lu，谷氨酸；（3)Ser，絲氨酸；（4)His，組氨酸；（5)Gly，甘氨酸； (6)Thr，蘇氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (ll)Val，纈氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，異亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，賴氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0014]采用上述技術方案所產生的有益效果在于:本發明針對含乳飲料的特性研制了專 用的處理試劑及試劑用量及處理參數，使得檢測步驟的工藝參數相互嚴密配合，實現了對 含乳飲料中γ -氨基丁酸和16種蛋白水解氨基酸的一步式高靈敏度、高穩定性的檢測，對提 高乳制品產品品質和加強監督具有重要的實際意義。
[0015]申請人針對本發明的檢測方法進行了系列試驗。參看附圖1、2(圖1是γ-氨基丁酸 和16種標準氨基酸的分離譜圖；圖2是實施例1中含乳飲料中γ -氨基丁酸和16種蛋白水解 氨基酸的分離譜圖），可見本發明的檢測方法能夠實現對含乳飲料中γ-氨基丁酸和16種蛋 白水解氨基酸的一步式同時檢測，分離圖譜十分清晰和可靠。
[0016] 同時，申請人的系列試驗顯示本檢測方法穩定性極高。利用其檢測含乳飲料中γ -氨基丁酸和16種蛋白水解氨基酸含量，檢測限為1.10pmol/yL -3.86pmol/yL，RSD分別為 3.62%-8.51%和2.56%-11.63%，精密度和準確度極高。下表為丫-氨基丁酸和16種氨基酸的 測試結果。
【附圖說明】
[0017] 圖1是γ-氨基丁酸和16種標準氨基酸的分離譜圖。
[0018] 圖2是含乳飲料中γ-氨基丁酸和16種蛋白水解氨基酸的分離譜圖（實施例1)。
【具體實施方式】
[0019] 以下實施例詳細說明了本發明。本發明所使用的各種原料及各項設備均為常規市 售產品，均能夠通過市場購買直接獲得。
[0020] 實施例1 A、制備含乳飲料水解樣品 取含乳飲料1. 〇g置于水解管中，加入濃鹽酸2mL，再加入新蒸餾的苯酚3滴，將水解管放 入冷凍劑中，冷凍3imn，充入高純氮氣并在充氮氣狀態下擰緊螺蓋，將水解管放入110°C的 恒溫干燥箱中，水解24小時后取出冷卻。打開水解管，將水解液全部過濾轉移到25mL容量瓶 中，取濾液lmL用真空干燥器在50°C干燥，蒸干，用lmL 0. lmol/L的鹽酸溶解，0.45μπι的濾膜 過濾來高效液相色譜進樣瓶中； B、 水解產物自動柱前衍生處理，獲取衍生產物 吸取硼酸緩沖液5份，吸取鄰苯二甲醛1份，吸收樣品1份，混勻，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混勻，準備上樣； C、 高效液相色譜法同時γ -氨基丁酸和16種氨基酸 高效液相色譜的分離條件為，色譜柱:Hypersil ODS C18液相色譜柱;流動相A: lOOOmL 純水中，加入8g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.20;加入5mL四氫呋喃;流動相B: 400mL純水中， 加入12g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.20;加入800mL乙腈和800mL甲醇，混勻；梯度洗脫條件 見下表：
麥有附囹刀頭施例i求1十卜百孔認科τ γ-m巷」阪和繭H7」、胛m巷阪tfjor尚 譜圖；各檢測物的出峰順序依次為：（1 )Asp，天門冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，絲氨酸； (4)His，組氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6)Thr，蘇氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9) GABA，γ-氨基丁酸；（10)Tyr，酪氨酸；（ll)Val，纈氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨 酸；（14)Ile，異亮氨酸；（15)Leu，亮氨酸；（16)Lys，賴氨酸；（17)Pro,脯氨酸。
[0021] 實施例2 A、制備含乳飲料水解樣品 取含乳飲料1. 〇g置于水解管中，加入濃鹽酸3mL，再加入新蒸餾的苯酚4滴，將水解管放 入冷凍劑中，冷凍5imn，充入高純氮氣并在充氮氣狀態下擰緊螺蓋，將水解管放入109°C的 恒溫干燥箱中，水解24小時后取出冷卻。打開水解管，將水解液全部過濾轉移到25mL容量瓶 中，取濾液2mL用真空干燥器在40°C干燥，蒸干，用lmL 0. lmol/L的鹽酸溶解，0.45μπι的濾膜 過濾來高效液相色譜進樣瓶中； Β、水解產物自動柱前衍生處理，獲取衍生產物 吸取硼酸緩沖液5份，吸取鄰苯二甲醛1份，吸收樣品1份，混勻，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混勻，準備上樣； C、高效液相色譜法同時γ -氨基丁酸和16種氨基酸 高效液相色譜的分離條件為，色譜柱:X Bridge C18液相色譜柱;流動相A: 1000mL純 水中，加入6g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.18;加入4mL四氫呋喃;流動相B:400mL純水中，加 入l〇g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.18;加入800mL乙腈和800mL甲醇，混勻；梯度洗脫條件見 下表：
恆測1守到γ -安卩整」不低安卩整眼訊土似τ巴1 苜團，食恆測似m、j m啤順斤w認;/、」： (I) Asp，天門冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，絲氨酸；（4)His，組氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6) Thr，蘇氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (II) Val，纈氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，異亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，賴氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0022] 實施例3 A、制備含乳飲料水解樣品 取含乳飲料l.Og置于水解管中，加入6mol/L鹽酸10mL，再加入新蒸餾的苯酚3滴，將水 解管放入冷凍劑中，冷凍3imn，充入高純氮氣并在充氮氣狀態下擰緊螺蓋，將水解管放入 111°C的恒溫干燥箱中，水解24小時后取出冷卻。打開水解管，將水解液全部過濾轉移到 25mL容量瓶中，取濾液2mL用真空干燥器在45°C干燥，蒸干，用lmL 0 . lmol/L的鹽酸溶解， 0.45μπι的濾膜過濾來高效液相色譜進樣瓶中； Β、水解產物自動柱前衍生處理，獲取衍生產物 吸取硼酸緩沖液5份，吸取鄰苯二甲醛1份，吸收樣品1份，混勻，再吸取9-芴基甲基氯甲 酸酯1份，混勻，準備上樣； C、高效液相色譜法同時γ -氨基丁酸和16種氨基酸 高效液相色譜的分離條件為，色譜柱:Hypersil ODS C18液相色譜柱;流動相A: 1000mL 純水中，加入5g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.25;加入3mL四氫呋喃;流動相B: 400mL純水中， 加入8g結晶乙酸鈉，混勻，pH調為7.25;按體積計加入800mL乙腈和800mL甲醇，混勻;梯度洗 日 A/fet m n
1?識U1 守；tu i _安J 敗彳口 丄DtT仞w'tt 安ΗΧ?」土'巴 二 m識U'fJ H、J m w羊川火/丁: (I) Asp，天門冬氨酸；（2)Glu，谷氨酸；（3)Ser，絲氨酸；（4)His，組氨酸；（5)Gly，甘氨酸；（6) Thr，蘇氨酸；（7)Arg，精氨酸；（8)Ala，丙氨酸；（9)GABA，γ-氨基丁酸；（lO)Tyr，酪氨酸； (II) Val，纈氨酸；（12)Met，蛋氨酸；（13)Phe，苯丙氨酸；（14)Ile，異亮氨酸；（15)Leu，亮氨 酸；（16)Lys，賴氨酸；（17)Pro，脯氨酸。
[0023] 實施例4 A、制備含乳飲料水解樣品 取含乳飲料1 .〇g置于水解管中，加入6mol/L鹽酸15mL，再加入新蒸餾的苯酸4滴，將水 解管放入冷凍劑中，冷凍5imn，充入高純氮氣并在充氮氣狀態下擰緊螺蓋，將水解管放入 110°C的恒溫干燥箱中，水解24小時后取出冷