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一株環形泰勒蟲裂殖體細胞及裂殖體的培養方法與流程

文檔序號:11145036閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一株環形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞,細胞株于2016年11月2日保藏于中國武漢大學的中國典型培養物保藏中心,保藏號為CCTCC No.C2016187。

2.一種環形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞的培養方法,其特征在于:

(1)顯微鏡下肉眼觀察,挑選生長狀態良好的環形泰勒蟲裂殖體細胞的種細胞,將種細胞單層鋪滿于無菌的培養器皿內。

(2)在無菌條件下,將步驟⑴中的細胞沿培養器皿的細胞生長面輕輕吹打并混勻,靜置培養96小時后,吸取細胞懸液并補加細胞營養液RPMI-1640至另一個培養器皿內批式傳代培養,其中吸取的細胞懸液與細胞營養液的體積比為1:1.6—1:3.5,培養至細胞倍增率、細胞密度和活率等指標趨于穩定,細胞形態正常。

3.根據權利要求2所述的環形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞的培養方法,其特征在于懸浮傳代培養至11代,得到細胞馴化成功的懸浮細胞,所用的培養基為購自Hyclone公司的RPMI-1640,培養時在恒溫、旋轉振蕩條件下進行,其培養溫度為37.5℃,每代的培養時間為72~96h。

4.根據權利要求3所述的環形泰勒蟲裂殖體感染的牛淋巴細胞的培養方法,其特征在于懸浮培養的參數為:培養溫度37.5℃、培養器皿的轉速為80~120rpm、每代的培養時間為96h,細胞量與培養基間的體積比為1:2—1:3。

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