1cm;
[0049] 2級：1 · Ocm〈薯塊病斑直徑< 2 · Ocm;
[0050] 3級：2 · Ocm〈薯塊病斑直徑< 3 · Ocm;
[0051 ] 4級：3 · Ocm〈薯塊病斑直徑< 4 · Ocm;
[0052] 5級:整個薯塊腐爛，薯塊病斑直徑>4. Ocm;
[0053] 其中，抗性評價標準如下：
[0054]高抗:平均發病嚴重度<1.5;
[0055]抗病：1 · 5〈平均發病嚴重度< 2;
[0056]中抗:2〈平均發病嚴重度<3;
[0057] 感病：3〈平均發病嚴重度仝4;
[0058] 高感:4〈平均發病嚴重度。
[0059] 本中心采用本實施例1提供的方法，對廣薯79、廣薯87、廣薯72和其它10份甘薯品 種或品系材料進行了抗性鑒定，其待鑒定甘薯材料的薯塊病斑直徑統計結果如表1所示，
[0060] 表1待鑒定甘薯材料的薯塊病斑直徑
[0061]
[0062] 廣薯79作為已知的感病品種，其發病情況是作為本實施例提供的發病條件是否適 宜的對照標準。其抗性等級也是作為其它甘薯品種或品系的抗性等級參照標準。
[0063] 廣薯79、待鑒定品系4、待鑒定品系9的抗性鑒定結果示意圖分別如圖1、圖2和圖3 所示。
[0064] 按本實施例的方法對廣薯79以及12份甘薯品種或品系材料的發病嚴重度進行了 鑒定，計算平均發病率，進行抗性評定，其結果如表2所示，
[0065]表2爪哇黑腐病抗性鑒定結果
[0066]
[0067] 由表2可知，對12份甘薯品種或品系材料的爪哇黑腐病鑒定抗性評價表明，廣薯 87、待鑒定品系3、待鑒定品系7、待鑒定品系9和待鑒定品系10等5個品種或品系的表現型為 中抗，其他品種或品系的抗性級別為感病和高感。通過本發明提供的方法，可迅速篩選出對 甘薯爪哇黑腐病抗性相對較強的品種。通過該方法也為甘薯的儲藏過程提供指導:對于鑒 定得到抗性級別為感病和高感結論的品種，在儲藏時要格外注意防治該病害。
[0068] 實施例2:
[0069] 本實施例提供一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法，包括以下步驟：
[0070] 1)病原菌活化培養:將甘薯爪哇黑腐病菌LP1接種至TOA培養基平板，25°C活化培 養2天，利用滅菌打孔器從PDA培養基平板的邊緣取一塊直徑為3_的含有菌絲體的菌塊，將 所述菌塊置于另一新的PDA培養基平板的中央，繼續25°C活化培養2天；
[0071] 2)待鑒定甘薯材料準備:取廣薯87、廣薯72和廣薯79三個品種的甘薯材料，清洗晾 干，削薯皮使待鑒定甘薯材料露出l-2cm 2創面;每個品種各取10個單重200g左右的薯塊進 行平行試驗；
[0072] 3)接種培養:利用滅菌打孔器從步驟1)繼續活性培養后的PDA培養基平板邊緣取 一塊直徑為6mm含有菌絲體的菌塊，分別將長有菌絲體的一面貼附于待鑒定甘薯材料和對 照品種的創面，將待鑒定甘薯材料和對照品種置于溫度為28°C，濕度為95%的培養室進行 培養；
[0073] 4)等級鑒定:接種培養5-10天后，將待鑒定甘薯材料和對照品種取出，觀察病害情 況并測量薯塊病斑直徑，進行發病嚴重度分級，然后計算每個待鑒定甘薯材料和對照品種 的平均發病嚴重度，根據平均發病嚴重度進行抗性評價；
[0074]其中，發病嚴重度分級標準如下：
[0075] 1級:薯塊正常無任何病癥，薯塊病斑直徑< 1cm;
[0076] 2級：1 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 2 · 0cm;
[0077] 3級：2 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 3 · 0cm;
[0078] 4級：3 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 4 · 0cm;
[0079] 5級:整個薯塊腐爛，薯塊病斑直徑>4.0cm;
[0080] 其中，抗性評價標準如下：
[0081] 高抗:平均發病嚴重度<1.5;
[0082]抗病：1 · 5〈平均發病嚴重度< 2;
[0083]中抗:2〈平均發病嚴重度<3;
[0084]感病:3〈平均發病嚴重度<4;
[0085] 高感:4〈平均發病嚴重度。
[0086]本實施例于3個不同的時間對廣薯87、廣薯72和廣薯79三個品種進行抗性鑒定，其 結果如表2所示。
[0087]表3廣薯87、廣薯72和廣薯79爪哇黑腐病重復抗性鑒定結果 [0088]
[0089] 由表2的結果可知，3次不同時間對3個甘薯品種進行甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定表 明，3次抗性鑒定結果較一致:廣薯72高感爪哇黑腐病，廣薯87中抗爪哇黑腐病，廣薯79對爪 哇黑腐病表現為感病至高感。說明該方法具有良好的穩定性，其抗性鑒定的結果可靠。結合 本中心的統計數據，利用本發明方法評價的結果與儲藏時3個品種的發病情況向吻合。
[0090] 上述實施方式僅為本發明的優選實施方式，不能以此來限定本發明保護的范圍， 本領域的技術人員在本發明的基礎上所做的任何非實質性的變化及替換均屬于本發明所 要求保護的范圍。
【主權項】
1. 一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟： 1) 病原菌活化培養:將甘薯爪哇黑腐病菌接種至roA培養基平板，活化培養，在TOA培養 基平板上生長出菌絲體； 2) 待鑒定甘薯材料準備:取待鑒定甘薯材料和對照品種，清洗晾干，削薯皮使待鑒定甘 薯材料和對照品種均露出0 · 5-2cm2創面； 3) 接種培養:用打孔器從PDA培養基平板邊緣取含有菌絲體的菌塊，分別將長有菌絲體 的一面貼附于待鑒定甘薯材料和對照品種的創面，進行培養； 4) 等級鑒定:接種培養5-10天后，將待鑒定甘薯材料和對照品種取出，觀察病害情況并 測量薯塊病斑直徑，進行發病嚴重度分級，然后計算每個待鑒定甘薯材料和對照品種的平 均發病嚴重度，根據平均發病嚴重度進行抗性評價。2. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)中，病原菌活化培養的具體操作方法 如下：將甘薯爪哇黑腐病菌接種至PDA培養基平板，活化培養2天，從PDA培養基平板的邊緣 取含有菌絲體的菌塊，將所述菌塊置于另一新的PDA培養基平板的中央，繼續活化培養2天。3. 如權利要求1或2所述的方法，所述活化培養的具體操作步驟:將PDA培養基平板置于 25±3Γ培養。4. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)中，所述對照品種為廣薯79。5. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)中，所述培養步驟的具體參數如下:培 養溫度為25 ± 3 °C，培養濕度為85-98 %。6. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)中，發病嚴重度分級標準如下： 1級:薯塊正常無任何病癥，或者薯塊病斑直徑< lcm; 2級：1 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 2 · 0cm; 3級:2 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 3 · 0cm; 4級:3 · 0cm〈薯塊病斑直徑< 4 · 0cm; 5級:整個薯塊腐爛，薯塊病斑直徑>4.0cm。7. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)中，抗性評價標準如下： 高抗:平均發病嚴重度<1.5; 抗病：1.5〈平均發病嚴重度< 2; 中抗:2〈平均發病嚴重度< 3; 感病:3〈平均發病嚴重度< 4; 高感:4〈平均發病嚴重度。
【專利摘要】本發明提供一種甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定方法，包括以下步驟：1)病原菌活化培養；2)待鑒定甘薯材料準備，使甘薯材料露出0.5-2cm2創面；3)接種培養：從PDA培養基平板邊緣取含有菌絲體的菌塊，分別將長有菌絲體的一面貼附于待鑒定甘薯材料和對照品種的創面，進行培養；4)等級鑒定：接種培養5-10天后，觀察待鑒定甘薯材料病害情況并測量薯塊病斑直徑，進行發病嚴重度分級，再根據平均發病嚴重度進行抗性評價。本發明提供了一種操作簡單、接種后發病周期短、發病過程穩定的甘薯爪哇黑腐病抗性鑒定評價方法。
【IPC分類】C12Q1/02
【公開號】CN105648028
【申請號】
【發明人】黃立飛, 房伯平, 葉芍君, 陳景益, 黃實輝, 張雄堅, 羅忠霞, 王章英, 姚祝芳, 陳新亮
【申請人】廣東省農業科學院作物研究所
【公開日】2016年6月8日
【申請日】2016年4月1日