阿霉素類高分子藥物的制備方法
【專利說明】阿霉轟類高分子藥物的制備方法 所屬技術領域
[0001] 本發明設及一種阿霉素類高分子藥物的制備方法，特別是設及一種具有癌癥細胞 祀向性的嵌段高分子材料藥物載體膠束的制備方法。屬于高分子化學及聚合物技術領域。
【背景技術】
[0002] 癌癥已成為危害人類健康的最主要疾病，治療癌癥的重要手段之一是藥物治療， 然而許多抗癌藥物存在著難溶于水、穩定性差等缺陷。如喜樹堿、紫杉醇、阿霉素、5-氣尿喀 晚等都因溶解度差而難W被生物體很好地利用，解決其水溶性問題是運類藥物制劑臨床 應用的關健。此外，腫瘤治療和診斷藥物其作用大多是非選擇性的，一些正常組織器官常有 較多分布，治療劑量下對正常組織器官毒副作用大。故解決如何增溶難溶性抗癌藥物W及 增加藥物穩定性、提高對癌細胞的選擇性迫在眉睫。因此，尋找一種可靠的祀向藥物載體是 解決W上兩個問題的關鍵。
[0003] 高分子膠束藥物載體一般采用的都為線性高分子膠束。Bae課題組開展的研 究工作最為引人注目，其在所發表的研究論文中指出，W腺鍵將Dox鍵連到聚合物主鏈 上，并利用癌細胞微環境中抑呈弱酸性使腺鍵斷裂，實現了Dox的祀點釋放。而且， Bae于 2005 年在MolecularBioSystems雜志上發表的一篇論文（BaeY,JangW-D, NishiyamaN,RikushimaS,KataokaK.必〇7 仿?〇分別 2005; 1 (3): 242-250.)，首次 同時將Fol和Dox分別鍵連到陽GW及PASP(聚天冬氨酸）上，從而兼具藥物的祀向傳遞 W及祀點釋放多功能性，流式細胞實驗（FCM)表明細胞對聚合物膠束的攝入量較不含化1 的聚合物膠束有明顯增加。GongShaoqin課題組也從事了相似的研究。其W聚馬來酸 苗豁己內醋無規共聚物為內核，陽G為殼，制備了聚合物納米膠束。W腺鍵連接Dox,并利用 Fol修飾了陽G端基，制備了抑敏感型祀向載藥膠束，測試了細胞攝入量W及細胞毒性，證 明在酸性條件下Dox由于腺鍵的斷裂而快速釋放（YangX，GrailerJJ,PillaS,Steeber DA,Gon邑S.仿'oco化/媒a祐紐6曲 2010; 210): 496-504.)。
[0004] 盡管線性聚合物膠束作為水難溶性藥物的載體，在遞藥過程中已顯示出巨大的優 勢和潛力，但仍然存在膠束穩定性差、增溶效果不明顯、藥物釋放率低的問題。目前聚合物 膠束的載藥量通常只能達到5%左右，要獲得更高的載藥量很困難。研究發現，聚合物通過 化學鍵連接藥物單體，可達到較高的載藥量。而線性嵌段共聚物負載能力往往偏低，但如果 過多鍵連藥物分子其膠束結構又不穩定。而星型聚合物可W克服運個不足。
[0005] 上海交通大學顏德岳化iuJ,PangY,HuangW,HuangX,MengLSiuX,化〇11 Y,YanD.仿?〇曲aero曲〇知細知52011; 12巧）：1567-1577.)合成了樹枝狀聚憐酸醋-聚 乳酸嵌段共聚物應用于藥物載體研究，包裹Dox后對海拉細胞有明顯抑制作用。另一具有 代表性的研究是中國科技大學劉世勇，利用功能化P-環糊精制備了用Fol和Dox修飾的聚 馬來酸酢星型聚合物，同時鍵連了對磁共振效應敏感的禮元素，在小鼠實驗中發現，聚合物 膠束在肝、腎部位的聚集有明顯加強（LiuT，LiX，QianY，HuX，LiuS.仿?〇曲別eria知 2012; 33(8): 2521-2531. )〇
[0006] 但是，由于星型聚合物中聚合物結構較為復雜，所制備的藥物載體出現生物相容 性差，藥物包載能力下降，den化imer表面藥物分子水溶性降低等問題。此外，den化imer結 構復雜，合成成本較高。運些問題都限制了星型聚合物納米載藥系統的應用。因此，不論是 性聚合物還是普通星型聚合物藥物載體，并不能同時具備：藥物祀向性，高藥物負載能力， 膠束結構穩定，祀點釋放的抑敏感性，生物相容性高運幾項對聚合物藥物載體系統的臨床 應用起至關重要作用的性能。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的是建立一種阿霉素類高分子藥物的制備方法，該藥物載體膠束具有 W下優點：屬于納米微粒；可實現藥物對癌細胞祀向傳遞W及癌細胞內抑敏感性釋放；載 藥量大；穩定性好；其祀向功能可有效減小藥物對正常組織器官毒副作用。
[0008] 該膠束是一種具有親水性和疏水性嵌段的星型嵌段聚合物；可W將阿霉素鍵連與 嵌段聚合物之上；高分子材料具有兩條親水鏈段，一條疏水鏈段：高分子材料其親水段為 聚丙締酷胺，通過葉酸進行修飾。疏水段為聚谷氨酸，通過腺鍵接枝阿霉素；高分子的膠束 結構具有核殼雙層結構，外層為親水性聚丙締酷胺，內層為藥物分子包裹層。
[0009] 所述的嵌段聚合物為W下結構式中的聚合物：
【具體實施方式】
[0012] 為使本發明的實施目的、技術方案和優點更為清楚，下面結合本發明的附圖和具 體實施例對本發明進行詳細說明： 如圖1所示，為阿霉素類高分子藥物的化學結構示意圖。該高分子為ABz型嵌段高分 子，具有兩個親水段②，和一個疏水段③所構成。每個鏈段上的鍵連了不同的分子結構： 葉酸小分子①鍵連于聚丙締酷胺分子鏈段②上，②是通過原子轉移自由基聚合法制 備； 利用1，3-偶極環加成反應所得到的五元環與聚谷氨酸③進行偶聯； 利用腺鍵將鏈段③與阿霉素分子④鍵連起來。
[0013] 如圖2所示，阿霉素類高分子藥物由該ABz雜臂星型嵌段高分子組裝形成。其結 構分別由①葉酸小分子；②聚丙締酷胺分子；③聚谷氨酸；④阿霉素分子等組成。高分子在 水溶液中通過疏水相互作用，可W自組裝為球狀的膠束結構，高分子的膠束結構具有核殼 雙層結構： 外層為親水性聚丙締酷胺②； 內層為聚谷氨酸③，為藥物分子包裹層，內層可使藥物分子包裹于球體內部，從而實現 藥物運載功能。
[0014] 圖3所示為ABz雜臂星型嵌段共聚物在水溶液中自組裝形成的球狀膠束結構的 AFM掃描圖像。證明高分子所形成球狀膠束結構均一，分散性好，在水溶液中不發生團聚，有 利于實現對藥物分子的運載和釋放功能。
[0015] 下面給出實施例W對本發明進行具體描述，但值得指出的是W下實施例只用于對 本發明進行進一步說明，不能理解為對本發明保護范圍的限制，該領域的技術熟練人員根 據上述本
【發明內容】
對本發明作出的一些非本質的改進和調整仍屬于本發明的保護范圍。 [001引 實施例1 : ①備疊氮小分子引發劑 步驟一：將2-氯乙氧基乙醇5血溶解于25血下酬中，溶液中加入4. 5gNar^, 2. 5濁U4NI，IOmg二環己燒并-18-冠酸-6,將混合物加熱至沸騰，攬拌24小時。將混合物 進行過濾，沉淀用丙酬進行徹底沖洗。所得到的混合溶液即為產物的粗品，將混合溶液濃縮 W后，在90°C進行蒸饋得到純凈物。所得到的2-疊氮乙氧基乙醇電NMR(CDCls):《3.70 扣 2H,C爲0巧，3.65 扣2? 冊CHzC分20)，3. 56 扣甜，N3CH2C分20)，3. 37 扣甜， C爲Ns)，and2. 56(S,1H,OH)。
[0017] 步驟二：將步驟一種制得的2-疊氮乙氧基乙醇2g，a-氯代酷氯5. 09g溶解于30mL二氯甲燒中，將反應體系轉移至冰域中，將6.Sg二環己基碳二亞胺緩慢加入反應容器 中，并攬拌。將〇.4g二甲氨基化晚溶于二氯甲燒中在10分鐘內滴入反應容器中。整個反 應體系在(TC條件下反應1個小時，然后在室溫下反應24小時。將反應過程中沉淀出來的 環己基脈過濾，并用二氯甲燒進行洗涂。用碳酸氨鋼溶液（5%)進行萃取，然后用無水硫酸 儀進行干燥。減壓真空干燥后，用硅膠色譜柱進行分離，最后得到產品2-氯代疊氮乙氧基 乙燒。咱NMR (CDCls):《4.30扣甜，CHzOCO), 3.73扣甜，COOCHzC分2〇)，3