一種茶籽粕脫毒方法
【專利摘要】本發明公開了一種茶籽粕脫毒方法，包括步驟：使用黑曲霉(Aspergillus niger)和乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)混合發酵茶籽粕原料。該方法的具體步驟為：茶籽粕中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60℃-90℃處理1-3h；分別培養黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種；調節預處理過的茶籽粕pH至6.5-7.5，加入甘蔗糖蜜，60℃-90℃熱處理1h后接種，發酵72h后發酵產物干燥粉碎后即得脫毒茶籽粕。本發明使用黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種發酵，具有優異的協同性能，發酵后茶皂苷含量降低顯著，小分子肽含量顯著提高。
【專利說明】一種茶籽粕脫毒方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物【技術領域】，尤其涉及一種茶籽柏脫毒方法。
【背景技術】
[0002] 油茶是中國特有的一種純天然高級油料植物，占全國木本食用油料的80%以上。 我國油茶面積約有5500萬畝，油茶籽年產量約為100萬噸，年產茶油高達20萬噸，預估產 值為110億元。按照油茶茶籽含油量26 %?39%，得油率70 %計算，油茶籽柏年產量70萬 噸左右，而且今年來茶油產量逐年增長，導致茶籽柏產量也進入了增長快車道。
[0003] 茶油生產中產生的茶籽柏中茶皂素、多酚類物質等抗營養因子含量過高，不適 宜直接用于動物飼料，大部分被用作清塘劑、肥料、燃料，甚至廢棄，少量用于茶皂素的提 取，造成了資源的極大浪費。茶籽柏一般含0.5%?7%的粗脂肪、10%?20%的蛋白質、 15%?25%的粗纖維、30%?60%的糖類物質、20%?50%的無氮浸出物。油茶籽柏蛋白 質中含有18種氨基酸，包括畜禽生長所需的10種必需氨基酸，其中蘇氨酸、谷氨酸、組氨酸 和精氨酸等含量較為豐富。同時，礦物質和微量元素 Ca、K、Mg、Fe、Mn等含量也較為豐富。 如果除去油茶籽柏中的抗營養因子，就可以使其變成一種營養價值較高的飼料原料。
[0004] 茶皂苷是茶籽柏中的主要毒性物質，其毒性主要表現為溶血性。溶血性是其苷元 與紅細胞壁上膽留醇結合生成不溶于水的復合物沉淀，破壞細胞滲透壓，使紅細胞發生崩 解，進而導致溶血現象。皂苷有無溶血活性與皂苷元有關，活性強弱與糖分子的大小、糖分 子之間的連接、糖分子上的取代基等有關，此外還與皂苷的濃度有關。因此本領域技術人員 致力于開發一種能夠顯著降低茶皂苷含量，改善茶籽柏動物飼料用品質的技術。
[0005] 甘蔗糖蜜是制糖工業中將壓榨出的甘蔗汁液，經加熱、中和、沉淀、過濾、濃縮、結 晶等制糖工序后所剩下的濃稠液體，俗稱糖稀，屬于液體能量飼料。甘蔗糖蜜能刺激瘤胃 (反芻動物的第一胃）活動，增進食欲，從而增加草料和干物質攝入量并幫助消化。糖蜜的 美味使草料的攝入增加。其他味道差的成分味道被糖蜜掩蓋，從而保證了重要元素的攝入。 甘蔗糖蜜作為一種糖工業中的天然副產品，是很好的能量來源和生命活動調節者。
【發明內容】
[0006] 有鑒于現有技術的上述缺陷，本發明所要解決的技術問題是提供一種茶籽柏脫毒 的方法。
[0007] 為實現上述目的，本發明提供了一種茶籽柏脫毒方法，包括步驟：
[0008] 使用黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)混合發 酵茶籽柏原料。
[0009] 優選地，所述方法的具體步驟為：
[0010] (1)茶籽柏預處理
[0011] 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60°C -90°c處理l-3h ;
[0012] ⑵菌種培養
[0013] 分別培養黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種；
[0014] ⑶半固體發酵
[0015] 調節步驟（1)中預處理過的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C -90°C熱處 理Ih后接種步驟（2)中所得菌種，發酵72h ;
[0016] ⑷干燥粉碎
[0017] 將步驟（3)發酵產物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
[0018] 優選地，步驟（1)中，茶籽柏預處理過程中pH為9-12 ;更優選地為10-11。
[0019] 優選地，步驟（2)中，黑曲霉菌種培養條件為：蔗糖2.5 % (w/v)，酵母粉0.3 % (w/ v)，蛋白胨 1.0% (w/v) ,K2HPO4 0.1% (w/v)，MgS04.7H20 0.01% (w/v)，25°C培養 1-2 天。
[0020] 優選地，步驟（2)中，乳酸乳球菌菌種培養條件為：蛋白胨1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04*7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養 12-24 小時。
[0021] 優選地，步驟（3)中，黑曲霉菌種接種量為5-10% (v/v)。
[0022] 優選地，步驟（3)中，乳酸乳球菌菌種接種量為20-30% (v/v)。
[0023] 優選地，步驟（3)中，甘鹿糖蜜的添加量為茶籽柏質量的5-10%。
[0024] 技術效果
[0025] 本發明的技術方案，由于茶籽柏中茶皂素的存在，使得茶籽柏粘性較大，本發明人 在研究意外地發現，在堿性條件下高溫處理茶籽柏，能夠極大的降低茶籽柏原料的粘度，使 得后續的半固體發酵能夠順利的進行。
[0026] 本發明使用黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種發酵，具有優異的協同性能，發酵后茶 皂苷含量降低顯著，小分子肽含量顯著提高。
[0027] 本發明使用甘蔗糖蜜作為發酵培養基的原料，不僅價格低廉，而且能夠完全滿足 發酵過成中的營養需求，非常適合作為黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種混合發酵的碳源，無 需再添加其它成分，簡化了發酵工藝。前期的研究結果表明，以黑曲霉和乳酸乳球菌進行混 合發酵，使用甘蔗糖蜜作為碳源，發酵產物中，小分子肽的含量明顯高于以葡萄糖（高出約 20% )和蔗糖（高出約10% )作為碳源進行發酵。
【具體實施方式】
[0028] 在本發明的實施例中，有關數據按照下述方法進行檢測：
[0029] 粗蛋白含量檢測方法參考：國家標準GB/T6432-94《飼料中粗蛋白測定方法》；
[0030] 水溶性蛋白檢測方法參考：農業行業標準NY/T1205-2006《大豆水溶性蛋白含量 的測定》執行；
[0031] 小分子肽含量檢測方法參考：按照輕工行業標準QB/T2653-2004《大豆肽粉》執 行；
[0032] 茶皂素含量檢測方法參考：鐘世安等，反相高效液相色譜法測定茶籽餅中茶皂素 [J]，理化檢驗，2008 ;
[0033] 纖維素含量檢測方法參考：國家標準GB/T5009. 10-23。
[0034] 黑曲霉（Aspergillus niger)和乳酸乳球菌（Lactococcus Iactis)購自北京北 納凱創生物技術有限公司。
[0035] 實施例I
[0036] (1)茶籽柏預處理
[0037] 5公斤茶籽柏中加入20公斤的水，攪拌均勻，調節pH為10,90°C處理Ih ;
[0038] (2)菌種培養
[0039] 黑曲霉囷種的培養：
[0040] 鹿糖 2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 I. 0% (w/v) ,K2HPO4 0· 1% (w/v)， MgS04 · 7H20 0· 01% (w/v)，25°C培養 2 天。
[0041] 乳酸乳球菌培養：
[0042] 蛋白胨I. 0% (w/v)，牛肉膏L 0% (w/v)，酵母抽提物0· 5% (w/v)，葡萄糖2% (w/ v)，K2HPO4 0· 2% (w/v)，MgSO4 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養 24 小時。
[0043] (3)半固體發酵
[0044] 調節步驟（1)中預處理過的茶籽柏pH至6. 5,加入甘鹿糖蜜500g，9(TC熱處理Ih 后接種黑曲霉菌種液2. 5L，乳酸乳球菌菌種液5L，發酵72h ;
[0045] (4)干燥粉碎
[0046] 將步驟（3)發酵產物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
[0047] 以未發酵的茶籽柏為對照，進行檢測，設定對照組中各項目含量為100%，檢測結 果如表1所示。
[0048] 表 1
[0049]
【權利要求】
1. 一種茶籽柏脫毒方法，其特征在于，包括步驟：使用黑曲霉（Aspergillus niger)和 乳酸乳球菌（Lactococcus lactis)混合發酵茶籽柏原料。
2. 如權利要求1所述的方法，其中，所述方法的具體步驟為： (1) 茶籽柏預處理 茶籽柏中加入3-5倍重量份的水，攪拌均勻，60°C -90°C處理l_3h ; (2) 菌種培養 分別培養黑曲霉菌種和乳酸乳球菌菌種； (3) 半固體發酵 調節步驟（1)中預處理過的茶籽柏pH至6. 5-7. 5,加入甘蔗糖蜜，60°C _90°C熱處理lh 后接種步驟（2)中所得菌種，發酵72h ; (4) 干燥粉碎 將步驟（3)發酵產物干燥粉碎后即得脫毒茶籽柏。
3. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟（1)中，茶籽柏預處理過程中pH為9-12;更優 選地為10-11。
4. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟⑵中，黑曲霉菌種培養條件為：鹿糖2. 5% (w/v)，酵母粉 0· 3% (w/v)，蛋白胨 1. 0% (w/v)，Κ2ΗΡ04 0· 1 % (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 01 % (w/v)，25°C 培養 1-2 天。
5. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟⑵中，乳酸乳球菌菌種培養條件為：蛋白胨 1.0% (w/v)，牛肉膏 1.0% (w/v)，酵母抽提物 0.5% (w/v)，葡萄糖 2% (w/v)，K2HP04 0.2% (w/v)，MgS04 · 7H20 0· 002% (w/v)，37°C厭氧培養 12-24 小時。
6. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，黑曲霉菌種接種量為5-10% (v/v)。
7. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，乳酸乳球菌菌種接種量為20-30% (v/ v)。
8. 如權利要求1所述的方法，其中，步驟（3)中，甘蔗糖蜜的添加量為茶籽柏質量的 5-10%。
【文檔編號】A23K1/14GK104286383SQ201410487785
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月16日 優先權日:2014年9月16日
【發明者】楊鐘華 申請人:瑞安市普羅生物科技有限公司