藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數計:魚腥草40份，金銀花12份，黃芪18份，黃芩15份，甘草15份。
[0048]所述的不銹鋼發酵罐為常規設備，在市場上購買，無任何特殊要求，采用通常的加工方法。
[0049]應用實施例1應用于浙江地區的鱖魚養殖
浙江湖州地區的鱖魚養殖池塘，面積20畝，水深2.0米，因大量投飼冰鮮餌料魚，導致高溫季節池塘水質過濃，水色不好，水質中氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等分別達到1.78 mg/L、
0.65 mg/L和0.40 mg/L，超標嚴重。底質發黑發臭，影響鱖魚的生長，病害嚴重，水體中檢出嗜水性氣單胞菌。在一晴天上午10點左右將將按實例I配方的發酵型中草藥水質改良劑應用于養殖池塘中，用量為0.5kg/畝?米水深，連用3天。用后5天水色好轉，透明度增大至30 cm，底質臭味消失，水體中氨氮、亞硝酸鹽和硫化氫含量降至0.75 mg/L、0.15 mg/L和0.12 mg/L，嗜水性氣單胞菌未檢出，魚類活動恢復正常。
[0050]應用實施例2應用于廣東地區的羅非魚養殖
廣東茂名地區的羅非魚養殖塘，面積15畝，水深1.5米，夏季高溫時池塘水質過濃，水色不好，水質中氨氮、亞硝酸氮分別達到2.06mg/L、0.45mg/L，超標嚴重，水體中無乳鏈球菌達5.2 X 15個/mL，影響羅非魚的生長。在一晴天上午10點左右將將按實例2配方的發酵型中草藥水質改良劑應用于養殖池塘中，用量為0.8kg/畝.米水深，連用3天。用后5天水色好轉，由濃綠色轉為淺黃綠色，透明度增大；水體中氨氮、亞硝酸氮含量降至0.52mg/L和0.15mg/L ;無乳鏈球菌數量下降為7.8X 13個/mL，羅非魚攝食正常。
[0051]應用實施例3應用于江蘇地區的南美白對蝦養殖
江蘇蘇州地區的南美白對蝦養殖塘，面積為25畝，水深1.2米以上。6月夏初時節發現有白便現象，此時水面藻類較多，藍藻占30%以上，水質氨氮達1.25mg/L，亞硝酸鹽達
0.38mg/L0對蝦肝臟發紅，腸道細長，空腸空胃，反應遲鈍。將按實例3配方的發酵型中草藥水質改良劑均勻潑灑于養殖池中，用量為Ikg/畝.米水深，連續使用3天。停用二天后分析可見，與不用的對照池塘相比，使用的池塘水色明顯好轉，氨氮下降至0.56mg/L，亞硝酸鹽下降至0.llmg/L，南美白對蝦攝食增加，胃腸填充物增多，肝臟紅腫減退，白便減少70%，南美白對蝦的不健康狀況得到有效改善。
【主權項】
1.一種水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:所述發酵型中草藥水質改良劑為液體制劑，由枯草芽孢桿菌CGMCC1.1413和植物乳桿菌CGMCC1.557組成混合菌在一定培養基和發酵溫度下與中草藥一同發酵，完成后加工成液體制劑； 按重量份計具體步驟如下: (1)枯草芽孢桿菌的培養:從試管斜面上取一環枯草芽孢桿菌CGMCC1.1413菌苔，接種到50~100mL滅菌的肉湯培養基中，于30~35°C、100~120r.min 1搖床上培養24~30h ;然后將其接入5~8L經滅菌的肉湯培養基中，于30~35°C、100~120r *min 1搖床上培養24~30h，制成菌種種子液備用； (2)植物乳桿菌的培養:從試管斜面上取一環植物乳桿菌CGMCC1.557菌苔，接種到50~100mL滅菌的MRS液體培養基中，于32~37°C靜置培養30~40h ;然后將其接入5~8L經滅菌的MRS液體培養基中，于32~37°C靜置培養28~32h，制成菌種種子液備用； (3)混合菌的組合:取步驟(I)培養至活菌濃度多18CFU.mL 1的枯草芽孢桿菌和步驟(2)中培養至活菌濃度彡18 CFU.mL 1的植物乳桿菌各5~8L，放入經滅菌的25L桶中混合，得到菌種混合種子液備用； (4)中草藥的微生物發酵:在1.0噸不銹鋼發酵罐中加入總體積600~700L的液體發酵培養基，經121°C滅菌15 min后冷卻備用；將步驟(3)所得菌種混合種子液10~16L接入發酵罐，在32~37°C、轉速40~80r.min 1的條件下培養28~35h，待菌液濃度彡10 8 CFU.mL 1時，調PH值為3.2-3.8，用5L塑料桶分裝，最后包裝入庫，得到產品水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑。2.如權利要求1所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:步驟(I)中所述的肉湯液體培養基為:蛋白胨1g.L \牛肉膏5g.L \ NaCl 5g.L 1，調節pH值6.8-7.2，經121cC滅菌20min后冷卻備用； 步驟(2)中所述的MRS液體培養基為，牛肉膏1g *L \蛋白胨1g *L \酵母膏5g *L \葡萄糖5g.L \檸檬酸二胺2g.L \吐溫80 Ig-L1,乙酸鈉5g.L \磷酸氫二鉀2g.L \硫酸鎂0.2g.L \硫酸錳0.05g.L \碳酸鈣20g.L \調節pH值6.4-6.6，經121°C滅菌15 min后冷卻備用； 步驟(4)中所述液體發酵培養基，其組份比例按重量份數計:糖蜜12~18份，大豆粉3~7份，酵母膏3~7份，乙酸鈉1~3份，硫酸鎂0.1-0.5份，磷酸氫二鉀1~2份，中草藥12~20份，水50~60份，于室溫下在發酵罐中溶解混合，調節溶液pH值至6.4~6.6，121 °C滅菌15min，冷卻后備用。3.如權利要求1所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:步驟(I)中所得菌種種子液的OD600值為0.9-1.2，活菌數彡10 8 CFU.mL S步驟(2)中所得菌種種子液活菌數彡18 CFU -1iiL1O4.如權利要求2所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:所述糖蜜中糖分含量多55%。5.如權利要求2所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:所述中草藥為100目以上的粉狀混合物，其組份比例按重量份數計:魚腥草35~45份，金銀花12-18份，黃芪10-20份，黃芩10-15份，甘草10-15份。6.如權利要求1-5之一所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法，其特征是:采用乳酸和碳酸氫鈉調節PH值。7.權利要求1所述水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的應用，其特征是:將水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑投放于水質待改善的養殖池塘中，用量為0.5~lkg/畝?米水深，連用3~5天。
【專利摘要】本發明涉及一種水產養殖用發酵型中草藥水質改良劑的制備方法及其應用，屬于水產養殖技術領域。其由枯草芽孢桿菌CGMCC？1.1413和植物乳桿菌CGMCC？1.557兩株具不同性狀和生態活性的微生物菌株，混合發酵具抑菌和提高免疫力的魚腥草、黃芪等中草藥，制成液態發酵型中草藥水質改良劑。本發明有效地提高了中草藥的水溶性和生物可利用性，將微生物與中草藥有機地結合，使用方便，使用量小，每畝水面每米水深的最小用量僅為0.5公斤，不受環境條件的影響；使用后效果穩定，可有效地去除或轉化養殖水體中的氨氮和亞硝酸氮，抑制和拮抗弧菌等病原生物，減少養殖中后期有害物質的積累，提高養殖生物機體的免疫力，達到生物凈水防病的目的，減輕病害所造成的經濟損失，保證養殖產量和質量。
【IPC分類】C02F103/20, C02F3/34, C12R1/125, C12N1/20, C12R1/25
【公開號】CN105174493
【申請號】
【發明人】吳偉
【申請人】中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年10月10日