BW的劑量灌胃兩種性別的小鼠，觀察14天。實驗期間未見明 顯的中毒表現，觀察期內無死亡。受試物對兩種性別的小鼠的急性經口毒性(MTD)均大于 20.Og/kg · BW，根據《食品安全性毒理學評價程序和方法》（2003年版)急性毒性分級，屬無 毒級。
[0094]表1小鼠的急性毒性試驗結果
[0096] 30天喂養試驗
[0097] 1.樣品：按實施例1-4所述配方及工藝制備的樣品。人擬用劑量為3.6g/60kg · BW·日。
[0098] 2.實驗動物:選用體重55~80g，SPF級Wistar大鼠80只，雌雄各半。
[0099] 3.試驗方法:劑量設計為：3.00、6.00、12.0(^/1^.81(分別相當于人擬用劑量的 50倍、100倍、200倍）。將大鼠隨機分為三個受試物組及對照組，每組20只，雌雄各半。對照組 喂飼正常基礎塊料，受試物組則喂飼摻入不同劑量樣品。動物單籠喂養，自由飲食，連續觀 察30天。
[0100] 4.觀察指標及結果：
[0101] 4.1-般情況觀察：
[0102] 每天觀察動物的表現、行為、毒性表現和死亡情況。每周稱體重1次和兩次食物攝 入量，計算每周及總的食物利用率。結果各組動物生長發育、活動均正常，無中毒表現和死 亡，各組動物每周體重、體重增加量、進食量和食物利用率及總體重增加量、進食量和食物
[0103] 利用率均無統計學差異(ρ>〇·〇5)。
[0104] 4.2血液學檢查：
[0105]測定血紅蛋白含量(Hgb)、紅細胞(RBC)及白細胞(WBC)計數，白細胞分類(淋巴、單 核、中性粒、嗜酸、嗜堿）。實驗末期血液學的各項指標均在正常值范圍內，各組動物血紅蛋 白、紅細胞及白細胞計數、白細胞分類與對照組相比均無統計學差異(Ρ>〇.05)。
[0106] 4.3生化指標測定：
[0107] 測定血清內氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、尿素氮(BUN)、 膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、總蛋白（TP)、白蛋白（ALB)、肌酐(CRE)。實驗末期 試驗動物各項生化指標均在正常值范圍內，各組動物學醫生化指標與對照組相比均無統計 學差異(Ρ>〇·〇5)。
[0108] 4.4大體觀察及病理組織檢查：
[0109] 試驗末期頸椎脫白處死動物，觀察各主要臟器及胸、腹腔大體病理改變。取出全部 動物的肝臟、腎臟、脾臟、睪丸，稱重并計算臟器系數。取出對照組和高劑量組動物的肝臟、 腎臟、脾臟、睪丸（或卵巢）、胃及十二指腸，用12%福爾馬林固定，石蠟包埋、切片、HE染色， 在光鏡下進行組織學檢查。各主要臟器(心、肝、脾、肺、腎、胃、腸等)均未見有意義的病理改 變。
[0110] 毒理試驗結果表明本品對屬于無毒級，可以長期服用。
[0111] 增加骨密度功能實驗
[0112] 1.樣品：按實施例1-4所述配方及工藝制備的樣品。人擬用劑量為3.6g/60kg · BW ·日。碳酸鈣。
[0113] 2.試驗動物:4周斷乳SD雄性大鼠，體重65-85g，每組10只。用含有膽固醇的飼料喂 養動物形成脂代謝紊亂動物模型。
[0114] 3 .劑量選擇：實施例組1 -4、低鈣對照組（15 0mg/100 g飼料）和碳酸鈣對照組 (3600mg/kg.BW)。給予三個月，觀察如下指標。
[0115] 4.結果：
[0116] 實驗項目及結果如下表2-3所示。
[0117] 表2對大鼠體重、骨鈣的影響
[0119] ~由表2可以看出，各實施例組與低鈣對照組比較有顯著性差異(PS 0.05)。
[0120] 表3對大鼠骨密度和骨鈣含量的影響
[0122] 由表3可以看出，各實施例組與低鈣對照組比較中點骨密度、遠端骨密度和骨質最 疏松點骨密度具有顯著性差異(P < 〇. 01)。
[0123] 由上述功能實驗結果判斷，骨鈣含量及骨密度均顯著于低鈣對照組，可判定本品 具有增加骨密度的功能。
[0124] 以上所述實施例僅是為充分說明本發明而所舉的較佳的實施例，本發明的保護范 圍不限于此。本技術領域的技術人員在本發明基礎上所作的等同替代或變換，均在本發明 的保護范圍之內。本發明的保護范圍以權利要求書為準。
【主權項】
1. 一種具有增加骨密度功能的保健食品組合物，其特征在于所述的保健食品組合物包 含:補骨脂提取物25-50重量份，葛根提取物25-50重量份，三七總皂苷20-40重量份，D-氨基 葡萄糖鹽酸鹽100-130重量份，碳酸鈣120-150重量份、水解膠原蛋白80-120重量份； 所述組合物由如下方法制備而成：取補骨脂，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取 1-2小時，提取1-3次，提取液濃縮，濾過，回收乙醇并濃縮至55°C熱測相對密度為1.15~ 1.25的稠液，干燥，粉碎，得干霄粉，即得補骨脂醇提取物;取葛根，加8-12倍量60-80 %乙醇 回流提取，提取1-2小時，提取1-3次，提取液濃縮，濾過，回收乙醇并濃縮至55°C熱測相對密 度為1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏粉，即得葛根醇提取物;將上述補骨脂提取物、 葛根提取物與三七總皂苷、D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、碳酸鈣、水解膠原蛋白混合，加入臨床上 可接受的適量常規輔料混合，按照常規工藝，制成硬膠囊劑、片劑、顆粒劑、粉劑、袋裝茶劑、 軟膠囊劑等口服固體制劑。2. 如權利要求1所述的保健食品組合物，其特征在于所述中藥提取物和營養物質的重 量份為：補骨脂提取物40重量份，葛根提取物40重量份，二七總阜苷30重量份，D-氨基葡萄 糖鹽酸鹽112重量份，碳酸鈣135重量份、水解膠原蛋白90重量份。3. 如權利要求1所述的保健食品組合物，其特征在于所述中藥提取物和營養物質的重 量份為：補骨脂提取物42重量份，葛根提取物32重量份，二七總阜苷36重量份，D-氨基葡萄 糖鹽酸鹽100重量份，碳酸鈣142重量份、水解膠原蛋白95重量份。4. 如權利要求1所述的保健食品組合物，其特征在于所述中藥提取物和營養物質的重 量份為:補骨脂提取物32重量份，葛根提取物46重量份，二七總阜苷32重量份，D-氨基葡萄 糖鹽酸鹽105重量份，碳酸鈣132重量份、水解膠原蛋白100重量份。5. 如權利要求1-4所述的任意一種保健食品組合物的制備方法，其特征在于該方法為 取補骨脂，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取1-2小時，提取1-3次，提取液濃縮，濾過， 回收乙醇并濃縮至55°C熱測相對密度為1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏粉，即得補 骨脂提取物;取葛根，加8-12倍量60-80%乙醇回流提取，提取1-2小時，提取1-3次，提取液 濃縮，濾過，回收乙醇并濃縮至55°C熱測相對密度為1.15~1.25的稠液，干燥，粉碎，得干膏 粉，即得葛根提取物;將上述補骨脂提取物、葛根提取物與三七總皂苷、D-氨基葡萄糖鹽酸 鹽、碳酸鈣、水解膠原蛋白混合，加入臨床上可接受的適量常規輔料混合，按照常規工藝，制 成硬膠囊劑、片劑、顆粒劑、粉劑、袋裝茶劑、軟膠囊劑等口服固體制劑。6. 如權利要求5所述的制備方法，其特征在于將原料補骨脂提取物、葛根提取物、三七 總皂苷、D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、碳酸鈣、水解膠原蛋白，攪拌均勻，制粒，干燥，整粒;干顆粒 加入硬脂酸鎂，硬脂酸鎂加入量為原料總量的0.5-0.6%，混合，裝膠囊，即得硬膠囊劑。7. 如權利要求5所述的制備方法，其特征在于所述補骨脂的提取工藝參數為:提取3次， 每次加8倍量60%乙醇，提取時間為每次2小時;所述濃縮條件為:溫度70°C、壓力0.08Mpa進 行減壓濃縮;所述干燥采用真空干燥法進行，干燥參數:溫度為60°C，真空度為0.08Mpa，時 間為45-55小時。8. 如權利要求5所述的制備方法，其特征在于所述葛根的提取工藝參數為:提取3次，每 次加8倍量80 %乙醇，提取時間為每次2小時;所述濃縮條件為:溫度70 °C、壓力0.08Mpa進行 減壓濃縮;所述干燥采用真空干燥法進行，干燥參數:溫度為60 °C，真空度為0.08Mpa，時間 為40-50小時。9.如權利要求1-4所述的任意一種保健食品組合物在制備具有增加骨密度功能的食品 中的應用。
【專利摘要】本發明涉及一種增加骨密度的保健食品組合物及其制備方法，所述的保健食品組合物包含：補骨脂提取物25-50重量份，葛根提取物25-50重量份，三七總皂苷20-40重量份，D-氨基葡萄糖鹽酸鹽100-130重量份，碳酸鈣120-150重量份、水解膠原蛋白80-120重量份。將補骨脂、葛根分別用不同濃度乙醇進行提取，分別將補骨脂提取物、葛根提取物、三七總皂苷、D-氨基葡萄糖鹽酸鹽、碳酸鈣、水解膠原蛋白與其它加入臨床上可接受的適量輔料混合，按照常規工藝，制成硬膠囊劑、片劑、顆粒劑、粉劑、袋裝茶劑、軟膠囊劑等口服固體制劑。所述的保健食品組合物具有增加骨密度的功能，且安全無毒副作用，可以長期服用，可用于預防和輔助治療骨質疏松癥。
【IPC分類】A61K31/7008, A61K33/10, A23L33/00, A61P19/10, A61K38/01, A61K36/488
【公開號】CN105639620
【申請號】
【發明人】崔俊昌
【申請人】崔俊昌
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2015年12月29日