專利名稱：一種循環誘導山藥微型塊莖的方法
技術領域：
本發明涉及植物塊莖繁殖方法，特別是一種循環誘導山藥微型塊莖的方法。
背景技術：
懷山藥是我國著名的“四大懷藥”之一，具有很好的藥用和食用價值，尤其是鐵棍山藥，它藥食兼優，主要以塊莖和珠芽入藥，具有極高的營養和藥用價值，屬懷山藥中的“極品”，備受國內外消費者的青睞，被譽為“懷參”或“大棒人參”。但在生產中，由于長期采用營養繁殖導致病毒感染嚴重，致使其種質退化、產量下降。因此，如何改善其品質、提高其產量已成為山藥生產中亟需解決的一個重要的問題。應用植物組織培養技術獲得脫毒苗可有效的解決這些問題，但脫毒苗不易運輸、包裝且移栽成活率低。研究發現，懷山藥脫毒試管苗在繁殖過程中可以形成微型塊莖，它不僅是植物的繁殖方式之一，而且也有利于種質的包裝、運輸、分配與利用，它的推廣應用是提高山藥產量、改善山藥品質的一條有效途徑。目前對于山藥脫毒微型塊莖的規模化生產，尤其是鐵棍山藥微型塊莖的規模化生產方面未見有經濟實用的誘導方法。
發明內容
本發明的目的是提供一種循環誘導山藥微型塊莖的方法，形成的微型塊莖品質好、產量高、周期短和便于運輸。實現本發明目的的技術方案是，一種循環誘導山藥微型塊莖的方法，其特征在于有以下步驟
(1)懷山藥帶芽莖段的預處理
在超凈工作臺上，將懷山藥試管苗切成長度為I cm左右的帶腋芽莖段接種于基本培養基為MS，添加20-40g/L的蔗糖和TDZ 0. 001-0. 01mg/L,在培養室進行培養，25-40 d即可長成健壯的植株，培養室的培養條件為溫度24-30°C，光照12-16 h/d，光強2000-30001x ；
(2)懷山藥試管苗的快速增殖
在超凈工作臺上，將上述得到的植株在無菌條件下直接接種于MS + 20-40g/L蔗糖的培養基上，在恒溫振蕩箱中進行振蕩培養12-18d，可短時間得到大量新生枝條，恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度25-35°C，100-140rpm ；
(3)懷山藥微型塊莖的誘導
在超凈工作臺上，將第二步得到的植株在無菌條件下接種于MS + 40-100g/L蔗糖的誘導培養基上，先在恒溫振蕩培養箱中進行振蕩培養0-45d,再置于培養室的散射光下靜置培養30-45 d，可以誘導出大量的微型塊莖，恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度24-30°C，40-60rpm，培養室的培養條件為溫度24_30°C，散射光。本發明與現有技術比較具有誘導材料可循環利用、微型塊莖的形成周期短、數量多、品質好的顯著優點。
具體實施例方式 本發明有以下實施例
(I)懷山藥帶芽莖段的預處理在超凈工作臺上將懷山藥試管苗切成長度為I cm左右的帶腋芽莖段接種于基本培養基為MS，添加20-40g/L的蔗糖、TDZ 0. 001-0. 01mg/L，在培養室進行培養，25-40 d即可長成健壯的植株，培養室的培養條件為溫度24-30°C，光照12-16 h/d，光強為2000-30001x ；
(2)懷山藥試管苗的快速增殖
在超凈工作臺上，將上述得到的植株在無菌條件下直接接種于MS + 20-40g/L蔗糖的培養基上，在恒溫振蕩箱中進行振蕩培養12-18d，可短時間得到大量新生枝條；恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度25-35°C，100-140rpm ；
(3)懷山藥微型塊莖的誘導
在超凈工作臺上，將第二步得到的植株在無菌條件下接種于MS + 40-100g/L蔗糖的誘導培養基上，先在恒溫振蕩 培養箱中進行振蕩培養0-45d,再置于培養室的散射光下靜置培養30-45 d，可以誘導出大量的微型塊莖；恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度24-30°C，40-60rpm ;培養室的培養條件為溫度24_30°C，散射光。
權利要求
1.一種循環誘導山藥微型塊莖的方法，其特征在于有以下步驟(1)懷山藥帶芽莖段的預處理在超凈工作臺上，將懷山藥試管苗切成長度為I Cm左右的帶腋芽莖段接種于基本培養基為MS，添加20-40g/L的蔗糖和TDZ O. 001-0. 01mg/L,在培養室進行培養，25-40 d即可長成健壯的植株，培養室的培養條件為溫度24-30°C，光照12-16 h/d，光強2000_30001x ；(2)懷山藥試管苗的快速增殖在超凈工作臺上，將上述得到的植株在無菌條件下直接接種于MS + 20-40g/L蔗糖的培養基上，在恒溫振蕩箱中進行振蕩培養12-18d，可短時間得到大量新生枝條，恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度25-35°C，100-140rpm ；(3)懷山藥微型塊莖的誘導在超凈工作臺上，將第二步得到的植株在無菌條件下接種于MS + 40-100g/L蔗糖的誘導培養基上，先在恒溫振蕩培養箱中進行振蕩培養0-45d,再置于培養室的散射光下靜置培養30-45 d，可以誘導出大量的微型塊莖，恒溫振蕩培養箱設置的參數為溫度24-30°C， 40-60rpm，培養室的培養條件為溫度24_30°C，散射光。
全文摘要
本發明公開了一種循環誘導山藥微型塊莖的方法，有以下步驟(1)懷山藥帶芽莖段的預處理將懷山藥試管苗切成長度為1cm左右的帶腋芽莖段接種于基本培養基為MS，添加20-40g/L的蔗糖和TDZ0.001-0.01mg/L,在培養室進行培養，25-40d即可長成健壯的植株，(2)懷山藥試管苗的快速增殖將上述得到的植株在無菌條件下直接接種于MS+20-40g/L蔗糖的培養基上，在恒溫振蕩箱中進行振蕩培養12-18d，可短時間得到大量新生枝條，(3)懷山藥微型塊莖的誘導將第二步得到的植株在無菌條件下接種于MS+40-100g/L蔗糖的誘導培養基上，先在恒溫振蕩培養箱中進行振蕩培養0-45d，再置于培養室的散射光下靜置培養30-45d，可以誘導出大量的微型塊莖，本發明應用于山藥的繁殖。
文檔編號A01H4/00GK103039364SQ20131001658
公開日2013年4月17日 申請日期2013年1月17日 優先權日2013年1月17日
發明者李明軍, 王醫鵬, 李翔, 張曉麗, 劉雯, 牛佳 申請人:河南師范大學