一種上皮培養體系的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明特別涉及一種上皮培養體系，屬于上皮細胞培養技術領域。
【背景技術】
[0002 ]上皮是由密集排列的上皮細胞和極少量細胞間質構成的動物的基本組織，一般彼此相聯成膜片狀，被覆在機體體表，或襯于機體內中空器官的腔面，以及體腔腔面，其排列方式有單層和多層之分，依功能和結構的特點可將上皮組織分為被覆上皮、腺上皮和感覺上皮等三類，其中被覆上皮為一般泛稱的上皮組織，分布最廣，現有技術中，上皮細胞培養的培養基成分比較復雜，配置不方便;且在沒有血清環境下，生長活性低，操作繁瑣，另外現有的上皮培養過程中，容易混入雜菌。
【發明內容】
[0003](一)要解決的技術問題
為解決上述問題，本發明提出了一種上皮培養體系，配置簡單，通過能夠在2%血清的環境下促進上皮細胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。
[0004](二)技術方案
本發明的上皮培養體系，包括上皮培養基和上皮添加劑;所述上皮培養基其組成成分及濃度為:甘氨酸18.75mg/L，丙氨酸4.45mg/L，L-丙氨酸-L-谷胺酰胺542mg/L，精氨酸147.5mg/L，天冬酰胺7.5mg/L，天冬氨酸6.65mg/L，半胱氨酸17.55mg/L，胱氨酸31.3mg/L，谷氨酸7.35mg/L，組氨酸31.48mg/L，異亮氨酸54.47mg/L，亮氨酸59.05mg/L，賴氨酸91.25mg/L，蛋氨酸17.25mg/L，苯丙氨酸35.48mg/L，脯氨酸17.25mg/L，絲氨酸26.25mg/L，蘇氨酸53.45mg/L，色氨酸9.02mg/L，酪氨酸55.8mg/L，繳氨酸52.85mg/L，維生素H0.0035mg/L，氯化膽堿8.98mg/L，泛酸|丐2.24mg/L，葉酸2.65mg/L，煙酰胺2mg/L，維生素B62.031mg/L，維生素B2 0.219mg/L，維生素BI 2.17mg/L，維生素B12 0.68mg/L，無旋光肌醇
12.6mg/L，氯化 |丐 116.6mg/L，硫酸銅0.0013mg/L，硝酸鐵 0.05mg/L，硫酸鐵 0.417mg/L，氯化鎂 28.6mg/L，硫酸鎂 48.8mg/L，氯化鉀312mg/L，碳酸氫鈉 2438mg/L，氯化鈉6999.5mg/L，磷酸氫二鈉7 lmg/L，磷酸二氫鈉62.5mg/L，硫酸鋅0.432mg/L，葡萄糖3150mg/L，次黃嘌呤2.411^凡，亞油酸0.04211^凡，硫辛酸0.105mg/L，酸紅8.lmg/L，四甲稀二胺0.08mg/L，丙酮酸鈉55mg/L，胸腺嘧啶0.37mg/L，維生素K3(甲萘醌)0.01mg/L，維生素D2(骨化醇)0.1mg/L;
所述上皮添加劑其組成成分及濃度為:重組人表皮細胞生長因子25ng/ml，氫化可的松100ng/ml，重組人胰島素10ug/ml，人全鐵轉鐵蛋白5ug/ml，腺嘌呤0.18mM，霍亂毒素0.1nM，三碘甲狀腺氨酸20—12M,
有益效果
與現有技術相比，本發明的上皮培養體系，配置簡單，通過上皮培養基和上皮添加劑配合使用，能夠在2%血清的環境下促進上皮細胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。
【具體實施方式】
[0005]本發明上皮培養體系，包括上皮培養基和上皮添加劑;所述上皮培養基其組成成分及濃度為:甘氨酸18.75mg/L，丙氨酸4.45mg/L，L-丙氨酸-L-谷胺酰胺542mg/L，精氨酸147.5mg/L，天冬酰胺7.5mg/L，天冬氨酸6.65mg/L，半胱氨酸17.55mg/L，胱氨酸31.3mg/L，谷氨酸7.35mg/L，組氨酸31.48mg/L，異亮氨酸54.47mg/L，亮氨酸59.05mg/L，賴氨酸91.25mg/L，蛋氨酸17.25mg/L，苯丙氨酸35.48mg/L，脯氨酸17.25mg/L，絲氨酸26.25mg/L，蘇氨酸53.45mg/L，色氨酸9.02mg/L，酪氨酸55.8mg/L，繳氨酸52.85mg/L，維生素H
0.0035mg/L，氯化膽堿8.98mg/L，泛酸|丐2.24mg/L，葉酸2.65mg/L，煙酰胺2mg/L，維生素B62.031mg/L，維生素B2 0.219mg/L，維生素BI 2.17mg/L，維生素B12 0.68mg/L，無旋光肌醇
12.6mg/L，氯化 |丐 116.6mg/L，硫酸銅0.0013mg/L，硝酸鐵 0.05mg/L，硫酸鐵 0.417mg/L，氯化鎂 28.6mg/L，硫酸鎂 48.8mg/L，氯化鉀312mg/L，碳酸氫鈉 2438mg/L，氯化鈉6999.5mg/L，磷酸氫二鈉7 lmg/L，磷酸二氫鈉62.5mg/L，硫酸鋅0.432mg/L，葡萄糖3150mg/L，次黃嘌呤2.411^凡，亞油酸0.04211^凡，硫辛酸0.105mg/L，酸紅8.lmg/L，四甲稀二胺0.08mg/L，丙酮酸鈉55mg/L，胸腺嘧啶0.37mg/L，維生素K3(甲萘醌)0.01mg/L，維生素D2(骨化醇)0.1mg/L;
所述上皮添加劑其組成成分及濃度為:重組人表皮細胞生長因子25ng/ml，氫化可的松100ng/ml，重組人胰島素10ug/ml，人全鐵轉鐵蛋白5ug/ml，腺嘌呤0.18mM，霍亂毒素0.1nM，三碘甲狀腺氨酸20—12M,
其中，所述氫化可的松由乙醇溶解。
[0006]本發明的上皮培養體系，配置簡單，通過上皮培養基和上皮添加劑配合使用，能夠在5%血清的環境下促進上皮細胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。
[0007]上面所述的實施例僅僅是對本發明的優選實施方式進行描述，并非對本發明的構思和范圍進行限定。在不脫離本發明設計構思的前提下，本領域普通人員對本發明的技術方案做出的各種變型和改進，均應落入到本發明的保護范圍，本發明請求保護的技術內容，已經全部記載在權利要求書中。
【主權項】
1.一種上皮培養體系，其特征在于:包括上皮培養基和上皮添加劑； 所述上皮培養基其組成成分及濃度為:甘氨酸18.75mg/L，丙氨酸4.45mg/L，L-丙氨酸-L-谷胺酰胺542mg/L，精氨酸147.5mg/L，天冬酰胺7.5mg/L，天冬氨酸6.65mg/L，半胱氨酸.17.55mg/L，胱氨酸31.3mg/L，谷氨酸7.35mg/L，組氨酸31.48mg/L，異亮氨酸.54.47mg/L，亮氨酸59.05mg/L，賴氨酸91.25mg/L，蛋氨酸17.25mg/L，苯丙氨酸.35.48mg/L，脯氨酸17.25mg/L，絲氨酸26.25mg/L，蘇氨酸53.45mg/L，色氨酸.9.02mg/L，酪氨酸55.8mg/L，纈氨酸52.85mg/L，維生素H 0.0035mg/L,氯化膽堿8.98mg/L，泛酸|丐2.24mg/L，葉酸.2.65mg/L，煙酰胺2mg/L，維生素B6 2.031mg/L，維生素B2 0.219mg/L，維生素BI .2.17mg/L，維生素B120.68mg/L，無旋光肌醇 12.6mg/L，氯化鈣116.6mg/L，硫酸銅.0.0013mg/L,硝酸鐵 0.05mg/L，硫酸鐵0.417mg/L，氯化鎂28.6mg/L，硫酸鎂.48.8mg/L，氯化鉀312mg/L，碳酸氫鈉2438mg/L，氯化鈉6999.5mg/L，磷酸氫二鈉71mg/L，磷酸二氫鈉62.5mg/L，硫酸鋅0.432mg/L，葡萄糖3150mg/L，次黃嘌呤2.4mg/L，亞油酸0.04211^凡，硫辛酸0.105mg/L，酚紅.8.lmg/L，四甲稀二胺0.08mg/L，丙酮酸鈉55mg/L，胸腺嘧啶0.37mg/L，維生素K3(甲萘醌)0.0lmg/L，維生素D2(骨化醇)0.lmg/L; 所述上皮添加劑其組成成分及濃度為:重組人表皮細胞生長因子25ng/ml，氫化可的松.100ng/ml，重組人胰島素10ug/ml，人全鐵轉鐵蛋白5ug/ml，腺嘌呤0.18mM，霍亂毒素.0.1nM，三碘甲狀腺氨酸20—12M。
【專利摘要】本發明公開了一種上皮培養體系；包括上皮培養基和上皮添加劑；所述上皮添加劑其組成成分及濃度為：重組人表皮細胞生長因子25ng/ml，氫化可的松100ng/ml，重組人胰島素10ug/ml，人全鐵轉鐵蛋白5ug/ml，腺嘌呤0.18mM，霍亂毒素0.1nM，三碘甲狀腺氨酸20-12M，本發明的上皮培養體系，配置簡單，通過上皮培養基和上皮添加劑配合使用，能夠在2%血清的環境下促進上皮細胞的生長活性，也可以部分抑制成纖維和平滑肌細胞的活性，減少雜細胞的污染。
【IPC分類】C12N5/071
【公開號】CN105647850
【申請號】
【發明人】王悅
【申請人】賽百慷（上海）生物技術股份有限公司
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年3月1日