專利名稱：富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法
技術領域：
本發明涉及一種富β -胡蘿卜素海膽的培育方法。
背景技術：
海膽的食用部分主要是生殖腺，提升生殖腺產量和品質是海膽育種的重要研究方向。胡蘿卜素在海膽生殖腺中的積累決定了生殖腺的顏色表現，另外，胡蘿卜素還參與海膽生殖、促進卵的發育成熟以及提高幼體的成活率，因此，海膽性腺中胡蘿卜素含量既是影響海膽性腺的重要品質又對其生殖性狀起重要作用。海膽可以吸收利用大型褐藻和底棲硅藻中的胡蘿卜素，因此，通過改善營養條件可提升胡蘿卜素含量，若能結合遺傳育種的方法，則能獲得更穩定的富含胡蘿卜素的海膽品系。
發明內容
本發明的目的是提供一種易控制、好操作、能穩定提高海膽生殖腺胡蘿卜素含量的海膽培育方法。本發明的富β -胡蘿卜素海膽的培育方法，操作步驟如下a、從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調溫幅度彡2. 0°C /天，靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，選擇海帶和煮熟的紫貽貝肉作為投喂餌料，日投餌1次，培育至性成熟；b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；C、將家系群體置于最強為50001x的照度條件下進行養殖，自然光周期，以海帶和裙帶菜作為餌料，并保持每個家系海膽數量至少100個；d、養殖家系群體至繁殖季節，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30 個，測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量((β-c) C)；e、評估β -胡蘿卜素含量的選育潛力計算β -胡蘿卜素含量的變異系數，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進行培育；f、計算殼高對β-胡蘿卜素含量的通徑系數1 ，計算殼徑對β-胡蘿卜素含量的通徑系數bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數bw;計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w ；g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高IV殼徑Pd、活體重 ρ .
rW ’h、按f和g步驟所得的數值計算每個海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數I， 按如下公式計算
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I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系；j、循環b i步驟至少4次；在按上述步驟育成后推廣的養殖群體內，在上市季節前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。本發明的富胡蘿卜素海膽的培育方法，其中所述的e步驟中分別計算殼高、殼徑、活體重對β-胡蘿卜素含量間的遺傳相關，選育具有正的遺傳相關且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關較大。本發明的富胡蘿卜素海膽的培育方法，操作方便，控制容易，明顯增加了海膽性腺內胡蘿卜素的含量，提高了海膽的品質。
具體實施例方式操作步驟如下a、從不同地理群體選擇種海膽，要求無畸形、棘刺完整堅硬、管足活力強，蝦夷馬糞海膽要求殼徑> 45mm，濕重> 65g、光棘球海膽要求殼徑> 65mm，濕重> 100g、馬糞海膽要求殼徑> 30mm，濕重> 35g，大規格的海膽產精卵量大且受精孵化率高。對種海膽進行暫養，其條件要求從親膽所在的生境水溫逐步調整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，其中蝦夷馬糞海膽為18°C 20°C，光棘球海膽為20 23°C，馬糞海膽為15 18°C， 調溫幅度< 2. 0°C /天，升溫過快容易造成種膽死亡；靜水培育，每日吸底一次，換水1/2 2/3，新鮮海水要與養殖用水溫度一致，這種換水方式能減少溫度刺激和干露刺激，防止種膽提前產卵；投喂海帶和煮熟的紫貽貝肉，日投餌1次，貽貝價格便宜，煮熟的紫貽貝肉能提供海膽性腺發育所需的蛋白、脂肪和類胡蘿卜素等營養，培育至性成熟。b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系。C、將家系群體置于最強為50001χ的照度條件下進行養殖，自然光周期，底棲硅藻能在這種條件下快速增殖生長，從而保證海膽對底棲硅藻的需求，投喂海帶和裙帶菜，海帶和裙帶菜等大型褐藻是海膽的主要天然餌料，是海膽性腺中的胡蘿卜素主要來源，并保持每個家系海膽數量至少100個。d、養殖家系群體至繁殖季節，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選至少30個，測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量 ((β -c) C)。e、評估β -胡蘿卜素含量的選育潛力計算β -胡蘿卜素含量的變異系數，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進行培育。最好分別計算殼高、殼徑、活體重對β -胡蘿卜素含量間的遺傳相關，選育具有正的遺傳相關且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關較大(蝦夷馬糞海膽前三者與胡蘿
4卜素含量的遺傳相關為0.4 0. 5)，則將他們作為間接選擇β-胡蘿卜素含量的輔助性狀。f、計算殼高對β-胡蘿卜素含量的通徑系數1 ，計算殼徑對胡蘿卜素含量的通徑系數bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數bw。計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w。g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高IV殼徑Pd、活體重 ρ
rW0h、按f和g步驟所得的數值計算每個海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數I， 按如下公式計算I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系。這種大規模的家系數量主要是為了有效控制多代選育的近交系數。j、循環b i步驟至少4次。在按上述步驟育成后推廣的養殖群體內，在上市季節前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料也可增加海膽性腺內胡蘿卜素含量。
權利要求
1. 一種富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法，按如下步驟操作a、從各種地理群體選擇種海膽至育種場地，從親膽所在的生境水溫逐步調整至適宜溫度，所述適宜溫度為15°C 23°C，調溫幅度彡2. O0C/天，靜水培育，每日吸底一次，換水 1/2 2/3，選擇海帶和煮熟的紫貽貝肉作為投喂餌料，日投餌1次，培育至性成熟；b、利用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設計，以雌雄比2 1的比例建立至少100個海膽家系；c、將家系群體置于最強為50001x的照度條件下進行養殖，自然光周期，以海帶和裙帶菜作為餌料，并保持每個家系海膽數量至少100個；d、養殖家系群體至繁殖季節，從至少20個家系中隨機挑選海膽，每家系中挑選30個， 測量每個海膽的殼高(TH)、殼徑(TD)、活體重(BW)和性腺β-胡蘿卜素含量((i3-c)C)；e、評估胡蘿卜素含量的選育潛力計算胡蘿卜素含量的變異系數，以此評價其表型變異程度；對β -胡蘿卜素含量進行方差分析，判斷家系等因素影響的顯著性；估計 β-胡蘿卜素含量的遺傳力；選擇胡蘿卜素含量具有至少5%的表型變異、方差分析家系因素的P值小于0. 05、具有至少0. 1的遺傳力的海膽家系群體進行培育；f、計算殼高對胡蘿卜素含量的通徑系數1 ，計算殼徑對胡蘿卜素含量的通徑系數bD，計算活體重對β-胡蘿卜素含量的通徑系數bw;計算海膽殼高的遺傳力h2H，計算殼徑的遺傳力h2D，計算活體重的遺傳力h2w ；g、在b步驟中的每個家系里均選出至少30個海膽，測量其殼高PH、殼徑PD、活體重Pw；h、按f和g步驟所得的數值計算每個海膽的胡蘿卜素含量的綜合選擇指數I，按如下公式計算I = bHPHhH2+bDPDhD2+bffPffhff2i、按I值計算每個家系的平均綜合選擇指數，上選50%的家系；再從被選家系中上選綜合選擇指數高的海膽個體且留種率小于或等于2%，按雌雄比為2 1的比例，在避免近親交配的情況下，再次建立至少100個海膽家系；j、循環b i步驟至少4次；在按上述步驟育成后推廣的養殖群體內，在上市季節前至少一個月開始，投喂海帶、胡蘿卜和添加了螺旋藻粉的配合飼料。
2.根據權利要求1所述的富含胡蘿卜素海膽的培育方法，其特征在于所述的e步驟中分別計算殼高、殼徑、活體重對胡蘿卜素含量間的遺傳相關，選育具有正的遺傳相關且它們與胡蘿卜素含量的遺傳相關較大。
全文摘要
富含β-胡蘿卜素海膽的培育方法從各種地理群體選擇種海膽，靜水培育至性成熟；用群體間完全雙列雜交的方法和巢式不平衡設計，以雌雄比2∶1的比例建立海膽家系；最高5000lx的照度條件下自然光周期養殖；養殖至繁殖季節，隨機挑選海膽測量殼高、徑、活體重和性腺β-胡蘿卜素含量；評估β-胡蘿卜素含量的選育潛力選擇β-胡蘿卜素含量具有至少5％的表型變異、方差分析的P值小于0.05、具有至少0.1的遺傳力的海膽進行培育；計算海膽的β-胡蘿卜素含量的綜合選擇指數I；選平均綜合選擇指數高的海膽再次建立至少100個海膽家系；循環上述步驟至少4次；投喂配合飼料。本方法好操作，易控制，海膽性腺內β-胡蘿卜素含量高。
文檔編號A01K61/00GK102283140SQ20101020077
公開日2011年12月21日 申請日期2010年6月17日 優先權日2010年6月17日
發明者丁君, 常亞青, 張偉杰 申請人:大連水產學院