人體維生素含量水平基因檢測試劑盒的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及基因檢測，具體涉及人體維生素基因檢測試劑盒。
【背景技術】
[0002] 維生素（vitamin)是人和動物為維持正常的生理功能而必需從食物中獲得的一類 微量有機物質。它的種類很多，化學結構各不相同，大多數是某些酶的輔酶(或輔基)的組成 成分，是維持機體正常生長(生長、健康、繁殖和生產機能）必不可缺的化合物，在體內起催 化作用，促進主要營養素(蛋白質、脂肪、碳水化合物等）的合成和降解，從而控制代謝。
[0003] 本發明主要涉及維生素 B6、B12、維生素 D和維生素 E。
[0004] 維生素 B6 ;幫助分解蛋白質，脂肪和碳水化合物。它有抑制嘔吐、促進發育等功 能，缺少它會引起嘔吐、抽筋等癥狀。是許多種有關氨基酸代謝酶的輔酶，故對氨基酸代謝 十分重要。
[0005] 維生素 B12,即抗惡性貧血維生素，又稱鉆胺素，含有金屬元素鉆，是維生素中唯 一含有金屬元素的，抗脂肪肝，促進維生素 A在肝中的膽存；促進細胞發育成熟和機體代 謝。
[0006] 維生素 D于1926年由化學家卡爾首先從魚肝油中提取。維生素 D的生理功能是 幫助人體吸收磯和巧，是造骨的必需原料，因此缺少維生素 D會得倆倭癥。人體中維生素 D 的合成跟曬太陽有關，因此，適當地光照有利健康。
[0007] 維生素 E于1922年由美利堅合眾國化學家伊萬斯在麥芽油中發現并提取，本世紀 40年代已能人工合成。維生素 E是人體內優良的抗氧化劑，人體缺少它，男女都不能生育， 嚴重者會患肌肉萎縮癥、神經麻木癥等。
[0008] 維生素是小分子物質，人體本身并不能合成，主要靠外界攝入。但是其攝入和代謝 水平卻跟人體自身基因息息相關，了解基因對其的影響，可W幫助我們適當的增加或減少 飲食當中的維生素，從而維持體內所需維生素的正常水平。
【發明內容】
[0009] 有鑒于此，本發明提供了一種維生素水平基因檢測試劑盒，該試劑盒對受測者的 相關基因進行檢測，分析得到其體內維生素水平，且PCR擴增反應在同一臺PCR儀上同步進 行并具備檢測的高效性、特異性。
[0010] 一種維生素水平基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試 劑包括： (1)針對4個基因 SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP rs2282679的引物組： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 針對SNP rs964184的引物組： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 針對SNP rs4654748的引物組： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 針對SNP rs492602的引物組： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0011] 本發明提供的維生素水平基因檢測試劑盒的有益效果是：通過PCR引物的設計使 多個PCR擴增反應在同一臺PCR儀上同步進行，對受測者的相關基因進行檢測，并實現檢測 的高效性、特異性，分析得到其維生素水平的遺傳因素，評估相關的風險因素，從而為受測 者獲得一個合適的飲食管理方案，指導日常生活習慣，采取相應的策略避免對其無效甚至 是有害的方法。
【附圖說明】
[0012] 圖1是反應產物瓊脂糖凝膠電泳圖。
【具體實施方式】
[0013] 維生素基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試劑包括： (1)針對4個基因SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP rs2282679的引物組： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 針對SNP rs964184的引物組： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 針對SNP rs4654748的引物組： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 針對SNP rs492602的引物組： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0014] 下面將結合實施例對本發明提供的方法予W進一步的說明。
[0015] 本實施例對測試者采用維生素水平基因檢測試劑盒同時檢測4個基因的SNP多 態位點，并根據基因分型結果，分析得到其維生素水平的遺傳因素，評估相關的風險因素， 從而為受測者獲得一個合適的飲食管理方案，采取相應的策略避免對其無效甚至是有害的 方法。
[0016] 使用到的維生素水平基因檢測試劑盒內試劑由W下組成： (1)針對4個基因 SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP rs2282679的引物組： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 針對SNP rs964184的引物組： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 針對SNP rs4654748的引物組： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 針對SNP rs492602的引物組： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2)PCR擴增試劑；lOXPCR緩沖液，該PCR緩沖液為lOOmM Tris-肥1 p冊.3,500mM KCl，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，該dNTPs混合物為Η磯酸鳥嘿嶺脫氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿嶺脫氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脫氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脫氧核巧酸 dCTP四種核巧酸，各組分濃度為2. 5mM ;5υ/μ 1熱啟動Taq酶。
[0017] (3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑諒脂糖、TAE緩沖液、DM分子量標準、Goldview 染色液和DM上樣緩沖液，該緩沖液W漠酪藍為指示劑稀釋至IX后使用。
[0018] 使用上述維生素水平基因檢測試劑盒按如下步驟進行檢測： (