g、酵母浸出物Ig、氯化鈣0.2g配制成pH7.0的液體培養基，將斜面菌種的單菌落接種在液體無氮培養基中置搖床上28-32Γ培養18-24小時。
[0030](3)液體發酵:采用含蔗糖I %、玉米粉4%、黃豆餅粉I %、硫酸銨0.2%、硫酸鎂0.02%、磷酸二氫鉀0.1 %、磷酸氫二鉀0.1 % (前述物料均按質量百分比添加)、pH7.2-7.4培養基，121°C滅菌20min，將搖瓶液體培養的菌種接種到發酵罐內(接種量為2-10% )，28-32°C條件下培養，每分鐘通發酵罐容積1-1.5倍的氣量，攪拌速度為150-250r/min，培養時間36-48小時。在接種量為10%，30°C恒溫培養的情況下，32小時進入穩定期，此時可結束發酵，獲得巨大芽孢桿菌Ap25的孢子發酵液，留作配制復合微生物菌劑用。
[0031]4、綠色木霉LTR-2的固體發酵
[0032]綠色木霉LTR-2的固體發酵按以下步驟進行:
[0033](I)斜面菌種:采用固體TOA培養基，將菌種接種在試管培養基中，28_32°C培養48-72小時。
[0034](2)茄瓶菌種:采用液體PDA培養基，將試管菌種接種在液體茄瓶中，于搖床上28-32 °C振蕩培養72-96小時。
[0035](3)液體菌種:采用種子培養基，玉米粉2%，葡萄糖0.5%，豆餅粉1%，K2HP040.2% ,KH2PO4 0.3%, CaCO3 I %，ρΗ6.0，121°C滅菌40min，將茄瓶內的種子用無菌水洗下，接種于250L的種子罐內，28-32°C培養，通氣量為發酵罐容積的0.6-1.0倍，攪拌速度為150-250r/min，培養時間36-48小時。
[0036](4)固體菌種:采用固體培養基，按麩皮7份、稻殼I份、玉米粉2份，總含水量70 %，pH6.0，121°C滅菌40min后冷卻，在混合接種器內將液體菌種與固體培養基混合均勻，接種量為5-10%，接種完畢轉移到固體培養室內培養。
[0037](5)培養:培養基厚度5cm，料溫控制在28-32°C，室溫控制在25-32°C，空氣濕度控制在95-100%，培養時間5-7天。
[0038]培養完畢將固體培養物自然風干，成品含水量控制在5-10%，得綠色木霉LTR-2固體培養物，過100目篩收集孢子粉，留作配制復合微生物菌劑用。
[0039]5、哈茨木霉Tl 1-W的液體發酵
[0040]哈茨木霉Tl1-W的液體發酵按以下步驟進行:
[0041 ] (I)斜面菌種:采用固體NA培養基，將哈茨木霉Tl 1-W菌種接種在試管培養基中，28-32°C 培養 18-24 小時。
[0042](2)搖瓶菌種:采用液體NA培養基，將斜面菌種接種在液體NA培養基中置搖床上28-32°C 培養 18-24 小時。
[0043](3 )液體發酵:采用含蔗糖I %、玉米粉2%、豆餅粉6%、硫酸銨0.5%、硫酸鐵0.05%、磷酸二氫鉀0.2%、磷酸氫二鉀0.4%、氯化鈣0.02% (前述物料均按質量百分比添加)、？!17.2-7.4培養基，121°(:滅菌201^11，將搖瓶液體培養的菌種接種到發酵罐內(接種量為2-10%)，28-32°C條件下培養，每分鐘通發酵罐容積1-1.5倍的氣量，攪拌速度為150-250r/min，培養時間36-48小時。在接種量為10%，30°C恒溫培養的情況下，32小時進入穩定期，此時可結束發酵，獲得哈茨木霉Tl 1-W的孢子發酵液，留作配制復合微生物菌劑用。
[0044]二、將液體或固體發酵的褐球固氮菌YKT41的孢子發酵液、越南伯克霍爾德氏菌P418的孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25的孢子發酵液、綠色木霉LTR-2固體培養物及哈茨木霉Tll-W的孢子發酵液五種菌劑中的兩種或多種菌劑配制成復合制劑，即得到有效活菌數不低于2億/g的煙草根結線蟲拮抗復合微生物菌劑;具體如下:
[0045]a.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑I
[0046]由越南伯克霍爾德氏菌P418孢子發酵液、哈茨木霉Tll-W孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液按體積比I?7:1?6: I?8配制得到。
[0047]b.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑2
[0048]由哈茨木霉Tll-W孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液、褐球固氮菌YKT41孢子發酵液按體積比I?6:1?6:1?3配制得到。
[0049]c.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑3
[0050]由越南伯克霍爾德氏菌P418孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液、綠色木霉LTR-2孢子粉按質量比I?3:1?5:1?7配制得到。
[0051 ]三、以復合微生物菌劑為主要功能性成分，添加蛋白渣、褐煤、生化黃腐酸、生物炭、碳酸鈣配制得到有效活菌數不低于0.2億/g，N、P、K的總養分含量不低于5%，有機質含量不低于45%，蛋白質含量不低于20%的煙草根結線蟲拮抗生物有機肥;蛋白渣為玉米漿、棉籽餅粉、花生餅粉、酵母粉、蛋白胨任一種的發酵殘渣曬干后得到;具體如下:
[0052]a.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥I
[0053]以5?25%的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑I為主要功能性成分，添加10?30%的蛋白渣、5?30 %的褐煤、1?25 %的生化黃腐酸、10?35 %的生物炭，再按前述混合料添加0.5?2.5%的碳酸鈣配制而成；
[0054]b.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥2
[0055]以5?25%的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑2為主要功能性成分，添加10?30%的蛋白渣、5?30%的褐煤、10?25%的生化黃腐酸、10?35%的生物炭，再按前述混合料添加0.5?2.5%的碳酸鈣配制而成；
[0056]c.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥3
[0057]以5?25%的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑3為主要功能性成分，添加10?30%的蛋白渣、5?30 %的褐煤、1?25 %的生化黃腐酸、10?35 %的生物炭，再按前述混合料添加0.5?2.5%的碳酸鈣配制而成；
[0058]d.上述比例均為質量百分比。
[0059]本發明的有益效果在于:生防制劑不僅能夠有效防治香蕉枯萎病，還能有效保護生態環境，提高香蕉品質和食用安全性;防治方法簡單易操作，成本低，對香蕉枯萎病防效尚O
【具體實施方式】
:
[0000]下面對本發明所述方法做進一步詳細說明。
[0061]如下實施例的香蕉枯萎病的生物防治方法的及其生防制劑同
【發明內容】
部分的描述。其中:
[0062]1、香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑由如下步驟得到:
[0063]a.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑I
[0064]由越南伯克霍爾德氏菌P418孢子發酵液、哈茨木霉Tll-W孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液按體積比I或3或7:1或3或6:1或4或8配制得到。
[0065]b.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑2
[0066]由哈茨木霉Tll-W孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液、褐球固氮菌YKT41孢子發酵液按體積比I或3或6:1或3或6:1或2或3配制得到。
[0067]c.香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑3
[0068]由越南伯克霍爾德氏菌P418孢子發酵液、巨大芽孢桿菌Ap25孢子發酵液、綠色木霉LTR-2孢子粉按質量比I或2或3:1或3或5:1或4或7配制得到。
[0069]2、香蕉枯萎病拮抗生物有機肥由如下步驟得到:
[0070]a.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥I
[0071 ]由5 %或15 %或25 %的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑I為主要功能性成分，添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10%或20 %或35 %的生物炭，再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到；
[0072]b.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥2
[0073]由5%或15 %或25 %的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑2為主要功能性成分，添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10%或20 %或35 %的生物炭，再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到；
[0074]c.香蕉枯萎病拮抗生物有機肥3
[0075]由5%或15 %或25 %的香蕉枯萎病拮抗復合微生物菌劑3為主要功能性成分，添加10%或20%或30%的蛋白渣、5%或15%或30%的褐煤、10%或15%或25%的生化黃腐酸、10%或20 %或35 %的生物炭，再按前述混合料質量比添加0.5%或1.5%或2.5%的碳酸鈣配制得到；
[0076]上述步驟三中比例為質量百分比，蛋白渣為玉米漿、或棉籽餅粉、或花生餅粉、或酵母粉、或蛋白胨的發酵殘渣曬干后得到。
[0077]實施例1:
[0078]在香蕉組培苗移栽成活后，每隔10天噴施一次復合微生物菌劑I號、復合微生物菌劑2號和復合微生物菌劑3號200倍液