，1H)，6.47(s，1H)，4.63(d，2H)。
實施例23：4-氨基-6-({[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺P2(0.097g，0.434mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.120g)。MS/ESI+342.2[MH]+，Rt＝0.58min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.96(d，1H)，8.71-8.78(m，1H)，7.98-8.06(m，2H)，7.95(td，1H)，7.72(d，1H)，7.50(d，1H)，7.32-7.37(m，1H)，7.25(br.s.，2H)，6.81-6.87(m，1H)，6.61-6.67(m，1H)，6.48(s，1H)，4.79(d，2H)。
實施例24：4-氨基-6-({[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[3-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P3(0.101g，0.421mmol)起始，加熱至回流1h并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至60:40)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.100g)。MS/ESI+359.2[MH]+，Rt＝1.01min(方法B)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.07(d，1H)，7.99(s，1H)，7.80(t，1H)，7.55-7.64(m，1H)，7.39-7.51(m，3H)，7.24-7.31(m，1H)，7.22(br.s.，2H)，6.71-6.78(m，1H)，6.52-6.57(m，1H)，6.49(s，1H)，4.64(d，2H)。
實施例25：4-氨基-6-({[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P4(0.130g，0.541mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.140g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt＝0.98min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.96(s，1H)，7.74(t，1H)，7.61-7.71(m，2H)，7.51-7.60(m，1H)，7.36-7.50(m，3H)，7.20(br.s.，2H)，6.73-6.79(m，1H)，6.53-6.60(m，1H)，6.51(s，1H)，4.51-4.65(m，2H)。
實施例26：4-氨基-6-({[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[3-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲胺P5(0.129g，0.546mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.132g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt＝1.05min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.94(s，1H)，7.63(t，1H)，7.29-7.47(m，6H)，7.17(br.s.，2H)，6.67-6.73(m，1H)，6.45-6.52(m，2H)，4.42-4.55(m，2H)，1.97(s，3H)。
實施例27：4-氨基-6-{[(1-苯基吲嗪-2-基)甲基]氨基}嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從(1-苯基吲嗪-2-基)甲胺P6(0.050g，0.224mmol)起始，加熱至回流1h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至50:50)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.037g)。MS/ESI+341.2[MH]+，Rt＝0.99min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.27(d，1H)，8.00(s，1H)，7.79(t，1H)，7.44-7.49(m，5H)，7.39-7.43(m，1H)，7.19-7.33(m，3H)，6.68-6.74(m，1H)，6.51-6.56(m，1H)，4.72(d，2H)。
實施例28：4-氨基-6-({[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[1-(3-氟苯基)吲嗪-2-基]甲胺P7(0.055g，0.23mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99.5:0.5)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.033g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt 1.02min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.30(d，1H)，8.01(s，1H)，7.81(t，1H)，7.43-7.53(m，3H)，7.26-7.34(m，2H)，7.24(br.s，2H)，7.07-7.15(m，1H)，6.74-6.80(m，1H)，6.55-6.61(m，1H)，4.73(d，2H)。
實施例29：4-氨基-6-({[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[1-(2-甲基苯基)吲嗪-2-基]甲胺P8(0.046g，0.19mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.024g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt 0.96min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.23-8.29(m，1H)，7.96(s，1H)，7.59(t，1H)，7.49(s，1H)，7.33(d，1H)，7.22-7.30(m，3H)，7.19(br.s.，2H)，6.87(d，1H)，6.60-6.67(m，1H)，6.48-6.54(m，1H)，4.48(d，2H)，2.10(s，3H)。
實施例30：4-氨基-6-({[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺P9(0.044g，0.20mmol)起始，加熱至回流1h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30至40:60)，得到標題化合物，為淺棕色固體(0.0416g)。MS/ESI+342.1[MH]+，Rt 0.49min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.61-8.71(m，2H)，8.34(d，1H)，8.05(s，1H)，7.81-7.92(m，2H)，7.69(d，1H)，7.59(s，1H)，7.19-7.32(m，3H)，6.88-6.95(m，1H)，6.63-6.70(m，1H)，4.80(d，2H)。
實施例31：4-氨基-6-[(吲嗪-2-基甲基)氨基]嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從吲嗪-2-基甲胺P10(0.065g，0.44mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99.9:0.1)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.040g)。MS/ESI+265.1[MH]+，Rt 0.78min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.17-8.21(m，1H)，8.04(s，1H)，7.79(t，1H)，7.41(s，1H)，7.32(d，1H)，7.22(br.s.，2H)，6.60-6.66(m，1H)，6.43-6.49(m，1H)，6.30(s，1H)，4.62(d，2H)。
實施例32：4-氨基-6-{[1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙基]氨基}嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙-1-胺Q1(0.041g，0.174mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至60:40)。通過用Et2O研磨進一步純化，得到標題化合物，為白色固體(0.035g)。MS/ESI+355.2[MH]+，Rt 1.05min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.88-7.94(m，2H)，7.39-7.58(m，6H)，7.27(d，1H)，7.17(br.s.，2H)，6.68-6.76(m，2H)，6.47-6.55(m，1H)，5.44-5.54(m，1H)，1.45(d，3H)。
實施例33：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.050g，0.211mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至30:70)，得到標題化合物，為黃色固體(0.049g)。MS/ESI+365.1[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.74-8.79(m，1H)，8.67(d，1H)，8.10(d，1H)，7.90-8.00(m，2H)，7.77(d，1H)，7.52(d，1H)，7.34-7.40(m，1H)，7.21(br.s.，2H)，6.80-6.88(m，1H)，6.71(s，1H)，6.59-6.67(m，1H)，5.68-5.79(m，1H)，1.39(d，3H)。
實施例34：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q3(0.062g)起始，加熱至回流3h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM:EtOAc＝80:20至30:70)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.045g)。MS/ESI+356.1[MH]+，Rt 0.66min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.68(d，1H)，8.62(dd，1H)，7.93-7.98(m，1H)，7.91(d，1H)，7.87(s，1H)，7.52-7.58(m，1H)，7.49(d，1H)，7.36(d，1H)，7.15(br.s.，2H)，6.72-6.80(m，2H)，6.50-6.57(m，1H)，5.39-5.49(m，1H)，1.49(d，3H)。
實施例35：4-氨基-6-({1-[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從粗1-[3-(吡嗪-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q4(0.114mmol)起始，加熱至回流4h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝30:70)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.024g)。MS/ESI+357.1[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.93(d，1H)，8.73-8.80(m，2H)，8.54(d，1H)，7.87(s，1H)，7.67(d，1H)，7.56(d，1H)，7.20(br.s.，2H)，6.86-6.93(m，1H)，6.79(s，1H)，6.63-6.69(m，1H)，5.69-5.78(m，1H)，1.52(d，3H)。
實施例36：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q10(0.062g，0.261mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM:EtOAc＝80:20至30:70)，隨后用Et2O研磨，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.036g)。MS/ESI+356.1[MH]+，Rt 0.52min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.65-6.72(m，2H)，8.11(d，1H)，7.90(s，1H)，7.54-7.60(m，2H)，7.49(d，1H)，7.40(d，1H)，7.15(br.s.，2H)，6.74-6.83(m，2H)，6.53-6.60(m，1H)，5.48-5.61(m，1H)，1.47(d，3H)。
實施例37：4-氨基-6-({1-[3-(噻吩-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(噻吩-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q11(0.058g)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20)。通過反相半制備性MDAP在酸性條件下(方法A)進一步純化，隨后溶解在DCM并用飽和NaHCO3洗滌，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.020g)。MS/ESI+361.1[MH]+，Rt 1.04min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.97-8.03(m，1H)，7.92(s，1H)，7.75(dd，1H)，7.44-7.49(m，1H)，7.26-7.30(m，2H)，7.23-7.26(m，1H)，7.15(br.s.，2H)，6.73-6.79(m，1H)，6.68(s，1H)，6.55-6.61(m，1H)，5.49-5.59(m，1H)，1.46(d，3H)。
實施例38：4-氨基-6-({1-[3-(噻吩-3-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(噻吩-3-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q12(0.061g)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20)。在酸性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法E)，隨后溶解在DCM中并用飽和NaHCO3洗滌，得到標題化合物，為淺綠色固體(0.030g)。MS/ESI+361.1[MH]+，Rt 1.04min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.96(s，1H)，7.91-7.95(m，1H)，7.74-7.77(m，2H)，7.45(d，1H)，7.34-7.37(m，1H)，7.27(d，1H)，7.17(br.s.，2H)，6.67-6.74(m，2H)，6.51-6.56(m，1H)，5.48-5.58(m，1H)，1.45(d，3H)。
實施例39：4-氨基-6-({1-[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[8-氟-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q5(0.084g，0.33mmol)起始，加熱至回流1h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)；通過快速色譜法在10g Biotage硅膠SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝60:40至40:60)，得到標題化合物(0.052g)。MS/ESI+374.2[MH]+，Rt 0.76min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.74-8.80(m，1H)，8.48(d，1H)，7.92-8.03(m，3H)，7.81(d，1H)，7.38-7.44(m，1H)，7.23(br.s.，2H)，6.91(s，1H)，6.68-6.75(m，1H)，6.57-6.64(m，1H)，5.69-5.76(m，1H)，1.42(d，3H)。
實施例40：4-氨基-6-({1-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[5-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q13(0.045g，0.18mmol)起始，加熱至回流2h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝80:20至50:50)，得到標題化合物，為淺白色固體(0.036g)。MS/ESI+370.1[MH]+，Rt 0.91min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.55-8.74(m，1H)，7.50-8.02(m，4H)，7.02-7.48(m，4H)，6.64-6.77(m，2H)，6.40(d，1H)，5.31-5.43(m，1H)，1.95(s，3H)，1.10-1.40(m，3H)。
實施例41：4-氨基-6-({1-[8-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[8-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q14(0.050g，0.20mmol)起始，加熱至回流1h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)；通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上進一步純化(環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.019g)。MS/ESI+370.2[MH]+，Rt 0.70min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.74-8.79(m，1H)，8.51(d，1H)，8.16(d，1H)，7.90-8.00(m，2H)，7.76(d，1H)，7.35-7.40(m，1H)，7.22(br.s.，2H)，6.72(s，1H)，6.68(d，1H)，6.55-6.60(m，1H)，5.68-5.78(m，1H)，2.40(s，3H)，1.38(d，3H)。
實施例42：4-氨基-6-({1-[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q6(0.033g，0.13mmol)起始，加熱至回流3h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至50:50)，隨后在堿性條件下通過反相半-制備型MDAP純化(方法F)，得到標題化合物，為白色固體(0.0055g)。MS/ESI+361.2[MH]+，Rt 0.92min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.98(s，1H)，7.88(d，1H)，7.38(d，1H)，7.25(d，1H)，7.14(br.s.，2H)，6.60-6.69(m，1H)，6.46-6.56(m，2H)，5.91(br.s.，1H)，5.53-5.63(m，1H)，4.18-4.23(m，2H)，3.76-3.88(m，2H)，2.24-2.31(m，2H)，1.50(d，3H)。
實施例43：4-氨基-6-({1-[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從粗1-[3-(戊-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q8(0.20mmol)和4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲腈(0.031g，0.20mmol)起始，加熱至回流3h并在堿性條件下通過反相半-制備型MDAP純化(方法F)，得到標題化合物，為白色固體(0.030g)。MS/ESI+345.3[MH]+，Rt 1.18min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.13(d，1H)，8.00(s，1H)，7.45(d，1H)，7.35(d，1H)，7.21(br.s.，2H)，6.77-6.85(m，1H)，6.68-6.76(m，1H)，6.44(s，1H)，5.63-5.72(m，1H)，2.48-2.57(m，2H)，1.51-1.64(m，5H)，1.02(t，3H)。
實施例44：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]丙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
與實施例22類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]丙-1-胺Q15(0.102g，0.40mmol)起始，加熱至回流3h并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(Cy:AcOEt＝8:2至Cy:AcOEt＝1:1)，得到所述化合物，為黃色固體(0.0463g)。MS/ESI+370.2[MH]+，Rt 0.73min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.76-8.80(m，1H)，8.62(d，1H)，8.29(d，1H)，7.92-8.02(m，2H)，7.86(d，1H)，7.51(d，1H)，7.36-7.42(m，1H)，7.20(br.s.，2H)，6.80-6.87(m，1H)，6.69(s，1H)，6.59-6.66(m，1H)，5.48-5.57(m，1H)，1.73-1.86(m，1H)，1.53-1.67(m，1H)，0.71(t，3H)。
實施例45：4-氨基-6-({1-[3-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
在0℃下向4-(2-{1-[(6-氨基-5-氰基嘧啶-4-基)氨基]乙基}吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯U1(0.045g，0.098mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中，緩慢添加三氟乙酸(0.045mL，0.59mmol)并將反應在室溫下攪拌1h。將混合物分配在DCM和飽和NaHCO3水溶液之間并將水相用DCM萃取；將合并的有機層用鹽水洗滌，用無水MgSO4干燥并濃縮。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH柱上純化(環己烷至環己烷AcOEt＝50:50)，隨后通過反相快速色譜法在C18柱上純化(H2O:CH3CN＝95:5至70:30，具有0.1％HCOOH)，得到標題化合物，為棕色固體(0.0067g)。MS/ESI+360.3[MH]+，Rt 0.53min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.99(s，1H)，7.85(d，1H)，7.36(d，1H)，7.08-7.27(m，3H)，6.59-6.67(m，1H)，6.47-6.53(m，2H)，5.85(br.s.，1H)，5.51-5.62(m，1H)，3.26-3.41(m，2H)，2.84-2.98(m，2H)，2.16(br.s.，2H)，1.49(d，3H)。
實施例46：4-氨基-6-({1-[3-(3-羥基丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈
向4-氨基-6-({1-[3-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲腈U2(0.062g，0.13mmol)在THF中(0.65mL)的溶液中，添加氟化四丁基銨1M的THF(0.14mL，0.14mmol)溶液，將所得混合物在室溫下攪拌30min，然后用飽和NH4Cl水溶液淬滅。將混合物用DCM萃取并將合并的有機層干燥、過濾并濃縮。將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝100:0至0:100)，得到標題化合物，為黃色固體(0.017g)。MS/ESI+333.2[MH]+，Rt 0.83min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.20(d，1H)，7.99(s，1H)，7.47(d，1H)，7.40(d，1H)，7.20(br.s.，2H)，6.81-6.89(m，1H)，6.71-6.78(m，1H)，6.45(s，1H)，5.60-5.72(m，1H)，5.33(t，1H)，4.38-4.50(m，2H)，1.54(d，3H)。
實施例47：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲醛
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.150g，0.63mmol)在t-BuOH(6.7mL)中的溶液中，添加4-氨基-6-氯-5-嘧啶甲醛(0.100g，0.63mmol)，隨后添加DIPEA(0.219mL，1.26mmol)并將所得混合物加熱至回流2h。將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1)，得到標題化合物，為黃色固體(0.106g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt 0.61min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.01(s，1H)，9.38(d，1H)，8.69-8.79(m，2H)，7.96(s，1H)，7.90(td，1H)，7.46-7.75(m，4H)，7.30-7.36(m，1H)，6.82-6.90(m，1H)，6.60-6.70(m，2H)，5.68-5.77(m，1H)，1.52(d，3H)。
實施例48：5-溴-4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}嘧啶-4,6-二胺
與實施例47類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.171g，0.72mmol)和5-溴-6-氯嘧啶-4-胺(0.150g，0.72mmol)起始，加熱至回流6天并通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝99.5:0.5)，隨后通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝90:10至80:20)，得到標題化合物，為白色固體(0.144g)。MS/ESI+408.9-410.9[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73-7.77(m，1H)，8.67(d，1H)，7.92(td，1H)，7.82(s，1H)，7.74(d，1H)，7.49(d，1H)，7.32-7.37(m，1H)，6.77-6.86(m，2H)，6.68(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.43(br.s.，2H)，5.58-5.68(m，1H)，1.40(d，3H)。
實施例49：4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-5-(三氟甲基)嘧啶-4,6-二胺
與實施例47類似地制備，從1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.036g，0.15mmol)和6-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(根據專利WO2011/146882中所報道的方法來制備)(0.030g，0.15mmol)起始，加熱至回流10h并通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷:EtOAc＝70:30)。通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上進一步純化(DCM至DCM:MeOH＝99:1)，得到標題化合物(0.007g)。MS/ESI+399.2[MH]+，Rt 0.74min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64-8.73(m，2H)，7.90-7.96(m，2H)，7.74(d，1H)，7.50(d，1H)，7.33-7.39(m，1H)，7.01-7.07(m，1H)，6.80-6.86(m，1H)，6.69(br.s.，2H)，6.59-6.66(m，2H)，5.76-5.85(m，1H)，1.37(d，3H)。
實施例50：5-甲基-4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}嘧啶-4,6-二胺
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.100g，0.42mmol)在t-BuOH(4.5mL)中的溶液中，添加6-氯-5-甲基嘧啶-4-胺(0.060g，0.42mmol)，隨后添加DIPEA(0.146mL，0.84mmol)并將所得混合物加熱至回流24h。經48h添加額外的1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.100g，0.42mmol)加熱至回流。將溶劑除去并將粗品溶于n-BuOH(4.5mL)；添加DIPEA(0.146mL，0.84mmol)并將反應加熱至130℃10天。
進行額外的實驗：向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.059g，0.25mmol)在n-BuOH(2.7mL)中的溶液中，添加6-氯-5-甲基嘧啶-4-胺(0.036g，0.25mmol)，隨后添加DIPEA(0.087mL，0.50mmol)并將所得混合物在MW輻射下在120℃加熱2h并在150℃加熱2h。然后將混合物在熱條件下在130℃加熱24h。經10天添加額外的1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.059g，0.25mmol)，在130℃下繼續加熱。
將兩個反應混合物合并，將溶劑除去并將粗品分配在DCM/MeOH≈4/1和水之間。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(環己烷:EtOAc＝50:50至40:60)；通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上進行兩次進一步純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)，得到標題化合物，為深黃色固體(0.0207g)。MS/ESI+345.2[MH]+，Rt 0.56min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.78(d，1H)，8.69-8.74(m，1H)，7.80-7.92(m，2H)，7.77(s，1H)，7.46(d，1H)，7.27-7.35(m，1H)，6.76-6.83(m，1H)，6.67(s，1H)，6.54-6.61(m，1H)，6.24-6.33(m，1H)，5.85(br.s.，2H)，5.60-5.70(m，1H)，1.80(s，3H)，1.41(d，3H)。
實施例51：4-氨基-N-甲基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲酰胺
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.040g，0.172mmol)和粗4-氨基-6-氯-N-甲基嘧啶-5-甲酰胺AA4(0.173mmol)在t-BuOH(3mL)中的混懸液中，添加DIPEA(0.090mL，0.516mmol)并將所得混合物在100℃下加熱過夜。添加額外的DIPEA(0.090mL，0.516mmol)并將混合物在相同溫度下攪拌100h。將溶劑除去并將粗品分配在DCM和水之間。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM:EtOAc＝80:20至100％EtOAc)，得到標題化合物，為棕色無定形固體(0.010g)。MS/ESI+388.3[MH]+，Rt 0.55min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.79(d，1H)，8.74(d，1H)，7.80-7.97(m，3H)，7.74(d，1H)，7.64(d，1H)，7.53(d，1H)，7.32-7.37(m，1H)，6.81-6.89(m，1H)，6.57-6.68(m，2H)，6.43(s，2H)，5.52-5.62(m，1H)，2.70(d，3H)，1.45(d，3H)。
實施例52：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲酰胺
向1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.034g，0.144mmol)在t-BuOH(1.6mL)中的溶液中，添加粗4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酰胺AA5(包含一些4-氨基-6-氯嘧啶-5-甲酸(0.144mmol)，隨后添加DIPEA(0.050mL，0.29mmol)并將所得混合物加熱至回流4h。將溶劑除去并將粗品分配在DCM/MeOH≈4/1和水之間。將有機相用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去并將粗品在酸性條件下通過反相半制備型MDAP純化(方法E)，得到兩個級分。第一洗脫級分得到標題化合物，為黃色固體(0.0055g)。MS/ESI+374.1[MH]+，Rt 0.50min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.79(d，1H)，8.73(d，1H)，7.86-7.97(m，3H)，7.64(d，1H)，7.51(d，1H)，7.40(s，2H)，7.31-7.36(m，1H)，6.81-6.87(m，1H)，6.59-6.67(m，2H)，6.49(s，2H)，5.51-6.60(m，1H)，1.46(d，3H)。
實施例53：4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲酸甲酸鹽
將在實施例52中描述的反應混合物的酸性條件(方法E)下通過半制備型MDAP純化而洗脫的第二級分蒸發至干，得到標題化合物，為棕色固體(0.0035g)。MS/ESI+375.1[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 13.27(br.s，1H)，9.98(br.s，1H)，8.80(d，1H)，8.72(d，1H)，7.84-7.92(m，2H)，7.62(d，1H)，7.51(d，1H)，7.29-7.35(m，1H)，6.80-6.87(m，1H)，6.58-6.66(m，2H)，7.36(br.s，2H)，5.52-5.68(m，1H)，1.47(d，3H)。
存在～31％mol的甲酸。
實施例54：3-氨基-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}吡嗪-2-甲酰胺
3-氨基-2-吡嗪甲酸(0.032g，0.232mmol)，HOBt(0.037g)和EDC HCl(0.053g，0.274mmol)在DMF(2mL)中的混合物在室溫下攪拌20min。添加DIPEA(0.055mL，0.316mmol，隨后添加1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙-1-胺Q2(0.050g，0.211mmol)在DMF(0.5mL)中的溶液并將反應在室溫下攪拌1h。將混合物分配在DCM和水之間并將水相用DCM萃取。將合并的有機相用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝80:20)。將所得材料用戊烷處理，蒸發并用Et2O研磨，得到標題化合物，為淡黃色固體(0.037g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.01(d，1H)，8.70-8.78(m，2H)，8.21(d，1H)，7.97(td，1H)，7.83(d，1H)，7.73(d，1H)，7.39-7.62(m，3H)，7.34-7.39(m，1H)，6.81-6.87(m，1H)，6.77(s，1H)，6.58-6.66(m，1H)，5.42-5.53(m，1H)，1.52(d，3H)。
實施例55：3-氨基-N-{[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}吡嗪-2-甲酰胺
與實施例54類似地制備，從[1-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲胺P9(0.086g，0.385mmol)起始，并通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(環己烷至環己烷:EtOAc＝50:50)，得到標題化合物，為淡黃色固體(0.079g)。MS/ESI+345.1[MH]+，Rt 0.54min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.60(t，1H)，8.65-8.71(m，1H)，8.34(d，1H)，8.21(d，1H)，7.79-7.93(m，3H)，7.33-7.74(m，4H)，7.19-7.25(m，1H)，6.86-6.93(m，1H)，6.62-6.69(m，1H)，4.73(d，2H)。
實施例56：[4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-基]甲醇
在0℃下向實施例47的4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲醛(0.031g)在MeOH(0.44mL)中的溶液中，添加NaBH4(0.005g，0.13mmol)并將混合物攪拌1h。將溶劑在減壓下除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝97:3)，得到標題化合物，為白色泡沫狀固體(0.021g)。MS/ESI+359.1[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.82(d，1H)，8.71-8.75(m，1H)，7.90(td，1H)，7.83(s，1H)，7.75(d，1H)，7.49(d，1H)，7.30-7.36(m，1H)，6.79-6.86(m，1H)，6.67(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.54(d，1H)，5.94(s，2H)，5.55-5.65(m，1H)，4.94(t，1H)，4.30-4.44(m，2H)，1.45(d，3H)。
實施例57：5-(嗎啉-4-基甲基)-4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}嘧啶-4,6-二胺
向實施例47的4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲醛(0.065g)在DCM(4mL)中的混懸液中，添加嗎啉(0.024mL，0.272mL)，隨后添加催化量的乙酸(pH≈6)并將所得的溶液在室溫下攪拌20分鐘。添加Na(OAc)3BH(0.077g，0.363mmol)并將反應在室溫下攪拌過夜。將混合物用DCM稀釋并用飽和Na2CO3水溶液洗滌；將有機相用硫酸鈉干燥并將溶劑除去。將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM:EtOAc＝70:30至100％EtOAc)，隨后通過快速色譜法在硅膠-NH柱上純化(DCM:MeOH＝99:1)。通過制備型TLC在硅膠NH上進一步純化(DCM:MeOH＝97:3)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.007g)。MS/ESI+430.1[MH]+，Rt 0.95min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.84(d，1H)，8.70-8.74(m，1H)，7.84-7.90(m，2H)，7.65(d，1H)，7.50(d，1H)，7.47-7.59(m，1H)，7.28-7.34(m，1H)，6.80-6.87(m，1H)，6.68(s，1H)，6.58-6.64(m，1H)，6.16(br.s.，2H)，5.43-5.60(m，1H)，3.41-3.52(m，4H)，3.31(s，2H)，2.22-2.42(m，4H)，1.47(d，3H)。
實施例58：5-[(1E)-(羥基亞氨基)甲基]-4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}嘧啶-4，6-二胺
向實施例47的4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-甲醛(0.050g)在EtOH(2mL)中的溶液中，添加吡啶(0.013mL，0.156mmol)，隨后添加羥胺鹽酸鹽(0.011g，0.156mmol)并將所得混合物在室溫下攪拌過夜。在減壓下除去揮發物并將粗品分配在DCM和水之間。將有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥，將溶劑在減壓下除去，將殘余物溶于CH3CN并在真空下干燥，得到標題化合物，為黃色固體(0.024g)。MS/ESI+374.2[MH]+，Rt 0.57min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.96(s，1H)，8.80(d，1H)，8.69-8.73(m，1H)，8.51(s，1H)，8.41(d，1H)，7.83-7.90(m，2H)，7.63(d，1H)，7.50(d，1H)，7.32(dd，1H)，6.80-6.90(m，3H)，6.57-6.66(m，2H)，5.69(t，1H)，1.50(d，3H)。
實施例59：3-[4-氨基-6-({1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}氨基)嘧啶-5-基]丙-2-炔-1-醇
向4-N-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-5-(3-{[三(丙-2-基)甲硅烷基]氧基}丙-1-炔-1-基)嘧啶-4,6-二胺V(0.057g，0.10mmol)在THF(0.5mL)中的溶液中，添加氟化四丁基銨1M的THF溶液(0.110mL，0.110mmol)并將所得混合物在室溫攪拌30分鐘。將反應用飽和NH4Cl水溶液淬滅并用DCM萃取；將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將殘余物溶于MeOH并裝入SCX柱(2g)，用MeOH洗滌。將產物用1M NH3在MeOH中的溶液洗脫并在減壓下除去揮發物。將殘余物通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為黃色固體(0.022g)。MS/ESI+385.3[MH]+，Rt 0.56min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73-8.77(m，1H)，8.70(d，1H)，7.84-7.95(m，2H)，7.72(d，1H)，7.50(d，1H)，7.31-7.37(m，1H)，6.79-6.86(m，1H)，6.58-6.72(m，3H)，6.42(br.s.，2H)，5.59-5.71(m，1H)，5.19(t，1H)，4.36(d，2H)，1.39(d，3H)。
實施例60：3-苯基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
將3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.030g，0.062mmol)，苯基硼酸(8.4mg，0.062mmol)和Pd(PPh3)4(3.6mg，0.0031mmol)在DME(4.5mL)中的混合物，乙醇(0.65mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)在80℃下攪拌過夜。將混合物用水淬滅并用DCM萃取；將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物(8.0mg)。MS/ESI+432.3[MH]+，Rt 0.86min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.70-8.74(m，1H)，8.62(dd，1H)，8.18(s，1H)，7.91(td，1H)，7.73-7.77(m，1H)，7.65-7.69(m，2H)，7.53-7.58(m，2H)，7.46-7.52(m，2H)，7.33-7.38(m，1H)，6.73-6.82(m，1H)，6.70(s，1H)，6.56-6.61(m，1H)，6.50(q，1H)，6.09-7.13(m，2H)，1.92(d，3H)。
實施例61：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯酚
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.030，0.063mmol)，3-羥基苯基硼酸(9.5mg，0.068mmol)和Pd(PPh3)4(3.6mg，0.0031mmol)在DME(6.2mL)中的混合物，EtOH(0.93mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.76mL)起始，在80℃下加熱2h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM:MeOH＝99:1至95:5)，得到標題化合物(0.010g)。MS/ESI+432.3[MH]+，Rt 0.86min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.73(s，1H)，8.71-8.75(m，1H)，8.64(d，1H)，8.18(s，1H)，7.93(td，1H)，7.76(d，1H)，7.50(d，1H)，7.31-7.40(m，2H)，7.06-7.11(m，2H)，6.86-6.90(m，1H)，6.78-6.84(m，1H)，6.69(s，1H)，6.57-6.62(m，1H)，6.49(q，1H)，5.70-7.45(m，2H)，1.92(d，3H)。
實施例62：3-(3-氟-5-甲氧基苯基)-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.030g，0.063mmol)，(3-氟-5-甲氧基苯基)硼酸(0.012g，0.069mmol)和Pd(PPh3)4(4.0mg，0.0031mmol)在DME(6.3mL)中的混合物，EtOH(1mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.7mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝10:90)。在酸性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法E)，隨后蒸發并過濾通過硅膠-NH柱，用DCM:MeOH＝95:5至洗脫，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.007g)。MS/ESI+480.3[MH]+，Rt 0.96min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.70-8.74(m，1H)，8.61(d，1H)，8.17(s，1H)，7.91(td，1H)，7.74(d，1H)，7.49(d，1H)，7.30-7.39(m，1H)，6.98-7.05(m，2H)，6.90-6.99(m，1H)，6.77-6.82(m，1H)，6.69(s，1H)，6.54-6.63(m，1H)，6.53-7.30(m，2H)，6.49(q，1H)，3.85(s，3H)，1.91(d，3H)
實施例63：N-[3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯基]乙酰胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.030g，0.063mmol)，3-乙酰氨基苯基硼酸(0.012g，0.068mmol)和Pd(PPh3)4(3.6mg，0.0031mmol)在DME(4.5mL)中的混合物，EtOH(0.65mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(5.0mg)。MS/ESI+489.3[MH]+，Rt 0.74min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(s，1H)，8.71-8.75(m，1H)，8.64(d，1H)，8.19(s，1H)，7.89-7.97(m，2H)，7.77(d，1H)，7.61-7.66(m，1H)，7.45-7.53(m，2H)，7.33-7.40(m，2H)，6.77-6.85(m，1H)，6.69(s，1H)，6.57-6.63(m，1H)，6.51(q，1H)，6.00-8.00(m，2H)，2.10(s，3H)，1.94(d，3H)。
實施例64：[3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯基]甲醇
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，3-(羥基甲基)苯基硼酸(0.023g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0062mmol)在DME(9mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)。通過在SCX柱上過濾進一步純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物(9.0mg)。MS/ESI+462.3[MH]+，Rt 0.71min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.72-9.76(m，1H)，8.64(d，1H)，8.19(s，1H)，7.89-7.98(m，1H)，7.77(d，1H)，7.64(s，1H)，7.48-7.55(m，3H)，7.42-7.47(m，1H)，7.33-7.40(m，1H)，6.78-6.85(m，1H)，6.70(s，1H)，6.57-6.63(m，1H)，6.52(q，1H)，6.00-7.18(m，2H)，5.30(t，1H)，4.62(d，2H)，1.94(d，3H)。
實施例65：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-(三氟甲基)苯酚
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，[3-羥基-5-(三氟甲基)苯基]硼酸(0.031g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0062mmol)在DME(9mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝70:30)。通過在SCX柱上過濾進一步純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物(0.023g)。MS/ESI+516.0[MH]+，Rt0.94min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.39(br.s.，1H)，8.70-8.74(m，1H)，8.60-8.64(m，1H)，8.20(s，1H)，7.91(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.30-7.40(m，3H)，7.14(s，1H)，6.77-6.85(m，1H)，6.68(s，1H)，6.56-7.30(m，2H)，6.57-6.63(m，1H)，6.52(q，1H)，1.94(d，3H)。
實施例66：3-(3-氟苯基)-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，3-氟苯基硼酸(0.021g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0062mmol)在DME(9mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:2)。通過快速色譜法在硅膠-NH柱上進一步純化(DCM:EtOAc＝90:10)，得到標題化合物(0.015g)。MS/ESI+450.3[MH]+，Rt 0.92min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71-8.76(m，1H)，8.63(d，1H)，8.20(s，1H)，7.93(td，1H)，7.76(d，1H)，7.57-7.64(m，1H)，7.48-7.55(m，2H)，7.43-7.48(m，1H)，7.30-7.39(m，2H)，6.78-6.84(m，1H)，6.72(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.52(q，1H)，6.25-7.30(m，2H)，1.94(d，3H)。
實施例67：N-[3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯基]甲磺酰胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，(3-甲磺酰胺基苯基)硼酸(0.032g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0062mmol)在DME(9mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)。將得到的產物為用MeOH稀釋，并將沉淀物通過過濾收集，將濾液裝入SCX(1g)柱，用MeOH洗滌，并將產物用1M氨的MeOH溶液洗脫。將該物質與收集的固體合并并蒸發，用CH3CN和水處理并蒸發，得到標題化合物，為白色固體(9mg)。MS/ESI+535.3[MH]+，Rt 0.77min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.93(br.s.，1H)，8.71-8.76(m，1H)，8.63(d，1H)，8.19(s，1H)，7.90-7.96(m，1H)，7.77(d，1H)，7.46-7.57(m，3H)，7.42(d，1H)，7.31-7.40(m，2H)，6.78-6.85(m，1H)，6.71(s，1H)，6.58-6.63(m，1H)，6.51(q，1H)，5.80-8.00(m，2H)，3.08(s，3H)，1.94(d，3H)。
實施例68：1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，3-吡啶基硼酸(0.018g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0062mmol)在DME(9mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.033g)。MS/ESI+433.3[MH]+，Rt 0.65min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.83-8.85(m，1H)，8.70-8.74(m，1H)，8.65-8.69(m，1H)，8.60-8.64(m，1H)，8.19(s，1H)，8.01-8.06(m，1H)，7.89-7.95(m，1H)，7.75(d，1H)，7.53-7.59(m，1H)，7.49(d，1H)，7.33-7.38(m，1H)，6.77-6.83(m，1H)，6.72(s，1H)，6.64-7.25(m，2H)，6.56-6.62(m，1H)，6.51(q，1H)，1.93(d，3H)。
實施例69：5-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)吡啶-3-醇
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)吡啶-3-醇(0.028g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(5mL)中的混合物，EtOH(0.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱3h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝70:30)，得到標題化合物(0.0135g)。MS/ESI+449.3[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.23(br.s.，1H)，8.71-8.76(m，1H)，8.63(d，1H)，8.31(d，1H)，8.16-8.27(m，2H)，7.93(td，1H)，7.76(d，1H)，7.50(d，1H)，7.34-7.42(m，2H)，6.94(br.s.，2H)，6.79-6.85(m，1H)，6.71(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.52(q，1H)，1.93(d，3H)。
實施例70：4-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯酚
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，(3-氟-4-羥基苯基)硼酸(0.019g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(8mL)中的混合物，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝70:30)，得到標題化合物(0.015g)。MS/ESI+466.0[MH]+，Rt 0.75min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.71-8.77(m，1H)，8.64(d，1H)，8.17(s，1H)，7.89-7.97(m，1H)，7.76(d，1H)，7.50(d，1H)，7.24-7.44(m，3H)，7.07-7.16(m，1H)，6.77-6.86(m，1H)，6.71(s，1H)，6.56-6.64(m，1H)，6.44-6.53(m，1H)，6.25-7.22(m，2H)，1.92(d，3H)。
實施例71：5-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯酚
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，(4-氟-3-羥基苯基)硼酸(0.019g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(8mL)中的混合物，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝85：25)，得到標題化合物(0.012g)。MS/ESI+466.4[MH]+，Rt 0.78min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.15(br.s.，1H)，8.72-8.75(m，1H)，8.64(d，1H)，8.18(s，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.22-7.40(m，3H)，7.04-7.09(m，1H)，6.78-6.86(m，1H)，6.69(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.49(q，1H)，6.00-7.60(m，2H)，1.92(d，3H)。
實施例72：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氯苯酚
與實施例60類似地制備，從起始，3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，(3-氯-5-羥基苯基)硼酸(0.021g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(8mL)中的混合物，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.2mL)，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.019g)。MS/ESI+482.0[MH]+，Rt 0.87min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.71-8.75(m，1H)，8.61-8.65(m，1H)，8.19(s，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.34-7.39(m，1H)，7.08-7.11(m，1H)，7.00-7.04(m，1H)，6.89-6.93(m，1H)，6.78-6.85(m，1H)，6.68(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.51(q，1H)，6.41-7.45(m，2H)，1.92(d，3H)。
NH2不清晰可見：寬信號在芳香區域(2H)。
實施例73：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯-1-磺酰胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，(3-氨磺酰基苯基)硼酸(0.029g，0.144mmol)和Pd(PPh3)4(6.9mg，0.0060mmol)在DME(12mL)中的混合物，EtOH(1.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.75mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.015g)。MS/ESI+511.2[MH]+，Rt 0.72min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71-8.74(m，1H)，8.62(d，1H)，8.20(s，1H)，8.12-8.16(m，1H)，7.89-7.97(m，2H)，7.87(d，1H)，7.71-7.80(m，2H)，7.45-7.53(m，3H)，7.33-7.40(m，1H)，6.78-6.84(m，1H)，6.68(s，1H)，6.56-6.64(m，1H)，6.53(q，1H)，6.40-7.33(m，2H)，1.94(d，3H)。
實施例74：N-[3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯基]甲磺酰胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，N-[3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲磺酰胺T1(0.052g，0.166mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(5mL)中的混合物，EtOH(0.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱2h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為白色固體(0.034g)。MS/ESI+543.2[MH]+，Rt 0.84min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.70-8.73(m，1H)，8.61(d，1H)，8.18(s，1H)，7.91(td，1H)，7.74(d，1H)，7.48(d，1H)，7.32-7.38(m，1H)，7.28-7.31(m，1H)，7.06-7.17(m，2H)，6.77-6.83(m，1H)，6.69(s，1H)，6.55-6.62(m，1H)，6.49(q，1H)，6.40-7.53(m，2H)，3.11(s，3H)，1.92(d，3H)。
實施例75：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯-1-磺酰胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯-1-磺酰胺T2(0.050g，0.145mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(5mL)中的混合物，EtOH(0.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.014g)。MS/ESI+529.2[MH]+，Rt 0.79min。(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.70-8.74(m，1H)，8.59-8.63(m，1H)，8.20(s，1H)，7.96-7.99(m，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.63-7.70(m，2H)，7.61(s，2H)，7.48(d，1H)，7.33-7.39(m，1H)，7.07(br.s，2H)，6.78-6.84(m，1H)，6.67(s，1H)，6.56-6.62(m，1H)，6.53(q，1H)，1.94(d，3H)。
實施例76：3-(3-氨基-5-氟苯基)-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.050g，0.104mmol)，3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯胺T3(0.030g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)在DME(5mL)中的混合物，EtOH(0.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱3h。添加額外的3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯胺T3(10mg)和Pd(PPh3)4(6.0mg，0.0052mmol)并繼續加熱1h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:EtOAc＝95:5)，得到標題化合物(0.011g)。MS/ESI+465.3[MH]+，Rt 0.79min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.72-8.76(m，1H)，8.64(d，1H)，8.18(s，1H)，7.90-7.96(m，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.34-7.39(m，1H)，6.79-6.84(m，1H)，6.67-6.72(m，2H)，6.57-6.63(m，1H)，6.41-6.54(m，3H)，6.25-7.32(m，2H)，5.71(s，2H)，1.92(d，3H)。
實施例77：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-羥基芐腈
與實施例60類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，3-羥基-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)芐腈T4(0.037g，0.150mmol)和Pd(PPh3)4(7.2mg，0.0063mmol)在DME(9.5mL)中的混合物，EtOH(2.9mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.4mL)起始，在80℃下加熱過夜。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.017g)。MS/ESI+473.3[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.47(s，1H)，8.71-8.75(m，1H)，8.63(d，1H)，8.19(s，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.44-7.47(m，1H)，7.33-7.40(m，2H)，7.22-7.26(m，1H)，7.01(br.s.，2H)，6.79-6.85(m，1H)，6.70(s，1H)，6.57-6.64(m，1H)，6.52(q，1H)，1.93(d，3H)。
實施例78：3-[3-氟-5-(1H-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基]-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺:氨2:1
將3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.100g，0.208mmol)分為兩個批料(每一個0.050g，0.104mmol)。在80℃下使兩個批料與5-[3-氟-5-(四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1H-1,2,3,4-四唑T6(每一個0.036g，0.125mmol)和Pd(PPh3)4(每一個6.0mg，0.0052mmol)在DME(每一個5.0mL)，乙醇(每一個0.8mL)和飽和碳酸鈉水溶液(每一個1.2mL)中反應過夜。添加水并將混合物酸化至pH 5-6用1N HCl水溶液并用DCM萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。一批通過快速色譜在10g硅膠Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH 90:10，具有0.01％甲酸)。將獲得的化合物與第二粗品混合，并通過快速色譜法在10g Biotage硅膠SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝70:30)。進行通過反相半制備型MDAP在堿性條件(方法F)下的進一步純化，得到標題化合物(7.0mg)。MS/ESI+518.4[MH]+，Rt 0.85min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73(d，1H)，8.62(d，1H)，8.20(s，1H)，8.16(t，1H)，7.93(td，1H)，7.83-7.89(m，1H)，7.76(d，1H)，7.45-7.53(m，2H)，7.33-7.38(m，1H)，6.76-6.83(m，1H)，6.70(s，1H)，6.56-6.62(m，1H)，6.53(q，1H)，6.41-7.54(m，2H)，1.94(d，3H)。
實施例79：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
將3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.465g，0.96mmol)在5個小瓶中平均分配。在80℃下使每一個與(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.0374g，0.24mmol)，Pd(PPh3)4(0.011g，0.0094mmol)，DME(18.7ml)，乙醇(2.8ml)和飽和碳酸鈉水溶液(5.3ml)反應過夜。然后將它們收集并在水中淬滅，最后用DCM萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將殘余物通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM:MeOH＝98:2至94:6)，得到標題化合物(0.265g)。MS/ESI+466.3[MH]+，Rt 0.81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.69-8.75(m，1H)，8.59-8.65(m，1H)，8.17(s，1H)，7.91(td，1H)，7.74(d，1H)，7.49(d，1H)，7.32-7.38(m，1H)，6.89-6.93(m，1H)，6.77-6.89(m，2H)，6.63-6.70(m，2H)，6.56-6.62(m，1H)，6.49(q，1H)，6.40-7.46(m，2H)，1.91(d，3H)。
實施例80(對映異構體1)和
實施例81(對映異構體2)：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚單一對映異構體
將實施例79中描述的外消旋3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚(0.260g)溶于EtOH/MeOH 1/1(38mL)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x2.0cm)；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)80/20v/v；UV檢測：220nM；流速：13mL/min；注射：20.4mg。
化合物80作為第一洗脫對映異構體得到，為黃色固體(0.095g)。MS/ESI+466.3[MH]+，Rt 0.82min(方法A)。手性HPLC方法H：Rt.＝8.2min，ee>99％
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.21(br.s.，1H)，8.69-8.75(m，1H)，8.60-8.66(m，1H)，8.18(s，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.32-7.39(m，1H)，6.90-6.94(m，1H)，6.78-6.90(m，2H)，6.64-6.71(m，2H)，6.56-6.62(m，1H)，6.49(q，1H)，6.40-7.46(m，2H)，1.91(d，3H)。
化合物81作為第二洗脫對映異構體得到，黃色固體(0.095g)。MS/ESI+466.4[MH]+，Rt 0.82min(方法A)。手性HPLC方法H：Rt.＝13.2min，ee>99％。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.21(br.s.，1H)，8.70-8.75(m，1H)，8.60-8.66(m，1H)，8.18(s，1H)，7.92(td，1H)，7.75(d，1H)，7.50(d，1H)，7.32-7.39(m，1H)，6.90-6.94(m，1H)，6.77-6.89(m，2H)，6.64-6.71(m，2H)，6.56-6.63(m，1H)，6.49(q，1H)，6.40-7.46(m，2H)，1.91(d，3H)。
實施例82：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
3-碘-1-{1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W4(0.216g，0.45mmol)分在兩個小瓶中(0.108g，每一個)；在80℃下使每一個與(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(每一個0.0455g，0.29mmol)，Pd(PPh3)4(每一個0.013g，0.011mmol)，DME(每一個15.4mL)，乙醇(每一個2.3mL)和飽和碳酸鈉水溶液(每一個4.2mL)反應過夜。然后，將它們收集并用水淬滅并用DCM萃取。將合并的有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將殘余物通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物(0.100g)。MS/ESI+466.3[MH]+，Rt 0.68min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(br.s.，1H)，8.62-8.68(m，2H)，8.19(s，1H)，8.07(d，1H)，7.48-7.55(m，3H)，6.89-6.93(m，1H)，6.77-6.88(m，2H)，6.76(s，1H)，6.64-6.70(m，1H)，6.55-6.62(m，1H)，6.30(q，1H)，6.20-7.46(m，2H)，1.90(d，3H)。
實施例83(對映異構體1)和
實施例84(對映異構體2)：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚單一對映異構體
將在實施例82中所描述的外消旋3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚(0.100g)溶于EtOH(60mL)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak IC(25x2.0cm)，5μ；流動相：正己烷/(2-丙醇+0.1％異丙基胺)60/40％v/v；UV檢測：220nM；流速：16mL/min；注射：8.3mg。
化合物83作為第一洗脫對映異構體得到，為淺黃色粉末(0.030g)。MS/ESI+466.4[MH]+，Rt 0.68min(方法A)。手性HPLC方法I：Rt＝6.8min，95.2％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，2H)，8.62-8.69(m，2H)，8.19(s，1H)，8.07(d，1H)，7.48-7.55(m，3H)，6.89-6.93(m，1H)，6.77-6.88(m，2H)，6.76(s，1H)，6.64-6.71(m，1H)，6.55-6.62(m，1H)，6.30(q，1H)，6.20-7.47(m，2H)，1.89(d，3H)。
化合物84作為第二洗脫對映異構體得到，為淺黃色粉末(0.032g)。MS/ESI+466.3[MH]+，Rt 0.69min(方法A)。手性HPLC方法I：Rt＝8.7min，97.8％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.62-8.68(m，2H)，8.19(s，1H)，8.06(d，1H)，7.48-7.55(m，3H)，6.88-6.93(m，1H)，6.77-6.88(m，2H)，6.76(s，1H)，6.64-6.71(m，1H)，6.55-6.62(m，1H)，6.30(q，1H)，6.20-7.47(m，2H)，1.89(d，3H)。
實施例85：3-{4-氨基-1-[1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
將3-碘-1-[1-(3-苯基吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W1(0.110g，0.23mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.040g，0.25mmol)和Pd(PPh3)4(14.4mg，0.012mmol)在DME(9.5mL)中的混合物，EtOH(1.66mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.2mL)在80℃下加熱2h。將混合物分配在水和DCM之間，將水相用DCM萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥。將溶劑在減壓下除去并將殘余物通過快速色譜法在28g硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM:MeOH＝99:1至80:20)，得到標題化合物，為白色固體(0.077g)。MS/ESI+465.3[MH]+，Rt 1.09min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，7.83(d，1H)，7.38-7.54(m，6H)，6.91(br.s.，1H)，6.81-6.89(m，1H)，6.62-6.74(m，3H)，6.46-6.53(m，1H)，6.26-7.37(m，2H)，6.21(q，1H)，1.84(d，3H)。
實施例86：3-(4-氨基-1-{1-[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟-苯酚
與實施例85類似地制備，從1-{1-[3-(2-氟苯基)吲嗪-2-基]乙基}-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W3(0.114g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.039g，0.251mmol)和Pd(PPh3)4(0.013g，0.0114mmol)在DME(9.4mL)中的混合物，EtOH(1.6mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.2mL)起始，在80℃下加熱3h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM:MeOH＝98:2至80:20)，得到標題化合物，為白色固體(0.020g)。MS/ESI+483.0[MH]+，Rt 1.03min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.12-10.18(m，1H)，8.02-8.18(m，1H)，7.16-7.62(m，6H)，6.49-6.95(m，6H)，6.09-6.25(m，1H)，6.00-7.5(m，2H)，1.76-1.95(M，3H)
實施例87：3-(4-氨基-1-{1-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從粗3-碘-1-{1-[6-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W5(0.130g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.041g，0.26mmol)和Pd(PPh3)4(0.015g，0.013mmol)在DME中的混合物(15mL)，EtOH(2.6mL)和飽和Na2CO3水溶液(4mL)起始，在80℃下加熱過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為灰白色固體(0.012g)。MS/ESI+480.3[MH]+，Rt 0.88min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(s，1H)，8.70-8.74(m，1H)，8.39(s，1H)，8.16(s，1H)，7.89(td，1H)，7.70(d，1H)，7.41(d，1H)，7.31-7.37(m，1H)，6.89-6.92(m，1H)，6.82-6.88(m，1H)，6.60-6.71(m，3H)，6.45(q，1H)，6.22-7.30(m，2H)，2.15(s，3H)，1.88(d，3H)。
實施例88：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-6-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W6(0.085g，0.155mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.029g，0.186mmol)和Pd(PPh3)4(9mg，0.008mmol)在DME(7.0mL)中的混合物，EtOH(1.1mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.7mL)起始，在80℃下加熱3h。添加額外的(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.029g，0.186mmol)和Pd(PPh3)4(9mg，0.008mmol)并繼續加熱過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為灰白色固體(20.5mg)。MS/ESI+534.3[MH]+，Rt 1.09min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.22(br.s.，1H)，9.09(br.s.，1H)，8.75-8.81(m，1H)，8.20(s，1H)，7.97(td，1H)，7.85(d，1H)，7.75(d，1H)，7.40-7.46(m，1H)，6.98-7.04(m，1H)，6.90-6.95(m，2H)，6.84-6.90(m，1H)，6.65-6.71(m，1H)，6.51(q，1H)，6.40-7.40(m，2H)，1.94(d，3H)。
實施例89：3-(4-氨基-1-{1-[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從粗3-碘-1-{1-[1-甲基-3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W7(0.106g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.0233g，0.15mmol)和Pd(PPh3)4(6.6mg，0.005mmol)在DME(7.0mL)中的混合物，EtOH(1.3mL)和飽和Na2CO3水溶液(2mL)起始，在80℃下加熱過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM:MeOH＝99:1至95:5)，得到標題化合物(4.0mg)。MS/ESI+480.0[MH]+，Rt 81min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.74-8.78(m，1H)，8.32(d，1H)，8.11(s，1H)，7.95(td，1H)，7.81(d，1H)，7.46(d，1H)，7.37-7.43(m，1H)，6.92-6.96(m，1H)，6.83-6.89(m，1H)，6.71-6.77(m，1H)，6.63-6.71(m，1H)，6.48-6.56(m，1H)，6.38-6.46(m，1H)，6.36-7.36(m，2H)，2.39(s，3H)，1.94(d，3H)。
實施例90：3-[4-氨基-1-(1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從粗3-碘-1-(1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)噻吩-2-基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W8(0.325g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.095g，0.61mmol)和Pd(PPh3)4(0.032g，0.027mmol)在DME(20mL)中的混合物，EtOH(3.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(7.6mL)起始，在80℃下加熱4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝94:6)，得到標題化合物，為白色固體(0.074g)。MS/ESI+570.2[MH]+，Rt 1.02min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.15(s，1H)，8.13(s，1H)，7.94(d，1H)，7.46(d，1H)，7.03(d，1H)，6.99(d，1H)，6.87-6.91(m，1H)，6.80-6.86(m，1H)，6.71-6.78(m，1H)，6.61-6.68(m，2H)，6.56-6.61(m，1H)，6.50-7.43(m，2H)，6.30(q，1H)，3.63-3.73(m，2H)，3.52-3.61(m，4H)，2.35-3.45(m，4H)，1.85(d，3H)。
實施例91：3-[4-氨基-1-(1-{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-(1-{3-[4-(嗎啉-4-基甲基)苯基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W9(0.320g，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.094g，0.60mmol)和Pd(PPh3)4(0.032g，0.027mmol)在DME中的混合物(21mL)，EtOH(3.9mL)和飽和Na2CO3水溶液(7.5mL)起始，在80℃下加熱4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，為淺黃色固體(0.057g)。MS/ESI+564.0[MH]+，Rt 3.89min(方法D)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(br.s.，1H)，8.14(s，1H)，7.81(d，1H)，7.45(d，1H)，7.30-7.40(m，4H)，6.86-6.89(m，1H)，6.79-6.85(m，1H)，6.63-6.73(m，3H)，6.46-6.51(m，1H)，6.32-7.30(m，2H)，6.25(q，1H)，3.57-3.66(m，4H)，3.50(s，2H)，2.33-2.42(m，4H)，1.84(d，3H)。
實施例92：3-{4-氨基-1-[1-(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從1-[1-(3-{4-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W10(0.188g，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.060g，0.38mmol)和Pd(PPh3)4(0.020g，0.017mmol)在DME(13mL)中的混合物，EtOH(2.4mL)和飽和Na2CO3水溶液(4.8mL)起始，在80℃下加熱4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)。在堿性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法F)，得到標題化合物，為黃色固體(0.022g)。MS/ESI+522.3[MH]+，Rt 1.04min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.38(br.s.，1H)，8.14(s，1H)，7.83(d，1H)，7.44(d，1H)，7.34-7.39(m，4H)，6.87(br.s.，1H)，6.76-6.82(m，1H)，6.59-6.73(m，3H)，6.46-6.52(m，1H)，6.23(q，1H)，6.17-7.30(m，2H)，3.43(s，2H)，2.18(s，6H)，1.83(d，3H)。
實施例93：3-{4-氨基-1-[1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從1-[1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W11(0.091g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.029g，0.187mmol)和Pd(PPh3)4(0.010g，0.009mmol)在DME中的混合物(6.3mL)，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.3mL)起始，在80℃下加熱4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)。在堿性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法F)，得到標題化合物，為白色固體(0.032g)。MS/ESI+522.3[MH]+，Rt 1.07min(方法C)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(s，1H)，8.15(s，1H)，7.82(d，1H)，7.40-7.49(m，2H)，7.28-7.36(m，2H)，7.23(br.s.，1H)，6.88-6.92(m，1H)，6.82-6.87(m，1H)，6.64-6.74(m，3H)，6.48-6.54(m，1H)，6.20(q，1H)，5.16-7.49(m，2H)，3.39(br.s.，2H)，2.14(s，6H)，1.84(d，3H)。
實施例94：3-(4-氨基-1-{1-[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-{1-[3-(1,3-噻唑-5-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W12(0.042g，0.086mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.015g，0.095mmol)和Pd(PPh3)4(5.0mg，0.0043mmol)在DME中的混合物(3.5mL)，EtOH(0.62mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱4h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在28g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝94:6)，得到標題化合物，為白色固體(0.016g)。MS/ESI+472.3[MH]+，Rt 0.90min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，9.29(s，1H)，8.15(s，1H)，8.02(s，1H)，7.89(d，1H)，7.51(d，1H)，6.89-6.92(m，1H)，6.78-6.88(m，2H)，6.72(s，1H)，6.59-6.69(m，2H)，6.22(q，1H)，6.12-7.72(m，2H)，1.88(d，3H)。
實施例95：1-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)吡咯烷-2-酮
與實施例85類似地制備，從1-[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]吡咯烷-2-酮W13(0.034mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.012g，0.076mmol)和Pd(PPh3)4(4.0mg，0.003mmol)在DME中的混合物(2.8mL)，EtOH(0.50mL)和飽和Na2CO3水溶液(0.95mL)起始，在80℃下加熱4h；添加額外的(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.012g，0.076mmol)和Pd(PPh3)4(0.004g，0.003mmol)并將混合物在相同溫度下加熱過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在2g硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝94:6)。在堿性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法F)，得到標題化合物，為粉色固體(非對映異構體的混合物，比例～65/35，通過1H NMR確定)(0.004g)。MS/ESI+472.3[MH]+，Rt 0.78min(方法C)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 10.38(br.s.，1H)，8.27(s，1H)，7.86(d，1H)，7.41-7.45(m，1H)，6.82-6.88(m，1H)，6.70-6.81(m，2H)，6.53-6.64(m，3H)，6.39-7.50(m，2H)，6.11(q，1H)，3.57-3.63(m，1H)，2.90-2.97(m，1H)，2.38-2.56(m，2H)，2.12-2.20(m，1H)，1.84-1.94(m，4H)。光譜是指最豐富的異構體。
實施例96：3-(4-氨基-1-{1-[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從粗3-碘-1-{1-[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W15(0.060g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.027g，0.17mmol)和Pd(PPh3)4(7.0mg，0.006mmol)在DME(12mL)中的混合物，EtOH(1.8mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.42mL)起始，在80℃下加熱2h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝97:3)；通過快速色譜法在10g硅膠Biotage SNAP柱上進一步純化(DCM至DCM:MeOH＝97:3)，得到標題化合物(0.010g)。MS/ESI+467.2[MH]+，Rt 0.73min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.21(s，1H)，8.71-8.75(m，1H)，8.25-8.32(m，2H)，8.13(s，1H)，8.00-8.04(m，1H)，7.92(td，1H)，7.31-7.36(m，1H)，7.04(q，1H)，6.88-6.98(m，2H)，6.79(dd，1H)，6.65-6.71(m，1H)，6.59(s，1H)，6.40-7.50(m，2H)，1.95(d，3H)。
實施例97:3-(4-氨基-1-{[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-{[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W16(0.020g，0.043mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(7.3mg，0.047mmol)和Pd(PPh3)4(2.5mg，0.0022mmol)在DME(4.5mL)中的混合物，EtOH(0.65mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。添加額外的(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(7.3mg，0.047mmol)和Pd(PPh3)4(2.5mg，0.0022mmol)并繼續加熱另外的2h。在后處理之后，將粗品通過快速色譜法在硅膠-NH Biotage SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝85:15)，得到標題化合物(0.012g)。MS/ESI+452.2[MH]+，Rt 0.78min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.91-8.95(m，1H)，8.75-8.80(m，1H)，8.28(s，1H)，7.93-8.03(m，2H)，7.44(d，1H)，7.36-7.42(m，1H)，6.90-6.93(m，1H)，6.79-6.89(m，2H)，6.61-6.70(m，2H)，6.35-7.46(m，2H)，6.26(s，1H)，5.79(s，2H)。
實施例98：3-(4-氨基-1-{[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-{[3-(吡啶-3-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W17(0.035g，0.075mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.015g，0.097mmol)和Pd(PPh3)4(4.3mg，0.0037mmol)在DME中的混合物(7.5mL)，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.1mL)起始，在80℃下加熱過夜。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝80:20)，得到標題化合物(0.011g)。MS/ESI+452.3[MH]+，Rt 0.74min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(br.s.，1H)，8.84(d，1H)，8.63-8.66(m，1H)，8.26(s，1H)，8.04-8.09(m，1H)，8.01(d，1H)，7.54-7.59(m，1H)，7.44(d，1H)，6.88-6.91(m，1H)，6.81-6.87(m，1H)，6.74-6.80(m，1H)，6.63-6.70(m，1H)，6.54-6.60(m，1H)，6.45(s，1H)，6.20-7.53(m，2H)，5.59(s，2H)。
實施例99：3-(4-氨基-1-{[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，從3-碘-1-{[3-(吡啶-4-基)吲嗪-2-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W18(0.055g，0.118mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.020g，0.130mmol)和Pd(PPh3)4(6.8mg，0.006mmol)在DME(8mL)中的混合物，EtOH(1.2mL)和飽和Na2CO3水溶液(2.2mL)起始，在80℃下加熱過夜。添加額外的(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(1eq)和Pd(PPh3)4(6.8mg，0.006mmol)并繼續加熱另外的2h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)；在SCX柱(1g)上進一步純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物(0.009g)。MS/ESI+452.3[MH]+，Rt 0.61min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.70-8.76(m，2H)，8.21-8.31(m，2H)，7.71-7.77(m，2H)，7.43-7.49(m1H)，6.89-6.93(m，1H)，6.77-6.88(m，2H)，6.59-6.70(m，2H)，6.40(s，1H)，6.00-7.70(m，2H)，5.66(s，2H)。
實施例100：3-(4-氨基-1-{[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與實施例85類似地制備，由3-碘-1-{[7-(吡啶-2-基)吡咯并[1,2-b]噠嗪-6-基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W19(0.026g，0.05mmol)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.0113g，0.072mmol)和Pd(PPh3)4(2.9mg，0.0025mmol)在DME(5mL)中的混合物，EtOH(0.75mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.42mL)起始，在80℃下加熱3h。后處理之后，將粗品通過快速色譜法在10g Biotage硅膠SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.012g)。MS/ESI+453.3[MH]+，Rt 0.66min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(s，1H)，8.74-8.77(m，1H)，8.50(d，1H)，8.30-8.34(m，1H)，8.23(s，1H)，7.93-8.00(m，2H)，7.32-7.38(m，1H)，6.90-6.95(m，1H)，6.85-6.91(m，1H)，6.81(dd，1H)，6.63-6.69(m，1H)，6.20-7.77(m，2H)，6.12(s，1H)，6.06(s，2H)。
實施例101：3-(4-氨基-1-{1-[3-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
在0℃下向4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1,2,3,6-四氫吡啶-1-甲酸叔丁基酯X(0.021g，0.037mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液中，緩慢添加三氟乙酸(0.017mL，0.22mmol)并將溶液在室溫下攪拌3天。將混合物分配在飽和NaHCO3水溶液和DCM之間，將水相進一步用DCM:MeOH(5:1)的混合物萃取并將合并的有機層用鹽水洗滌，用無水MgSO4干燥并濃縮。將粗品通過反相快速色譜在1g C-18柱上純化(H2O+0.1％甲酸:CH3CN+0.1％甲酸＝95:5至50:50)。在堿性條件下通過反相半制備型MDAP進一步純化(方法F)，得到標題化合物，為橙色固體(2mg)。MS/ESI+570.2[MH]+，Rt 1.17min(方法C)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.27(s，1H)，7.83(d，1H)，7.33(d，1H)，6.87-6.90(m，1H)，6.80-6.85(m，1H)，6.59-6.66(m，3H)，6.46(t，1H)，6.37(q，1H)，5.73-5.78(m，1H)，3.35-3.38(m，2H)，2.90-2.98(m，1H)，2.80-2.90(m，1H)，2.25-2.35(m，1H)，1.94-2.05(m，4H)。
OH，NH和NH2由于與MeOH的化學交換而不可見。
實施例102：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)丙-2-炔-1-醇
將3-碘-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W2(0.060g，0.125mmol)，炔丙醇(0.036mL，0.625mmol)，CuI(8.3mg，0.044mmol)和二乙基胺(0.13mL，1.25mmol)在DMF(0.5mL)中的混合物脫氣，然后添加Pd(PPh3)2Cl2(0.015g，0.021mmol)并將反應在室溫下攪拌2h。將混合物用EtOAc稀釋并通過C鹽墊過濾；將濾液用水和鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在11g Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH 90:10)。在SCX(1g)柱上進一步純化，用1M氨的MeOH溶液洗脫，得到標題化合物(9.7mg)。MS/ESI+410.3[MH]+，Rt 0.67min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.71-8.75(m，1H)，8.64(d，1H)，8.15(s，1H)，7.93(td，1H)，7.72(d，1H)，7.51(d，1H)，7.34-7.39(m，1H)，6.79-6.86(m，1H)，6.57-6.66(m，2H)，6.44(q，1H)，6.00-8.00(m，2H)，5.45(t，1H)，4.40(d，2H)，1.87(d，3H)。
實施例103：5-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-1,3-噻唑-2-胺
在0℃下向N-[5-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-1,3-噻唑-2-基]氨基甲酸叔丁基酯Y(0.060g，0.108mmol)在DCM(2mL)中的溶液中，緩慢添加TFA(0.050mL，0.650mmol)，讓后將反應在室溫下攪拌3h。添加額外的TFA(0.648mmol)并將反應混合物在室溫下攪拌過夜。在減壓下除去揮發物并將粗品通過反相快速色譜在12g Biotage C18 SNAP柱上純化(H2O+0.1％甲酸:乙腈+0.1％甲酸＝95:5至70:30)，得到標題化合物(0.014g)。MS/ESI+454.3[MH]+，Rt 0.59min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.72-8.76(m，1H,)8.64(d，1H)，8.15(s，1H)，7.94(td，1H)，7.75(d，1H)，7.49(d，1H)，7.35-7.40(m，1H)，7.29(s，1H)，7.27(br.s，2H)，6.99(br.s.，2H)，6.78-6.85(m，1H)，6.65(s，1H)，6.57-6.63(m，1H)，6.42(q，1H)，1.88(d，3H)。
實施例117：3-(4-氨基-1-{1-[3-(5-{[雙(2-羥基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
將粗3-碘-1-[1-(3-{5-[(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)甲基]吡啶-2-基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W32(0.214)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.044g，0.285mmol)和Pd(PPh3)4(0.015g，0.013mmol)在DME(9.3ml)中的混合物，EtOH(1.7mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.5ml)在80℃下加熱3h。將混合物分配在水和DCM之間并將水相用DCM萃取；將合并的有機層用鹽水洗滌并用硫酸鈉干燥并將溶劑在減壓下除去。將殘余物溶于1M的HCl水溶液在EtOH中的溶液(從37％HCl水溶液的EtOH溶液制備)(3.5mL)并將混合物在室溫下攪拌3h。在減壓下除去揮發物并將粗品溶于MeOH，裝入SCX柱(1g)，用MeOH洗滌，然后用1M NH3的MeOH溶液洗脫。將堿性級分蒸發并將殘余物通過快速色譜法在硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝85:15)，得到標題化合物，為黃色固體(0.040g)。MS/ESI+583.3[MH]+，Rt 0.62min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(s，1H)，8.65-8.68(m，1H)，8.60(d，1H)，8.17(s，1H)，7.87(dd，1H),7.70(d，1H)，7.46-7.50(m，1H)，6.90-6.93(m，1H)，6.83-6.89(m，1H)，6.76-6.82(m，1H)，6.64-6.69(m，2H)，6.55-6.61(m，1H)，6.49(q，1H)，6.20-7.30(m，2H)，4.43(t，2H)，3.76(s，2H)，3.46-3.56(m，4H)，2.60(t，4H)，1.90(d，3H)。
實施例124：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-1-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
步驟1：3-{3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-氟苯基}-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-1-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺124a
向1-[3-(吡啶-2-基)-1-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙-1-醇M41(0.065g，0.21mmol)，3-{3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-氟苯基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺AA7(0.091g，0.25mmol)和PPh3(0.072g，0.27mmol)在干THF(3mL)中的混合物中，逐滴添加DIAD(0.049ml，0.25mmol)在THF(1mL)中的溶液并將反應在室溫下攪拌1h。將溶劑除去并將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物，(0.100g)，將其未經任何額外的純化而使用。MS/ESI+648.4[MH]+，Rt 1.56(方法A)。
步驟2：3-(4-氨基-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-1-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚124
向粗3-{3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-5-氟苯基}-1-{1-[3-(吡啶-2-基)-1-(三氟甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺124a(0.100g)在THF(1.7ml)中的溶液中，添加氟化四丁基銨1M在THF中(0.23ml，0.23mmol)的溶液并將所得混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后用DCM稀釋并用NH4Cl飽和水溶液淬滅。分離各相，將有機層用硫酸鈉干燥、過濾并濃縮。將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝98:3)。將所得產物通過制備型TLC進一步純化(DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(4.5mg)。MS/ESI+534.3[MH]+，Rt 1.00(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.23(br.s.，1H)，8.58-8.61(m，1H)，8.12(s，1H)，7.74-7.83(m，2H)，7.64-7.69(m，1H)，7.47-7.51(m，1H)，7.29-7.34(m，1H)，7.13-7.18(m，1H)，6.73-6.81(m，2H)，6.67-6.72(m，1H)，6.64(dt，1H)，6.31(q，1H)，6.00-7.73(m，2H)，1.91(d，3H)。
實施例143：3-(4-氨基-1-{1-[3-({9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基}甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
步驟1：9-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁基酯143a
與實施例85類似地制備，從粗9-{[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]甲基}-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁基酯W56(0.370g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.129g，0.828mmol)和Pd(PPh3)4(0.032g，0.028mmol)在DME(18ml)中的混合物，EtOH(3mL)和飽和Na2CO3水溶液(5.5ml)起始，在80℃下加熱過夜；后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝95:5)，得到標題化合物(0.017g，0.026mmol)。MS/ESI+655.5[MH]+，Rt 1.46min(方法J)。
步驟2：3-(4-氨基-1-{1-[3-({9-甲基-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基}甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚143
在氮氣下將9-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸叔丁基酯143a(17mg，0.026mmol)和1M LiAlH4的THF溶液(0.156mL，0.156mmol)在干THF(8mL)中的混合物在65℃下攪拌2h。將反應冷卻至0℃，添加硫酸鈉十水合物并將混合物在室溫下攪拌0.5h，然后將固體過濾掉并將濾液蒸發。將所得粗品通過色譜法在硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為白色固體(5mg)。MS/ESI+569.6[MH]+，Rt 1.09min(方法J)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.29(s，1H)，8.08(d，1H)，7.39(d，1H)，6.75-6.87(m，2H)，6.60-6.71(m，3H)，6.55(t，1H)，6.36(q，1H)，6.85(br.s，2H)，3.82(d，1H)，3.67(d，1H)，2.12-2.22(m，4H)，2.09(s，3H)，1.90(d，3H)，1.85-2.03(m，4H)，1.10-1.29(m，8H)。
實施例144：3-(4-氨基-1-{1-[3-({7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基}甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
步驟1：2-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁基酯144a
與實施例85類似地制備，從粗2-{[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]甲基}-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁基酯W57(0.056g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.027g，0.174mmol)和Pd(PPh3)4(0.010g，0.0087mmol)在DME(4ml)中的混合物，EtOH(0.5mL)和飽和Na2CO3水溶液(1.4ml)起始，在80℃下加熱過夜；后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝85:15)，得到標題化合物，為淺棕色固體(0.024g，0.038mmol)。MS/ESI+627.6[MH]+，Rt 0.77min(方法A)。
步驟2：3-(4-氨基-1-{1-[3-({7-甲基-2,7-二氮雜螺[3.5]壬-2-基}甲基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚144
與實施例143步驟2類似地制備，從2-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁基酯144a(24mg，0.038mmol)起始，在65℃下加熱過夜并通過快速色譜法在硅膠-NH柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為白色固體(6mg)。MS/ESI+541.5[MH]+，Rt 0.88min(方法J)。
1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 10.15(br.s.，1H)，8.30(s，1H)，8.11(d，1H)，7.39(d，1H)，6.85-6.91(m，1H)，6.78-6.83(m，1H)，6.60-6.71(m，3H)，6.51-6.57(m，1H)，6.41(q，1H)，6.32-8.39(m，2H)，3.69-4.07(m，2H)，2.52-2.63(m，4H)，1.80-2.22(m，10H)，1.36-1.51(m，4H)。
實施例145：3-{1-[1-(3-{[(3aR,6aS)-5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲基}吲嗪-2-基)乙基]-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
步驟1：(3aR,6aS)-5-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯145a
與實施例85類似地制備，從粗(3aR,6aS)-5-{[2-(1-{4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基}乙基)吲嗪-3-基]甲基}-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯W58(0.152g)，(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(0.041g，0.266mmol)和Pd(PPh3)4(0.014g，0.012mmol)在DME(8.6ml)中的混合物，EtOH(1.6mL)和飽和Na2CO3水溶液(3.3ml)起始，在80℃下加熱3h；后處理之后，將粗品通過快速色譜法在Biotage硅膠-NH SNAP柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(0.032g)。MS/ESI+613.3[MH]+，Rt 1.23min(方法C)。
步驟2：3-{1-[1-(3-{[(3aR,6aS)-5-甲基-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲基}吲嗪-2-基)乙基]-4-氨基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚145
與實施例143步驟2類似地制備，從(3aR,6aS)-5-[(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)甲基]-八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯145a(18mg，0.029mmol)起始，在65℃下加熱過夜并通過色譜法在硅膠-NH柱上純化(DCM:MeOH＝99:1至90:10)，得到標題化合物，為玻璃體固體(2.8mg)。MS/ESI+527.3[MH]+，Rt 0.99min(方法C)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 8.28(s，1H)，8.17(d，1H)，7.34(d，1H)，6.86-6.89(m，1H)，6.80-6.85(m，1H)，6.59-6.71(m，3H)，6.42-6.53(m，2H)，3.84-4.09(m，2H)，2.74-2.88(m，2H)，2.52-2.69(m，2H)，2.28-2.39(m，2H)，2.27(s，3H)，2.18-2.24(m，1H)，1.99(d，3H)，1.96-2.16(m，3H)。
實施例149：3-(4-氨基-1-{1-[3-(1-{2-[雙(2-羥基乙基)氨基]乙基}-1H-吡唑-3-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
與制備實施例117類似地，從3-碘-1-[1-(3-{1-[2-(2,2,3,3,11,11,12,12-八甲基-4,10-二氧雜-7-氮雜-3,11-二硅雜十三烷-7-基)乙基]-1H-吡唑-3-基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺W62(0.180g)和(3-氟-5-羥基苯基)硼酸(39.7mg，0.25mmol)起始。后處理之后，將粗品溶于MeOH并裝入SCX柱(10g)，用MeOH洗滌，然后用1M NH3的甲醇MeOH溶液洗脫。將堿性級分蒸發并將殘余物通過快速色譜法在硅膠柱上純化(DCM至DCM:MeOH＝90:10)，得到標題化合物，為黃色固體(8.7mg)。MS/ESI+586.5[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.69-8.73(m，1H)，8.22(s，1H)，7.97(d，1H)，7.41-7.45(m，1H)，6.94-6.97(m，1H)，6.87-6.92(m，1H)，6.78(d，1H)，6.69-6.75(m，1H)，6.66(dt，1H)，6.56-6.62(m，2H)，6.50(q，1H)，6.46-7.30(m，2H)，4.19-4.43(m，4H)，3.39(t，4H)，2.99(t，2H)，2.60(t，4H)，1.88(d，3H)。
實施例93a(對映異構體1)和
實施例93b(對映異構體2)：3-{4-氨基-1-[1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
將在實施例93中所描述的外消旋3-{4-氨基-1-[1-(3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚(0.330g)溶于EtOH/MeOH 1/1(140ml)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x3.0cm)，5μ；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)85/15％v/v；UV檢測：220nm；流速：34mL/min；注射：10.8mg。
化合物93a作為第一洗脫對映異構體得到，為淺棕色固體(0.105g)。MS/ESI+522.3[MH]+，Rt 0.70min(方法A)。手性HPLC方法K：Rt＝7.3min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.16(br.s.，1H)，8.14(s，1H)，7.78-7.83(m，1H)，7.40-7.48(m，2H)，7.28-7.34(m，2H)，7.22(s，1H)，6.88-6.92(m，1H)，6.80-6.87(m，1H)，6.62-6.74(m，3H)，6.54-8.10(m，2H)，6.47-6.53(m，1H)，6.20(q，1H)，3.32-3.40(m，2H)，2.12(s，6H)，1.83(d，3H)。
化合物93b作為第二洗脫對映異構體得到，為淺棕色固體(0.103g)。MS/ESI+522.3[MH]+，Rt 0.69min(方法A)。手性HPLC方法K：Rt＝10.5min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.15(br.s.，1H)，8.14(s，1H)，7.78-7.83(m，1H)，7.40-7.48(m，2H)，7.28-7.34(m，2H)，7.22(s，1H)，6.88-6.92(m，1H)，6.80-6.87(m，1H)，6.62-6.74(m，3H)，6.54-8.10(m，2H)，6.47-6.53(m，1H)，6.20(q，1H)，3.32-3.40(m，2H)，2.12(s，6H)，1.83(d，3H)。
實施例108a(對映異構體1)和
實施例108b(對映異構體2)：3-[4-氨基-1-(1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]-5-氟苯酚
將在實施例108中所描述的外消旋3-[4-氨基-1-(1-{3-[5-(嗎啉-4-基甲基)吡啶-2-基]吲嗪-2-基}乙基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]-5-氟苯酚(0.063g)溶于EtOH(8ml)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x2cm)，5um；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)70/30％v/v；UV檢測：220nm；流速：14mL/min；注射：9mg。
化合物108a作為第一洗脫對映異構體得到(23mg)。MS/ESI+565.4[MH]+，Rt 0.65min(方法A)。手性HPLC方法L：Rt＝12.8min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(br.s.，1H)，8.57-8.62(m，2H)，8.17(s，1H)，7.77(dd，1H)，7.68(d，1H)，7.48-7.53(m，1H)，6.86-6.90(m，1H)，6.77-6.86(m，2H)，6.71(s，1H)，6.66(dt，1H)，6.57-6.63(m，1H)，6.52(q，1H)，6.10-7.44(m，2H)，3.59-3.65(m，4H)，3.51-3.59(m，2H)，2.36-2.44(m，4H)，1.92(d，3H)。
化合物108b作為第二洗脫對映異構體得到(19mg)。MS/ESI+565.4[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。手性HPLC方法L：Rt＝16.0min，97.6％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.20(br.s.，1H)，8.57-8.62(m，2H)，8.17(s，1H)，7.77(dd，1H)，7.68(d，1H)，7.48-7.53(m，1H)，6.86-6.90(m，1H)，6.77-6.86(m，2H)，6.71(s，1H)，6.66(dt，1H)，6.57-6.63(m，1H)，6.52(q，1H)，6.10-7.44(m，2H)，3.59-3.66(m，4H)，3.51-3.59(m，2H)，2.36-2.45(m，4H)，1.92(d，3H)。
實施例114a(對映異構體1)和
實施例114b(對映異構體2)：3-{4-氨基-1-[1-(3-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚
將實施例114中所描述的外消旋3-{4-氨基-1-[1-(3-{5-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基}吲嗪-2-基)乙基]-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基}-5-氟苯酚(0.266g)溶于10ml乙醇+4ml正己烷并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x2.0cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)80/20％v/v；UV檢測：220nm；流速：18mL/min；注射：28.5mg。
化合物114a作為第一洗脫對映異構體得到，黃色固體(0.091g)。MS/ESI+578.4[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。手性HPLC方法M：Rt＝8.8min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.18(br.s.，1H)，8.54-8.60(m，2H)，8.15(s，1H)，7.72(dd，1H)，7.64(d，1H)，7.47-7.51(m，1H)，6.86-6.89(m，1H)，6.76-6.84(m，2H)，6.69(s，1H)，6.64(dt，1H)，6.55-6.60(m，1H)，6.51(q，1H)，6.10-7.30(m，2H)，3.48-3.58(m，2H)，2.22-2.49(m，8H)，2.16(s，3H)，1.90(d，3H)。
化合物114b作為第二洗脫對映異構體得到，黃色固體(0.091g)。MS/ESI+578.4[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。手性HPLC方法M：Rt＝15.3min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.54-8.60(m，2H)，8.15(s，1H)，7.72(dd，1H)，7.64(d，1H)，7.47-7.51(m，1H)，6.86-6.89(m，1H)，6.76-6.84(m，2H)，6.69(s，1H)，6.64(dt，1H)，6.55-6.60(m，1H)，6.51(q，1H)，6.10-7.30(m，2H)，3.48-3.58(m，2H)，2.22-2.49(m，8H)，2.16(s，3H)，1.90(d，3H)。
實施例117a(對映異構體1)和
實施例117b(對映異構體2)：3-(4-氨基-1-{1-[3-(5-{[雙(2-羥基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚
將實施例117中所描述的外消旋3-(4-氨基-1-{1-[3-(5-{[雙(2-羥基乙基)氨基]甲基}吡啶-2-基)吲嗪-2-基]乙基}-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)-5-氟苯酚(0.030g)溶于3ml(乙醇/正己烷1/1)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x2.0cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇/甲醇1/1+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nm；流速：17mL/min；注射：8mg。
化合物117a作為第一洗脫對映異構體得到(0.012g)。MS/ESI+583.4[MH]+，Rt 0.60min(方法A)。手性HPLC方法N：Rt＝5.3min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.75-10.50(m，1H)，8.65-8.68(m，1H)，8.58-8.62(m，1H)，8.17(s，1H)，7.87(dd，1H)，7.70(d，1H)，7.46-7.50(m，1H)，6.88-6.91(m，1H)，6.76-6.86(m，2H)，6.62-6.68(m，2H)，6.55-6.61(m，1H)，6.49(q，1H)，6.20-7.30(m，2H)，4.45(br.s.，2H)，3.76(s，2H)，3.51(t，4H)，2.60(t，4H)，1.90(d，3H)。
化合物117b作為第二洗脫對映異構體得到(0.012g)。MS/ESI+583.4[MH]+，Rt 0.60min(方法A)。手性HPLC方法N：Rt＝7.7min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(s，1H)，8.65-8.68(m，1H)，8.58-8.62(m，1H)，8.17(s，1H)，7.87(dd，1H)，7.70(d，1H)，7.46-7.50(m，1H)，6.90-6.93(m，1H)，6.84-6.89(m，1H)，6.76-6.82(m，1H)，6.64-6.69(m，2H)，6.55-6.61(m，1H)，6.49(q，1H)，6.20-7.30(m，2H)，4.43(t，2H)，3.76(s，2H)，3.47-3.55(m，4H)，2.60(t，4H)，1.90(d，3H)。
實施例121a(對映異構體1)和
實施例121b(對映異構體2)：4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮
將實施例121中所描述的外消旋4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1-[2-(嗎啉-4-基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮(0.225g)溶于50ml(乙醇/正己烷1/1)并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak IC(25x2.0cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nm；流速：19mL/min；注射：22mg。
化合物121a作為第一洗脫對映異構體得到(0.074g)。MS/ESI+595.4[MH]+，Rt 0.67min(方法J)。手性HPLC方法O：Rt＝14.9min，98％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，8.02-8.06(m，1H)，7.73(d，1H)，7.45-7.50(m，1H)，6.89-6.92(m，1H)，6.84-6.89(m，1H)，6.75-6.81(m，1H)，6.63-6.71(m，2H)，6.57-6.63(m，1H)，6.42-6.46(m，1H)，6.29-6.37(m，2H)，6.00-7.40(m，2H)，3.98-4.05(m，2H)，3.54-3.62(m，4H)，2.55-2.61(m，2H)，2.43-2.50(m，4H)，1.89(d，3H)。
化合物121b作為第二洗脫對映異構體得到(0.076g)。MS/ESI+595.4[MH]+，Rt 0.64min(方法J)。手性HPLC方法O：Rt＝17.9min，98％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，8.02-8.06(m，1H)，7.73(d，1H)，7.45-7.50(m，1H)，6.89-6.92(m，1H)，6.84-6.89(m，1H)，6.75-6.81(m，1H)，6.63-6.71(m，2H)，6.57-6.63(m，1H)，6.42-6.46(m，1H)，6.29-6.37(m，2H)，6.00-7.40(m，2H)，3.98-4.06(m，2H)，3.54-3.62(m，4H)，2.55-2.62(m，2H)，2.43-2.50(m，4H)，1.89(d，3H)。
實施例127a(對映異構體1)和
實施例127b(對映異構體2)：2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}-3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-1-甲腈
將實施例127中所描述的外消旋2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}-3-{3-[(二甲基氨基)甲基]苯基}吲嗪-1-甲腈(0.146g)溶于7ml乙醇/正己烷1/1并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak AD-H(25x2.0cm)，5μm；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)75/25％v/v；UV檢測：220nm；流速：17mL/min；注射：10.4mg。
化合物127a作為第一洗脫對映異構體得到(53.7mg)。MS/ESI+547.4[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。手性HPLC方法P：Rt＝5.7min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.12(s，1H)，7.89(d，1H)，7.67(d，1H)，7.43-7.49(m，1H)，7.37-7.42(m，1H)，7.27-7.33(m，1H)，7.17-7.26(m，2H)，6.84-6.92(m，3H)，6.64(dt，1H)，6.17(q，1H)，6.10-7.80(m，2H)，3.30-3.40(m，2H)，2.10(s，6H)，1.93(d，3H)。
化合物127b作為第二洗脫對映異構體得到(52.8mg)。MS/ESI+547.3[MH]+，Rt 0.64min(方法A)。手性HPLC方法P：Rt＝7.5min，99.6％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.12(s，1H)，7.89(d，1H)，7.67(d，1H)，7.43-7.49(m，1H)，7.37-7.42(m，1H)，7.27-7.33(m，1H)，7.17-7.26(m，2H)，6.84-6.92(m，3H)，6.64(dt，1H)，6.17(q，1H)，6.10-7.80(m，2H)，3.30-3.40(m，2H)，2.10(s，6H)，1.93(d，3H)。
實施例133a(對映異構體1)和
實施例133b(對映異構體2)：4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮
將實施例133中所描述的外消旋4-(2-{1-[4-氨基-3-(3-氟-5-羥基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]乙基}吲嗪-3-基)-1-[2-(二甲基氨基)乙基]-1,2-二氫吡啶-2-酮(55.0mg)溶于11ml乙醇并通過手性制備型液相色譜法進行手性拆分。條件：柱：Chiralpak IC(25x2.0cm)，5μ；流動相：正己烷/(乙醇+0.1％異丙基胺)70/30％v/v；UV檢測：220nm；流速：15mL/min；注射：5mg。
化合物133a作為第一洗脫對映異構體得到(17.3mg)。MS/ESI+553.5[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。手性HPLC方法Q：Rt＝7.7min，100％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.17(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，8.04(d，1H)，7.72(d，1H)，7.45-7.49(m，1H)，6.90-6.92(m，1H)，6.84-6.89(m，1H)，6.75-6.81(m，1H)，6.63-6.70(m，2H)，6.57-6.62(m，1H)，6.45(d，1H)，6.28-6.36(m，2H)，6.00-7.40(m，2H)，3.99(t，2H)，2.51-2.55(m，2H)，2.22(s，6H)，1.89(d，3H)。
化合物133b作為第二洗脫對映異構體得到(19.7mg)。MS/ESI+553.5[MH]+，Rt 0.63min(方法A)。手性HPLC方法Q：Rt＝8.9min，96.8％ee。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 10.19(br.s.，1H)，8.16(s，1H)，8.04(d，1H)，7.72(d，1H)，7.45-7.49(m，1H)，6.90-6.92(m，1H)，6.84-6.89(m，1H)，6.75-6.81(m，1H)，6.63-6.70(m，2H)，6.57-6.62(m，1H)，6.45(d，1H)，6.28-6.36(m，2H)，6.00-7.40(m，2H)，3.99(t，2H)，2.51-2.55(m，2H)，2.22(s，6H)，1.89(d，3H)。
本發明化合物的藥理學活性
PI3K酶抑制活性在無細胞測定中的體外測定
人重組蛋白PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ和PI3Kδ購自Millipore Ltd(Billerica，MA)。將化合物以0.5mM溶于DMSO，使用ADP-GloTM激酶測定法(Promega，Madison WI)，根據制造商的說明，在不同濃度下測試其對PI3Ks的活性。
簡言之，激酶反應在384-孔白色平板(Greiner Bio-One GmbH，Frickenhausen)上進行。給每個孔載入0.1μl測試化合物和2.5μl 2x反應緩沖液(40mM Tris pH7.5、0.5mM EGTA、0.5mM Na3VO4、5mMβ-甘油磷酸、0.1mg/ml BSA、1mM DTT)，其包含50μM PI和PS底物(L-α-磷脂酰肌醇鈉鹽和L-α-磷脂酰-L-絲氨酸，Sigma-Aldrich，St.Louis MO)和PI3K重組蛋白(PI3Kγ0.25ng/μl、PI3Kδ1ng/μl、PI3Kα0.125ng/μl、PI3Kβ1ng/μl)。
通過向每個孔中添加2.5μl 2x ATP溶液啟動反應(終濃度：PI3KγATP 30μM；PI3KδATP 80μM；PI3KαATP 50μM；PI3KβATP 100μM)，在室溫溫育60min。隨后，將每個激酶反應體系與5μl ADP-GloTM試劑一起溫育40min，從而能夠耗盡未消耗的ATP。然后向每個孔中加入激酶檢測試劑(10μl)，以便將ADP轉化成ATP，并且允許使用熒光素酶/熒光素反應測定新合成的ATP。60min溫育后，使用Wallac 多標記讀出器(PerkinElmer，Waltham MA)測定發光信號。
使用應用于Microsoft Excel(Microsoft，Redmont，WA)的XLfit(IDBS，Guilford，UK)中的4-參數邏輯模型進行曲線擬合和IC50計算。
根據本發明的代表性化合物顯示IC50<1μM，一些甚至低于10nM，特別是在上文所述的PI3Kδ抑制測定中。
各化合物的結果如下表1中所示。
表1：PI3K酶抑制活性在無細胞測定中的體外測定結果
其中化合物根據在其對PI3K-α、-β、-γ和-δ的抑制活性方面的效能分類如下：
+++：IC50<10nM
++：IC50在10-1000nM范圍內
+：IC50>1000nM