一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法
【專利摘要】本發明公開了一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸銨，加入動物蹄甲粉末，動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為5?18：1，用橡皮塞密封試管，在140?190℃下加熱10?15分鐘，動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液，降溫，動物蹄甲溶液凝固，粉碎，再加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1：5，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇。本發明操作步驟簡單，成本低，耗時短。
【專利說明】
一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法
技術領域
[0001] 本發明屬于動物蹄甲深加工的技術領域，具體涉及一種簡便提取動物蹄甲多肽的 方法。
【背景技術】
[0002] 檢索到如下4篇專利文獻，專利文獻1(申請號為201110315457.8)記載了一種蹄甲 肽的提取方法，該方法采用健康豬蹄甲為原料，經過升溫蒸煮、烘干、粉碎機粉碎、蹄甲粉配 水、升溫蒸煮、酶解、滅酶、活性炭脫色、膜分離，將得到的濾液經干燥后即獲蹄甲肽的技術； 專利文獻2(申請號201110084644.X)記載了一種蹄甲多肽的復合水解制備方法，是將經過 干燥和粉碎后的蹄甲原料，在堿溶液中進行溫和的部分水解;然后使用蛋白水解酶進一步 水解;制得蹄甲多肽產品。其技術特點在于采用堿液和蛋白水解酶雙重復合水解方法制備 蹄甲多肽;專利文獻3(申請號200910192431.1)記載了一種動物蹄甲提取物的制備方法，具 體的說是一種采用酶解方法制備蹄甲提取物的生產工藝，酶解所得酶解液，結合噴霧干燥 的方法制備蹄甲多肽提取物，其特征在于將豬、羊或牛的蹄甲洗凈、除雜、酶解后，精制加工 制成多肽提取液，加入生物活性保護劑后噴霧干燥制成蹄甲提取物干粉的技術;專利文獻4 (申請號200910230964.4)記載了一種蹄甲多肽的制備方法，該方法屬于一種藥物的制備方 法，所述的方法是原料處理、提取、濃縮、烘干、粉碎、制得蹄甲多肽的技術。
[0003] 以上方法從蹄甲中分離（提取）蹄甲肽時，使用酸化劑、還原劑等藥品以及蛋白酶 等生物活性試劑。缺點主要有所需耗材多，成本高;.g.操作時間長，除去試劑殘留需要 較長時間，并且有些成分長時間也很難去除;Γ|)操作過程復雜，以上蹄甲多肽的分離(提取） 需要復雜的操作步驟，需要具有較強專業知識的專業技術人員才可完成。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于克服現有技術的不足，并提供一種使用熱的氨基甲酸銨溶液來 處理動物蹄甲簡便提取動物蹄甲多肽的方法，它不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑和酶等 試劑，操作步驟簡單，成本低，耗時短。
[0005] 本發明的技術方案如下： 一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸銨，加入動物蹄甲粉末，動物 蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為5-18:1，用橡皮塞密封試管，在140-190°C下加熱10-15 分鐘，動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液，降溫，動物蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基 甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗沉 淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇。
[0006] 優選，動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為8-13:1。
[0007] 優選，在150-170 °C下加熱得到動物蹄甲溶液。
[0008] 本發明的優點在于：1、據實驗結果，熱的氨基甲酸銨溶液溶解動物蹄甲的能力很 強，不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑等試劑，也可以在短時間內充分溶解蹄甲，可以節省 提取蹄甲多肽的試劑費用和不需要復雜的試劑除去過程;2、只使用熱的氨基甲酸銨溶液就 可以溶解動物蹄甲并可以提取蹄甲多肽，溶解過程很簡單;3、本發明加熱氨基甲酸銨的方 法沒有特別的要求，油浴加熱，微波爐加熱都可以；4、本發明從動物蹄甲中分離蹄甲多肽 時，不使用酸化劑、還原劑、表面活性劑和酶等試劑，操作步驟簡單，成本低，耗時短。
[0009]【附圖說明】圖1是本發明工藝流程圖。
[0010]【具體實施方式】下面結合附圖對本發明作進一步說明。
[0011] 實施例1，由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入驢蹄甲粉末，驢蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為5:1，用橡皮塞密封試管，在140 °C下加熱15分鐘，驢蹄甲全部溶解后得到驢蹄甲溶液，降溫，驢蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 91.21%〇
[0012] 實施例2,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入驢蹄甲粉末，驢蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為7 :1，用橡皮塞密封試管，在150 °C下加熱11分鐘，驢蹄甲全部溶解后得到驢蹄甲溶液，降溫，驢蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 91.51%〇
[0013] 實施例3,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入豬蹄甲粉末，豬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為18:1，用橡皮塞密封試管，在190 °C下加熱10分鐘，豬蹄甲全部溶解后得到豬蹄甲溶液，降溫，豬蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 91.17%〇
[0014] 實施例4,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入豬蹄甲粉末，豬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為16:1，用橡皮塞密封試管，在180 °C下加熱10分鐘，豬蹄甲全部溶解后得到豬蹄甲溶液，降溫，豬蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 91.33%〇
[0015] 實施例5,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為8:1，用橡皮塞密封試管，在150 °C下加熱12分鐘，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降溫，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 93.25%〇
[0016] 實施例6,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為10:1，用橡皮塞密封試管，在160 °C下加熱13分鐘，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降溫，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 93.68%〇
[0017] 實施例7,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入馬蹄甲粉末，馬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為13:1，用橡皮塞密封試管，在170 °C下加熱13分鐘，馬蹄甲全部溶解后得到馬蹄甲溶液，降溫，馬蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 93.58%〇
[0018] 實施例8,由圖1可知，一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，試管中稱取氨基甲酸 銨，加入馬蹄甲粉末，馬蹄甲粉末和氨基甲酸銨的重量比為11:1，用橡皮塞密封試管，在165 °C下加熱15分鐘，馬蹄甲全部溶解后得到馬蹄甲溶液，降溫，馬蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，過濾，用乙醇或蒸餾水清洗 沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇，蹄甲多肽提取率為 93.79%〇
[0019] 本發明氨基甲酸銨溶液當中溶解蹄甲的機理如下：以驢蹄甲為例，這些多肽分子 主要是以二硫鍵和氫鍵結合的，氨基甲酸銨切斷多肽的氫鍵讓多肽變性，即氨基甲酸銨作 為溶媒切斷多肽氫鍵的同時，結合多肽中自由的氨基和羧基，提高了氨基甲酸銨當中的溶 解度。另外，氨基甲酸銨分解產生的氨侵入多肽的結晶領域，擴大了多肽分子間距離，氨基 甲酸銨分子更容易侵入多肽分子當中，促進多肽的溶解。
【主權項】
1. 一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，其特征在于采用如下步驟，試管中稱取氨基甲 酸銨，加入動物蹄甲粉末，動物蹄甲和氨基甲酸銨的重量比為5-18:1，用橡皮塞密封試管， 在140-190°C下加熱10-15分鐘，動物蹄甲全部溶解后得到動物蹄甲溶液，降溫，動物蹄甲溶 液凝固，粉碎，再加入95%乙醇讓蹄甲多肽析出，氨基甲酸銨重量：乙醇體積=1:5,過濾，用乙 醇或蒸餾水清洗沉淀，加熱干燥，得到粉末狀的蹄甲多肽，濾液旋轉蒸發，回收乙醇。2. 如權利要求1所述的一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，其特征在于:動物蹄甲和氨 基甲酸銨的重量比為8-13:1。3. 如權利要求1所述的一種簡便提取動物蹄甲多肽的方法，其特征在于:在150-170°C 下加熱得到動物蹄甲溶液。
【文檔編號】C07K1/36GK105949275SQ201610448651
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年6月21日
【發明人】薩如拉, 陳建興
【申請人】赤峰學院