一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法
【專利摘要】本發明公開了一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法。該稀釋液由葡萄糖、乳糖、蔗糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA等組成。其配制方法為：稱取各種組分放入無菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過濾、分裝、滅菌、密封即得。使用前加入青霉素、雙氫鏈霉素、卵黃和甘油。該稀釋液適用于馬屬動物精液的冷凍保存。本發明的有益效果是：配制簡單，使用方便，馬屬動物精液冷凍保存效果好，適于規模化生產和應用。
【專利說明】一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及動物精液冷凍保存的【技術領域】，特別涉及一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法。
【背景技術】
[0002]精液冷凍保存與人工授精技術的結合在現代養殖業生產中發揮著極其重要的作用，應用冷凍精液進行人工授精可以不受時間、地域、品種及個體體格的限制，并且大量減少公畜飼養量，降低生產成本，提高優良種公畜的利用率，為養殖業帶來巨大的經濟效益。同時，精液冷凍技術的發展和冷凍精液的使用在品種引進、雜交改良，以及提高繁殖性能、疾病控制及遺傳多樣性保護方面具有重要的意義。
[0003]稀釋液在冷凍精液的制作過程中是必不可少的，可以補充精子的營養，減少精液粘稠度，降低異物對精子的影響，同時緩和代謝產物的危害作用；另外還能夠保護精子，增強其抵抗低溫打擊和抗氧化的能力，減少冷凍所造成的損傷。
[0004]近年來，家畜精液稀釋液的研究不斷取得可喜的成果，尤其是在牛、羊等反芻動物方面。馬屬動物精液稀釋液的研究也日漸成效，但是仍然存在諸多弊端，主要表現在精液冷凍效果不穩定，受胎率低；因此開發出保存效果好，成本低，受胎效果好的冷凍精液稀釋液對人工授精而言有重要的經濟效益。
【發明內容】
[0005]為了解決傳統的冷凍精液稀釋液對精子活力的保存效果差、受胎率低等問題，本發明提供了一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法。
[0006]為了實現上述發明目的，本發明提供了一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法。所述稀釋液包括葡萄糖、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA。
[0007]每500ml的所述稀釋液中，各組分的含量為:葡萄糖2(T25g、乳糖1.2^2.0g、檸檬酸鈉 0.2~0.25g、碳酸氫鈉 0.35~0.45g 和 EDTA 0.45~0.55g。
[0008]所述葡萄糖為無水葡萄糖，其分子式為C6H12O6 ;所述乳糖的分子式為C12H22O11 ;所述檸檬酸鈉的分子式為Na3C6H5O7.2H20。
[0009]本發明還提供了上述馬屬動物精液稀釋液的配制方法，所述配制方法包括:
(1)稱取所需要量的葡萄糖、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA，放入無菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過濾、分裝、滅菌、密封即得；
(2)將經過嚴格滅菌、密封的稀釋液標記配制時間，置于(T5°C保存；
(3)使用前向所述稀釋液中分別按1000單位/ml的量添加青霉素和1000ug/ml的量添加雙氫鏈霉素，分別按2%和2.5%的量添加卵黃和甘油，混勻即可。
[0010]本發明實施例提供的技術方案帶來的有益效果是:使用本發明馬屬動物冷凍精液稀釋液進行精液的冷凍保存，效果明顯優于傳統的稀釋液，馬屬動物精液的保存效果好，保證精子的活率和精子頂體完整率，增強受精能力，充分提高了精液的利用率和優良公畜配種的效率；本發明的基礎液配制簡單，使用方便，適于規模化生產和應用。
【具體實施方式】
[0011]下面結合實施例對本發明做進一步描述。
[0012]實施例1
稱取葡萄糖24g、乳糖1.2g、檸檬酸鈉0.25g、碳酸氫鈉0.45g和EDTA 0.5g，放入無菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過濾、分裝、滅菌、密封即得；將經過嚴格滅菌、密封的稀釋液標記配制時間，置于(T5°C保存，隨用隨取。使用前向稀釋液中分別按1000單位/ml的量添加青霉素和1000ug/ml的量添加雙氫鏈霉素，分別按2%和2.5%的量添加卵黃和甘油，并混合均勻。
[0013]對比試驗I
將傳統的稀釋液葡萄糖-卵黃稀釋液(對照組I)和牛奶稀釋液(對照組2)，與實施例1的稀釋液(實施例組I)分別稀釋馬的精液并制作凍精。24小時后測定精子的活率，結果如表1所示。
[0014]表1:不同冷凍稀釋液制作凍精的活率比較
【權利要求】
1.一種馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法，其特征在于，所述稀釋液包括葡萄糖、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA。
2.根據權利要求1所述的馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法，其特征在于，每500ml的稀釋液中，各組分的含量為:葡萄糖2(T25g、乳糖1.2^2.0g、檸檬酸鈉0.2^0.25g、碳酸氫鈉 0.35~0.45g 和 EDTA 0.45~0.55g。
3.根據權利要求1-2所述的馬屬動物冷凍精液稀釋液及其配制方法，其特征在于，所述葡萄糖為無水葡萄糖，其分子式為C6H12O6 ;所述乳糖的分子式為C12H22O11 ;所述檸檬酸鈉的分子式為Na3C6H5O7.2H20。
4.一種如權利要求1-3任意一項所述的馬屬動物冷凍精液稀釋液的配制方法，其特征在于，所述配制方法包括:(I)稱取所需要量的葡萄糖、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸氫鈉和EDTA，放入無菌燒杯中，加雙蒸水溶解后，定容、過濾、分裝、滅菌、密封即得；(2)將經過嚴格滅菌、密封的稀釋液標記配制時間，置于(T5°C保存； 一種如權利要求1-4任意一項所述的馬屬動物冷凍精液稀釋液的使用方法，其特征在于:向所述稀釋液中分別按1000單位/ml的量添加青霉素和1000ug/ml的量添加雙氫鏈霉素，分別按2%和2.5%的量添加卵黃和甘油，混合均勻后置于20°C恒溫水浴鍋中，I小時后對馬屬動物新 鮮精液進行稀釋，并制作凍精。
【文檔編號】A01N1/02GK103783032SQ201310588637
【公開日】2014年5月14日 申請日期:2013年11月21日 優先權日:2013年11月21日
【發明者】鄒敬清, 榮美潔, 孫騰飛 申請人:青島德瑞駿發生物科技有限公司, 伊犁德瑞駿發生物科技有限公司, 青島德瑞鰲藍馬術有限公司