<listing id="vjp15"></listing><menuitem id="vjp15"></menuitem><var id="vjp15"></var><cite id="vjp15"></cite>
<var id="vjp15"></var><cite id="vjp15"><video id="vjp15"><menuitem id="vjp15"></menuitem></video></cite>
<cite id="vjp15"></cite>
<var id="vjp15"><strike id="vjp15"><listing id="vjp15"></listing></strike></var>
<var id="vjp15"><strike id="vjp15"><listing id="vjp15"></listing></strike></var>
<menuitem id="vjp15"><strike id="vjp15"></strike></menuitem>
<cite id="vjp15"></cite>
<var id="vjp15"><strike id="vjp15"></strike></var>
<var id="vjp15"></var>
<var id="vjp15"></var>
<var id="vjp15"><video id="vjp15"><thead id="vjp15"></thead></video></var>
<menuitem id="vjp15"></menuitem><cite id="vjp15"><video id="vjp15"></video></cite>
<var id="vjp15"></var><cite id="vjp15"><video id="vjp15"><thead id="vjp15"></thead></video></cite>
<var id="vjp15"></var>
<var id="vjp15"></var>
<menuitem id="vjp15"><span id="vjp15"><thead id="vjp15"></thead></span></menuitem>
<cite id="vjp15"><video id="vjp15"></video></cite>
<menuitem id="vjp15"></menuitem>

一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試條及其制備方法

文檔序號:5960002閱讀:336來源:國知局
專利名稱:一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試條及其制備方法
技術領域
本發明涉及生物學領域,尤其涉及寄生蟲疾病的檢測技術,特別是一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試條及其制備方法。
背景技術
異尖線蟲病(anisakiasis),是人食用生的或未煮熟的含異尖線蟲III期幼蟲的海魚所導致的一種食源性寄生蟲病。主要致病的蟲種為簡單異尖線蟲(Anisakis simplex)和派氏異尖線蟲(Anisakis pegreffii)。異尖線蟲的成蟲和幼蟲形態不同,海魚為異尖線蟲III期幼蟲的第二中間宿主,故食用了含異尖線蟲III期幼蟲的生海魚,可導致異尖線蟲病。20世紀60年代首次報道人異尖線蟲病以來,已在全球五大洲均有病例報告,其中大多數病例是來自日本、西班牙等有食生魚習慣的國家。日本每年有2000例異尖線蟲 病報道,美國每年報道50例,歐洲每年報告500例。我國已于1993年將水生動物異尖線蟲病列入了《中華人民共和國禁止進境的動物傳染病、寄生蟲病名錄》。根據阮廷清對1982-2006年我國海魚異尖線蟲專項調查報告的數據進行統計分析顯示,海魚類總的感染率為47. 10%,在沿海省市(如遼寧、河北、山東、上海、浙江、福建、廣東、海南等)和島嶼均有調查和發現異尖線蟲。且已從緬甸進口的帶魚、從印度尼西亞、加拿大和泰國進口的11種海魚中發現了異尖線蟲III期幼蟲。隨著人們生食海魚習慣的流行,異尖線蟲病會有逐年增加的趨勢。目前臨床上確診異尖線蟲病的主要方法仍是通過纖維內窺鏡檢查在胃內是否存在蟲體。在臨床上對嘔吐、惡心、上腹部疼痛等不典型的異尖線蟲病癥狀的確診存在困難。故提高現有的檢測水平,研制合適的檢測異尖線蟲病的方法十分必要。對異尖線蟲病診斷方法有病原學方法、分子生物學方法和免疫學方法。形態學上只能鑒定幼蟲分型,即異尖線蟲I型幼蟲和異尖線蟲II型幼蟲.且若蟲體有損壞或者缺少關鍵鑒定特征,則形態學上就很難區分蟲種。分子生物學方面即利用等位酶分析、線粒體DNAcox2基因、核糖體RNA基因序列、核糖體DNA基因序列、多重PCR分析來鑒定蟲種,雖說其精確性較高,但其花費大、檢查時間長、技術專業性等因素限制了其廣泛使用,且不適合在需要快速準確鑒定蟲種的現場調查中使用。免疫學方法在異尖線蟲病診斷上的應用越來越受到重視,最有效的免疫學診斷方法是應用純化天然抗原或重組抗原檢測異尖線蟲病人特異性IgE抗體,常用的方法主要有酶聯免疫吸附法(ELISA)、免疫印跡法(Western blot)。但這些方法費時費力、或對儀器設備及操作人員要求較高、或不適合于快速檢測、或交叉反應嚴重。

發明內容
本發明的目的提供一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條及其制備方法,所述的這種檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條及其制備方法要解決現有技術中檢測異尖線蟲病的方法費時、費力,可靠性低的技術問題。
本發明提供了一種用免疫學方法檢測異尖線蟲病的試劑,包括(1)異尖線蟲病的天然抗原,(2)抗人或抗哺乳動物IgG的探針;其中,異尖線蟲病天然抗原按如下方法制備將活的異尖線蟲III期幼蟲,用生理鹽水洗凈后,用濾紙吸取蟲體水分,倒入玻璃勻漿器中加入緩沖液后手動攪碎,反復凍融,冰浴超聲粉碎后,0-6°C離心,取上清即為異尖線蟲病天然抗原。其中,抗人或抗哺乳動物IgG探針是利用人或哺乳動物IgG免疫鼠、兔、羊或者其他動物獲得多抗或單克隆抗體。進一步的,所述的抗人或抗哺乳動物IgG探針還可以是金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者鏈球菌G蛋白(SPG)、或者是標記的金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者標記的鏈球菌G蛋白(SPG)。
具體的,所述的標記為膠體金、染料或者乳膠。本發明還提供了一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,包括一個樣品墊和一個纖維素膜,所述的樣品墊和所述的纖維素膜之間設置有一個含有膠體金標記探針的金標墊,所述的金標墊、所述的樣品墊分別和一個纖維素膜緊密連接,在所述的纖維素膜的遠離金標墊的一端設置有一個吸水墊,所述的吸水墊和所述的纖維素膜緊密連接,所述纖維素膜上遠離金標墊的一端設置質控線,在質控線和金標墊之間的纖維素膜上設置一條檢測線,所述的檢測線有異尖線蟲病的天然抗原組成,所述的質控線由特異性結合膠體金標記探針的抗體組成。進一步的,所述的膠體金標記探針為利用人或哺乳動物IgG免疫鼠、兔、羊或者其他動物獲得的多抗或單克隆抗體。進一步的,所述標記探針為金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA),或者鏈球菌G蛋白(SPG);進一步的,所述的質控線中的抗體為雞抗SPG的IgY抗體。在一個優選方案中,所述的異尖線蟲病的天然抗原為異尖線蟲III期幼蟲提取的粗抗原,其蛋白濃度為f 10mg/mL,噴涂量為10 μ L/cm2 ;膠體金標記探針濃度(以蛋白濃度計)1 5mg/15 20mL ;雞抗SPG的IgY抗體溶液濃度為O. I 5mg/mL,噴涂量為10 μ L/cm2。所述支持檢測線和質控線的纖維素膜為硝酸纖維素膜(NC膜)或醋酸纖維素膜;所述支持膠體金標記抗體的金標墊為玻璃纖維膜或聚脂膜;所述樣品墊可以是濾血膜樣品墊,所述的濾血膜是棉籽絨和纖維素的混合物或者玻璃纖維和纖維素的混合物,適合于全血樣品;所述樣品墊也可以是玻璃纖維或吸水紙樣品墊,適合于血清樣品;所述吸水墊由吸水材料制備,如吸水紙。所述的纖維素膜的寬度為2. 5 3. Omm ;吸水墊寬度為2(T40mm,厚度為O. I "O. 2mm ;金標墊的寬度為5 IOmm;樣品墊寬度為2(T40mm。具體的,所述免疫層析試紙條背面設置一個起支撐作用的背板,背板材料的選擇是多種多樣的,可以是為塑料板,如聚氯乙烯板(PVC)等。本發明的一個優選的方案是將所述帶有背板的免疫層析試紙條裝入一個檢測盒體中,所述的檢測盒體的對應于濾血膜樣品墊的部位設有檢測孔,對應于檢測線和質控線的部位設有觀測窗。檢測樣品時將全血或血清加入檢測孔中。本發明還提供了一種制備上述檢測異尖線蟲病的免疫層析紙條的方法,包括以下步驟(I)制備異尖線蟲的天然抗原,將將來源于異尖線蟲III期幼蟲提取的粗抗原蛋白濃度調整到f 10mg/mL ;制備膠體金標記探針,將I飛mg以鏈球菌G蛋白(SPG)為抗原免疫動物獲得的抗體加入IOOmL膠體金溶液,離心去沉淀,復溶到15 20mL ;(2)制備與膠體金標記探針特異結合的抗體,將溶液濃度調整到O. r5mg/mL ;(3)將異尖線蟲的天然抗原溶液噴到所述纖維素膜上形成檢測線,將能與膠體金標記探針特征結合的抗體溶液噴到所述纖維素膜的另一區域形成質控線;(4)將玻璃纖維膜或聚脂膜浸入膠體金標記探針溶液,制備金標墊;(5)將吸水墊粘貼在所述纖維素膜的遠離檢測線的一端,將金標墊的一端粘貼在纖維素膜的靠近檢測線的一端,將樣品墊粘貼于金標墊的另外一端,得到異尖線蟲病的免疫層析試紙條。 在一個優選的方案中,上述纖維素膜在噴有檢測線、質控線后,在30_40°C下干燥O. 5^2小時,再粘貼吸水墊。在一個優選的方案中,為使膠體金標記探針溶液與玻璃纖維膜或聚脂膜更好地結合,可向膠體金標記探針溶液中添加29TlO%的蔗糖;為使金標墊更易于纖維素膜粘貼,可將金標墊在30-40°C下干燥O. 5小時,再與纖維素膜粘貼。異尖線蟲病患者體內血液中含有能特異性結合所感染的異尖線蟲III期幼蟲抗原的抗異尖線蟲III期幼蟲的抗體,通過檢測受試者體內血液中是否含有抗異尖線蟲III期幼蟲的抗體,可作為輔助診斷受試者是否患有異尖線蟲病的指標。本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條適用于從異尖線蟲病患者體內抽取的全血樣品和血清樣品。對于全血樣品,本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條中的樣品墊采用濾血膜樣品墊;對于血清樣品,本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條中的樣品墊可采用玻璃纖維或吸水紙樣品墊。本發明將異尖線蟲III期幼蟲抗原固定在纖維素膜等支持物上作為固相抗原,用以捕獲受試者血樣中的抗異尖線蟲III期幼蟲抗體。異尖線蟲病患者體內血液中含有的抗異尖線蟲III期幼蟲抗體的優勢抗體類型為IgG。膠體金標記探針采用鏈球菌G蛋白(SPG)制備,該鏈球菌G蛋白(SPG)可以是購買的商品化產品,或按照常規方法自行制備。該膠體金標記探針附著于金標墊上。檢測過程中,復溶的膠體金標記探針可與受試者血樣中的人IgG抗體結合,從而當受試者血樣中存在異尖線蟲病特異性抗體時在檢測線位置形成色帶。本發明將與膠體金標記探針特異性結合的抗體固定在纖維素膜上作為質控線。無論待檢樣品中是否含有抗異尖線蟲III期幼蟲抗體,本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條中質控線位置總能形成色帶,該條色帶是判定檢測過程是否正常和免疫層析試紙條是否變質的標準。質控線不限于雞抗SPG的IgY抗體,只要能與選定的膠體金標記探針特異性結合,同樣能實現本發明的發明目的,知識領域的一般技術人員都知曉的。本發明的免疫層析試紙條具有以下優點(1)敏感性和特異性高實驗室考核結果顯示,本發明的免疫層析試紙條總的敏感性可達100%,特異性可達99. 4%。(2)檢測方法簡單、快速;檢測過程中標本處理簡單,血清或全血都可以直接使用,無需處理,不需要專門儀器和人員培訓,非專業技術人員按照說明書即可操作,并可迅速觀察結果,標本中的抗體經5分鐘左右的紙層析后,即可出現肉眼可見的沉淀線,可便于及時診斷,及時治療異尖線蟲病,適用于臨床和現場使用;(3)制備方法簡單,成本低廉,易于進行商業化生產。本發明將在異尖線蟲病的檢測及其相關疾病的診斷和治療中發揮重要作用,應用前景廣闊。


圖I是本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的縱截面結構示意圖。圖2是本發明的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的俯視結構示意圖。其中1為樣品墊;2為金標墊;3為纖維素膜;4為吸水墊;5為檢測線;6為質控線;7為背板。以下結合具體實施例,進一步闡述本發明。應理解,這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法;所述百分含量如無特別說明均為質量/體積百分含量或體積/體積百分含量。
具體實施例方式實施例I檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備I、針對異尖線蟲病的天然抗原的制備從帶魚體內找到活的異尖線蟲III期幼蟲,用O. 9%的生理鹽水洗凈后,用濾紙吸取蟲體水分,倒入玻璃勻漿器中加入適量PBS緩沖液后手動攪碎,反復凍融3天,每天3次,冰浴超聲粉碎3次,7000r/min 4°C低溫離心30min,取上清,收集分裝即為粗抗原。2、制備免疫膠體金探針及金標墊用下述方法制備鏈球菌G蛋白(SPG)標記的免疫膠體金探針及金標墊;I)采用檸檬酸鹽還原法制備膠體金顆粒,具體方法為,將HAuC14 (滬試牌購于上海國藥集團化學試劑有限公司)配制成O. 01%水溶液,取IOOmL加熱至沸騰,攪動下準確加入I. 6mL的1%的檸檬酸三鈉水溶液,待液體顏色穩定成葡萄酒紅色,得到膠體金溶液。2)確定膠體金偶聯探針飽和濃度用O. 2M K2CO3調節步驟I)制備的膠體金溶液的pH值至6. 0,準備5支潔凈試管,分別加入ImL膠體金溶液。將步驟I)鏈球菌G蛋白(SPG)抗體稀釋為O. 5mg/mL,分別向4支試管中加入20 μ L、25 μ L、30 μ L、35 μ L,另一支為空白對照,混勻后于室溫下放置5分鐘,加入10%NaCl水溶液,混勻,靜置10-20分鐘后觀察液體顏色。膠體金溶液顏色不變時所含量少蛋白量即為穩定ImL膠體金溶液所需抗體的最適濃度,以此為基礎增加20%抗體量即為膠體金偶聯探針飽和溶液。結果維持膠體金溶液顏色不變的蛋白量為30 μ L,即偶聯探針濃度為15 μ g/mL。3)鏈球菌G蛋白(SPG)標記的免疫膠體金探針及金標墊的制備;取50mL膠體金溶液,用O. 2M K2C03調節pH值為6,按15 μ g/mL加入鏈球菌G蛋白(SPG),得到含有濃度為15 μ g/mL鏈球菌G蛋白(SPG)的免疫膠體金探針溶液50mL,攪拌I小時,再加入終濃度為O. 05%PEG20000,攪拌I小時,IOOOOrpm離心30分鐘,棄上清,用20mM硼酸緩沖液洗滌沉淀,并將其保存于IOmL含5%蔗糖的20mM硼酸緩沖液中,得到鏈球菌G蛋白(SPG)標記的膠體金探針溶液。取5mL鏈球菌G蛋白(SPG)標記膠體金探針溶液均勻加在玻璃纖維膜上,37°C下干燥O. 5小時,得到金標墊。3、檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備
該試紙條的制備方法包括以下步驟I) NC膜的包被異尖線蟲III期幼蟲抗原包被用O. OlM pH7. 2PBS稀釋上述制備的異尖線蟲III期幼蟲抗原至終濃度為2mg/mL,用于包被檢測線;質控抗體雞抗SPG的IgY抗體的包被用O. OlM pH7. 2PBS稀釋雞抗SPG的IgY抗體至終濃度為O. 5mg/mL,用于包被質控線;BIODOT公司XZ1000噴膜機將分別噴于300mm長、25mm寬的硝酸纖維素膜(購自MILLIP0RE公司)上,噴涂量為10 μ L/cm2,形成一條檢測線和一條質控線,37°C下干燥I小時。2)檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備 用一塊單面涂了不干膠的PVC背板,中間粘貼上處理好的NC膜;NC膜靠近質控線的一端緊密粘貼吸水墊(購于MILLIP0RE公司);NC膜靠近檢測線的一端緊密粘貼金標探針墊;金標探針墊遠離檢測線的一端緊密連接粘貼濾血膜樣品墊(購自WHATMAN公司)。得到檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,可按所需大小進行切割,加干燥劑后密封保存。4、檢測異尖線蟲病的免疫層析試劑盒的制備為了方便使用,將步驟3制備的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條裝入一個檢測盒體中,加干燥劑后密封保存。該檢測盒體對應于樣品墊的部位設有點樣孔,對應于檢測線和質控線的部位設有觀測窗。實施例2、檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的實驗室考核I、檢測方法與實施例I制備的免疫層析試紙條的濾血膜樣品墊加入待測血清,I分鐘后加入樣品稀釋液(PBS) I滴(約50 μ L),2分鐘后開始觀察結果,15分鐘觀察終止。檢測原理與結果判斷測定時將樣本血清或全血加在濾血膜樣品墊I上,I分鐘后滴一滴(約50uL)樣本稀釋液,稀釋液帶動樣品按樣品墊I、金標墊2、硝酸纖維素膜3、吸水墊4的方向移動,流經金標墊2時使金標墊2上的膠體金標記探針復溶,并帶動其向硝酸纖維素膜3、吸水墊4移動。膠體金標記探針(本發明實施例為鏈球菌G蛋白(SPG))可與樣品中有待測抗體結合,形成免疫復合物。此免疫復合物流至檢測線5時,若標本中有待測抗體(抗異尖線蟲病抗原的抗體),即被檢測線5的特異性固相抗原所捕獲,在硝酸纖維素膜3上的檢測線5位置顯出紅色檢測線條;次免疫復合物流經質控線6時,即被質控線6的固相抗體(雞抗SPG的IgY抗體)所捕獲,在硝酸纖維素膜3上的質控線6位置顯出紅色質控線條。結果判定如果檢測線5和質控線6均出現紅色條帶,即判斷為異尖線蟲病。如果僅有質控線6出現紅色條帶,即判為陰性。2、實驗結果用本發明實施例I制備的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條進行實驗室考核結果如表I所示。由表2可以看出本發明的免疫層析試紙條的敏感性可達100%,特異性可達99. 4%。上述檢測結果表明本發明的免疫層析試紙條可用于異尖線蟲病的快速檢測。表I本發明檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的實驗室考核結果
權利要求
1.一種用免疫學方法檢測異尖線蟲病的試劑,其特征在于包括以下組份 (I)異尖線蟲病的天然抗原(2)抗人或抗哺乳動物IgG的探針; 其中,異尖線蟲病的天然抗原按如下方法制備將活的異尖線蟲III期幼蟲,用生理鹽水洗凈后,用濾紙吸取蟲體水分,倒入勻漿器中加入緩沖液后攪碎,反復凍融,冰浴超聲粉碎后,0-6°C離心,取上清即為異尖線蟲病天然抗原。
2.如權利要求I所述的用免疫學方法檢測異尖線蟲病的試劑,其特征在于所述的抗人或抗哺乳動物IgG探針是用人或哺乳動物IgG免疫鼠、兔、或者羊獲得的多抗或單克隆抗體。
3.如權利要求I所述的用免疫學方法檢測異尖線蟲病的試劑,其特征在于所述的抗人或抗哺乳動物IgG探針是鼠抗人IgG的單克隆抗體、或者金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者鏈球菌G蛋白(SPG)、或者是標記的鼠抗人IgG的單克隆抗體、或者是標記的金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)、或者標記的鏈球菌G蛋白(SPG)。
4.如權利要求3所述的用免疫學方法檢測異尖線蟲病的試劑,其特征在于所述的標記為膠體金、染料或者乳膠標記。
5.一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于包括一個樣品墊和一個纖維素膜,所述的樣品墊和所述的纖維素膜之間設置有一個含有膠體金標記探針的金標墊,所述的金標墊、所述的樣品墊分別和一個纖維素膜緊密連接,在所述的纖維素膜的遠離金標墊的一端設置有一個吸水墊,所述的吸水墊和所述的纖維素膜緊密連接,所述纖維素膜上遠離金標墊的一端設置有一個質控線,在質控線和金標墊之間的纖維素膜上設置一個檢測線,所述的檢測線有異尖線蟲病的天然抗原組成,所述的質控線由特異性結合膠體金標記探針的抗體組成。
6.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述的膠體金標記探針為用人或哺乳動物IgG免疫鼠、兔、或者羊獲得的多抗或單克隆抗體。
7.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述標記探針為金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA ),或者鏈球菌G蛋白(SPG )。
8.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述的質控線中的抗體為雞抗SPG的IgY抗體。
9.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述的異尖線蟲病的天然抗原為異尖線蟲III期幼蟲提取的粗抗原,其蛋白濃度為flOmg/mL,噴涂量為IOyL /cm2 ;膠體金標記探針濃度(以蛋白濃度計):f 5mg/15 20mL ;雞抗SPG的IgY抗體溶液濃度為O. I 5mg/mL,噴涂量為IOyL /cm2。
10.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述的纖維素膜選自硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜;所述的金標墊選自玻璃纖維膜或聚脂膜;所述樣品墊選自濾血膜、玻璃纖維或吸水紙,其中濾血膜是棉籽絨和纖維素的混合物或者玻璃纖維和纖維素混合物,所述吸水墊為吸水紙。
11.如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述的纖維素膜、樣品墊、金標墊、吸水墊設置在一個起支撐作用的背板上。
12.如權利要求11所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條,其特征在于所述帶有背板的免疫層析試紙條設置在一個檢測盒體中,所述的盒體的對應于濾血膜樣品墊的部位設有檢測孔,對應于檢測線和質控線的部位設有觀測窗。
13.—種制備如權利要求5所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的方法,其特征在于包括以下步驟 (1)制備異尖線蟲的天然抗原,將將來源于異尖線蟲III期幼蟲提取的粗抗原蛋白濃度調整到f 10 mg/mL ;制備膠體金標記探針,將I飛mg以鏈球菌G蛋白(SPG)為抗原免疫動物獲得的抗體加入IOOmL膠體金溶液,離心去沉淀,復溶到15 20mL ; (2)制備與膠體金標記探針特異結合的抗體,將溶液濃度調整到O.r5mg/mL ; (3)將異尖線蟲的天然抗原溶液噴到所述纖維素膜上形成檢測線,將能與膠體金標記探針特征結合的抗體溶液噴到所述纖維素膜的另一區域形成質控線; (4)將玻璃纖維膜或聚脂膜浸入膠體金標記探針溶液,制備金標墊; (5)將吸水墊粘貼在所述纖維素膜的遠離檢測線的一端,將金標墊的一端粘貼在纖維素膜的靠近檢測線的一端,將樣品墊粘貼于金標墊的另外一端,得到異尖線蟲病的免疫層析試紙條。
14.如權利要求13所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備方法,其特征在于纖維素膜在噴有檢測線、質控線后,在30-40°C下干燥O. 5^2小時,再粘貼吸水墊。
15.如權利要求13所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備方法,其特征在于在膠體金標記探針溶液中添加29TlO%的蔗糖。
16.如權利要求13所述的檢測異尖線蟲病的免疫層析試紙條的制備方法,其特征在于將金標墊在30-40°C下干燥O. 5小時,再與纖維素膜粘貼。
全文摘要
一種檢測異尖線蟲病的免疫層析試條,包括一個樣品墊和一個纖維素膜,樣品墊和纖維素膜之間設置有一個含有膠體金標記探針的金標墊,金標墊、樣品墊分別和一個纖維素膜緊密連接,在纖維素膜的遠離金標墊的一端設置有一個吸水墊,吸水墊和纖維素膜緊密連接,纖維素膜上遠離金標墊的一端設置有一個質控線,在質控線和金標墊之間的纖維素膜上設置一個檢測線,檢測線有異尖線蟲病的天然抗原組成,質控線由特異性結合膠體金標記探針的抗體組成。本發明還提供了上述試紙條的制備方法,本發明的免疫層析試紙條具有簡便性、敏感性、特異性和快速性的優點,適于臨床和現場使用。
文檔編號G01N33/544GK102879563SQ201210401889
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月19日 優先權日2012年10月19日
發明者周洋, 陳家旭, 石鋒, 蔡玉春 申請人:中國疾病預防控制中心寄生蟲病預防控制所
網友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1
韩国伦理电影