一種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法和測定裝置制造方法
【專利摘要】本發明公開了一種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法和測定裝置，其中所述測定方法包括下述步驟：1)將殺蟲劑配制成殺蟲劑原液，然后將殺蟲劑原液稀釋成不同濃度的稀釋藥液；2)將殺蟲劑稀釋藥液與玉米螟幼蟲飼料混合均勻，并在室溫下將飼料劃分成矩形區塊；3)將玉米螟幼蟲接種到飼料中，封好培養；4)培養結束后檢查死、活蟲數，計算死亡率、校正死亡率、LC50，依據LC50的大小判斷殺蟲劑對玉米螟的毒力的強弱。相應的，本發明公開了用于上述測定方法的測定裝置。本發明公開的測定方法能夠簡單、準確、快速獲得殺蟲劑對玉米螟的毒力數據，為防治玉米螟殺蟲劑篩選提供有效可靠的技術支持。
【專利說明】—種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法和測定裝置
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種毒力測定方法和測定裝置，用來測定殺蟲劑對玉米螟的毒力，屬于農藥【技術領域】。
【背景技術】
[0002]玉米是我國的主要糧食作物之一，玉米螟Ostrinia furnacalis (Guen6e)是玉米上的主要害蟲，玉米在不同生育期受不同世代玉米螟為害:在玉米心葉期取食葉肉或蛀食未展開心葉，造成“花葉”;抽雄后鉆蛀莖桿，使雌穗發育受阻而減產，如蛀孔處遇風吹折，則減產更嚴重。幼蟲在穗期則直接蛀食雌穗、嫩粒，造成籽粒缺損、霉爛，品質降低。
[0003]統計研究發現，一般年份春玉米會受玉米螟為害減產10%左右，玉米螟爆發年份導致玉米減產30%以上，造成巨大產量和經濟損失，成為我國玉米生產中不穩定的重要因素。
[0004]目前，玉米螟的防治技術包括抗螟育種、化學防治、生物防治、物理防治、農業防治等。其中，化學防治作為一種見效快、效果穩定的害蟲防治手段在玉米螟的防治中一直發揮重要的作用。對于殺蟲劑而言，如何衡量殺蟲劑對玉米螟毒力是一個重要方面，毒力測定的準確性在很大程度上決定著殺蟲劑研發的成敗。傳統上對玉米螟的生物測定方法有浸葉法和人工飼料混藥法:浸葉法需要種植玉米，用玉米葉片浸藥液來飼喂玉米螟，根據死亡情況計算殺蟲劑的毒力，這種測定方法生測時間較長，無法滿足高通量、多批次的不同殺蟲劑毒力測定需要；人工飼料混藥法是把藥液與飼料混合后來飼喂玉米螟，生測時間短，效果較好，但已有的用于玉米螟飼養的人工飼料成塊狀，較為干燥，與藥劑混配時不容易混勻，造成實驗結果不準確，影響實驗。
【發明內容】
[0005]針對現有技術的缺陷，本發明公開了一種基于混藥平皿法室內測定殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法，應用這種方法空白對照的死亡率不超過5%，害蟲不易逃逸，操作簡單，結果快速，準確。
[0006]為實現上述目的，本發明是通過下述技術方案實現的:
[0007]—種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法，包括下述步驟:1)將殺蟲劑配制成殺蟲劑原液，然后將殺蟲劑原液稀釋成不同濃度的稀釋藥液；2)將殺蟲劑稀釋藥液與玉米螟幼蟲飼料混合均勻，并在室溫下將飼料劃分成矩形區塊；3)將玉米螟幼蟲接種到飼料中，封好培養；4)培養結束后檢查死、活蟲數，計算死亡率、校正死亡率、LC5tl，依據LC5tl的大小判斷殺蟲劑對玉米螟的毒力的強弱。
[0008]在上述方法中，殺蟲劑原液的配制根據該殺蟲劑的使用說明調配即可，通常是采用水或者有機溶劑溶解殺蟲劑粉末使其成為原液，在原液配制完成后，采用農藥助劑對殺蟲劑原液進行稀釋，稀釋后的濃度在5-25mg/ml之間。
[0009]其中，所述農藥助劑可選自化學農藥領域任意可用的助劑，主要是有機溶劑或水，具體包括但不限于吐溫、丙酮、水中的一種或多種。
[0010]在上述方法中，玉米螟幼蟲飼料可選用已有文獻中公開過的飼料類型，也可選用標準的玉米粉+葡萄糖混合飼料，優選采用包含玉米粉、葡萄糖、瓊脂、山梨酸、甲醛的飼料，將這些成分在沸水中溶解均勻后冷卻。
[0011]在上述飼料中，各成分的用量可以根據實際需要進行調整，通常是在每IOOOml水中，各成分用量為玉米粉3-8g，葡萄糖10-20g，瓊脂10-20g，山梨酸2_8g，甲醛l_2mL ;優選組成為玉米粉5g，葡萄糖15g，瓊脂15g，山梨酸4g，甲醛1.6mL。
[0012]在上述飼料中，即可將各成分同時加入到沸水中，也可先用部分水溶解部分成分，用另一部分水溶解其他成分，最后在充分混勻后冷卻。
[0013]上述飼料優選的制備方法是先稱取玉米粉和瓊脂，用一定量的水混勻，稱為①；將另一部分水燒開，將①緩慢加入，煮5分鐘，然后加入葡萄糖，將剩余水全部加入煮沸。停止加熱后，加入山梨酸和甲醛，充分混勻即可。
[0014]上述飼料制備完成后通常冷卻至比室溫略高的溫度，通常是40_45°C，以便促進與殺蟲劑稀釋藥液的混合。
[0015]在本發明中，殺蟲劑稀釋藥液與玉米螟幼蟲飼料體積比為1:20-80，混合均勻后
冷卻至室溫。
[0016]在本發明中，考慮到成活率和生長速度，所用玉米螟幼蟲優選為玉米螟2?3齡幼蟲，其在飼料中的培養條件為溫度為26°C，光照為16:8(L:D)，相對濕度為75%，培養時間為2-7天。
[0017]上述的玉米螟幼蟲既可以是從田間篩選的，也可以是人工培養的。為了避免受到時間和季節的影響，優選通過人工培養得到所需玉米螟幼蟲，培養方法為將田間的玉米螟一代老熟幼蟲，在溫度26?28°C，光照為16:8(L:D)，相對濕度為75%的光照條件下使其化蛹、交配、產卵；孵化的幼蟲以人工飼料進行飼養，飼養2代后，挑選體長一致和健康的2?3齡幼蟲。
[0018]上述的人工飼料從市場上即可采購，常見的玉米飼料即可。
[0019]為了保證毒力測定的準確，本發明的測定方法進一步的還包括對照組，對照組的培養條件和時間與正常試驗組相同，區別在于培養對照組玉米螟幼蟲的飼料中不含有殺蟲齊U，只含有農藥助劑。
[0020]相應的，本發明公開了專用于上述測定方法的毒力測定裝置，包括兩個相同的培養皿，兩個培養皿蓋與蓋或者底與底粘結(擴大測定空間，防止幼蟲逃逸)，培養皿底部放置混有稀釋藥液的飼料。
[0021]為了保證培養的可視化，兩個培養皿是通過透明膠粘結的，每個培養皿底部飼養的玉米螟幼蟲數根據培養皿的大小進行調整，對于通常使用的9cm直徑的培養皿，底部飼養約20只幼蟲。
【具體實施方式】:
[0022]實施例1 一種合成化合物川楝素對玉米螟的毒力測定
[0023]將川楝素用丙酮或乙醇溶解后配成母液，用含0.1% TweenSO的蒸餾水進行稀釋，將母液稀釋成5種濃度，空白對照CK為在飼料中加入除川楝素以外的農藥助劑，按照混藥平皿法進行毒力測定，試驗數據及結果見表1。
[0024]表1川楝素對玉米螟的毒藥力測定結果
[0025]
【權利要求】
1.一種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定方法，其特征在于包括下述步驟:1)將殺蟲劑配制成殺蟲劑原液，然后將殺蟲劑原液稀釋成不同濃度的稀釋藥液；2)將殺蟲劑稀釋藥液與玉米螟幼蟲飼料混合均勻，并在室溫下將飼料劃分成矩形區塊；3)將玉米螟幼蟲接種到飼料中，封好培養；4)培養結束后檢查死、活蟲數，計算死亡率、校正死亡率、LC5tl，依據LC5tl的大小判斷殺蟲劑對玉米螟的毒力的強弱。
2.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于步驟I)殺蟲劑原液由農藥助劑對殺蟲劑進行稀釋，稀釋后的濃度在5-25mg/ml之間；所述農藥助劑為有機溶劑或水。
3.根據權利要求2所述的測定方法，其特征在于所述農藥助劑選自吐溫、丙酮、水中的一種或多種。
4.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于步驟2)所述玉米螟幼蟲飼料包含玉米粉、葡萄糖、瓊脂、山梨酸、甲醛，這些成分在沸水中溶解均勻后冷卻。
5.根據權利要求4所述的測定方法，其特征在于步驟2)殺蟲劑稀釋藥液與玉米螟幼蟲飼料體積比為1:20-80，混合均勻后冷卻至室溫。
6.根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于步驟3)所用玉米螟幼蟲為玉米螟2?3齡幼蟲，培養條件為溫度為26°C，光照為16:8(L:D)，相對濕度為75%，培養時間為2_7天。
7.根據權利要求6所述的測定方法，其特征在于玉米螟幼蟲通過人工培養得到，培養方法為將田間的玉米螟一代老熟幼蟲，在溫度26?28°C，光照為16:8(L:D)，相對濕度為75%的光照條件下使其化蛹、交配、產卵；孵化的幼蟲以人工飼料進行飼養，飼養2代后，挑選體長一致和健康的2?3齡幼蟲。
8.一種用于殺蟲劑對玉米螟毒力的測定裝置，其特征在于包括兩個相同的培養皿，兩個培養皿蓋與蓋或者底與底粘結，培養皿底部放置混有稀釋藥液的飼料。
【文檔編號】G01N33/00GK104007231SQ201410197909
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年5月12日 優先權日:2014年5月12日
【發明者】羅蘭, 袁忠林, 劉志航 申請人:青島農業大學