人體bmr（基礎代謝率）檢測試劑盒和計算方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及基因檢測，具體涉及人體BMR基因檢測試劑盒。
【背景技術】
[0002] 基礎代謝率是指在自然溫度環境中，人體在非活動的狀態下(包括消化系統，即禁 食兩個小時W上)，維持生命所需消耗的最低能量。送些能量主要用于保持各器官的機能， 如呼吸(肺)、必跳(必臟)、腺體分泌(腦及其他神經系統)、過濾排泄（腎臟)、解毒(肝臟)、肌 肉活動等等。基礎代謝率會隨著年齡增加或體重減輕而降低，而隨著肌肉增加而增加。疾 病、進食、環境溫度變化、承受壓力水平變化都會改變人體的能量消耗，從而影響基礎代謝 率。
[0003] 基礎代謝率不同決定了人體每天消耗的熱量不同，因此如果要通過飲食來減肥， 則必須攝入能量< 消耗能量。同時，基礎代謝率還決定了人體在不同的運動強度下消耗能 量的不同，因此在健身運動過程當中，如果強度過大導致能量消耗過多，會引發諸多不健康 甚至有害的病患。
[0004] BMR是人體各器官、組織能量消耗的指數，因此和基因密切相關。目前各種BMR的 計算方法主要是通過統計的方法，借助相應儀器而進行，無法反應個體間的差異。
【發明內容】
[0005] 有鑒于此，本發明提供了一種BMR基因檢測試劑盒，該試劑盒對受測者的相關基 因進行檢測，分析得到其體內代謝水平，并計算基于基因信息的BMR數值，且PCR擴增反應 在同一臺PCR儀上同步進行并具備檢測的高效性、特異性。
[0006] 一種BMR基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試劑包括： (1) 針對2個基因 SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0007] 本發明提供的BMR基因檢測試劑盒的有益效果是；通過PCR引物的設計使多個 PCR擴增反應在同一臺PCR儀上同步進行，對受測者的相關基因進行檢測，并實現檢測的高 效性、特異性，分析得到其BMR的遺傳因素，從而為受測者獲得一個合適的健康方案，了解 自身的代謝水平，指導其科學合理的運動強度和日常飲食管理，在健身運動和減肥中采取 相應的策略避免對其無效甚至是有害的方法。
【附圖說明】
[0008] 圖1是反應產物瓊脂糖凝膠電泳圖。
【具體實施方式】
[0009] BMR基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試劑包括： (1) 針對2個基因 SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0010] 下面將結合實施例對本發明提供的方法予W進一步的說明。
[0011] 測試者基本狀況為；男性，身高175cm，體重100公斤。本實施例對測試者采用BMR 基因檢測試劑盒同時檢測2個基因的SNP多態位點，并根據基因分型結果，分析得到其 BMR的遺傳因素，從而為受測者獲得一個合適的健康方案，了解自身的代謝水平，指導其科 學合理的運動強度和日常飲食管理，在健身運動和減肥中采取相應的策略避免對其無效甚 至是有害的方法。
[0012] 使用到的BMR基因檢測試劑盒內試劑由W下組成： (1)針對2個基因 SNP多態位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS16892496的引物組： 5' -GTTGAAGAGCAAGCCCCCA-3' 5' -GTGACTTGTACCCACG-3' 5' -GAACCAATAATACTCTCCTC-3' 5> -CATTTGGAATGGAAAC-3> 針對SNP RS7832552的引物組： 5' -GTGATAGTGTGAGGTAC-3' 5' -GTTTATTMGAGCATTCA-3' 5' -ATCTTTMAGAATTCTAG-3' 5> -TGCATTGGATTTTG-3> (2)PCR擴增試劑；lOXPCR緩沖液，該PCR緩沖液為lOOmM Tris-肥1 p冊.3,500mM KCl，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，該dNTPs混合物為Η磯酸鳥嘿嶺脫氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿嶺脫氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脫氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脫氧核巧酸 dCTP四種核巧酸，各組分濃度為2. 5mM ;5υ/μ 1熱啟動Taq酶。
[001引（3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑諒脂糖、TAE緩沖液、DNA分子量標準、Goldview 染色液和DM上樣緩沖液，該緩沖液W漠酪藍為指示劑稀釋至IX后使用。
[0014] 使用上述BMR基因檢測試劑盒按如下步驟進行檢測： (1)提取樣本基因組DNA。
[0015] 采集該測試者唾液，向l-2ml唾液樣品中加入500ul提取緩沖溶液，該DNA提取 緩沖溶液溶劑為50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化C1，反復吹打混勻 后，8000Xg離必5分鐘，棄去上清，此步驟重復一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 該裂解液溶劑為 50mM Tris-肥 1 pH7. 4,50mM Tris-肥 1 pH7. 4，150mM 化Cl，lmM 邸TA，1% Triton χ-100，1% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,蛋白酶 K20mg/mL,徹底懸浮沉淀并 充分混勻后，室溫放置30分鐘，期間來回顛倒離必管數次；得到的混合液中，加入濃度為 lOmg/mLRNA酶的水溶液10 μ L，37°C下靜置lOmin ;得到的上清液中，加入等體積苯酪-氯 仿混合溶液，苯酪和氯仿體積比為1 : 1，充分混勻，混合液4°C，12000Xg離必5分鐘，上清 液移入干凈離必管內；加入等體積苯氛-氯仿-異戊醇混合溶液，苯酪、氯仿和異戊醇體積 比為25 : 24 : 1，充分混勻后，4°C，12000Xg離必5分鐘，上清液移入干凈離必管內；加 入等體積氯仿-異戊醇混合溶液，充分混勻后，4°C，12000Xg離必5分鐘，上清液移入干 凈離必管內；加入0. 6倍體積的冰浴異丙醇溶液及0. 1倍的3mol/L醋酸鋼溶液，-2(TC靜 置60分鐘后，4°C，12000 X g離必10分鐘，棄上清液；得到的沉淀物中