專利名稱：一種北京楊組織培養方法
技術領域：
本發明涉及苗木的培養技術，尤其是一種楊樹的組織培養方法三
二背景技術：
北京楊是我國選育的楊樹新品種，為鉆天楊和青楊的雜交后代。其木 材清軟、纖維長，可供建筑、橋梁、礦柱、膠合板、造紙等用。也是優良 的用材林、防護林、行道樹和"四旁"綠化樹種。由于它材質好、生長快、 抗性強，深受人民的歡迎，但多年來一直以常規扦插育苗為主，繁殖率低， 遠不能滿足社會的需求。
三
發明內容
本發明目的在于提供一種對北京楊離體培養且繁殖率高的組織培養技術。
為實現上述目的，本發明采用的技術方案是 一種北京楊組織培養方 法，其特征在于包括如下步驟
① 取材及初代芽誘導分化培養取北京楊的葉柄，清洗消毒后切除兩 頭傷口，平放在誘導培養基上，每瓶接種一個外植體，置于培養架上光照 培養；
② 叢生芽抽莖培養不定芽長約0.5cm,切下接入抽莖培養基中培養;
③ 壯苗培養；待芽長約1.5cm，切下接入MS培養基中進行壯苗培養；
④ 增殖培養把約1.5cm的健壯苗接于增殖培養基上；
⑤ 生根培養把增殖培養所得2cm以上的健壯苗切下接入生根培養基
中培養；
⑥ 煉苗移栽。
所述培養的培養條件是培養基加入30g/L蔗糖和6. 5g/L瓊脂，pH6. 0，
培養室溫度為25土rC,光照強度1500 20001x,光照時間12小時/天。 本發明對北京楊離體培養，具有繁殖率高的優點。具體實施例方式
下面結合實施例對本發明進一步說明 實施例 1材料與方法 1. 1試驗材料 北京楊 1. 2試驗方法 1.2.1材料處理
室內盆栽苗新萌葉片，剪取葉柄，無菌水反復沖洗30分鐘，濾紙吸干 水分待用。
1.2.2初代芽誘導分化培養
將外植體置于超凈工作臺上，0. 1%升汞消毒6分鐘，無菌水沖洗5次。 切除葉柄兩頭傷口，平放在誘導培養基上，每個接種瓶接一個外植體，放 在培養架上光照培養。
1.2.3抽莖培養
把誘導出的叢生芽團，切成小芽團，接入添加了不同激素濃度的抽莖 培養基本中進行抽莖培養。 1. 2. 4壯苗培養
初代叢生芽抽莖后組培苗比較細弱，待芽長約1.5cm，切下接入不加任 何激素的MS培養基中進行壯苗培養。 1.2.5增殖培養
切取壯苗后的健壯苗，接入增殖培養基中進行增殖培養。增殖培養以 MS為基本培養基，添加不同濃度的激素。 1. 2. 6生根培養
切取2cm以上的健壯苗，轉入生根培養基中，生根培養以MS為基本培養基，添加不同激素，以MS基本培養基為對照，培養"天后統計生根情 況。
1.2.7培養條件
培養條件為培養基中加入30g/L蔗糖、6.5g/L瓊脂，pH6. 0，培養室溫 度為25土rC，光照1500 ~ 20001x,光照時間12小時/天。
1. 2. 8煉苗移栽
組培苗根長至l 2cm， 2~4條根時，即可進行煉苗移栽。移栽前組培 生根苗須移到自然光照下閉瓶煉苗3-5天，讓試管苗接受強光的照射，使 其長得壯實起來，然后再開瓶煉苗l-2天，經受較低濕度的處理，以適應 將來自然濕度的條件。
2結果與分析
2. 1外植體誘導結果
滅菌材料接種到芽誘導分化培養基上，兩周左右葉柄兩頭傷口處產生 新的綠點，30天左右，能產生大量芽團，約O. 3~0.5cm，芽色嫩綠。經統 計分析MS+6-BA0. 4mg/L+TDZ0. GOlmg/L+NAAO. lmg/L分化效果最好。
2.2芽的抽莖培養與生長情況
把初代培養誘導出的芽團切成小芽團，接到抽莖培養基上，20天左右 小芽生長高度可達1. 5 ~ 2cm ,經統計，對比分析得到 MS+6-BAO. lmg/L+NAAO. 05mg/L抽蓬效果最好。
2.4增殖培養
把壯苗培養后健壯苗切下，轉接到增殖培養基上，少形成大量叢生芽 團，多為腋芽萌動或是基部傷口處分化出小量健壯芽，經過20天左右培養， 腋芽可長約2cm左右健壯芽，而基部新分化芽長約1. Scm。增殖系數為1 5 ~ 4.5。經統計分析，增殖最佳培養基為MS+6-BAO. 2mg/L+NAA0. OSmg/L。
2. 5生根培養
當芽長至2cm高時，接入不同濃度的NAA生根培養基中，以不加任何 激素的MS培養基作對照，經統計分析，MS比較適合北京楊生根。2. 6煉苗移栽
組培生根苗根長1-20！1， 2~4條根時，煉苗后移栽到沙珍珠巖園 土=2: 1: 1,遮陰保濕，培養兩周左右，逐漸揭開薄膜，成活率85%以上。
權利要求
1、一種北京楊組織培養方法，其特征在于包括如下步驟①取材及初代芽誘導分化培養取北京楊的葉柄，清洗消毒后切除兩頭傷口，平放在誘導培養基上，每瓶接種一個外植體，置于培養架上光照培養；②叢生芽抽莖培養不定芽長約0.5cm，切下接入抽莖培養基中培養；③壯苗培養；待芽長約1.5cm，切下接入MS培養基中進行壯苗培養；④增殖培養把約1.5cm的健壯苗接于增殖培養基上；⑤生根培養把增殖培養所得2cm以上的健壯苗切下接入生根培養基中培養；⑥煉苗移栽。
2、 根據權利要求l所述的培養方法，其特征在于所述的培養條件是 培養基加入30g/L蔗糖和6. 5g/L瓊脂，pH6.0,培養室溫度為'25 ± 1。C,光 照強度1500 - 20001x,光照時間12小時/天。
3、 根據權利要求l所述北京楊的組織培養方法，其特征在于對外植 物體洗凈方法是無菌水反復沖洗30分鐘。
4、 根據權利要求l所述北京楊組織培養方法，其特征在于初代誘導 芽分化培養中的消毒方法是用0.1%升汞消毒6分鐘，無菌水清洗5次。
5、 根據權利要求l所述北京楊組織培養方法，其特征在于所述誘導 培養基是MS+6-BA0. 4mg/L+ TDZO. OOlmg/L +NAAO. lmg/L。
6、 根據權利要求1所述北京楊組織培養方法，其特征在于所述抽莖培 養基是MS+6-BAQ. lmg/L+NAAO. Q5mg/L。
7、 根據權利要求l所述北京楊組織培養技術，其特征在于所述壯苗培 養基是MS。
8、 根據權利要求書l所述北京楊組織培養方法，其特征在于所述增 殖培養基是MS+6-BAO. 2mg/L+NAA0. 05mg/L。
9、 根據權利要求書l所述的北京楊組織培養方法，其特征在于所述 生根培養基是MS。
10、 根據權利要求書1所述的北京楊組織培養方法，其特征在于所 述移栽中的基質成分為沙珍珠巖園土=2: 1: 1。
全文摘要
本發明公開了一種北京楊組織培養方法，其特征在于包括如下步驟①取材及初代芽誘導分化培養；②叢生芽抽莖培養；③壯苗培養；④增殖培養；⑤生根培養；⑥煉苗移栽。本發明對北京楊離體培養，具有繁殖率高的優點。
文檔編號A01H4/00GK101341853SQ20081003201
公開日2009年1月14日 申請日期2008年8月4日 優先權日2008年8月4日
發明者唐作鈞, 李紹華, 李重立, 梁麗容, 王叢亞, 肖興翠 申請人:湖南茂源林業有限責任公司