專利名稱：一株降低青貯飼料中黃曲霉毒素b1的乳酸菌及其應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一株青貯用乳酸菌，具體是一株可抑制青貯飼料中霉菌生長、降解黃曲霉毒素以及改善青貯飼料品質的降低青貯飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌及其應用。
背景技術：
黃曲霉毒素(Aflatoxin，AFT)是一類結構和理化性質相似的真菌次級代謝物，分別為B1、B2、GU G2、Ml和M2等，在所有黃曲霉毒素中，BI的毒性最強且化學性質最穩定，它具有很強的致癌性、致突變性和致畸形，是國際上認可的A類致癌物。黃曲霉毒素中毒(Aflatoxicosis)主要表現在動物采食量降低、生長速度緩慢、組織器官受損以及影響原始
細胞的發育和胎兒的分化。我國飼料工業起步相對較晚，對霉菌毒素的防控欠缺，霉菌毒素是影響飼料養殖業發展的重要因素，飼料的質量安全不僅關系到畜禽動物的生命和經濟效率，更關鍵的是直接影響到人們的身體健康和生命安全。尤其是飼料中黃曲霉毒素的危害，更應引起人們的高度警惕和重視。因此掌握黃曲霉毒素的防治措施，對保障糧油食品質量安全和確保動物性食品安全尤為重要。目前，生物去除黃曲霉毒素由于效率高、無毒副作用越來越受到關注。乳酸菌是近年來正在推廣的青貯微生物添加劑，一些研究表明乳酸菌的代謝產物乳酸、醋酸、苯乳酸、丙酸和蛋白類等物質具有抑制黃曲霉生長和產毒素的能力，乳酸菌在生長過程中形成的代謝物可以抑制毒素合成或將毒素轉化成無毒性的物質，乳酸菌還可通過細胞壁成分吸附黃曲霉毒素，達到去除真菌毒素的目的。所以乳酸菌在降低飼料中黃曲霉毒素具有廣闊的發展前景。本發明針對上述課題，從分離自自然發酵飼料的130株植物乳桿菌中，篩選出一株具有抑制霉菌、降低黃曲霉毒素、改善青忙飼料品質的植物乳桿菌(L. plantarum Ps_8)。
發明內容
本發明的目的在于提供一株可抑制青貯飼料中霉菌生長、降解黃曲霉毒素以及改善青貯飼料品質的降低青貯飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌及其應用。本發明是通過下述技術方案實現的。一株降低青貯飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌，其特征在于所述乳酸菌為植物乳桿菌(L. plantarum Ps_8)已于2011年10月28日，在地址為中國北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號=CGMCC No. 5359。所述乳酸菌在青貯飼料中的應用，具體制備方法如下原料準備將原料刈割后，保證原料清潔、無霉爛變質，切斷至2-3cm。菌株活化將冷凍保存的L. plantarum Ps_8接種于MRS液體培養基中，在溫度37°C下培養18-22h，如此傳代培養2-3次得到所述的活化L. plantarum Ps_8菌種。菌粉的制備將上述活化的菌種接種發酵、干燥、粉碎制成菌粉，使其活菌數達到lX1010cfu/go青貯飼料的調制原料的水分含量控制在65%_70%，稱取IOOg原料裝入真空包裝塑料袋中(180 X 260cm)，將上述制備的菌粉以I X 105cfu/g的接種量接種到原料中，采用真
空包裝機真空包裝后，置于儲藏室進行發酵。青貯飼料的品質檢測青貯飼料發酵20-30天即發酵成熟后，取出部分青貯飼料進行霉菌計數和黃曲霉毒素檢測。本發明提供的植物乳桿菌具有下述的積極效果本發明L. plantarum Ps_8在青忙飼料中具有抑制霉菌生長的特性。本發明L. plantarum Ps_8添加到青貯飼料中可以降低飼料中黃曲霉毒素BI的含量、提聞青詞料的品質。·
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步說明；下述實施例只是說明性的，并不限制本發明的保護范圍。下述實施例中的實驗方法，如無特別說明，均為常規方法。一株降低青貯飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌，其特征在于所述乳酸菌為植物乳桿菌(L. plantarum Ps_8)已于2011年10月28日，在地址為中國北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號=CGMCC No. 5359。所述乳酸菌在青貯飼料中的應用，具體制備方法如下原料準備將原料刈割后，保證原料清潔、無霉爛變質，切斷至2-3cm。菌株活化將冷凍保存的L. plantarum Ps_8接種于MRS液體培養基中，在溫度37°C下培養18-22h，如此傳代培養2-3次得到所述的活化L. plantarum Ps_8菌種。菌粉的制備將上述活化的菌種接種發酵、干燥、粉碎制成菌粉，使其活菌數達到lX1010cfu/go青貯飼料的調制原料的水分含量控制在65%_70%，稱取IOOg原料裝入真空包裝塑料袋中(180 X 260cm)，將上述制備的菌粉以I X 105cfu/g的接種量接種到原料中，采用真
空包裝機真空包裝后，置于儲藏室進行發酵。青貯飼料的品質檢測青貯飼料發酵20-30天即發酵成熟后，取出部分青貯飼料進行霉菌計數和黃曲霉毒素檢測。L. plantarum Ps_8在青忙玉米飼料中抑制霉菌的特性的檢驗方法如下將菌粉加入適量的滅菌水，制成菌體懸浮液，使其含乳酸菌活菌數在I X IO8Cfu/mL。以lX105cfu/g的接種量接種到玉米原料中，添加同體積的滅菌蒸餾水作為對照組，采用真空包裝機真空包裝后，置于儲藏室進行發酵。分別在發酵3、7、10、15、30天時，稱取IOg青貯飼料，加入90ml滅菌水，充分震蕩，再用滅菌水以十倍稀釋法對樣品進行梯度稀釋，分別選取適當的稀釋液100 μ L涂布于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(Potato Dextrose Agar),30°C恒溫培養箱中厭氧培養48h后，對霉菌進行計數。青貯發酵過程中的霉菌動態變化見表I。表I青貯玉米發酵過程中的霉菌數量動態變化
權利要求
1.一株降低青貯飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌，其特征在于所述乳酸菌為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum Ps_8),是從130株植物乳桿菌中篩選出的具有降低青忙飼料中黃曲霉毒素BI含量的特性；該菌菌株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCC No. 5359。
2.如權利要求1所述所述乳酸菌在青貯飼料中的應用，具體制備方法如下原料準備將原料刈割后，保證原料清潔、無霉爛變質，切斷至2-3cm ；菌株活化將冷凍保存的L. plantarum Ps-8接種于MRS液體培養基中，在溫度37°C下培養18-22h，如此傳代培養2-3次得到所述的活化L. plantarum Ps-8菌種；菌粉的制備，將上述活化的菌種接種發酵、干燥、粉碎制成菌粉，使其活菌數達到 lX1010cfu/go青貯飼料的調制原料的水分含量控制在65%-70%，稱取IOOg原料裝入真空包裝塑料袋中(180 X 260cm)，將上述制備的菌液以I X 105cfu/g的接種量接種到原料中，采用真空包裝機真空包裝后，置于儲藏室進行發酵；青貯飼料的品質檢測青貯飼料發酵20-30天即發酵成熟后，取出部分青貯飼料進行霉菌計數和黃曲霉毒素檢測。
3.提供一株可抑制青貯飼料中霉菌生長、降解黃曲霉毒素以及改善青貯飼料品質的降低青忙飼料中黃曲霉毒素BI的乳酸菌(L. plantarum Ps_8)及其應用。
全文摘要
一株可抑制青貯飼料中霉菌生長、降解黃曲霉毒素以及改善青貯飼料品質的降低青貯飼料中黃曲霉毒素B1的乳酸菌。技術方案是其特征在于所述乳酸菌為植物乳桿菌(L.plantarum Ps-8)已于2011年10月28日，在地址為中國北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏號CGMCC No.5359。本發明還公開了其應用方法。
文檔編號A23K3/02GK102994423SQ201210451128
公開日2013年3月27日 申請日期2012年11月12日 優先權日2012年11月12日
發明者于潔, 高鵬飛 申請人:北京和美科健生物技術有限責任公司