溶液經濃縮，進行噴霧干燥，設置入口溫度190°C，出口溫度 90 °C。獲得13.01 kg高F值玉米寡肽制品。
[0035]以上三種案例中獲得的高F值寡肽各項指標如下表1 表1實例1-3獲得高F值寡肽各項指標檢測結果
下面通過高F值玉米寡肽預防小鼠酒精性肝損傷作用的實驗來進一步說明本發明產 品的保肝護肝生理功能。
[0036] 1.材料與方法 1.1實驗材料 清潔級昆明雄性小鼠100只，體重（20-25)g，由山東省實驗動物中心提供。甘油三酯測 定試劑盒、丙二醛試劑盒、谷胱甘肽試劑盒，購自南京建成生物工程研究所。無水乙醇，購自 天津市恒興化學試劑制造有限公司。
[0037] I. 2實驗方法 將新購實驗小鼠置于實驗室自由攝食和飲水，適應環境一周。
[0038] 小鼠隨機分為5組每組20只。按高F值玉米寡肽低（100 mg · kg-i-BW)、中（400 mg · kg-lBW)、高(700 mg · kg-lBW)設3個劑量組。另設乙醇模型對照組和空白對照組。
[0039] 高F值寡肽劑量組和乙醇模型對照組按4800 mg · kg-Hg 50%乙醇5 mL · kg-S空 白對照組給予等量去離子水。每天1次，連續32 d。同時各高F值寡肽劑量組第1天開始喂食 高F值玉米寡肽，按10 mL · kg<體積灌胃，每天1次，連續32 d，乙醇模型對照組和空白對照 組給予等量去離子水。動物每周稱重兩次，按體重調整灌胃量。
[0040] 末次給藥后，將高F值寡肽劑量組和乙醇模型對照組1次灌胃給予50 % (V/V)乙醇 0.12ιΛ·10 g<BW，空白對照組給予去離子水，禁食12 h后處死動物，取肝臟制成0.1 g· ml/1肝勻漿，檢測丙二醛(MAD)、還原型谷胱甘肽(GSH)和甘油三酯(TG)含量。同時取肝臟進 行脂肪染色，鏡檢，以肝細胞內脂滴分布，稀少為0分;含脂滴的肝細胞不超過1/4，1/2,3/4 分別為1分，2分，3分;肝組織幾乎被脂滴代替為4分，用來評價小鼠肝臟病理組織學變化(月旨 肪變性）。
[0041 ] 2.實驗結果 實驗結果數據用數據處理軟件SPSS進行處理。結果如表2 表2高F值玉米寡肽對小鼠 MAD、GSH、TG含量和脂滴分布的影響
2.1對小鼠體重的影響 各劑量組小鼠實驗初始、中期、終末的體重與對照組相比，均無顯著性差異(P>〇.05)。 [0042] 2.2對小鼠肝臟丙二醛(MDA)含量的影響 模型對照組與空白對照組相比，肝組織中MDA含量明顯升高，差異有顯著性(P〈0.05); 高F值寡肽高劑量組MDA含量比模型對照組降低，差異有顯著性(P〈0.05)，見表2。
[0043] 2.3對小鼠肝臟還原型谷胱甘肽(GSH)含量的影響 模型對照組與空白對照組相比，肝組織中GSH，含量明顯降低，差異有極顯著性（P〈 〇. 01);高F值玉米寡肽低，高劑量組GSH含量高于模型對照組，差異有極顯著性(P〈0.01 )，見 表2。
[0044] 2.4對小鼠肝臟甘油三酯(TG)含量的影響 模型對照組與空白對照組相比，肝組織中TG含量明顯升高，差異有極顯著性(P〈0.01); 高F值玉米寡肽高劑量組TG含量明顯低于模型對照組，差異有極顯著性(P〈0.01 )，見表2。 [0045] 2.5對小鼠肝臟脂滴分布的影響 模型對照組肝組織100%出現脂肪變性，與空白對照組比較，差異有極顯著(P〈〇.01); 高F值玉米寡肽高劑量組肝臟脂肪變性程度比模型對照組明顯降低，差異有極顯著性(P〈 0.01)，見表 2。
[0046]結果表明本發明制得的高F值玉米寡肽能夠使酒精性肝損傷小鼠肝臟的肝細胞脂 肪變性指數降低，同時可以使肝臟中的甘油三酯(TG)、丙二醛(MAD)含量降低，還原性谷胱 甘肽(GSH)含量升高。因此本方法生產的高F值玉米寡肽具有明顯的預防小鼠酒精性肝損傷 作用。
[0047]根據上述說明書的揭示和教導，上述實例為本發明較佳的實施方式。因此，本發明 并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發明實質與原理下所作的改變、組合、修 飾，均應為等效的置換方式，都包含在本發明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法，其特征在于包括以下 操作步驟： (1) 玉米黃粉的乳化:將玉米黃粉按料液比1:9的比例進行配比加水，在乳化罐中8000-10000 r/min高速剪切乳化30 min-60 min; (2) 酶解、滅酶、過濾：將乳化液轉入酶解罐中，調溫度50-60°C，pH9-l 1，按酶活比（1- 5): 1加入堿性蛋白酶與復合風味蛋白酶，酶解1-3 h; 酶解結束，將溫度升至90-100 °C滅酶10_15min;滅酶后，利用板框過濾過濾酶解液； (3) 活性炭吸附：將上述濾液調pH至2.5-3.5，按固液比1:10加入活性炭，靜態吸附2-3 h;并進行板框過濾； (4) 分離純化:將上述濾液經10000 Da、5000 Da、1000 Da超濾膜分級超濾，再經150 Da 納濾膜進行除鹽以及游離氨基酸； (5) 濃縮干燥:將上述溶液經濃縮后，進行噴霧干燥，設置入口溫度180-190°C，出口溫 度80-90 °C ;獲得高F值玉米寡肽制品。2. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(1)中所述乳化為玉米黃粉預處理的一種方法，在乳化罐中進行。3. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(2 )中所述堿性pH調節劑為NaOH。4. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟（2)中所述堿性蛋白酶與復合風味蛋白酶分別為Ala Calase2.4L、 Flavourzyme 500 MG，兩種蛋白酶分別為外切與內切蛋白酶。5. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(2)中所述板框過濾，為適用于工業化生產的大型過濾設備。6. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(3)中所述活性炭為食品級果殼粉末狀活性炭，細度為200目。7. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(4)中所述超濾納濾膜為工業化生產中用于分離純化的先進的膜過濾系 統，可對不同分子量大小物質及顆粒進行分級分離與純化。8. 根據權利要求1所述的一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法， 其特征在于步驟(5)所述噴霧干燥，所用設備為大型噴霧干燥塔，且噴霧條件為入口溫度 180-190°C，出 口溫度80-90°C。9. 一種根據權利要求1-8任一項所述方法制備得到的高F值玉米寡肽。
【專利摘要】本發明公開了一種具有醒酒護肝活性的高F值玉米寡肽的工業化生產方法。該方法包括步驟：將玉米黃粉（CGM）經過高速剪切乳化，利用堿性蛋白與復合風味蛋白酶組合進行酶解，酶解后滅酶，板框過濾，活性炭吸附脫苦脫色及去除芳香族氨基酸，再經超濾設備分離純化，納濾除鹽，噴霧干燥獲得高F值玉米寡肽。本發明制得的產品能夠使酒精性肝損傷小鼠肝臟的肝細胞脂肪變性指數降低，同時可以使肝臟中的甘油三酯（TG）、丙二醛（MAD）含量降低，還原性谷胱甘肽（GSH）含量升高，結果表明本方法生產的高F值玉米寡肽具有預防小鼠酒精性肝損傷的作用。
【IPC分類】A23J3/14, A23J3/34
【公開號】CN105639048
【申請號】
【發明人】張文鐠, 王溢, 張明振
【申請人】華隆（乳山）食品工業有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年1月12日