專利名稱：一種毛細管電色譜整體柱及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種毛細管電色譜整體柱及其制備方法，特別涉及一種具有平整固定
相界面的毛細管電色譜整體柱及制備方法。
(二)
背景技術：
毛細管電色譜整體柱在進行毛細管電泳儀_紫外檢測的時候需要有一段長約3mm的透光檢測窗口，即需要毛細管內部和外部均為透光狀態。對于毛細管外部，一般用燒蝕、濃硫酸腐蝕和刀片刮除等方式除去聚酰亞胺涂層；要使毛細管內部呈透光狀態比較困難，主要是在毛細管內部的檢測窗口處留空或除去檢測窗口處的固定相。目前已報道的方法主要有以下三種。第 一 種注射器吸入或利用毛細現象緩慢吸入。Li juan Yan等(Li juan
Yan， Qinghe Zhang， Weibing Zhang， Yuqi Feng， LihuaZhang， Tong Li， YukuiZhang. Hybrid organic — inorganic phenylmonolithic column for capillary
electrochromatogr即hy [J]Electrophoresis 2005， 26， 2935-2941)用注射器將配好的均勻反應混合液壓入已預處理過的毛細管中，反應完成后用乙醇沖洗掉表面活性劑和可溶性水解產物，在6(TC下干燥48h。用刀片將固定相末端的聚酰亞胺涂層刮去制備檢測窗口。 Jian Lin等(Jian Lin， Guihua， Huang， Xucong Lin， Zenghong Xie
Methacrylate-based monolithic column withmixed_mode hydrophilic interaction/strong cation—exchange stetionaryphase for c即illary liquid chromatography arid
pressure-assisted CEC[J]Electrophoresis 2008， 29， 4055-4065)用特氟龍管連接毛細管和注射器，將混合物吸入毛細管內至所需長度。兩端用硅膠墊密封，在6(TC水浴中反應20h。甲醇和水沖洗殘余反應物后，在固定相的末端用熱金屬絲除去聚酰亞胺涂層制備檢測窗口 。這種方式盡管緩慢小心，但仍會因毛細現象而造成吸入過多，在加熱凝膠過程中也會造成固定相位置的變化和界面不平整。同時也有通過將檢測窗口處充入氮氣，兩端充滿溶液的方法來控制檢測窗口處無固定相。先將毛細管注入長約lOcm的聚合混合物，接著充入氮氣約5mm，然后毛細管重新注入長約25cm聚合混合物后密封。反應后將5mm空氣段的聚酰亞胺涂層除去即可成為檢測窗口。這種方式仍然沒有消除毛細擴散對界面不平整的影響，同時充入一定量氮氣實際操作中很難控制。 第二種用聚四氟乙烯小管無縫連接已填充和未填充的兩根毛細管。平貴臣等(專利申請號02144581.8)報道了一種零死體積毛細管柱的連接方法。主要操作分兩個步驟1將毛細管柱的非研磨端與高壓泵相連接并同時通水，在高壓通水狀態下將毛細管柱用大于500目的砂紙上研磨。2用針頭將聚四氟乙烯管(內徑比毛細管外徑小)的一端稍稍擴展，使其擴展部分內徑大于毛細管柱的外徑，然后將毛細管從擴展端插入聚四氟乙烯管至所需位置，切除疑有碎屑的插入端。接著將另一根毛細管柱從擴展端插入聚四氟乙烯管中，使兩根毛細管柱的端口緊密結合，割除聚四氟乙烯管的擴展部分。顯然，用該方式制備檢測窗口操作繁瑣、要求高，不方便。同時需要操作者有豐富的操作經驗，初學者較難掌握。 第三種先整柱填充反應溶液，待溶液反應完全固化后，再在適當位置刮去聚酰亞胺涂層，用電熱絲加熱分解一小段固定相，以制備檢測窗口。平貴臣等(專利申請號01142109. 6)報道用刀片在毛細管合適位置上刮去2 4mm的聚酰亞胺涂層開置窗口 ，在通水條件下，使用電阻絲在450°C 60(TC下在窗口處加熱2 5s，使窗口位置的固定相受熱分解，制備檢測窗口。此方法只針對有機基質整體固定相有用。同時較難控制制作窗口的加熱時間，如果加熱時間過短，檢測窗口長度太短；如果加熱時間過長，會對色譜柱窗口部分以外的固定相造成破壞。
發明內容
為解決毛細管電色譜整體柱的固定相接口不平整的問題，發明人提出汞留空的方法，即利用吸入汞抑制柱內反應液的毛細擴散，獲得平整的固定相接口，并利用吸入汞液長度控制固定相界面位置。該方法操作簡單，對操作者要求不高。 本發明的目的是提供一種毛細管電色譜整體柱，所述的毛細管電色譜整體柱具有平整固定相界面，并提供混合基質毛細管電色譜整體柱的制備方法。
本發明的技術方案是 —種毛細管電色譜整體柱，所述的毛細管電色譜整體柱以如下方法制得首先將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液，取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管先吸入汞液，再吸入反應混合液，并控制汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，反應混合液進行固化反應，反應混合液固化后再將汞液全部吸出，經后處理制備得到具有平整固定相界面的毛細管電色譜整體柱。 所述預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線根據設定檢
測窗的位置來決定，所述界面連接線至毛細管接近檢測窗的一端的區域為預設留空段，所
述界面連接線至毛細管遠離檢測窗的一端的區域為預設固定相填充段，本發明方法通過吸
入汞液充滿預設留空段來控制固定相界面位置，并控制了毛細管留空段的長度。
較為具體的，所述的毛細管電色譜整體柱按如下方法制備得到將預生成整體柱
固定相的反應單體配成反應混合液，將汞液和反應混合液分層置于同一容器中，其中汞液
位于下層，取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固
定相的界面連接線，毛細管遠離設定檢測窗的一端為吸入端口 ，置于汞層，毛細管另一端通
過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸
入反應混合液使汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，并使汞液
在毛細管內的長度全部占據設定的留空段，所述的留空段為包括檢測窗在內的界面連接線
到毛細管遠離固定相一端的留空區域，然后用密封件將毛細管兩端密封，將毛細管放入恒
溫容器，40 6(TC條件下進行固化反應，至反應混合液固化后，開啟密封件，用連接有特氟
龍管的注射器將滎液全部吸出，毛細管繼續置于恒溫容器中反應12 24小時，經后處理即
制備得到所述具有平整固定相界面的毛細管電色譜整體柱。 所述的密封件通常可使用硅橡膠片。 所述的恒溫容器可為常見的保溫設備，如烘箱或恒溫水浴鍋等。
所述的注射器可以為同樣具有注射功能的設備如注射泵等。 本發明所述預處理過的毛細管是指毛細管在制備前都需要經過預處理，這是本領域人員都知道的方法，通常的毛細管預處理方法是石英毛細管依次用甲醇，水各沖洗0. 5h，0. lmol/L鹽酸沖洗lh，水沖洗至中性，lmol/L的NaOH水溶液沖洗2h，純水洗滌至中性后用甲醇沖洗O. 5h，于7(TC氣相色譜爐中用氮氣吹干，用硅膠塞封口備用。
本發明所述毛細管固化后的后處理步驟，也是本領域人員公知的后處理方法，通常采用的后處理方法為用甲醇沖洗8 12小時，除去色譜柱內未參與反應的單體、致孔劑以及低分子化合物，75t:下氮氣吹掃3 5h，除去色譜柱內殘余的甲醇。
本發明所述的預生成整體柱固定相的反應單體可以為常見的用于制備毛細管電色譜整體柱的反應單體，例如(l)用于制備無機硅膠整體柱的硅氧烷類試劑，如四甲氧基硅烷(TM0S)、四乙氧基硅烷(TE0S)、3-(三甲氧基硅烷)丙基甲基丙烯酸酯(y-MPS)、苯基三乙氧基硅烷、辛基三乙氧基硅烷、十八烷基三乙氧基硅烷等；(2)用于制備有機聚合物整體柱的甲基丙烯酸樹脂類、丙烯酸樹脂類，如甲基丙烯酸丁酯(BMA)、甲基丙烯酸辛酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸十二酯、甲基丙烯酸十六酯(HDMA)、甲基丙烯酸十八酯、2_丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸、乙叉二甲基丙烯酸酯、丙烯酸丁酯等。 本發明實施例中使用的固定相的反應單體為3-(三甲氧基硅烷)丙基甲基丙烯酸酯(y-MPS)和甲基丙烯酸酯類化合物，如甲基丙烯酸十六酯(HDMA)、甲基丙烯酸丁酯(BMA)、甲基丙烯酸十二酯等等，但本發明方法不限于此類反應單體，其他可以進行整體柱固定相聚合反應的單體均可以用于本發明的方法中，用來制備毛細管電色譜整體柱。
本發明優選采用3-(三甲氧基硅烷)丙基甲基丙烯酸酯(y-MPS)和甲基丙烯酸十六酯(HDMA)為反應單體，并按如下配比制成反應混合液y-MPS、0. lmol/L的鹽酸、HDMA、甲苯按體積比3 :2:1: 16混合得到混合液，然后添加O. 02g/mL混合液體積的偶氮二異丁腈(ABIN)，混合后靜置分層，取上層即為反應混合液。 較為具體的，所述的反應混合液按下述方法配制得到y -MPS和0. lmol/L的鹽酸按體積比3 : 2的比例混合，超聲20min，冷卻至室溫后，按y _MPS、0. lmol/L的鹽酸、HDMA、甲苯的體積比為3 :2:1: 16的比例加入HDMA和甲苯，得到混合液，然后添加O. 02g/mL混合液體積的AIBN，超聲20min，靜置分層，取上層即為反應混合液。 所述用注射器吸入汞液，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混
合液使汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，并使汞液在毛細管
內的長度全部占據設定的留空段的過程中，最開始用注射器吸入汞液的長度，必須大于或
等于設定留空段的長度，在吸入汞液的長度大于設定留空段長度的情況下，可以在吸入反
應混合液時，通過調節反應混合液在毛細管內的長度來調節汞液在毛細管內的長度，使汞
液與反應混合液的界面連接處與界面連接線標記重疊即可，此時汞液的長度達到預設留空
段的長度，多余的汞被注射器吸走。這種調節方法是本領域人員都公知的。 更為具體的，為了提高汞在毛細管內長度的精確度，通常按照以下的步驟進行操
作注射器吸入汞液，使汞液充滿毛細管，然后將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸
入反應混合液，使汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，并使汞
液在毛細管內的長度全部占據設定留空段的長度，所述的留空段為包括檢測窗在內的界面
連接線到毛細管遠離固定相一端的留空區域。
本發明還提供了一種制備所述的毛細管電色譜整體柱的方法，所述的方法包括以下步驟(l)將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液；(2)將汞液置于離心管中，依次用二次蒸餾水、乙醇洗滌，再用反應混合液潤洗，然后加入反應混合液于同一容器中，其中汞液位于下層；(3)取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管遠離設定檢測窗的一端為吸入端口，置于汞層，毛細管另一端通過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混合液，使汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，并使汞液在毛細管內的長度全部占據設定留空段，所述的留空段為包括檢測窗在內的界面連接線到毛細管遠離固定相一端的留空區域；(4)用硅橡膠片密封毛細管兩端，將毛細管放在恒溫容器內，40 6(TC條件下進行固化反應，待柱內反應混合液固化后，取下兩端硅橡膠片，用連接有特氟龍管的注射器將汞液全部吸出，毛細管繼續置于恒溫容器中反應12 24小時，經后處理制備得到所述具有平整固定相界面的毛細管電色譜整體柱。 所述步驟(4)中汞液全部吸出后，可將汞液洗凈，回收重復利用。
本發明的有益效果在于 1、整體柱固定相界面易于控制由于毛細管內吸入了銀白色的汞液，使汞液在毛
細管內的位置用肉眼在管外能清晰地辨認，汞液在毛細管內充填的長度，即為整體柱留空
長度，控制了留空段的長度，即控制了固定相的長度，也就控制了固定相的界面位置。
2、整體柱固定相界面易于平整對于毛細管電色譜整體柱，大部分都使用部分填
充的方式制備檢測窗口 ，如果沒有有效控制柱內溶液的毛細擴散現象，制得的固定相界面
不平整，產生一個明顯的"過渡區"，如附圖l，將會影響分離溶質的紫外吸收和整體柱的性
能，前者會使檢測靈敏度降低，后者會使譜峰對稱性不好，柱效降低；而本發明由于使用了
吸汞法控制，因汞液的高密度抑制了反應液的毛細擴散現象，就可獲得平整的固定相界面，
如附圖2，改善柱性能。 3、操作簡單，便于初學者使用。 4、無污染制備過程中，反應溶液所需的固化反應溫度不高，且汞液處在密封環境，不會揮發，制備成功后，用注射器吸出毛細管內的汞液，回收重復利用。
(四)
圖1比較例1制備的毛細管電色譜整體柱的固定相界面顯微圖 圖2實施例1制備的毛細管電色譜整體柱的固定相界面顯微圖 圖3利用實施例1制備的毛細管電色譜整體柱分離8種有機物的毛細管電泳分離
譜圖 圖4利用實施例2制備的毛細管電色譜整體柱分離5種有機物的毛細管電泳分離譜圖
(五)
具體實施例方式
下面以具體實施例來對本發明做進一步描述，但本發明的保護范圍不限于此。
本發明實施例中使用的毛細管電色譜柱為混合基質甲基丙烯酸十六酯整體柱。
6
毛細管預處理 石英毛細管依次用甲醇，水各沖洗O. 5h，0. lmol/L HC1沖洗lh，水沖洗至中性，lmol/L NaOH沖洗2h，純水洗滌至中性后用甲醇沖洗0. 5h，于7(TC氣相色譜爐中用氮氣吹
干，用硅膠塞封口備用。 實施例1 (1)配置反應混合液 將150 ii L y -MPS和100 y L 0. lmol/L的鹽酸混合，超聲20min，冷卻至室溫后，加入50 ii L HDMA和800 y L甲苯，然后添加0. 02gAIBN，超聲20min，靜置直至分層，取上層為反應混合液。 (2)將lmL汞液置于離心管中，依次用二次蒸餾水和無水乙醇將汞洗凈后，用反應混合液潤洗3次，然后在該離心管中加入約lmL反應混合液，由于汞密度大此時處于離心管下層。 (3)預處理過的毛細管總長度為32cm，設定的檢測窗口開在12cm處，即毛細管內留空段長度設為12cm，并在毛細管外壁該長度處做上標記。毛細管遠離檢測窗的一端為吸入端口 ，置于汞層，另一端通過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液至充滿整支毛細管，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混合液至標記處，此時毛細管內反應混合液長度為20cm，毛細管內汞液長度為12cm。 (4)用硅橡膠片密封毛細管兩端，將毛細管放置于6(TC烘箱內，反應12h，此時毛
細管內反應物固化，取下硅橡膠片，用注射器將汞液全部吸出，然后繼續置于6(TC烘箱內反
應24h，最后用甲醇沖洗10小時，除去色譜柱內未參與反應的單體、致孔劑以及低分子化合
物，接著在氣相色譜爐中在75t:下氮氣吹掃3h，即可制得具有平整固定相界面的混合基質
毛細管電色譜整體柱。 實施例2 (1)配置反應混合液 將200 ii L y -MPS和20 y L 0. lmol/L的鹽酸混合，超聲20min，冷卻至室溫后，加入100iiL BMA和400ii L正丙醇和400ii L 1，4-丁二醇，然后添加0. 02g AIBN，超聲20min，靜置直至分層，取上層混合液為反應混合液。 (2)將lmL汞液置于離心管中，依次用二次蒸餾水和無水乙醇將汞洗凈后，用反應混合液潤洗3次，然后在該離心管中加入約lmL反應混合液，由于汞密度大此時處于離心管下層。 (3)預處理過的毛細管總長度為52cm，設定的檢測窗口開在12cm處，即毛細管內留空段長度設為12cm，并在毛細管外壁該長度處做上標記。毛細管遠離檢測窗的一端為吸入端口 ，置于汞層，另一端通過特氟龍管連接注射泵，用注射泵吸入汞液至充滿整支毛細管，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混合液至標記處，此時毛細管內反應混合液長度為40cm，汞液長度為12cm。 (4)用硅橡膠片密封毛細管兩端，將毛細管放置于6(TC恒溫水浴鍋內，反應12h，此時毛細管內反應物固化，取下硅橡膠片，用注射器將汞液全部吸出，繼續置于6(TC恒溫水浴鍋內反應24h，最后用甲醇沖洗10小時，除去色譜柱內未參與反應的單體、致孔劑以及低分子化合物，接著在氣相色譜爐中在75t:下氮氣吹掃3h，即可制得具有平整固定相界面的混合基質毛細管電色譜整體柱。 實施例3 (1)配置反應混合液 將150 ii L y -MPS和100 y L 0. lmol/L的鹽酸混合，超聲20min，冷卻至室溫后，加入50 ii L甲基丙烯酸十二酯和800 ii L甲苯，然后添加0. 02g AIBN，超聲20min，靜置直至分層，取上層混合液為反應混合液。 (2)將lmL汞液置于離心管中，依次用二次蒸餾水和無水乙醇將汞洗凈后，用反應混合液潤洗3次，然后在該離心管中加入約lmL反應混合液，由于汞密度大此時處于離心管下層。 (3)預處理過的毛細管總長度為45cm，設定的檢測窗口開在12cm處，即毛細管內留空段長度設為12cm，并在毛細管外壁該長度處做上標記。毛細管遠離檢測窗的一端為吸入端口 ，置于汞層，另一端通過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液至充滿整支毛細管，再將毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混合液至標記處，此時毛細管內反應混合液長度為33cm，汞液長度為12cm。 (4)用硅橡膠片密封毛細管兩端，將毛細管放置于6(TC烘箱內，反應12h，此時毛細管內反應物固化，取下硅橡膠片，用注射器將汞液全部吸出，繼續置于6(TC烘箱內反應24h，最后用甲醇沖洗10小時，除去色譜柱內未參與反應的單體、致孔劑以及低分子化合物，接著在氣相色譜爐中在75t:下氮氣吹掃3h，即可制得具有平整固定相界面的混合基質毛細管電色譜整體柱。
實施例4 取實施例1制備的毛細管電色譜整體柱，分離8種有機物。 儀器與試劑P/ACE MDQ型高效毛細管電泳儀(Beckman，USA) ，PDA檢測器；石英毛細管(100 ii m i. d. ， 375 ii m o. d.，河北永年)。 硫脲、苯、甲苯、乙苯(AR，上海化學試劑公司)；萘、聯苯、芴和菲(純度>98%，上海百靈威化學試劑公司)。分別配成濃度為lmg/mL的甲醇溶液，然后等體積混合，進行測試。 電色譜條件整體柱總長32cm，有效長度20cm，以8. 0mmol/LpH8. 0的磷酸鹽溶液與乙腈按體積比l : l混合配成運行緩沖溶液，采用壓力方式進樣(0.021MPaX5s)，分離電壓15kV，分離溫度25t:，硫脲為電滲流標記物，檢測波長為214nm，色譜柱兩端同時加壓0.14MPa。 得到的分離譜圖如附圖3。
實施例5 取實施例2制備的毛細管電色譜整體柱，分離5種有機物。 儀器與試劑P/ACE MDQ型高效毛細管電泳儀(Beckman，USA) ，PDA檢測器；石英毛細管(100 ii m i. d. ， 375 ii m o. d.，河北永年)。 硫脲、苯、甲苯(AR，上海化學試劑公司)；萘、聯苯(純度^ 98%，上海百靈威化學試劑公司)。分別配成濃度為lmg/mL的甲醇溶液，然后等體積混合，進行測試。
電色譜條件整體柱總長52cm，有效長度40cm，以8. 0mmol/LpH8. 0的磷酸鹽溶液與乙腈按體積比l : l混合配成運行緩沖溶液，采用壓力方式進樣(0.021MPaX5s)，分離電壓15kV，分離溫度25t:，硫脲為電滲流標記物，檢測波長為214nm，色譜柱兩端同時加壓0.14MPa。 得到的分離譜圖如附圖4。 比較例1 (1)配置反應混合液 將150 ii L y -MPS和100 y L 0. lmol/L的HC1混合，超聲20min，冷卻至室溫后，加入50 ii L HDMA和800 ii L甲苯，然后添加0. 02gAIBN，超聲20min，靜置直至分層，取上層混合液為反應混合液。 (2)將取出的反應混合液lmL置于2. 5mL離心管中。預處理過的毛細管總長度為45cm，設定的檢測窗口開在12cm處，即毛細管內留空段長度設為12cm，并在毛細管外壁該長度處做上標記。毛細管一端為吸入端口，置于汞層，另一端通過特氟龍管連接注射器或注射泵，在顯微鏡觀察下，用注射器小心吸入該反應混合液至標記處，此時毛細管內吸入的反應混合液長度為33cm，留空段的長度為12cm。 (3)用硅橡膠片密封毛細管兩端，將毛細管放置于6(TC烘箱內，反應12h，此時毛細管內反應物固化，取下硅橡膠片，繼續置于6(TC烘箱內反應24h，最后用甲醇沖洗10小時，除去色譜柱內未參與反應的單體、致孔劑以及低分子化合物，接著在氣相色譜爐中在75t:下氮氣吹掃3h，即可制得混合基質毛細管電色譜整體柱。
權利要求
一種毛細管電色譜整體柱，其特征在于所述的毛細管電色譜整體柱以如下方法制得首先將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液，取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管先吸入汞液，再吸入反應混合液，并控制汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，再將反應混合液進行固化反應，反應混合液固化后將汞液全部吸出，經后處理制備得到具有平整固定相界面的毛細管電色譜整體柱。
2. 如權利要求1所述的毛細管電色譜整體柱，其特征在于所述的毛細管電色譜整體柱 按如下方法制備得到將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液，將汞液和反應 混合液分層置于同一容器中，其中汞液位于下層，取預處理過的毛細管標記一位置為預制 成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管遠離設定檢測窗的一端 為吸入端口 ，置于汞層，毛細管另一端通過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液，再將 毛細管吸入端口上移至反應混合液中，吸入反應混合液使汞液與反應混合液的界面連接處 與所述的界面連接線標記重疊，并使汞液在毛細管內的長度全部占據設定的留空段，所述 的留空段為包括檢測窗在內的界面連接線到毛細管遠離固定相一端的留空區域，然后用密封件將毛細管兩端密封，將毛細管放入恒溫容器中，40 6(TC條件下進行固化反應，至反應混合液固化后，開啟密封件，用連接有特氟龍管的注射器將汞液全部吸出，毛細管繼續置于恒溫容器中反應12 24小時，經后處理制備得到所述具有平整固定相界面的毛細管電 色譜整體柱。
3. 如權利要求1所述的毛細管電色譜整體柱，其特征在于所述的密封件為硅橡膠片。
4. 一種制備如權利要求1所述的毛細管電色譜整體柱的方法，其特征在于所述的方法 包括以下步驟(l)將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液；(2)將汞液置于離 心管中，依次用二次蒸餾水、乙醇洗滌，再用反應混合液潤洗，然后加入反應混合液于同一 容器中，其中汞液位于下層；(3)取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色 譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管遠離設定檢測窗的一端為吸入端口 ，置 于汞層，毛細管另一端通過特氟龍管連接注射器，用注射器吸入汞液，再將毛細管吸入端口 上移至反應混合液中，吸入反應混合液，使汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面 連接線標記重疊，并使汞液在毛細管內的長度全部占據設定的留空段，所述的留空段為包 括檢測窗在內的界面連接線到毛細管遠離固定相一端的留空區域；(4)用硅橡膠片密封毛 細管兩端，將毛細管放在恒溫容器內，40 6(TC條件下進行固化反應，待柱內反應混合液 固化后，取下兩端硅橡膠片，用連接有特氟龍管的注射器將汞液全部吸出，毛細管繼續置于 恒溫容器中反應12 24小時，經后處理制備得到所述具有平整固定相界面的毛細管電色 譜整體柱。
5. 如權利要求4所述的方法，其特征在于所述步驟(4)中汞液全部吸出后，將汞液洗 凈，回收重復利用。
全文摘要
本發明公開了一種毛細管電色譜整體柱，所述的毛細管電色譜整體柱以如下方法制得首先將預生成整體柱固定相的反應單體配成反應混合液，取預處理過的毛細管標記一位置為預制成的毛細管電色譜整體柱的檢測窗與固定相的界面連接線，毛細管先吸入汞液，再吸入反應混合液，并控制汞液與反應混合液的界面連接處與所述的界面連接線標記重疊，將反應混合液進行固化反應，反應混合液固化后再將汞液全部吸出，經后處理制備得到具有平整固定相界面的毛細管電色譜整體柱。本發明提供的毛細管電色譜整體柱的固定相界面位置易于控制，界面易于平整，操作簡單，便于初學者使用。
文檔編號G01N30/60GK101776670SQ20101010881
公開日2010年7月14日 申請日期2010年2月7日 優先權日2010年2月7日
發明者吳瓊, 王園朝, 蔡誠 申請人:杭州師范大學