本發明屬于細菌檢測領域,特別涉及一種檢測厭氧氨氧化細菌的方法。
背景技術:
厭氧氨氧化工藝是近年來興起的一種低成本、高效脫氮工藝,其脫氮機理為基于厭氧氨氧化細菌的生命代謝進行氨氮和亞硝態氮的脫除。在厭氧氨氧化工藝中,厭氧氨氧化細菌(又稱“anammox菌”)是工藝穩定運行的關鍵微生物之一,因此,對厭氧氨氧化細菌的檢測是保證厭氧氨氧化工藝運行的必要措施之一。目前,研究人員多通過高級分子生物學手段進行厭氧氨氧化細菌的定性及定量,但是,該手段存在實驗過程繁瑣、費用高昂、耗時較長等缺點,基于此,本發明提供了一種可快速分析檢測厭氧氨氧化細菌的方法。
技術實現要素:
本發明針對當前厭氧氨氧化細菌檢測過程中程序繁瑣、費用高昂、耗時較長等缺點,提出了一種便捷的檢測厭氧氨氧化細菌的方法。
具體步驟為:
(1)對含有厭氧氨氧化細菌的樣品進行采集。
(2)將采集的含有厭氧氨氧化細菌的樣品進行預處理。
(3)將預處理后的含有厭氧氨氧化細菌的樣品進行染色。
(4)將染色后的含有厭氧氨氧化細菌的樣品進行清洗以去除多余的染色劑。
(5)將清洗后的含有厭氧氨氧化細菌的樣品進行防退色處理。
(6)將防退色處理后的含有厭氧氨氧化細菌的樣品放置于熒光分光光度計或者熒光顯微鏡下進行分析檢測,根據特定波長下的熒光值定性及定量檢測樣品中厭氧氨氧化細菌。
本發明方法操作簡單,能夠達到低成本快速準確地分析檢測厭氧氨氧化細菌的目的。
具體實施方式
實施例:
本實施例中的含有厭氧氨氧化細菌的樣品取自桂林理工大學自行培養馴化的厭氧氨氧化污泥,具體的檢測步驟如下:
(1)將采集的厭氧氨氧化污泥進行清水洗凈處理。
(2)將清洗后的厭氧氨氧化污泥用蘇丹紅進行染色。
(3)將染色后的厭氧氨氧化污泥進行清洗以去除多余的蘇丹紅。
(4)對清洗后的厭氧氨氧化污泥添加市售抗熒光淬滅封片液進行防退色處理。
(5)將防退色處理后的厭氧氨氧化污泥放置于熒光分光光度計進行500~570nm波段的熒光進行分析檢測,根據所得的熒光值定性及定量檢測樣品中厭氧氨氧化細菌。
將本實施例所得的熒光值與高級分子生物學手段所得的分析結果進行對照,結果具有明顯的線性相關性,證明該方法能夠實現低成本快速準確地分析檢測厭氧氨氧化細菌的目的。