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一種水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法及其應用_2

文檔序號:8957013閱讀:來源:國知局
作用;枯草芽孢桿菌可刺激水產養殖動物生長發育,提高免疫球蛋白和抗體水平,增強細胞免疫和體液免疫功能,提高群體免疫力;枯草芽孢桿菌菌體自身合成α -淀粉酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類,可使中草藥的藥用成份釋放,在消化道中與動物體內的消化酶類一同發揮作用;枯草芽孢桿菌在生長過程中可吸收利用水中的C0D、氨氮、亞硝酸鹽等,具有較好的凈水效果。本發明利用其發酵中草藥,釋放中草藥有效藥用成份,并通過抑菌、凈水等多種功能來修復水體環境。
[0013](2)植物乳桿菌:植物乳桿菌是乳酸菌的一種,菌勝為直或彎的圓端直桿菌,通常為0.9-1.2μπι X3.0-8.0 μm,單個、成對或短鏈狀。通常缺乏鞭毛,但能運動。革蘭氏陽性,不生芽孢。兼性厭氧,表面菌落直徑約3_,凸起,呈圓形,表面光滑,細密,色白,偶爾呈淺黃或深黃色。屬化能異養菌,生長需要營養豐富的培養基,需要泛酸鈣和煙酸,但不需要硫胺素、吡哆醛或吡哆胺、葉酸、維生素B12。能發酵戊糖或葡萄糖酸鹽,終產物中85%以上是乳酸。通常不還原硝酸鹽,不液化明膠,接觸酶和氧化酶皆陰性。能產生DL-乳酸,有1,6-二磷酸果糖醛縮酶和單磷酸己糖途徑的活性,能在葡萄酸鹽中生長,并產C02。發酵I分子的核糖或其他的戊糖生成I分子的乳酸和I分子的乙酸。15°C能生長,通常最適生長溫度為30?35°C。此菌與其他乳酸菌的區別在于此菌的活菌數比較高,能大量的產酸,使水中的pH值穩定不升高,而且其產出的酸性物質能降解重金屬;由于此菌是兼性好氧,在繁殖過程中能產出特有的乳酸桿菌素,乳酸桿菌素是一種生物型的防腐劑。在養殖中后期,由于動物的糞便和殘餌料增加,會下沉到池塘的底部,并且腐爛,滋生很多病菌,生成大量的氨氮和亞硝酸鹽,使底部偷死現象嚴重。如果長期使用植物IL璧趕菌,就能很好的抑制底部糞便和殘餌料的腐爛,也就降低了氨氮和亞硝酸鹽的增加,大量減少了化工降解素的用量,使養殖成本降低。
[0014]此外,植物乳桿菌具有一定的免疫調節作用;對致病菌有抑制作用;可降低血清膽固醇含量和預防心血管疾病;維持腸道內菌群平衡;促進營養物質吸收;緩解乳糖不耐癥;抑制腫瘤細胞的形成等。本發明利用其發酵中草藥,釋放中草藥有效藥用成份,并通過其分泌乳酸和乳酸桿菌素來抑菌、轉化去除水體中的亞硝酸鹽等。
[0015](3)魚腥草:精細棕黃色粉末,為魚腥草全草的干燥品粉碎物,具有清熱解毒,消癰排濃,利尿通淋功能。用于防治肺癰吐膿,痰熱喘咳,熱痢,熱淋,癰腫瘡毒。本發明應用魚腥草作為抗菌抑菌、清熱解毒的藥物,防止弧菌、氣單胞菌等侵染水產生物機體。
[0016](4)金銀花:金銀花又名忍自古被譽為清熱解毒的良藥。它性甘寒氣芳香,甘寒清熱而不傷胃,芳香透達又可祛邪。金銀花既能宣散風熱,還善清解血毒,用于各種熱性病,如身熱、發疹、發斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等癥,均效果顯著。金銀花含有綠原酸、木犀草素苷等藥理活性成分,對溶血性鏈球菌、金黃葡萄球菌等多種致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有較強的抑制力,另外還可增強免疫力、抗早孕、護肝、抗腫瘤、消炎、解熱、止血(凝血)、抑制腸道吸收膽固醇等,其臨床用途非常廣泛,可與其它藥物配伍用于治療呼吸道感染、菌痢、急性泌尿系統感染、高血壓等40余種病癥。本發明應用金銀花抗菌抗病毒,提高水產生物機體的免疫力。
[0017](5)黃芪:黃芪又名綿芪,主產于內蒙古、山西、甘肅、黑龍江等地。黃芪性甘溫,歸肺經,有補氣升陽、益衛固表之功能。經常用黃芪配伍瓊珍靈芝煎湯或泡水代茶飲,具有良好的防病保健作用。現代醫學研究表明,黃芪有增強機體免疫功能、皿、利尿、抗衰老、抗應激、降壓和較廣泛的抗菌作用。黃芪不僅能擴張冠狀動脈,改善心肌供血,提高免疫功能,而且能夠延緩細胞衰老的進程。本發明應用黃芪抗應激,提高水產生物機體的免疫力。
[0018](6)黃苳:黃苳別名山茶根、土金茶根,是唇形科黃苳屬多年生草本植物;肉質根莖肥厚,葉堅紙質,生于向陽草坡地、休荒地上,海拔60?1300 (1700?2000)米,產于黑龍江,遼寧,內蒙古,河北,河南,甘肅,陜西,山西,山東,四川等地,中國北方多數省區都可種植。俄羅斯東西伯利亞,蒙古,朝鮮,日本均有分布。黃芩的根入藥,味苦、性寒,有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。主治溫熱病、上呼吸道感染、肺熱晐嗽、濕熱黃膽、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎動不安、高血壓、癰腫癤瘡等癥。黃芩的臨床抗菌性比黃連好,而且不產生抗藥性。本發明應用黃芩作為抗菌抑菌、清熱解毒的藥物,防止弧菌、氣單胞菌等侵染水產生物機體。
[0019](7)甘草:甘草別名國老、甜草、烏拉爾甘草、甜根子,豆科、甘草屬多年生草本,根與根狀莖粗壯,是一種赴益中草藥。藥用部位是根及裉蓋,藥材性狀根呈圓柱形,長25?100厘米,直徑0.6?3.5厘米。外皮松緊不一,表面紅棕色或灰棕色。根莖呈圓柱形,表面有芽痕,斷面中部有髓。氣微,味甜而特殊。甘草多生長在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠邊緣和黃土丘陵地帶。根和根狀莖供藥用。功能主治清熱解毒、祛痰止咳、腚腹等。可調和某些藥物的烈性,如可緩和太宣、m的瀉下作用及其對胃腸道的刺激。甘草還有抗炎,抗過敏作用,能保護發炎的咽喉和氣管粘膜。甘草浸膏和甘草酸對某些毒物有類似葡萄糖醛酸的解毒作用。本發明應用甘草作為調和、解毒的藥物,提高中草藥抗菌抗病毒功效,減少毒性影響。
[0020]生物材料樣品保藏:
枯草芽孢桿菌subtil is, CGMCC 1.1413,公開于中國普通微生物菌種保藏管理中心,I^lilh http: //www.bnb1.com/p 28/d 45328.html:植物蘭‘桿菌 LactobacillusPI ant arum, CGMCC 1.557,公開于中國普通微牛物菌種保藏管理中心,網址http://www.bnb1.com/p 66/d 50866.html。
[0021]本發明的有益效果:本發明利用枯草芽孢桿菌和植物乳桿菌兩株具不同性狀和生態活性的微生物菌株,混合發酵具抑菌和提高免疫力的魚腥草、黃芪等中草藥,生成含微生物活菌的發酵型中草藥制劑,集凈化水質、抑制病原、修復腸道、保肝護肝、促進消化、防病促長等多功能于一體,可直接潑灑,使用方便,使用量小,每畝水面每米水深的最小用量僅為0.5公斤,不受環境條件的影響,特別是提高了中草藥的水溶性和生物可利用性,將微生物與中草藥有機地結合在一起;使用后可有效地去除或轉化養殖水體中的氨氮和亞硝酸氣,抑制和措抗弧菌等病原生物,減少養殖中后期有害物質的積累,提尚養殖生物機體的免疫力,達到生物凈水防病的目的,減輕病害所造成的經濟損失,保證養殖產量和質量。
【具體實施方式】
[0022]實施例1:一種水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑及制備方法,采用以下工藝步驟:
(I)枯草芽孢桿菌的培養:從試管斜面上取一環枯草芽孢桿菌subtilis,CGMCC 1.1413,由由中國普通微生物菌種保藏管理中心提供)菌苔,接種到50mL滅菌的肉湯培養基中,于30°C、120r.min 1搖床上培養24h。然后將其接入5L經滅菌的肉湯培養基中,于30°C、120r -min 1搖床上培養24h,制成菌種種子液備用。此時菌液的OD 6。。值約等于1.0,活菌數彡 18 CFU.mL I。
[0023]所述的肉湯液體培養基,含蛋白胨1g.L \牛肉膏5g.L \ NaCl 5g.L 1,
調節pH 7.0,經121°C滅菌20min后冷卻備用。
[0024](2 )植物乳桿菌的培養:從試管斜面上取一環植物乳桿菌(Lac tobacillusPI ant
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