合物及其制備方法 治療膜腺癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為:臘腸果4360g離根香3220g槐 角巧390g白矢車菊素250g穿屯、蓮黃酬巧C190g; 制備方法： (1)按原料藥配比取臘腸果、離根香、槐角巧、白矢車菊素、穿屯、蓮黃酬巧C，混勻，用重 量百分比濃度13%乙醇作為溶劑，36°C溫浸提取，提取次數為16次，每次提取時間為25小時， 每次溶劑用量為原料藥總重量的17倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至 相對密度1.11，濾過，藥液通過LD605大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度 37%乙醇溶液洗脫LD605大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度37%乙醇洗脫液，回收乙醇， 濃縮干燥，即得提取物A; (2) 取步驟(1)藥渣A，用重量百分比濃度51%乙醇作為溶劑，加熱回流提取7次，每次提 取時間為1.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的29倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，濃縮至相對密度1.14,濾過，藥液通過DA201大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重 量百分比濃度乙醇溶液洗脫DA201大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度乙醇洗脫 液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B; (3) 將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。
[0022] 實施例4:片劑的制備 取實施例1藥物組合物243g，加入淀粉255g，混勻，制粒，干燥，加微晶纖維素54g，硬脂 酸儀3g，混勻，壓制成1400片，即得藥物組合物片劑。
[0023] 實施例5:膠囊的制備 取實施例2藥物組合物250g，加入淀粉260g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸 儀，混勻，裝膠囊1300粒，即得藥物組合物膠囊。
[0024] 實施例6:滴丸的制備 稱取聚乙二醇6000 326g水浴(80°C)加熱煮烙，加入實施例3藥物組合物13g，充分攬 拌均勻，W液體石蠟為冷卻劑，置玻璃管（4*80cm)中，冷卻溫度為rC，滴口內外徑為7.0/ 2.0 (mm/mm)，滴口距液面為2.2cm，滴速W每分62滴為最佳條件，用棉布吸干滴丸表面的冷 凝劑，即得藥物組合物滴丸。
[0025] 實施例7:治療膜腺癌的藥物組合物 治療膜腺癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為： 槐角巧300重量份白矢車菊素120重量份穿屯、蓮黃酬巧C85重量份。
[0026] 實施例8:治療膜腺癌的藥物組合物 治療膜腺癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為： 槐角巧280重量份白矢車菊素270重量份穿屯、蓮黃酬巧C200重量份。
[0027] 實施例9:治療膜腺癌的藥物組合物 治療膜腺癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為： 槐角巧140重量份白矢車菊素200重量份穿屯、蓮黃酬巧C75重量份。
[0028] 實驗例1:治療膜腺癌的試驗研究 1材料與方法 1.1實驗材料 RPMI 1640細胞培養基購自Gibco公司；藥物組合物為實施例1藥物組合物，批號 20110329;胎牛血清購自Gibco公司；四甲基偶氮挫藍(MTT)購自Sigma公司；Annexin V- FITC/PI雙染法細胞調亡檢測試劑盒購自南京凱基生物技術有限公司。
[0029] 1.2細胞系及細胞培養 人轉移膜腺癌細胞株AsPC-1來源于人膜腺癌裸鼠異種移植產生的癌性腹水，可W表 達CEA、人膜腺相關抗原、人膜腺特異性抗原和黏蛋白，呈上皮樣貼壁生長，由我司傳代培 養，接種于含10%胎牛血清、lOOU/ml青鏈霉素的RPMI1640培養基，于37°C、5%0)2、飽和濕 度的培養箱中培養，每2-3天傳代一次。
[0030] 1.3 MTT法檢測藥物組合物對AsPC-1細胞增殖的影響 收集對數生長期AsPC-1細胞，調整細胞懸液濃度為2X104/ml，接種于96孔板，每孔 20化1。同時空白組加入20化1培養液作為本底，對照調零。培養1化后，空白組和對照組加 入新鮮培養液20化1，實驗組分別加入藥物組合物濃度為0.5、1.0、2.0、4.0、8. Omg/L的培養 液20化1，每個劑量5個復孔。于24、48、72h，每孔加入MTT 2化1，繼續培養4h，小屯、吸棄培養 基，每孔加入二甲基亞諷（DMS0H5化1，避光振蕩5-lOmin，酶標儀測49化m處的吸光度 (A)值，計算細胞生長抑制率，細胞生長抑制率(R) = (A對照組一A實驗組)/(A對照組一A空白 組）X100〇/〇。
[0031] 1.4流式細胞術檢測藥物組合物對AsPC-1細胞調亡的影響 采用Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞調亡率，分別收集對照組和經1.0、2.0、4.0、 8. Omg/L藥物組合物作用2地的AsPC-1細胞，調整細胞濃度，按調亡檢測試劑盒說明處理細 胞，簡要步驟如下：PBS洗細胞二次；收集5X105個細胞，加入50化1 Bingding Buffer重 懸細胞;加入扣1 Annexin V-FITC和化1 PI室溫避光染色15min，流式細胞儀檢測，分析 調亡率。
[0032] 1.5統計學處理 采用SPSS 17.0統計軟件進行單因素方差分析，P<0.05為差異有統計學意義。
[0033] 2 結果 2.1藥物組合物抑制AsPC-1細胞的增殖 不同濃度藥物組合物作用相同時間，隨著藥物濃度的增加對AsPC-1細胞生長的抑制 率呈增加趨勢。〇.5mg/L藥物組合物作用24小時，對細胞生長無顯著影響，而2.0mg/L藥 物組合物作用24小時后，對細胞生長的抑制率為（19.22 ± 3.56)%，差異有統計學意義。相同 濃度的藥物組合物作用不同時間，隨時間的延長抑制率亦增加。8.Omg/L藥物組合物作用 24小時，對細胞的抑制率為（35.42 ±3.66)%，作用72小時，對細胞的抑制率為（65.67 ± 1.89)%，差異有統計學意義。由此可見，藥物組合物W時間及劑量依賴的方式抑制膜腺癌 AsPC-1細胞的生長。
[0034] 2.2藥物組合物誘導AsPC-1細胞的調亡 不同濃度藥物組合物作用AsPC-1細胞24小時，其調亡率隨著藥物濃度的增加呈增加 趨勢。1.Omg/L藥物組合物作用于AsPC-1細胞后，細胞調亡率改變并不明顯；但8.Omg/L 藥物組合物作用24小時后，細胞調亡率由對照組的（8.12 ± 0.68) %升高至(43.26 ± 0.78) %， 差異有統計學意義(P<〇.001)。由此可見，藥物組合物可誘導膜腺癌AsPC-1細胞調亡，呈 劑量依賴性。
【主權項】
1. 一種治療胰腺癌的藥物組合物，其特征在于制成該藥物組合物的原料藥的組成和重 量份為： 臘腸果4330-4360重量份離根香3220-3260重量份槐角苷360-390重量份白矢車菊 素250-280重量份穿心蓮黃酮苷C170-190重量份。2. 根據權利要求1所述一種治療胰腺癌的藥物組合物，其特征在于制成該藥物組合物 的原料藥的組成和重量份為： 臘腸果4350重量份尚根香3240重量份槐角苷380重量份白矢車菊素265重量份穿 心蓮黃酮苷C180重量份。3. 根據權利要求1所述一種治療胰腺癌的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以采 用制劑學的常規方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。4. 根據權利要求1所述一種治療胰腺癌的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化學 藥或中藥組成的治療胰腺癌藥物。5. -種治療胰腺癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備： 原料藥的組成和重量份為:臘腸果4330-4360重量份離根香3220-3260重量份槐角苷 360-390重量份白矢車菊素250-280重量份穿心蓮黃酮苷C170-190重量份； 制備方法： (1) 按原料藥配比取臘腸果、離根香、槐角苷、白矢車菊素、穿心蓮黃酮苷C，混勻，用重 量百分比濃度13%乙醇作為溶劑，36°C溫浸提取，提取次數為16次，每次提取時間為25小時， 每次溶劑用量為原料藥總重量的17倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至 相對密度1.11，濾過，藥液通過LD605大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度 37%乙醇溶液洗脫LD605大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度37%乙醇洗脫液，回收乙醇， 濃縮干燥，即得提取物A; (2) 取步驟（1)藥渣A，用重量百分比濃度51%乙醇作為溶劑，加熱回流提取7次，每次提 取時間為1.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的29倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，濃縮至相對密度1.14,濾過，藥液通過DA201大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重 量百分比濃度78%乙醇溶液洗脫DA201大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度78%乙醇洗脫 液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B; (3) 將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。6. 根據權利要求5所述一種治療胰腺癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下 步驟制備： 原料藥的組成和重量份為:臘腸果4350重量份離根香3240重量份槐角苷380重量份 白矢車菊素265重量份穿心蓮黃酮苷C180重量份； 制備方法： (1)按原料藥配比取臘腸果、離根香、槐角苷、白矢車菊素、穿心蓮黃酮苷C，混勻，用重 量百分比濃度13%乙醇作為溶劑，36°C溫浸提取，提取次數為16次，每次提取時間為25小時， 每次溶劑用量為原料藥總重量的17倍，濾過，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至 相對密度1.11，濾過，藥液通過LD605大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度 37%乙醇溶液洗脫LD605大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度37%乙醇洗脫液，回收乙醇， 濃縮干燥，即得提取物A; (2) 取步驟（1)藥渣A，用重量百分比濃度51%乙醇作為溶劑，加熱回流提取7次，每次提 取時間為1.1小時，每次溶劑用量為藥渣A重量的29倍，濾過，得藥渣B和提取液B，提取液B回 收乙醇，濃縮至相對密度1.14,濾過，藥液通過DA201大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重 量百分比濃度78%乙醇溶液洗脫DA201大孔吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度78%乙醇洗脫 液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B; (3) 將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。7. 根據權利要求5所述一種治療胰腺癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組 合物可以采用制劑學的常規方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。8. 根據權利要求5所述一種治療胰腺癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組 合物與化學藥或中藥組成治療胰腺癌藥物。
【專利摘要】本發明公開了一種治療胰腺癌的藥物組合物及其制備方法，本發明藥物組合物是以臘腸果、離根香、槐角苷、白矢車菊素、穿心蓮黃酮苷C為原料藥，配比而成，可按常規制劑工藝制成各種劑型，治療胰腺癌療效顯著。
【IPC分類】A61K36/185, A61P1/18, A61P35/00, A61K31/7048, A61K31/352, A61K36/48
【公開號】CN105596407
【申請號】CN201610047661
【發明人】不公告發明人
【申請人】濟南星懿醫藥技術有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請日】2016年1月25日