技術總結
本發明公開了對咽拭子樣本或鼻咽拭子樣本直接實時定量的PCR的方法,包括以下步驟:(1)制備裂解液和PCR反應液;(2)將咽拭子樣本或鼻咽拭子樣本加入到含有步驟(1)中裂解液的PCR擴增管中,再加入磁珠到PCR擴增管中,振蕩搖勻混合;(3)將步驟(2)中的PCR擴增管在80?100℃高溫處理10min后冷卻到室溫,然后在18?28℃反應5?10min;(4)將PCR擴增管瞬時離心后放入到磁力架中,待磁珠吸附到磁力架一側后將上清吸出;(5)在PCR擴增管內加入配置好的PCR反應液,進行實時定量PCR反應;所述裂解液的成分為0?2M的NaCl、0?0.3%的Triton?X和0?0.2M的KCl,磁珠為市售的核酸提取使用的羥基磁珠,檢測咽拭子樣本不僅快速簡便、高效實用,且不需核酸提取過程和離心機等設備,簡化了操作過程,節約了時間和成本,能大量處理樣本,操作檢測時可防止污染。
技術研發人員:胡彬;劉杰;陶施芳;潘玲玲
受保護的技術使用者:紹興迅敏康生物科技有限公司
文檔號碼:201710122152
技術研發日:2017.03.03
技術公布日:2017.05.10