一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法

專利名稱：一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法
技術領域：
本發明涉及氮的分析測定技術領域，尤其涉及一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法。
背景技術：
氮是植物生長發育不可缺少的營養元素，被稱為生命元素，氮素代謝在植物的新陳代謝中占主導地位。植物中的氮可分為蛋白質氮和非蛋白質氮，蛋白質氮是植物正在利用的氮含量；非蛋白質氮主要包括氨基酸、生物堿、硝酸鹽、亞硝酸鹽和氨鹽等，是一種儲藏形式的氮；總氮則代表植物總的氮元素的吸收情況。植物中氮的含量隨著其生理狀況及環境條件的不同而發生變化，所以測定其中不同形式氮的含量對研究植物的氮素吸收、運輸和代謝規律，了解植物的生長狀況，以及確定植物制品的品質、營養價值等都具有重要的意義；對于植物制品，測定其中非蛋白質氮含量還有助于確定其中蛋白質氮的真實含量，有利于對其品質進行評價。對于氮含量的測定，通常采用的方法是將樣品中的含氮化合物消解，得到硝酸鹽， 然后將得到的硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，利用亞硝酸鹽與磺胺和N-萘基乙二胺鹽酸鹽顯色的性質，采用分光光度法對其進行測定。如鄒琳等采用流動注射分析儀測定了水中的總氮和總磷的含量(鄒琳，周圣東，陳衛.高壓消解\流動注射光度法同時測定水中總氮與總磷.中國給水排水，2009，25 (22) 93 97.)，其過程為在110°C下，將水樣經過堿性過硫酸鉀和硫酸兩次消解，得到的消解產物分別進入流動注射分析儀中的總氮、總磷分析系統， 得到水樣中總氮、總磷的含量。在總氮分析系統中，消解產物通過一個鍍銅的鎘圈后，硝酸根被定量還原為亞硝酸根，在酸性條件下，亞硝酸根與磺胺和N-萘基乙二胺鹽酸鹽在45°C 恒溫條件下反應生成紫紅色物質，其最佳吸收波長為550nm，采用分光光度法對得到的紫紅色物質進行測定，得到水中的總氮含量。高壓消解對非蛋白質氮中的無機氮消解效果較好，但是對于植物堿、氨基酸類的非蛋白質氮，如煙堿、茶堿、亮氨酸等來說，由于其結構較為復雜，采用高壓消解時存在消解不完全、不徹底的現象，從而造成對非蛋白質氮測定的回收率低，得到的測量結果不準確。 尤其對于植物及植物制品來說，其大部分非蛋白質氮屬于植物堿或氨基酸類，而且植物及植物制品中還含有還原性成分，如糖類，這些還原性成分會與氧化劑反應，從而影響對含氮組分的消解，造成其消解不完全和不徹底，采用上述方法對其中的非蛋白質氮含量進行測定時，得到的消解產物不夠完全和徹底，導致測定結果不準確。

發明內容
本發明的目的在于提供一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，本發明提供的方法對非蛋白質氮的測定具有較高的回收率，得到的植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定結果準確。本發明提供一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟
a)分離植物及植物制品中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；b)在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；c)將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；d)檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；e)根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。優選的，所述紫外催化為在非硫酸酸性環境中進行紫外催化。優選的，所述紫外催化的溫度為90°C 110°C。優選的，所述高溫加熱的溫度為95°C 150°C。優選的，所述高溫加熱為加壓高溫加熱。優選的，所述加壓高溫加熱的壓力為5Psi 8Psi。優選的，所述步驟b)中的加熱溫度為90°C 110°C。優選的，所述步驟a)具體為向植物及植物制品中加入蛋白質變性試劑，加熱得到的混合物，分離后得到含有非蛋白質氮的待測試樣。優選的，所述蛋白質變性試劑為有機酸。優選的，所述步驟b)前還包括向所述待測試樣中加入過氧化氫，除去所述待測試樣中的還原性組分；和/或向所述待測試樣中加入活性炭，除去所述待測試樣中的無機色素；和/或向所述待測試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，除去所述待測試樣中的金屬離子。本發明提供的植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟分離植物及植物制品中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱， 得到消解產物；檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。在本發明中，過硫酸鉀在加熱條件下產生活性氧原子
，對植物及植物制品進行初步消解；然后在紫外催化條件下，部分活性氧原子
與水反應生成自由基，該自由基使樣品中的非蛋白質氮組分進一步消解；接著， 高溫條件下，活性氧原子
對植物及植物制品中的非蛋白質氮的組分進行更進一步的消解，最終使各類非蛋白質氮組分消解完全。本發明提供的方法具有良好的消解效果，在將待測試樣中的非蛋白質氮組分完全和徹底消解的同時，將其中的還原性組分消解，使其失去還原作用，減少對非蛋白質氮組分消解的干擾，從而提高得到的消解結果的均一性，提高對非蛋白質氮測定的回收率，提高測定結果的準確性。另外，本發明提供的測定方法具有良好的穩定性和重復性。實驗結果表明，本發明提供的方法對植物及植物制品中非蛋白質氮組分之一的煙堿檢測的回收率為98. 76 % 100. 9 %，茶堿的回收率達到100. 8 %，亮氨酸的回收率為 99.0% ；采用本發明提供的方法測定了煙草中的非蛋白質氮含量，得到了準確的結果。另外，本發明提供的方法采用連續消解的方式，操作簡單、省時，步驟簡便，且消解條件溫和， 本發明提供的方法批量處理樣品能力較強，處理周期較短，大大提高了檢測效率。


圖1為本發明實施例1得到的紫外光譜圖；圖2為本發明實施例1得到的非線性二級標準曲線；圖3為本發明實施例1得到的線性標準曲線。
具體實施例方式本發明提供了一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟a)分離植物及植物制品中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；b)在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；c)將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；d)檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；e)根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。為了便于對植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定，本發明優選對得到的植物及植物制品進行前處理，具體包括以下步驟將植物及植物制品烘干、粉碎，得到植物及植物制品粉末。所述烘干溫度優選為 250C 40°C，更優選為280C 38°C，最優選為30°C 35°C，所述植物及植物制品粉末的粒度優選為60目 120目，更優選為65目 110目，最優選為80目 100目。得到植物及植物制品粉末后，獲得所述植物及植物制品粉末的干重。所述植物及植物制品粉末的干重優選按照以下方法獲得測定所述植物及植物制品粉末中的水分含量，用稱量得到的植物及植物制品粉末的質量扣除得到的植物及植物制品粉末中的水分含量，得到所述植物及植物制品粉末的干重。本發明優選采用烘箱法測定所述植物及植物制品粉末中的水分含量，對所述烘箱法沒有特殊限制。植物及植物制品粉末的質量根據測定結果的精確度而定，本發明中，測定結果的準確度優選為0. OOOlg 0. Olg,更優選為0. OOlg 0. Olgo得到植物及植物制品粉末的干重后，本發明分離所述植物及植物制品粉末中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣。本發明可以采用向植物及植物制品粉末中加入蛋白質變性試劑，加熱得到的混合物，或紫外烘烤所述植物及植物制品粉末的方法，固化其中的蛋白質，分離固化后的蛋白質，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；本發明優選向植物及植物制品粉末中加入蛋白質變性試劑，將得到的混合物加熱，分離固化后的蛋白質，得到含有非蛋白質氮的待測試樣，所述蛋白質變性試劑優選為有機酸，更優選為醋酸水溶液；所述醋酸水溶液的體積分數優選為0. 1 % 5 %，更優選為0. 3 % 4 %，最優選為0. 5 % 3 % ；所述蛋白質變性試劑的體積與植物及植物制品粉末的質量比優選為25mL (0. 1 3)g，更優選為25mL (0. 3 1) g ；優選將得到的混合物加熱至沸騰；所述加熱時間優選為5分鐘 50分鐘，更優選為8分鐘 40分鐘，最優選為20分鐘 30分鐘。停止加熱后，優選將得到的溶液趁熱過濾，用所述蛋白質變性試劑優選淋洗1 次 10次，更優選為2次 8次，最優選為3 5次，合并每次得到的濾液，冷卻后定容，得到含有非蛋白質氮的待測試樣。為了減小植物及植物制品中還原性組分對其中非蛋白質氮含量測定的干擾，本發明在對所述待測試樣進行消解前優選除去所述待測試樣中的還原性組分。本發明中所述植物及植物制品中主要的還原組分為糖類化合物，優選當所述待測樣品中總糖含量> 15% 時，更優選>20%時，優選向所述待測樣品中加入過氧化氫，除去所述待測試樣中的還原性組分。所述過氧化氫與待測樣品中的糖進行氧化還原反應，糖中的醛基被過氧化氫氧化為羧基，失去還原作用，所述過氧化氫的質量濃度優選為3 % 50 %，更優選為10 % 30 %， 本發明對所述氧化還原反應中原料的配比，反應條件等沒有特殊限制，為本領域技術人員熟知的糖與過氧化氫之間的氧化還原反應。為了減小雜質對非蛋白質氮測定的干擾，本發明在對所述待測試樣進行消解前優選除去所述待測試樣中的雜質，將得到的濾液定容，得到含有非蛋白質氮的待測試樣，如所述待測樣品中含有無機色素時，可以采用以下方法處理優選向所述濾液中加入活性炭，過濾得到的混合溶液，除去其中的無機色素；所述待測樣品含有金屬離子時，可以采用以下方法處理優選向所述濾液中加入乙二胺四乙酸二鈉溶液，過濾得到的混合溶液，除去其中的金屬離子，所述乙二胺四乙酸二鈉溶液的濃度優選為0. lg/L 5g/L，更優選為0. 2g/L 3g/L，最優選為0. 8g/L 2g/L ；所述待測樣品含有無機色素和金屬離子時，可以先用上述方法除去無機色素再除去金屬離子，也可以先用上述方法除去金屬離子再除去無機色素。得到含有非蛋白質氮的待測試樣后，本發明在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液。所述過硫酸鉀在加熱條件下釋放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
會對待測試樣中的非蛋白質氮化合物進行消解，得到消解產物。所述過硫酸鉀與所述植物及植物制品干重的質量比優選為1 (1 20)，更優選為1 O 15)，最優選為1 (3 10)；所述過硫酸鉀優選為過硫酸鉀溶液，所述過硫酸鉀溶液的摩爾濃度優選為 0. lmol/L lmol/L，更優選為 0. 15mol/L 0. 8mol/L,最優選為 0. 25mol/L 0. 5mol/ L ；所述加熱溫度優選為90°C 110°C，更優選為95°C 105°C。得到混合溶液后，本發明將所述混合溶液進行紫外催化，得到紫外催化的消解產物。在紫外催化過程中，上述得到的部分活性氧原子
在紫外催化的條件下與水反應， 優選在紫外燈照射條件下，生成自由基，所述自由基可對待測試樣中的各類有機氮等還原性組分進行消解，得到紫外催化的消解產物。所述紫外催化優選在非硫酸酸性環境中進行紫外催化，更優選為在鹽酸酸性環境中進行紫外催化；所述紫外催化的溫度優選為90°C 110°c，更優選為 95°C 105 °C。得到紫外催化的消解產物后，本發明將所述紫外催化的消解產物繼續進行高溫加熱，得到所述待測試樣的消解產物。在高溫加熱過程中，上述得到的活性氧原子
在高溫條件下對所述紫外催化的消解產物進行進一步地消解，得到所述待測樣品的消解產物。所述高溫加熱的溫度優選為95°C 150°C，更優選為100°C 140°C，最優選為110°C 130°C; 所述高溫加熱優選為加壓高溫加熱，所述加壓高溫加熱的壓力優選為5Psi 8Psi，更優選為 5. 5Psi 7. 5Psi。得到所述待測試樣的消解產物后，檢測所述消解產物，本發明優選采用紫外分光光度法檢測所述消解產物，得到所述消解產物的紫外光譜數據。首先將得到的消解產物還原，得到亞硝酸鹽，然后將所述亞硝酸鹽優選與磺胺和Ν-α-萘基)乙二胺二鹽酸鹽反應，得到紫紅色產物，采用紫外分光光度法測定得到的紫紅色產物，得到所述消解產物的紫外光譜數據。優選用鎘將得到的消解產物還原，得到亞硝酸鹽；所述磺胺的濃度優選為Ig/ L 50g/L，更優選為10g/L 40g/L，最優選為20g/L 30g/L ；所述N-萘基乙二胺鹽酸鹽的濃度優選為0. lg/L 10g/L,更優選為0. 5g/L 8g/L，最優選為lg/L 5g/L ；所述測定波長優選為520nm 560nm，更優選為530nm 550nm，最優選為5;35nm M5nm。根據上述技術方案得到的紫外光譜數據和預定的標準曲線，即可得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。在本發明中，所述標準曲線優選按照以下方法獲得配制系列濃度的標準溶液；在加熱條件下，向所述標準溶液中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；檢測所述消解產物，得到系列濃度標準溶液的紫外光譜數據；根據所述紫外光譜數據及系列濃度繪制得到標準曲線。本發明中所述標準溶液優選為硝酸鈉水溶液，采用國家標準物質研究中心的硝酸鹽氮標準，配制系列濃度的標準溶液。首先，配制標準物質的儲備液，將得到的儲備液稀釋至標準溶液的濃度。所述標準溶液的質量濃度優選為0.001% 10%，更優選為0. 01% 5%，最優選為0. ；優選用醋酸溶液將標準物質儲備液稀釋到標準溶液的濃度，所述醋酸溶液的體積分數優選為0. 1 % 10 %，更優選為0. 25 % 8 %，最優選為0. 5 % 5%。得到系列濃度的標準溶液后，本發明在加熱條件下，向所述標準溶液中加入過硫酸鉀，得到混合溶液。所述過硫酸鉀在加熱條件下釋放出活性氧原子
，得到的活性氧原子
會對所述標準溶液進行消解，得到消解產物。所述過硫酸鉀與所述標準溶液中標準物質的質量比優選為1 (1 20)，更優選為1 O 15)，最優選為1 (3 10);所述過硫酸鉀優選為過硫酸鉀溶液，所述過硫酸鉀溶液的摩爾濃度優選為0. lmol/L lmol/ L，更優選為0. 15mol/L 0. 8mol/L，最優選為0. 25mol/L 0. 5mol/L ；所述加熱溫度優選為90°C 110°C，更優選為95°C 105°C。得到混合溶液后，將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物。 所述紫外催化和高溫加熱過程與上述技術方案中的紫外催化和高溫加熱過程相同。按照上述技術方案中的紫外催化和高溫加熱過程，得到消解產物后，檢測所述消解產物，得到系列濃度標準溶液的紫外光譜數據。所述檢測過程與上述技術方案中的檢測過程相同。根據上述技術方案中的檢測過程，得到系列濃度標準溶液的紫外光譜數據后，根據所述紫外光譜數據及其對應的濃度繪制標準曲線。所述標準曲線優選為非線性二級標準曲線或線性標準曲線。根據上述技術方案得到的植物及植物制品消解產物的紫外光譜數據和標準曲線， 經過計算即可得到植物及植物制品中非蛋白質氮的質量，再將所述非蛋白質氮的質量除以上述植物及植物制品的干重，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。本發明中，對植物及植物制品含有的非蛋白質氮化合物中的煙堿、茶堿和亮氨酸進行了測定，測定了煙草中非蛋白質氮含量，均得到了準確的結果。
煙堿，俗稱尼古丁，是一種存在于茄科植物中的生物堿，具有式(I)結構 茶堿是氮雜環類化合物，為植物及植物制品中植物堿的一種，具有式(II)結構亮氨酸可用來配制植物生長促進劑，是植物及植物制品中重要的非蛋白質氮化合物之一，具有式(III)結構本發明提供的植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，過硫酸鉀釋放出的活性氧原子
首先對植物及植物制品進行初步消解，然后依次在紫外催化和高溫加熱條件下對植物及植物制品進行進一步的消解，最終使植物及植物制品中的非蛋白質氮化合物得到相對完全、徹底的消解，而且消除了其中還原性組分對消解產物的影響，具有良好的消解效果，得到的消解產物具有良好的均一性，本發明提供的方法對植物及植物制品中非蛋白質氮測定的回收率高，結果準確。實驗結果表明，本發明提供的方法對植物及植物制品中非蛋白質氮化合物煙堿測定的回收率為98. 76% 100. 9%，茶堿的回收率達到100. 8%， 亮氨酸的回收率達到99.0%。采用本發明提供的方法測定了煙草中的非蛋白質氮的含量， 結果準確。另外，本發明提供的方法具有良好的穩定性和重復性。為了進一步說明本發明，以下結合實施例對本發明提供的植物及植物制品中非蛋白質氮含量測定方法進行詳細描述，但不能將它們理解為對本發明保護范圍的限定。實施例1將Ilg硝酸鈉溶解于IOOmL蒸餾水中，得到質量濃度為10. 0 %的硝酸鈉儲備液。 準確移取1. OmL,2. OmL,4. OmL,6. OmL,8. OmLUO. OmL所述標準儲備液，用體積分數為0. 5% 的醋酸溶液分別定容到lOOmL，得到系列濃度的硝酸鈉標準待測溶液。分別取所述標準待測溶液2mL，傾入連續流動分析儀樣品管中分別平行測定三次。在連續流動分析儀中，樣品進樣量為0. lmL/min，進樣時間為100s，沖洗時間為120s。首先在90°C下，向所述標準待測溶液中加入2mL摩爾濃度為0. 3mol/L的過硫酸鉀溶液，過硫酸鉀溶液的進樣量為0. 8mL/min, 然后得到的混合溶液在90°C、鹽酸提供的酸性條件下進行紫外燈照射:3min，接著在6Psi壓力下高溫加熱得到的紫外催化的消解產物2. 5min，加熱溫度為110°C，得到樣品的消解產物。得到的消解產物經過鎘柱被還原為亞硝酸鹽，進入檢測器進行紫外分光光度法測定，檢
(III )。測波長為MOnm，得到標準物質的紫外光譜圖。標準物質的紫外光譜圖如圖1所示，圖1為本發明實施例1得到的紫外光譜圖，圖中曲線上的信號叉從第五個開始緊接著的6個信號叉依次為系列濃度的標準溶液的電信號強度。根據得到的系列濃度的標準物質的紫外光譜圖及其對應的濃度繪制得到標準曲線，如圖2和圖3所示，圖2為本發明實施例1得到的非線性二級標準曲線，圖3為本發明實施例1得到的線性標準曲線，圖3所示的線性標準曲線的硝酸根濃度線性范圍為0. 1%，線性方程為:A(吸光度)=-1076. 98+47750. 43C(% )，相關系數r為0.9981。由圖中可以看出，本發明提供的方法對非蛋白質氮氮含量測定的電信號強度得到明顯的提高，而且電信號強度與其濃度之間存在良好的線性關系，本發明提供的方法具有良好的效果。比較例1將Ilg硝酸鈉溶解于IOOmL蒸餾水中，得到質量濃度為10. O %的硝酸鈉儲備液。 準確移取1. OmL,2. OmL,4. OmL,6. OmL,8. OmLUO. OmL所述標準儲備液，用體積分數為0. 5% 的醋酸溶液分別定容到lOOmL，得到系列濃度的硝酸鈉標準溶液。分別取得到的標準溶液 2mL，傾入連續流動分析儀樣品管中分別平行測定三次。在連續流動分析儀中，樣品進樣量為0. lmL/min，進樣時間為100s，沖洗時間為120s。首先在90°C下，向所述標準溶液中加入 2mL摩爾濃度為0. 3mol/L的過硫酸鉀溶液，過硫酸鉀溶液的進樣量為0. SmL/min，然后在 6Psi壓力高溫加熱得到的混合溶液2. 5min，加熱溫度為110°C，得到樣品的消解產物。得到的消解產物經過鎘柱被還原為亞硝酸鹽，進入檢測器進行紫外分光光度法檢測，檢測波長為MOnm，得到標準物質的紫外光譜圖。根據得到的系列濃度的標準物質的紫外光譜圖繪制得到標準曲線。實施例2 3將3. 2446g煙堿用蒸餾水溶解并定容至200mL，得到質量濃度為1. 60%的煙堿儲備液。移取16. OmL,32. OmL所述煙堿儲備液，用體積分數為0. 5 %的醋酸溶液定容到 lOOmL，得到煙堿待測溶液。移取2. OmL所述兩種不同濃度的煙堿待測溶液，傾入流動分析儀樣品管中分別平行測定三次。在連續流動分析儀中，樣品進樣量為0. lmL/min，進樣時間為100s，沖洗時間為120s。首先在90°C下，向所述煙堿待測溶液中加入2mL摩爾濃度為 0. 3mol/L的過硫酸鉀溶液，過硫酸鉀溶液的進樣量為0. SmL/min，然后得到的混合溶液在 90°C、鹽酸提供的酸性條件下進行紫外燈照射3min，接著在6Psi壓力下高溫加熱得到的紫外催化的消解產物2. 5min，加熱溫度為110°C，得到煙堿樣品的消解產物。得到的消解產物經過鎘柱被還原為亞硝酸鹽，進入檢測器進行紫外分光光度法檢測，檢測波長為540nm，得到煙堿的紫外光譜圖。根據得到的煙堿的紫外光譜圖和實施例1得到的標準曲線，得到煙堿的氮含量， 計算得到煙堿的平均質量分別為5. 113mg, 10. 448mg,對煙堿測定的回收率為98. 76 %、 100. 90%，結果如表1所示，表1為本發明實施例2 3與比較例2 3得到的測定結果。比較例2 3將3. 2446g煙堿用蒸餾水溶解并定容至200mL，得到質量濃度為1. 60%的煙堿儲備液。準確移取16. OmL,32. OmL所述煙堿儲備液，用體積分數為0. 5%的醋酸溶液定容到 IOOmL,得到煙堿待測溶液。移取2. OmL所述兩種不同濃度的煙堿待測溶液，傾入連續流動分析儀樣品管中分別平行測定三次。在連續流動分析儀中，樣品進樣量為0. lmL/min，進樣時間為100s，沖洗時間為120s。首先在90°C下，向所述煙堿待測溶液中加入2mL摩爾濃度為0. 3mol/L的過硫酸鉀溶液，過硫酸鉀溶液的進樣量為0. SmL/min，然后在6Psi壓力下高溫加熱得到的混合溶液2. 5min，加熱溫度為110°C，得到樣品的消解產物。得到的消解產物經過鎘柱被還原為亞硝酸鹽，進入檢測器進行紫外分光光度法檢測，檢測波長為540nm，得到煙堿的紫外光譜圖。根據得到的煙堿的紫外光譜圖和比較例1得到的標準曲線，得到煙堿的氮含量， 計算得到煙堿的平均質量為3. 943mg,7. 18%ig，對煙堿測定的回收率為75. 95%,69. 19%, 結果如表1所示，表1為本發明實施例2 3與比較例2 3得到的測定結果。表1本發明實施例2 3與比較例2 3得到的測定結果
權利要求
1.一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟a)分離植物及植物制品中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；b)在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；c)將所述混合溶液依次經過紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；d)檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；e)根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。
2.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述紫外催化為在非硫酸酸性環境中進行紫外催化。
3.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述紫外催化的溫度為90°C 110°C。
4.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述高溫加熱的溫度為95°C 150°C。
5.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述高溫加熱為加壓高溫加熱。
6.根據權利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述加壓高溫加熱的壓力為5Psi SI3Si。
7.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟b)中的加熱溫度為90°C 110°C。
8.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟a)具體為向植物及植物制品中加入蛋白質變性試劑，加熱得到的混合物，分離后得到含有非蛋白質氮的待測試樣。
9.根據權利要求8所述的測定方法，其特征在于，所述蛋白質變性試劑為有機酸。
10.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟b)前還包括 向所述待測試樣中加入過氧化氫，除去所述待測試樣中的還原性組分；和/或向所述待測試樣中加入活性炭，除去所述待測試樣中的無機色素； 和/或向所述待測試樣中加入乙二胺四乙酸二鈉，除去所述待測試樣中的金屬離子。
全文摘要
本發明提供一種植物及植物制品中非蛋白質氮含量的測定方法，包括以下步驟分離植物及植物制品中的蛋白質氮，得到含有非蛋白質氮的待測試樣；在加熱條件下，向所述待測試樣中加入過硫酸鉀，得到混合溶液；依次對所述混合溶液進行紫外催化和高溫加熱，得到消解產物；檢測所述消解產物，得到紫外光譜數據；根據所述紫外光譜數據和預定的標準曲線，得到植物及植物制品中非蛋白質氮含量。本發明提供的方法具有良好的消解效果，在將待測試樣中的非蛋白質氮組分完全消解的同時，將其中的還原性組分消解，使其失去還原作用，減少對非蛋白質氮組分消解的干擾，從而提高得到的消解結果的均一性，提高對非蛋白質氮測定的回收率，提高測定結果的準確性。
文檔編號G01N21/33GK102519900SQ201110460000
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月30日 優先權日2011年12月30日
發明者孔浩輝, 張心穎, 程志穎 申請人:廣東中煙工業有限責任公司