專利名稱：一種鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法
技術領域：
本發明屬于獸藥殘留檢測的動物性食品基體標準物質技術領域，具體是涉及一種鯉魚肌肉中氯霉素殘留基體凍干粉標準樣品的制備方法。
背景技術：
氯霉素(Chloramphenicol，CAP)，化學名D_ (-)-蘇阿型對硝基苯基_2_ 二氯乙酰氨基-1，3-丙二醇。分子式C11H12O5N2Cl2,分子量322. 0124。氯霉素是一種人工合成的廣譜抗生素，能引起人的再生障礙性貧血、粒狀白細胞缺乏癥、新生兒灰色綜合癥等疾病，尤其是氯霉素的低濃度藥物殘留會誘發致病菌的耐藥性。氯霉素的殘留不但對人體造成危害，而且嚴重影響我國動物性食品的出口。水產品主要進口國對水產品中氯霉素限量要求各不相同，如歐盟規定的水產品中氯霉素殘留檢測的最低極限值(MRPL)為0. 3μ g/kg，日本規定不得檢出，0. 1 μ g/kg的殘留也可被檢出。在食品安全檢測體系中，標準物質對整個檢測質量控制體系起到核心作用。歐盟對獸藥殘留分析方法與結果表達的法規(2002/657/EC)中明確指出了需要采用實物標準樣品進行檢測過程控制，可見實物標準樣品在獸藥殘留檢測中的具有十分重要的意義。目前用于氯霉素殘留檢測的標準物質主要是純品氯霉素標準樣品，檢測質量控制主要是通過向樣品中添加純的氯霉素標準品后進行檢測分析，這種分析方法無法代表目標分析物在活體內真正存在的狀態，即無法代表目標分析物的“內化”狀態。這樣方式得到的標準樣品并非真正意義上的實物標準樣品，由于目標物和基體結合情形與真實檢測樣品不完全一致而導致提取、凈化等處理結果與日常分析樣本存在較大差異，從而影響結果的可靠性和有效性。
發明內容
本發明的目的是提供一種鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品得制備方法，通過添加氯霉素養殖鯉魚，獲得樣品材料，并制備成一種均勻性好、穩定性好、易保存且目標物和基體結合情形與真實檢測樣品一致的標準樣品，該標準樣品可用于氯霉素殘留檢測質量控制、檢測方法評價、檢測能力評價。本發明鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法采用氯霉素對活鯉魚進行養殖添加，使鯉魚體內含有氯霉素，在不含藥物水中飼養待體內藥物濃度達到穩定代謝狀態后，將鯉魚捕撈快速冷凍至-18°C以下，將冷凍的鯉魚室溫下解凍，取肌肉部分勻漿制成魚糜，冷凍干燥，過篩，裝瓶，真空封裝，制備得到鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品；制備的標準樣品中的氯霉素濃度為1. 0-10. Oug/kg。本發明的顯著優點是采用模擬養殖條件下對生長的活鯉魚藥物養殖添加后選擇適當時機，將鯉魚捕撈快速冷凍至-18°C以下，將冷凍的鯉魚室溫下解凍，取肌肉部分勻漿制成魚糜，冷凍干燥，過篩，分裝密封包裝；均勻性檢驗、穩定性研究和協作實驗檢測，通過給藥控制和采集時機的選擇可獲得預期含量的目標物結合狀態與實際檢測樣品一致的含氯霉素鯉魚基體陽性材料，采用攪碎和勻化介質相結合的工藝可以保證材料的均勻性，冷凍干燥、分裝密封可以保證樣品的穩定性，便于標準樣品的常溫傳遞。本發明的產品可以在常溫下運輸，保質期長，目標物和基體結合情形與真實檢測樣品一致，可用于相關檢測分析的質量控制，樣品均勻穩定，運輸方便，使用可靠，產品具有顯著的經濟價值和市場競爭力。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細的說明。對水中、鯉魚肌肉中氯霉素濃度進行實時監控檢測，以確定制備不同濃度水平的標準樣品時養殖添加持續時間，測定結果如表1所示表1水中、鯉魚肌肉中氯霉素濃度實時監控檢測結果
權利要求
1.一種鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法，其特征在于采用氯霉素對活鯉魚進行養殖添加，使鯉魚體內含有氯霉素，在不含藥物水中飼養待體內藥物濃度達到穩定代謝狀態后，取魚肉勻漿制成魚糜，冷凍干燥，過篩，裝瓶，真空封裝，制備得到鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品。
2.—種鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法，其特征在于所述制備的凍干粉標準樣品中的氯霉素濃度為1. 0-10. Oug/kg。
3.根據權利要求1所述的鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法，其特征在于采用內外包裝，內包裝使用聚乙烯瓶，外包裝使用鋁箔袋真空封裝。
4.根據權利要求1或2所述的鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法，其特征在于，包括以下步驟(1)實驗動物的選擇市購活體鯉魚，要求個體大小均一、均重約1.^g，應先確認樣品中不含氯霉素，隨機取樣，檢測確認為陰性樣品后進行喂養，陰性樣品在20°C _25°C環境下飼養2天后，剔除受傷不健康的鯉魚；(2)藥物養殖添加向魚池中添加醫用氯霉素片劑，根據養殖水量，添加藥物使氯霉素水中濃度為200ug/L，實時監控檢測水體中和魚體內藥物濃度，在此條件下養殖18-M小時后，鯉魚肌肉內藥物濃度約為1. Oug/kg，將鯉魚撈至不含氯霉素的養殖池中繼續養殖M小時，使鯉魚肌肉內藥物濃度達到穩定代謝狀態；(3)撈出步驟( 中飼養完成后的鯉魚快速冷凍至_18°C以下處死，將冷凍的鯉魚室溫下解凍，去鱗、去皮、去頭、去刺、去內臟，留取肌肉部分；(3)攪碎勻漿將魚肉混合攪碎，IOkg攪碎魚肉中加2kg稀釋劑，即5%的乙醇溶液，ν/ v，混勻制成魚糜；(4)冷凍干燥冷凍干燥條件-60°C速凍成厚度不超過2cm的凍塊，置于真空干燥倉中，快速升溫至60°C，保持48小時，直至凍塊干燥；(5)粉碎勻質將冷凍干燥的魚糜用中藥粉碎機粉碎，以攪拌鍋混勻；(6)過篩勻質后的魚粉過0.6mm孔篩，棄去篩余；(7)包裝快速用聚乙烯瓶分裝，再用鋁箔袋將聚乙烯瓶進行真空封裝；(8)冷藏保存2-8°C冷藏保存。
5.根據權利要求4所述的鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品的制備方法，其特征在于所述步驟(7)中每個瓶內裝魚粉10g。
全文摘要
本發明提供一種鯉魚肌肉中氯霉素殘留基體凍干粉標準樣品的制備方法，屬于獸藥殘留檢測的動物性食品基體標準物質技術領域。解決目標物和基體結合情形與真實檢測樣品不完全一致而導致提取、凈化等處理結果與日常分析樣本存在較大差異的問題。采用氯霉素對活鯉魚進行養殖添加，使鯉魚體內含有氯霉素，在不含藥物水中飼養待體內藥物濃度達到穩定代謝狀態后，將鯉魚捕撈快速冷凍至-18℃以下，將冷凍的鯉魚室溫下解凍，取肌肉部分勻漿制成魚糜，冷凍干燥，過篩，裝瓶，真空封裝，制備得到鯉魚肌肉中氯霉素殘留凍干粉標準樣品；制備的標準樣品中的氯霉素濃度為1.0-10.0μg/kg。
文檔編號G01N1/42GK102288464SQ20111019471
公開日2011年12月21日 申請日期2011年7月5日 優先權日2011年7月5日
發明者周長朋, 徐成鋼, 時文春, 李開鋒 申請人:時文春