一種甜葉菊組培苗的保存方法
【專利摘要】本發明公布了一種甜葉菊組培苗的保存方法，其做法是利用一種以草炭 + 珍珠巖混合物為基質的培養基，代替傳統的瓊脂基質，作為甜葉菊組培苗的保存培養基，并在其中加入含有各種營養物質和植物激素的營養液，在這種保存培養基上培養甜葉菊。本方法可以大大延緩其甜葉菊組培苗的生長，達到長時間保存甜葉菊組培苗的目的。本發明與現有的植物組培苗保存技術相比，優勢在于，采用正常甜葉菊組織培養的溫度保存菊苗，花費少，成本低，效果好。
【專利說明】一種甜葉菊組培苗的保存方法
【技術領域】
[0001] 一種甜葉菊組培苗的保存方法，涉及甜葉菊組織培養【技術領域】，更具體的說是一 種延緩甜葉菊組培苗的生長進程，對其進行長期保存的方法。
【背景技術】
[0002] 甜葉菊的組織培養是進行甜葉菊快速繁殖、遺傳誘變等生產和科研工作的重要手 段。但由于快繁生產和科學研究都有一定的階段性，其間不可避免地會有一定時間的停滯 階段。例如生產單位按照客戶的需要完成了訂單需要的苗量，而新的訂單還無法預期；或 科研單位對甜葉菊某方面的研究已經完成或告一段落，在一定的時間內不必再繁殖菊苗。 此時甜葉菊的組織培養單位就會面臨組培苗保存的問題：如何讓組培的菊苗緩慢地生長， 通過緩慢的生長，延長組培苗在瓶中的生長時間，減少繼代的操作，既節約人工和材料。由 于甜葉菊的組培苗生長的特別快，一般生根苗30天左右就能長滿一瓶，如果不進行繼代培 養，苗體就會逐漸老化，最后死亡，使組培材料丟失。此時如果出現市場需要，臨時從外植體 進行轉化培養可能遠水不解近渴，錯失市場良機。但如果對菊苗進行繼代保存，就會增加人 力、物力的消耗，造成浪費。為了解決上述問題，有人采用低溫培養的方法進行甜葉菊組培 苗的保存，將甜葉菊的組培苗在KTC下進行培養，通過低溫的環境，延緩菊苗的生長，可以 使甜葉菊組培苗的生長周期延長。但是低溫培養需要一定的設施條件，也會增加電力的消 耗。所以發明出一種能夠在正常甜葉菊組織培養溫度條件下保存甜葉菊組織培養苗的技術 是業界所期待的。
【發明內容】
[0003] 本發明的目的在于提供一種在正常甜葉菊組織培養溫度下進行甜葉菊組培苗保 存的方法，以減少甜葉菊組培苗保存培養的操作成本。
[0004] 本發明是這樣實現的： 1. 一種甜葉菊組培苗的保存方法，其配方是： (1) 基質：基質采用草炭和珍珠巖1:1的混合物； (2) 營養液：營養液中大量元素、微量元素和鐵鹽的濃度均按照1/2MS培養基的要求配 制，有機成分的濃度為MS培養基的2倍，另加0. 4mg/L NAA和30g/L蔗糖； (3) 用量：用250ml的組織培養瓶，每瓶加混合基質50ml，營養液40ml。
[0005] 操作步驟： (1) 基質的制備：將草炭與珍珠巖按照1:1的重量份放在一起并混合均勻； (2) 配制營養液； (3) 裝瓶：在組培瓶中加入基質和營養液； (4) 滅菌：用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌； (5) 接種：滅菌后待組培瓶冷卻，向基質中接種，每瓶接入1-5個單節莖段(最好為1 個）； (6)培養：將組培瓶放入組培室中按照正常的甜葉菊組織培養條件進行培養：溫度 25±1°C，光照強度約15001x (光源為40 W日光燈)，光照時間12 h/d。
[0006] 本發明的有益效果： 采用本發明的方案保存培養基保存甜葉菊的組培苗，可以在正常的甜葉菊組織培養溫 度下，大大延長組培苗的保存時間，省工省料，節約費用。當出現甜葉菊快繁需求時，可以立 即從保存培養基中取出菊苗，回到瓊脂培養基中進行快繁培養；如果沒有快繁需求，單位可 以利用本發明的方法進行材料的長期保存，生長周期長，繼代間隔時間長。本培養基的應用 可以提商相關企業及科研單位的戰略機動性，減支增收。
[0007]
【具體實施方式】： 1. 一種甜葉菊組培苗的保存方法的配方： (1) 基質：基質采用草炭和珍珠巖1:1的混合物； (2) 營養液：營養液中大量元素、微量元素和鐵鹽的濃度均按照1/2MS培養基的要求配 制，有機成分的濃度為MS培養基的2倍，另加0. 4mg/L NAA和30g/L蔗糖； (3) 用量：用250ml的組織培養瓶，每瓶加混合基質50ml，營養液40ml。
[0008] 操作步驟： (1) 基質的制備：將草炭與珍珠巖按照1:1的重量份放在一起并混合均勻； (2) 配制營養液； (3) 裝瓶：在組培瓶中加入基質和營養液； (4) 滅菌：用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌； (5) 接種：滅菌后待組培瓶冷卻，向基質中接種，每瓶接入5個單節莖段，加蓋； (6) 培養：將組培瓶放入組培室中按照正常的甜葉菊組織培養條件進行培養：溫度 25±1°C，光照強度約15001x (光源為40 W日光燈)，光照時間12 h/d。
[0009] 試驗情況： 試驗于2013年10月9日在安徽科技學院植物組織培養實驗室進行。按照上述配方及 操作步驟接種甜葉菊組培苗的單節莖段，以1/2MS的瓊脂培養基培養基為對照；每處理接 種20瓶，每瓶接種5株。
[0010] 生長調查：從表1可見，在本發明的保存培養基中，甜葉菊的組織培養苗生長明顯 變慢，從接種到長滿瓶和從接種到半數苗死亡的時間都明顯較對照大為增加，有效地延長 了甜葉菊組培苗的保存時間。
[0011] 表1.兩種培養基甜葉菊組培苗生長情況表
【權利要求】
1. 一種甜葉菊組培苗的保存方法，其特征在于，它包括培養基的配方和操作步驟： (1) 培養基的配方： ① 基質：基質為草炭和珍珠巖1:1的混合物； ② 營養液：營養液中大量元素、微量元素和鐵鹽的濃度均按照1/2MS培養基的要求配 制，有機成分的濃度為MS培養基的2倍，另加 0. 4mg/L NAA和30g/L蔗糖； ③ 用量：用250ml的組織培養瓶，每瓶加混合基質50ml，營養液40ml ; (2) 操作步驟： ① 基質的制備：將草炭與珍珠巖按照1:1的重量份放在一起并混合均勻； ② 配制營養液； ③ 裝瓶：在組培瓶中加入基質和營養液； ④ 滅菌：用高壓蒸汽滅菌器進行滅菌； ⑤ 接種：滅菌后待組培瓶冷卻，向基質中接種，每瓶接入1-5個單節莖段，加蓋； ⑥ 培養：將組培瓶放入組培室中按照正常的甜葉菊組織培養條件進行培養：溫度 25±1°C，光照強度約15001x，光源為40 W日光燈，光照時間12 h/d。
2. 根據權利要求1所述的所述的一種甜葉菊組培苗的保存方法，其特征在于，所述的 每瓶接入的甜葉菊單節莖段數為1個。
【文檔編號】A01H4/00GK104255453SQ201410452423
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月9日 優先權日:2014年9月9日
【發明者】林平, 何克勤, 崔廣榮 申請人:安徽科技學院