專利名稱：快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法
技術領域：
本發明涉及作物淀粉分析技術領域，尤其是一種快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法。
背景技術：
氣嗓\_Sorghum bicolor (L.) Moench]是世界上最古老的谷類作物之一,屬禾本科(Gramineae)高粱族(Andropogoneae')高粱屬isorghum、。高粱除作為糧食、飼料和能源作物外，也是釀酒工業的主要原料之一。高粱有粳性和糯性之分，不同高粱品種的直鏈淀粉、支鏈淀粉及總淀粉含量變異幅度較大，其籽粒淀粉含量及其直鏈淀粉和支鏈淀粉的比率與釀酒品質、產量有重要關系。同時，直鏈、支鏈淀粉的含量和比例也影響煮飯特性及食味，優良的釀酒型和食用品種選育在糧食生產及釀酒產業上均有重要意義。因此，選擇一種快速、準確的淀粉測定方法十分必要。傳統的淀粉含量測定方法有費林試劑滴定法，但其操作繁瑣，不易掌握。Rose等對酸水解淀粉的方法和六種比色法測定糖的方法進行比較研究，認為酸解法結合蒽酮比色法是比較理想的方法；翁忠 嵐對酸水解法進行改進，發明了 DNS比色法來測定釀酒高粱中的淀粉含量，并認為具有準確性高、實用性強的特點。然而，上述方法只能測定總淀粉含量，而不能將直鏈淀粉與支鏈淀粉的測定區分開來，而且測定過程中需要濃酸和有毒試劑，存在安全隱患。目前最常用的淀粉含量測定方法是旋光法測定粗淀粉含量，結合碘染色法(GB7648-87)測定直鏈淀粉含量，用兩者之差間接得到支鏈淀粉含量，該方法需要配制不同的反應體系，工作量較大。范明順等采用雙波長分光光度法對高粱直鏈淀粉和支鏈淀粉含量測定方法進行了探討，但兩種淀粉在可見光范圍內的吸收曲線隨著濃度梯度的不同而變化，這就使得參比波長和測定波長處的吸光度不相等，造成較大偏差，并且作圖法查找參比波長和測定波長也會產生較大誤差。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，它測定高粱籽粒中直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉的含量，而且準確度高，操作方便快捷，并且安全環保，以克服現有技術的不足。本發明是這樣實現的:快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，將直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液進行波長掃描，分別找出直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液的吸收峰波長；根據Lambert-Beer定律，通過繪制標準曲線的方式得到兩種淀粉組分在吸收峰位置的摩爾吸光系數，聯立方程組求解兩種淀粉濃度的計算公式，用于快速批量測定；具體步驟如下:
(1)配制終濃度為0.001 (λ I mg/mL碘-淀粉顯色反應體系，調節pH 3.0 5.0，顯色10 30 min,以雙光束可見-紫外分光光度計進行可見光范圍內的波長掃描，根據兩種淀粉溶液的吸收曲線，找出它們的吸收峰波長λ ! (500 560 nm)、λ 2 (580 700 nm)；
(2)按步驟(I)配置顯色反應體系的方式，分別配制終濃度為O 0.04 mg/L的直鏈淀粉溶液的顯色反應體系與終濃度為O 0.1 mg/L的支鏈淀粉溶液的顯色反應體系，在波長入P λ 2處測定吸光度，以濃度C為橫坐標，吸光度J為縱坐標繪制標準曲線，其斜率即為摩爾吸光系數kal、ka2、kbl、kb2,根據Lambert-Beer定律,聯立二元一次方程組,求解得兩種淀粉的C與J之間的計算公式為:
權利要求
1.種快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:將直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液進行波長掃描，分別找出直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液的吸收峰波長；根據Lambert-Beer定律，通過繪制標準曲線的方式得到兩種淀粉組分在吸收峰位置的摩爾吸光系數，聯立方程組求解兩種淀粉濃度的計算公式，用于快速批量測定；具體步驟如下: (1)配制終濃度為0.001 (λ I mg/mL碘-淀粉顯色反應體系，調節pH 3.0 5.0，顯色10 30 min,以雙光束可見-紫外分光光度計進行可見光范圍內的波長掃描，根據兩種淀粉溶液的吸收曲線，找出它們的吸收峰波長λ ! (500 560 nm)、λ 2 (580 700 nm)； (2)按步驟(I)配置顯色反應體系的方式，分別配制終濃度為O 0.04 mg/L的直鏈淀粉溶液的顯色反應體系與終濃度為O 0.1 mg/L的支鏈淀粉溶液的顯色反應體系，在波長入P λ 2處測定吸光度，以濃度C為橫坐標，吸光度J為縱坐標繪制標準曲線，其斜率即為摩爾吸光系數kal、ka2、kbl、kb2,根據Lambert-Beer定律,聯立二元一次方程組,求解得兩種淀粉的C與J之間的計算公式為:
2.據權利要求1所述的快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步驟(I)中，反應體系的pH為3.5 4.0，顯色時間15 25 min，吸收峰波長λ 1=530 nm,λ 2=622 nm。
3.據權利要求1所述的快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步驟⑵中，摩爾吸光系數 kal=15.5770，ka2=30.1570，kbl=3.4924，kb2=2.0369，兩種淀粉的 C 與J之間的關系式為:
4.據權利要求1所述的快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步驟(3)中，磨碎的高粱粉過60目篩，稱取質量為90 110 mg高粱粉，高粱分散液濃度為0.9 1.1 mg/mL,取分散液體積為25 30 mL,加入的石油醚體積為10 15 mL,脫脂2次。
5.據權利要求1所述的快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，其特征在于:所述的步驟(4)中，取脫脂分散液的體積為5 mL，直鏈淀粉含量(％) =CiAi X 100%，支鏈淀粉含量=CjtM X 100%,總淀粉含量(％)=直鏈淀粉含量(％) +支鏈淀粉含量(％)，其中(1、分別為直鏈淀粉和支鏈淀粉的 測定濃度(mg/mL)，m為樣品質量(g)。
全文摘要
本發明公開了一種快速測定高粱籽粒淀粉含量的方法，將直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液進行波長掃描，分別找出直鏈淀粉和支鏈淀粉標準品溶液的吸收峰波長；根據Lambert-Beer定律，通過繪制標準曲線的方式得到兩種淀粉組分在吸收峰位置的摩爾吸光系數，聯立方程組求解兩種淀粉濃度的計算公式，用于快速批量測定。本發明采用比色法可同時測定直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉的含量，而且準確度高，方便快捷。解決了傳統的淀粉測定方法每次只能測定直鏈淀粉含量或者總淀粉含量，而不能同時測定直鏈淀粉和支鏈淀粉含量問題；而且本發明建立的方法不使用濃硫酸、濃鹽酸和有毒試劑，使之更加綠色環保、安全性高，成本低廉，使用效果理想。
文檔編號G01N21/33GK103091273SQ201310029030
公開日2013年5月8日 申請日期2013年1月25日 優先權日2013年1月25日
發明者張明生, 李祥棟, 王洋 申請人:貴州大學