光合陸生和水生植物的栽培是全世界主要的經濟活動且為大多數人提供大部分卡路里需求。除了農業生產外，許多類型的光合陸生和水生植物(諸如花卉)的生產還用于其他用途。這些光合物種的栽培常常因植物疾病和病癥復雜化，這些植物疾病和病癥可顯著降低農場的生產率。收獲作物期間的損害(例如水果或塊莖上的傷口)是疾病或致病有機體可不利地影響生產者的另一個時機。因此，農民使用多種方法來限制植物病癥和疾病，包括化學處理，這些化學處理涉及增加的成本并可能破壞環境、當地的生物多樣性和農民及其他食用該農產品或與該農產品相互作用的人的健康。這些化學處理以及基因工程被廣泛用來提升植物抵抗疾病的能力并作為疾病的治療措施，但現代農業過度依賴于這些化學處理已導致廣泛的抗藥性并導致需要更自然的方式來促進植物的健康免疫功能。
當植物因諸如生物(真菌、細菌、病毒)和非生物(環境因素—缺乏營養素、干旱、缺氧、高溫、日照或污染)的任何原因而被破壞、受到攻擊或受到影響時，植物出現疾病抵抗力(Freeman和Beattie，2008)。在不適當的條件下，產生次級代謝物，包括例如萜類、酚類、生物堿類、蛋白質類和酶類。
根據以往的研究，據發現，植物的免疫系統可使用各種激發劑來促進或刺激。使用不同的激發劑還會影響不同種類的物質的產生，例如碳水化合物聚合物、脂質、糖肽和糖蛋白。這些物質的產生用來抵抗微生物的破壞并支持植物的許多過程，諸如活性氧物種(AOS)、植物抗毒素(phytoalexin)的生物合成、起源于類苯基丙烷(phenyl propanoid)的細胞壁強度、胼胝質(callose)累積、其他抗性酶的合成和PR蛋白累積(Van Loon和Van Strien，1999)。
殼聚糖(chitosan)可刺激萜類的活性。據發現，西紅柿中的殼聚糖可誘導西紅柿葉中產生倍半萜烯(sesquiterpene)(Walker-Simmon等人，2001)。另外，使用馬鈴薯中的低分子量殼聚糖可誘導馬鈴薯芽產生倍半萜烯和產生植物抗毒素(Vasyukova等人，2001)。此外，不同的分子量和乙酰化程度會影響抗菌素耐藥性的反應活性。分子量比乙酰化程度的影響更大(Sekiguchi等人，1994)。根據蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)、大腸桿菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、腸道沙門氏菌(Salmonella enteric)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis，)和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)的生長抑制實驗，結果表明該低分子量殼聚糖可提供比較高分子的殼聚糖更好的對微生物的生長抑制(Jing等人，2007；Jung等人，2002；Omura等人，2003)。這是因為較小的分子可比較大的分子移動得更快(Kumar，2005)。
此外，寡殼聚糖可促進植物對細菌、病毒和真菌的超敏反應。被破壞的細胞將迅速死亡，而蛋白質和植物抗毒素會累積以防止擴散到其他正常細胞。500微克寡殼聚糖/ml的濃度可在72小時內引起40.6％的煙草細胞死亡(Wang等人，2008)。可以說，與殼聚糖聚合物相比，寡殼聚糖是更好的激發劑，因為據發現寡殼聚糖可以更好地刺激豆類產生豌豆素(pisatin)植物抗毒素(Kendra和Hadwiger，1984；Hadwiger等人，1994)。這與另一項對葡萄葉開展的研究一致，該研究揭露與高分子量的寡殼聚糖(3和10kDa)相比，使用低分子量的寡殼聚糖(1.5kDa)可激活產生更多的植物抗毒素(Aziz等人，2006)。
因此，本領域對于用于刺激植物產生物質(包括對提升植物的免疫力和植物生長而言重要的物質)的組合物和方法仍有需要。
技術實現要素：
使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑(Nano Vacc-Fertiliceutical for Plant)來刺激植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質。一升的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑含有：
1.殼寡糖0.6重量％；
2.有機酸0.6重量％；
3.氨基酸0.5重量％；和
4.礦物質1.68重量％。
用于刺激植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的制造過程由以下這些步驟組成：
1.使殼寡糖與有機酸反應；
2.產物為納米生物殼寡糖溶液；
3.使納米生物殼寡糖溶液與氨基酸反應；
4.產物為納米氨基生物殼寡糖物質；
5.使納米氨基生物殼寡糖物質與礦物質螯合；
6.產品為植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑；以及
7.包裝產品。
用于刺激植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明如下：
用于刺激觀葉植物產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備20ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與1升水混合。然后混合在一起并將用于栽種在1rai中的種子/莖浸泡在該溶液中6小時。
2.將浸泡過的種子/莖帶至準備好的地塊栽種。
3.幼苗生長14天后，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。然后，將所有成分混合在一起以使用噴霧器噴灑在該地塊上。該混合物的量為每1rai 20升。每7-15天噴灑該溶液，直到收獲。如果移動了幼苗，則在移動后14天開始再次噴灑。
用于刺激果樹產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以用于噴灑1rai)。然后全部混合在一起并每15至30天噴灑在植物上，直到開花。將80ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑與20升水混合(以噴灑1rai)。噴灑后15天，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以噴灑1rai)。然后每15至30天噴灑在植物上，直到開花。
用于刺激開花植物產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以噴灑1rai)。然后混合在一起并將用于栽種在1rai中的種子/莖浸泡在該溶液中6小時。
2.將浸泡過的種子/莖帶至所提供的地塊栽種。
3.幼苗生長14天(幼苗期)后，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。然后，將所有成分混合在一起以使用噴霧器噴灑在該地塊上。該混合物的量為每1rai 20升。每7至15天噴灑該溶液，直到出現花蕾。之后，制備80ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。將它們混合在一起并且每15至30天使用噴霧器噴灑在該地塊上，直到供收獲的開花階段。然后，將40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑與20升水混合以每15至30天噴灑在該地塊上，直到出現花蕾。
檢查植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的方法：
1.激活植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質
—隨機從每一組的1-rai地塊收集植物。然后，蒸餾或萃取樣品以找出重要物質諸如類黃酮、酚類、生物堿類等(取決于各植物的植物學特性)的量。之后，比較使用和未使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑之間的數據。
在一個實施方案中，本發明為包含殼寡糖、有機酸、氨基酸和礦物質的組合物。在一個實施方案中，該有機酸是乳酸。在一個實施方案中，該氨基酸為蛋氨酸。在一個實施方案中，該礦物質包含氮、磷、鉀、硫、錳、鋅、鈣、硅、亞鐵和鐵。在一個實施方案中，該殼寡糖具有可變的分子量和可變的脫乙酰化程度。在一個實施方案中，該殼寡糖的分子量在約2.0×102至約2.0×103的范圍內，且脫乙酰化程度在約84％至約96％的范圍內。在另一個實施方案中，該殼寡糖的分子量在約4.0×104至約4.0×105的范圍內，且脫乙酰化程度在約81％至約92％的范圍內。在另一個實施方案中，該殼寡糖的分子量在約3.0×106至約3.0×107的范圍內，且脫乙酰化程度在約75％至約85％的范圍內。
在一個實施方案中，本發明為包含殼寡糖、有機酸、氨基酸、礦物質和稀釋劑的組合物。在一個實施方案中，該稀釋劑為水。在一個實施方案中，殼寡糖的濃度為約0.6％，有機酸的濃度為約0.6％，氨基酸的濃度為約0.5％，且礦物質的濃度為約1.68％。在另一個實施方案中，該濃度按重量計。
在一個實施方案中，本發明為制備根據權利要求1所述的組合物的方法，包括：提供殼寡糖；添加有機酸；添加氨基酸；和添加礦物質。在一個實施方案中，該有機酸為乳酸。在另一個實施方案中，該氨基酸為蛋氨酸。在另一個實施方案中，該礦物質包含氮、磷、鉀、硫、錳、鋅、鈣、硅、亞鐵和鐵。
在一個實施方案中，本發明為制備稀釋的殼寡糖組合物的方法，包括將殼寡糖、有機酸、氨基酸和礦物質與水混合。
在一個實施方案中，本發明為刺激植物產生物質的方法，包括將包含殼寡糖、有機酸、氨基酸和礦物質的組合物施用給以下任一者：植物、植物的種子和植物的莖。在一個實施方案中，該植物為觀葉植物。在另一個實施方案中，該植物為果樹。在另一個實施方案中，該植物為開花植物。在另一個實施方案中，該植物為羅勒。在另一個實施方案中，該植物為辣椒。在另一個實施方案中，該植物為水稻。在一個實施方案中，該物質為類黃酮。在另一個實施方案中，該物質為酚類物質。在另一個實施方案中，該物質為生物堿。在另一個實施方案中，該物質為萜類。在另一個實施方案中，該物質為蛋白質。在另一個實施方案中，該物質為酶。在另一個實施方案中，該物質為類胡蘿卜素。在另一個實施方案中，該物質為辣椒素類物質(capsaicinoid)。在另一個實施方案中，該物質為脂肪酸。在一個實施方案中，該組合物在已建立植物的栽培之前或之后施用，且該施用包括在一定面積的地帶上噴灑一定量的該組合物，噴灑比率以組合物的立方厘米數(cc)/1rai表示。在一個實施方案中，每三天噴灑該組合物。在另一個實施方案中，每六天噴灑該組合物。在另一個實施方案中，每十二天噴灑該組合物。在一個實施方案中，該比率為40cc/1rai。在另一個實施方案中，該比率為80cc/1rai。在另一個實施方案中，該比率為120cc/1rai。在另一個實施方案中，該比率為160cc/1rai。
在一個實施方案中，本發明為用于刺激植物產生物質的套裝，其包含一定量的含有殼寡糖、有機酸、氨基酸和礦物質的組合物和使用該組合物的說明手冊。
具體實施方式
本發明涉及包含殼寡糖的組合物及其制備和使用方法。本發明的組合物用于刺激植物產生某些物質。出于多種原因，期望增加這些物質在各種植物中的產生。在一個方面，增加物質的產生與提升植物的免疫力有關。在另一個實施方案中，增加物質的產生與增進植物生長有關。在另一個實施方案中，期望增加物質的產生，因為該物質本身是植物生長的原因。本發明的目的是使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑刺激植物(例如觀葉植物、果樹和開花植物)產生物質，這通過以下方式進行：準備植物的種子或莖，并將溶液噴灑在栽培該植物的地塊上，以激活較平常更多的物質產生。由該植物產生的這些重要物質有利于：1)生長—防止由陽光(直接和間接)造成的危險、促進生長、增加出產的色素、抑制真菌、細菌和病毒生長、產生對昆蟲和害蟲的毒性等等，2)出產質量—出產的重要物質的量、抗氧化劑、色素濃度和儲存期。使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑來促進和刺激重要物質的產生對植物和承包人具有重要意義。在植物方面，其有助于抵抗疾病、出產質量(諸如顏色)、延長儲存、預防收獲后的疾病和出產傷害減少。此外，使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑可增進植物的特定特性。例如，羅勒的強烈氣味是由β-30石竹烯(β-30Caryophyllene)、β-欖烯(β-elemene)、metyleugenol和甲基胡椒酚(methyl chavicol)造成。由羅勒產生的幾種類型的物質諸如維生素C、酚類和類黃酮在作為抗氧化劑上發揮著重要作用。此外，從羅勒提取的甲醇可用作抗氧化劑，并包括超氧化物陰離子、羥基自由基、超氧化物自由基和鐵捕獲(Hakkim等人，2007)。
定義
如本文所使用的下列各術語具有本章節中與其相關的含義。除非另外定義，否則本文所使用的所有技術和科學術語通常具有本發明所屬領域中普通技術人員所通常理解的相同含義。一般而言，本文所使用的命名法以及農業、化學和配制科學中的實驗室和田間程序為本領域眾所周知且常用的。
本文所使用的詞語“一個(種)”是指一個(種)或多于一個(種)(即，至少一個(種))該詞語的語法對象。例如，“要素”意指一個要素或多于一個要素。
當指可測量的值(諸如量、時間長度等)時，本文所使用的“約”意在包含從指定值±20％、±10％、±5％、±1％或±0.1％的變化，因為這些變化在執行所公開的方法時是適當的。
除非明確指示僅指替代項或這些替代項相互排斥，否則本文所使用的術語“或”意指“和/或”，雖然本公開支持僅指替代項和“和/或”的定義。
如本文所使用的詞語“包含”(和包含的任何形式，諸如“含有“)、“具有”(和具有的任何形式，諸如“帶有”)或“包括”(和包括的任何形式，諸如“囊括”)為包含在內的或開放式的且不排除另外的、未列舉的要素或方法步驟。
本文所使用的術語“免疫性肥料藥劑”是指這樣一種組合物，其增加植物產生物質，并因此賦予植物增加的免疫力和/或增加的生長特性，并使植物免受自然壓力條件的影響，包括但不限于受傷和病原感染，諸如病毒、細菌、真菌或昆蟲，但也包括熱、寒冷或干旱。免疫力一般可指植物對環境因素的抵抗力，無論是有生命的環境因素(例如各種害蟲、微生物等)或無生命的環境因素(例如高溫或低溫、高濕度或低濕度等)。增加的生長特性一般可指該植物的任何物理屬性，例如增加刺激物質本身的產生、增加其他物質的產生或增加植物各部分(葉、果實、根、莖、種子等)的產生。
如本文所使用的術語“寡糖”是指糖化合物，其分子由連續的少量或具體地講2至10個串聯的單糖單元形成。
本文所使用的術語“分子量”或者“分子質量”是指分子的質量，其由各構成原子的質量乘以分子中該種原子的數目計算出。當用于聚合物質(諸如糖或寡糖)的背景下時，其中該物質包含具有可變長度的分子，“分子量”可既指分子量的范圍或又指平均分子量。
本文所使用的術語“脫乙酰化”是指從分子中的乙酰氨基部分移除乙酰基，但使氨基基團保留在原處。
本文所使用的術語“DD”或“脫乙酰化程度”是指消除或減少乙酰基基團(CH3CO)(其指示甲殼素和殼聚糖)的過程。如果該數值低，則甲殼素的量高。另一方面，如果該數值高，則殼聚糖的量高。
本文所使用的術語“有機酸”是指具有酸性性質的有機化合物，其實例包括但不限于羧酸和磺酸。
本文所使用的術語“氨基酸”是指同時包含至少一個羧基基團和至少一個氨基基團的有機化合物。
本文所使用的術語“納米氨基生物殼寡糖”是指包含氨基酸、殼聚糖和糖的化合物。通過生物過程，可提供達到納米級的較小分子。
本文所使用的術語“礦物質”是指來自有殼蝦(shell shime)、有殼蟹、魚和腐殖質的礦物質提取物。通過生物技術方法改變結構，直到化合物的改變在植物中具有獨特的遞送機制，類似于藥物在人體中的遞送。
本文所使用的術語“rai”是指相當于1600平方米或0.3954英畝的面積單位。
本文所使用的術語“kD”意指千道爾頓，且指統一原子質量單位或道爾頓(符號：Da)，其為用于指示原子或分子尺度的質量(原子質量)的標準單位。一個統一原子質量單位約為一個單一質子或中子的質量且相當于1g/mol。
本文所使用的術語“增加”、“刺激”和這些術語的變型包括任何可測量的增加。
“疾病”是這樣一種植物健康狀態，其中該植物無法保持體內平衡，并且其中如果該疾病沒有改善則植物的健康將持續惡化。相反地，植物中的“病癥”是這樣一種健康狀態，其中該植物能夠保持體內平衡，但其中該植物的健康狀態較不存在該病癥時不利。如果不治療，則病癥不一定會使植物的健康狀態進一步變差。本文中，疾病和病癥可互換使用。
本文所使用的“治療疾病或病癥”意指降低植物經歷該疾病或病癥的癥狀的頻率。如果該疾病或病癥的癥狀的嚴重性降低、患者經歷的這種癥狀的頻率降低或這兩種情況，則該疾病或病癥“緩解”。
化合物的“有效量”或“治療有效量”是足以為施用該化合物的受試者(諸如植物)提供有益效果的化合物的量。遞送載劑的“有效量”是足以有效地結合或遞送化合物的量。
本文所使用的短語“水性溶劑”是指包含至少水，能夠溶解、懸浮或者說是分散殼寡糖的任何和所有溶劑體系。
本文所使用的術語“局部”是指將本發明的組合物施用到植物的任何暴露區域或植物的種子上。將本發明的組合物施加到植物的根、莖、葉或果實上均為局部施用的實例。
本文所使用的短語“有效量”是指足以或有效預防或治療(延遲或預防發作、防止進展、抑制、減少或逆轉)與植物相關的疾病或病況(包括刺激植物產生物質和刺激植物的免疫力)的量。
本文所使用的術語“另外的成分”包括但不限于以下一種或多種：賦形劑；表面活性劑；分散劑；惰性稀釋劑；制粒劑和崩解劑；結合劑；潤滑劑；甜味劑；調味劑；著色劑；防腐劑；生理上可降解的組合物，諸如明膠；水性載劑和溶劑；油性載劑和溶劑；懸浮劑；分散劑或潤濕劑；乳化劑；緩和劑(demulcent)；緩沖劑；鹽；增稠劑；填充劑；乳化劑；抗氧化劑；抗生素；抗真菌劑；穩定劑；和農業上可接受的聚合性或疏水性物質。
本文所使用的“說明性材料”包括可用來傳代本發明的組合物于其指定用途的用處的出版物、記錄、圖表或任何其他表現媒體。本發明的套裝的說明性材料可例如被固定在含有該組合物的容器上或與含有該組合物的容器一起運送。或者，該說明性材料可與容器分開運送，但希望接收者能配合使用該說明性材料和組合物。
在本公開的全文中，本發明的各方面可以范圍格式呈現。應當理解的是，以范圍格式給出的描述僅是為了方便和簡潔的目的，而不應被解釋為硬性限制本發明的范圍。因此，對范圍的描述應被視為已具體公開了所有可能的子范圍和在該范圍內的各個數值。例如，對諸如1至6的范圍的描述應被視為已具體公開了諸如1至3、1至4、1至5、2至4、2至6、3至6等子范圍，以及該范圍內的各個數值和分數，例如1、2、3、4、5、5.5和6。不論范圍的廣度如何，這均適用。
描述
在一個方面，本發明涉及植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。本發明部分地涉及以下出人意料的發現：該功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑可增加植物產生重要物質，例如包括但不限于與植物免疫力有關的物質。
在一個實施方案中，植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑包含兩種類型的物質：1)刺激劑或激發劑，和2)前體。這兩部分為可供植物快速吸收的納米粒子。其激活作用類似于加強該植物的免疫力的疫苗。添加前體以立即完成植物過程，而不用等待光合作用。此外，其有助于促進所述過程按預期發生。
本發明的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑可通過刺激植物產生免疫力和若干物質的過程來促進重要物質的產生。
本發明的組合物
在一個方面，本發明涉及包含殼寡糖的組合物。在一個實施方案中，該殼寡糖衍生自殼聚糖。殼聚糖是通過甲殼素脫乙酰化而產生的多糖，甲殼素為含有乙酰化氨基基團的天然多糖。殼聚糖包含乙酰化和脫乙酰化氨基基團。該比率可通過核磁共振(NMR)光譜來測量且以％脫乙酰化程度(％DD)表示。市售殼聚糖中的DD在約60％至約100％的范圍內。殼聚糖經加工成具有可變的長度和質量的大分子的混合物，稱為殼寡糖。在本發明的一個實施方案中，殼寡糖的分子量在約2.0×102至約2.0×103的范圍內，且脫乙酰化程度在約84％至約96％的范圍內。在另一個實施方案中，殼寡糖的分子量在約4.0×104至約4.0×105的范圍內，且脫乙酰化程度在約81％至約92％的范圍內。在另一個實施方案中，殼寡糖的分子量在約3.0×106至約3.0×107的范圍內，且脫乙酰化程度在約75％至約85％的范圍內。
甲殼質和殼聚糖為真菌的細胞壁以及昆蟲和甲殼類動物的外骨骼的主要組分。甲殼質化合物包括甲殼素(IUPAC：N-[5-[[3-乙酰氨基-4,5-二羥基-6-(羥甲基)氧雜環己-2基]甲氧基甲基-1]-2-[[5-乙酰氨基-4,6-二羥基-2-(羥甲基)氧雜環己-3-基]甲氧基甲基]-4-羥基-6-(羥甲基)氧雜環己-3-基]乙酰胺)和殼聚糖(IUPAC：5-氨基-6-[5-氨基-6-[5-氨基-4,6-二羥基-2(羥甲基)氧雜環己-3-基]氧基-4-羥基-2-(羥甲基)氧雜環己-3-基]氧基-2(羥甲基)氧雜環己-3,4-二醇)。這些化合物可商購獲得，例如從Sigma-Aldrich商購獲得，或從昆蟲、甲殼類動物殼或真菌細胞壁制備。用于制備甲殼素和殼聚糖的方法為本領域已知的且已例如在美國專利No.4,536,207(從甲殼類動物的殼制備)、Pochanavanich等人，Lett.Appl.Microbiol.35:17-(2002)(從真菌細胞壁制備)和美國專利No.5,965,545(從蟹殼和水解商品殼聚糖制備)中進行了描述。可獲得的脫乙酰化的甲殼素和殼聚糖的脫乙酰化程度在低于約35％至高于約90％的范圍內，且涵蓋寬泛的分子量，例如小于15kD的低分子量殼聚糖低聚物和0.5至2kD的甲殼素低聚物；分子量為約150kD的“實用級”殼聚糖；和高達約700kD的高分子量殼聚糖。
在另一方面，本發明涉及包含殼寡糖和有機酸的組合物。有機酸為具有酸性性質的有機化合物，比如羧酸或磺酸。本發明的實施方案例如包括諸如甲酸、醋酸、丙酸、丁酸(butyric acid或butanoic acid)、戊酸(valeric acid或pentanoic acid)、己酸(caproic acid或hexanoic acid)、草酸、乳酸、葡糖酸、戊二酸、谷氨酸、富馬酸、檸檬酸、蘋果酸、馬來酸、苯甲酸的酸，以及它們的混合物。在一些實施方案中，該有機酸具有6個或更少的碳原子，而在其他實施方案中，該有機酸具有4個或更少的碳原子。在一個實施方案中，該有機酸為乳酸。
在另一方面，本發明涉及包含氨基酸的組合物。氨基酸為同時包含羧基和氨基基團的有機化合物。本發明的實施方案例如包括諸如組氨酸、丙氨酸、異亮氨酸、精氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、賴氨酸、天冬氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、蘇氨酸、谷氨酰胺、色氨酸、甘氨酸、纈氨酸、吡咯賴氨酸、脯氨酸、硒代半胱氨酸、絲氨酸和酪氨酸的氨基酸。在一個實施方案中，該氨基酸為蛋氨酸。
在另一方面，本發明涉及包含礦物質的組合物。在一個實施方案中，該礦物質為礦物質提取物。在另一個實施方案中，該礦物質提取物從有殼蝦、有殼蟹、魚和腐殖質獲得。在另一個實施方案中，該礦物質選自氮、磷、鉀、硫、錳、鋅、鈣、硅和亞鐵或鐵。在另一個實施方案中，該礦物質包含氮、磷、鉀、硫、錳、鋅、鈣、硅和亞鐵或鐵。
在一個方面，本發明涉及植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑，其為包含殼寡糖、有機酸、氨基酸和礦物質的濃縮組合物。在一個實施方案中，該組合物配制成納米粒子。在另一個實施方案中，該組合物以稀釋劑稀釋以產生即用型植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的制劑。在一個實施方案中，該稀釋劑為包含水和至少一種可與水混溶的其他溶劑的水性稀釋劑，該可與水混溶的其他溶劑的實例包括但不限于醇和二醇。在一個實施方案中，該稀釋劑為水。在一個實施方案中，在該即用型制劑中的殼寡糖的濃度為約0.6重量％。在另一個實施方案中，在該即用型制劑中的有機酸的濃度為約0.6重量％。在另一個實施方案中，在該即用型制劑中的氨基酸的濃度為約0.5重量％。在另一個實施方案中，在該即用型制劑中的礦物質的濃度為約1.68重量％。
在另一方面，該植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑組合物也可包含具有殺真菌、殺細菌或殺病毒活性的另外的活性劑或適合激活該植物本身的防御系統的其他化合物。此類化合物為本領域眾所周知的且該第一類型的化合物的實例包括但不限于殺蟲劑、殺真菌劑、殺菌劑、殺線蟲劑、除草劑、殺軟體動物劑，而該第二類型的化合物的實例包括但不限于氯代煙酰(chloronicotinyl)或苯并噻二唑衍生物(US 2009/0018019或美國專利No.4,931,581)或若干這些活性劑的混合物。適合與本發明的植物保護組合物組合的常用活性劑的另外實例包括但不限于戊唑醇(tebuconazol)、咯菌腈(fludioxonil)、環戊唑菌(metconazol)、甲基硫菌靈(thiophanat-methyl)、氟嘧菌酯(fluoxastrobin)、丙硫菌唑(prothioconazol)、咪鮮胺(prochloraz)、氟喹唑(fluquinconazol)、螺環菌胺(spiroxamine)、苯醚甲環唑(difenoconazol)、氟環唑(epoxiconazol)、丙硫菌唑(prothioconazol)、滅菌唑(triticonazol)、醚菌胺(dimoxystrobin)、樂果(dimethoat)、λ氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、噻蟲嗪(thiamethoxam)、甲基嘧啶磷(pirimiphos-methyl)、氰氟蟲胺(metaflumizone)、噻蟲啉(thiacloprid)、β-氟氯氰菊酯(beta-cyfluthrin)、吡蟲啉(imidacloprid)、多殺菌素(spinosad)、氯蟲苯甲酰胺(chlorantraniliprole)、噻蟲胺(clothianidin)、溴氰菊酯(deltamethrin)、除蟲脲(diflubenzuron)、螺螨酯(spirodiclofen)、α-氯氰菊酯(alpha-cypermethrin)、ζ-氯氰菊酯(zeta-cypermethrin)、啶酰菌胺(boscalid)、醚菌胺(dimoxystrobin)、環戊唑菌(metconazol)、助壯素(mepiquat)或三唑醇(triadimenol)。
在一個實施方案中，本發明的組合物為溶液。在另一個實施方案中，本發明的組合物為乳液。在另一個實施方案中，本發明的組合物可配制成脂質體和微滴。
如本領域的技術人員將理解的是，乳液由兩種或更多種不混溶的液體的混合物組成，即，含有多個相。乳液與溶液不同，溶液含有一個或基本上僅一個相。乳液中的液體之一為分散相且分散在另一相中，所述另一相為連續相。在一種類型的乳液中，連續液相圍繞水滴，即油包水乳液。在另一種類型的乳液中，油分散在連續的水相內，即水包油乳液。如本領域的技術人員將理解的是，短語“油包水”和“水包油”僅用于舉例說明目的，因為乳液通常可由任何兩種不混溶的液體形成，包括兩種非水性的不混溶液體。乳化為制備乳液的過程。在一個實施方案中，本發明的組合物為乳液(諸如油包水或水包油乳液，包括但不限于脂質乳液，諸如大豆油乳液)的組分。例如，包含溶解在溶液(其包含水性溶劑)中的殼寡糖的組合物也可包含脂質乳液或水包油乳液。
在某些實施方案中，本發明的乳液可具有脂質組分。在多種實施方案中，該脂質組分的量的范圍可占乳液的約1％至99％、約5％至約75％、約10％至約60％、約20％至約50％或約30％至約40％(體積/體積)。在多種實施方案中，該乳液的脂質組分可為大豆油、長鏈甘油三酯、蓖麻油、玉米油、棉籽油、橄欖油、花生油、薄荷油、紅花油、芝麻油、大豆油、氫化大豆油、氫化植物油、中鏈甘油三酯椰子油、棕櫚籽油和衍生物、中鏈(C8/C10)甘油單酯和甘油二酯、d-α-生育酚、大豆脂肪酸或它們的組合。
在某些實施方案中，本發明的乳液包含殼寡糖和水性溶劑，且還可以包含乳化劑。乳化劑為穩定乳液的物質。乳化劑(emulsifier)也可稱為乳化劑(emulgent)。乳化劑也可以為表面活性劑。在多種實施方案中，乳化劑可為卵磷脂、純化的卵磷脂、聚氧乙烯35蓖麻油(Cremophor EL)、聚氧乙烯40氫化蓖麻油(Cremophor RH 40)、聚氧乙烯60氫化蓖麻油(Cremophor RH 60)、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、琥珀酸d-α-生育酚聚乙二醇1000酯、Solutol HS-15、丙二醇或它們的組合。各種濃度的乳化劑可用于本發明。例如，本發明的包含殼寡糖的組合物可包含約0.1％-99％、0.1％-60％、5％-50％、10％-40％、5％-25％、10％-30％、10％-25％、25％-50％、10％-75％、25％-75％、10％-65％、25％-65％、10％-60％、25％-60％、0.1％、1％、5％、10％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％或其中可推導出的任何范圍的乳化劑。
在其他實施方案中，本發明的乳液具有全氟化碳組分。在多種實施方案中，該全氟化碳組分的量的范圍可占乳液的約0.1％至99％、約5％至約75％、約10％至約60％、約20％至約50％、或約30％至約40％(體積/體積)。在多種實施方案中，由于全氟化碳的有限毒性，其可提供額外的優點。在一個實施方案中，本發明的乳液包含殼寡糖、全氟化碳和乳化劑。
在多種實施方案中，本發明的組合物可為脂質體懸浮液的組分。脂質體(例如多層、單層和/或多囊脂質體)是一種微觀、球形的流體填充的結構，其壁包含一層或多層在物理和/或化學性質上類似于構成哺乳動物細胞膜的那些的磷脂和分子。通過非限制性實例說明，脂質體可由多種天然膜組分形成，諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂酰膽堿，比如美國專利No.5,120,561和6,007,838(其各自全文以引用方式并入本文)中所描述的，或由純表面活性劑組分比如DOPE(二油酰磷脂酰-乙醇胺，dioleoylphosphatidyl-ethanolamine)形成。脂質體可被配制成包含多種作為有效載荷的物質，無論是在水性隔室中或在脂質隔室中，或在這兩種隔室中。一般而言，親脂性活性物質溶解在雙層中，兩親性物質變成與磷脂膜相關聯，而親水性物質則以溶液出現在封閉的水性空間中，比如Artmann等人，1990，Drug Res.40(Ⅱ)12:1363-1365(其全文以引用方式并入本文)所述。
本發明的脂質體組合物可根據本文所提出的方法和詳細描述包含任何范圍的脂質體和殼寡糖組分。通過非限制性實例說明，本發明的組合物的脂質體組分可包括約0.1％至約99.9％的脂質體組分，或更優選地，約0.1％至約50％的脂質體組分，甚至更優選地，約0.1％至約30％的脂質體組分。在多種實施方案中，本發明的脂質體包含膽固醇、硬脂胺、磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺或它們的組合。
在多種實施方案中，本發明的組合物也可以為微滴的組分。本發明的微滴由直徑在約200埃至約10,000埃的范圍內的有機液相的球體組成，所述球體被合適的脂質的單層所覆蓋。優選的脂質為磷脂，其為生物膜的天然成分，并因此為生物相容的。可用于制備微滴的化合物包括磷脂酰膽堿(卵磷脂)、鞘磷脂、磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰肌醇、雙磷脂酰甘油和磷脂酰甘油。微滴可通過超聲波處理(包括探頭式或水浴式超聲波處理)、均質化、微流化或通過高強度機械攪拌來制備。制備本發明的微滴的優選方法是使用探頭超聲波儀通過超聲波處理來進行。或者，可在水浴超聲波儀中制備微滴。
在多種實施方案中，本發明的組合物也可為液體懸浮液的組分。液體懸浮液可使用常規方法制備以得到在水性或油性載劑中的活性成分的懸浮液。水性載劑包括例如水和等滲鹽水。油性載劑包括例如杏仁油、油酯、乙醇、植物油，諸如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油、分餾的植物油和礦物油，諸如液體石蠟。液體懸浮液還可包含一種或多種另外的成分，包括但不限于懸浮劑、分散劑或潤濕劑、乳化劑、緩和劑、防腐劑、緩沖劑、鹽、調味劑、著色劑和甜味劑。油性懸浮液還可包含增稠劑。已知的懸浮劑包括但不限于山梨糖醇糖漿、氫化食用脂肪、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠、阿拉伯膠和纖維素衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素。已知的分散劑或潤濕劑包括但不限于天然存在的磷脂，諸如卵磷脂、烯化氧與脂肪酸、與長鏈脂族醇、與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯、或與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(例如分別為聚氧乙烯硬脂酸酯、十七乙烯氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol)、聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯(polyoxyethylene sorbitol monooleate)和聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯(polyoxyethylene sorbitan monooleate))。已知的乳化劑包括但不限于卵磷脂和阿拉伯膠。已知的防腐劑包括但不限于對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯、抗壞血酸和山梨酸。已知的甜味劑包括例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、蔗糖和糖精。已知的用于油性懸浮液的增稠劑包括例如蜂蠟、硬石蠟和鯨蠟醇。
本發明的方法
在一個方面，本發明涉及制備植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的方法。在一個實施方案中，該方法包括提供殼寡糖的步驟。在另一個實施方案中，該方法包括添加有機酸的步驟。在另一個實施方案中，該殼寡糖與有機酸反應。在一個實施方案中，將有機酸加入殼寡糖的產物為納米生物殼寡糖溶液。在一個實施方案中，該方法包括將氨基酸加入納米生物殼寡糖溶液的步驟。在另一個實施方案中，納米生物殼寡糖溶液與氨基酸發生反應。在一個實施方案中，將氨基酸加入納米生物殼寡糖溶液的產物為納米氨基生物殼寡糖物質。在一個實施方案中，該方法包括將礦物質加入納米氨基生物殼寡糖物質的步驟。在另一個實施方案中，該礦物質為螯合礦物質。
在一個方面，本發明涉及以稀釋劑稀釋該植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑，以便制備即用型制劑的方法。在一個實施方案中，該稀釋劑為水。在一個實施方案中，植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑與水的比率可根據特定的最終用途的范圍來確定。例如，稀釋可根據所需的即用型制劑的最終體積來確定。在一個實施方案中，可將20立方厘米(cc)的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑添加到1升水中。在其他實施方案中，可將40cc、80cc、120cc或160cc添加到1升水中。在另一個實施方案中，稀釋可根據需要噴灑該即用型制劑的土地表面積和希望施加到該相同面積的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的量來確定。在一個實施方案中，以足夠的水稀釋40cc的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以噴灑1rai的土地(1rai＝1600平方米)。在另一個實施方案中，以足夠的水稀釋80cc的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以噴灑1rai的土地。在另一個實施方案中，以足夠的水稀釋120cc的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以噴灑1rai的土地。在另一個實施方案中，以足夠的水稀釋160cc的功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以噴灑1rai的土地。在一個實施方案中，制備用于噴灑1rai的土地的即用型制劑所需的水為20升。
在一個方面，本發明涉及刺激植物產生物質的方法。在一個實施方案中，該植物的實例包括但不限于觀葉植物、果樹和開花植物。在一個實施方案中，該植物為辣椒。在另一個實施方案中，該植物為羅勒。起源于植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的羅勒與原始的羅勒不同，因為其味道強烈、顏色較深且具有更大量的精油。在另一個實施方案中，該植物為水稻。在另一個實施方案中，該植物選自單子葉植物和雙子葉植物。術語“單子葉植物”是指特征在于具有一個種子葉(子葉)的一組植物，而術語“雙子葉植物”是指特征在于具有二個胚葉的第二組植物。單子葉植物的非限制性實例包括小麥、燕麥、小米、大麥、黑麥、玉米、水稻、高粱、小黑麥、斯佩爾特小麥(spelt)和甘蔗，而雙子葉植物的非限制性實例包括擬南芥屬(Arabidopsis)、纖維植物(棉花、亞麻、大麻、黃麻)、蕎麥、葡萄樹、茶、啤酒花、開心果、水芹、亞麻籽、油樹(油菜、芥菜、罌粟、橄欖、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可豆、花生)、蔬菜(例如菠菜、生菜、蘆筍、卷心菜、胡蘿卜、洋蔥、西紅柿、馬鈴薯、辣椒、蕓苔)、茄子、玉米、煙草、萬壽菊、金盞菊、黃瓜植物(諸如黃瓜、食用葫蘆、甜瓜)、無核小水果(例如蘋果、梨、李子、桃子、杏仁、櫻桃、草莓、覆盆子和黑莓)、柑橘類水果(諸如橙、檸檬、葡萄柚、柑橘)、南瓜/小果南瓜、西葫蘆、甜菜(例如糖用甜菜和飼料甜菜)、核果(例如咖啡、大棗、芒果、棕櫚樹，比如椰棗)、樟科(例如鱷梨、肉桂、樟腦)、觀賞植物(例如花、灌木、落葉喬木和針葉樹)和豆科植物(諸如豆類、小扁豆、豌豆、大豆)。根據本發明，該植物可為傳統的作物植物或為通過常規方法培育、誘變或通過重組DNA技術獲得的具有新特性的植物品種。因此，該植物可包括轉基因植物和雜交植物。
在一個實施方案中，其產生經過刺激的物質為重要物質，其實例包括但不限于類黃酮、酚類物質、生物堿、萜類、蛋白質和酶。在一個實施方案中，該物質與植物免疫力有關。在另一個實施方案中，增加該物質的產生增強植物的免疫力。在另一個實施方案中，該物質為農業目的所需的物質，比如但不限于：該物質、植物本身或這兩者適合且適宜供人食用或使用。在一個實施方案中，該物質為倍半萜烯。在另一個實施方案中，該物質為類胡蘿卜素。在另一個實施方案中，該物質為辣椒素類物質。在一個實施方案中，該物質選自β-30石竹烯、β-欖烯、metyleugenol、甲基胡椒酚和辣椒素。在一個實施方案中，該物質為脂肪酸。在另一個實施方案中，該物質為揮發性脂肪酸。
在一個實施方案中，該方法包括將本發明的組合物施用至植物的種子或植物本身，比如但不限于植物的根、莖、葉、果實等。在一個實施方案中，刺激植物產生物質的方法在已建立植物的栽培之前實行。在另一個實施方案中，刺激植物產生物質的方法在已建立植物的栽培之后實行。在一個實施方案中，將本發明的組合物噴灑在一定面積的包含該植物的栽培的地帶上。在一個實施方案中，每三天噴灑該組合物。在另一個實施方案中，每六天噴灑該組合物。在另一個實施方案中，每十二天噴灑該組合物。在一個實施方案中，該組合物以40cc/1rai的比率噴灑。在另一個實施方案中，該組合物以80cc/1rai的比率噴灑。在另一個實施方案中，該組合物以120cc/1rai的比率噴灑。在另一個實施方案中，該組合物以160cc/1rai的比率噴灑。
在一個實施方案中，植物可通過本領域已知的任何方法與本發明的組合物接觸。在另一個實施方案中，植物通過選自以下的任一種方法接觸：噴灑、散布、傾倒、涂覆和撒粉。在一個實施方案中，可提供包含將液體形式的本發明組合物分散在氣體或蒸氣中從而形成該組合物的小液滴的噴霧劑。然后，該噴霧劑使得能夠將組合物分布在一定表面積上，比如單株植物或包含多株植物的田間。將組合物分散在氣體或蒸氣中也稱為霧化。液體狀態的組合物也可被散布在植物或田間上或可被傾倒在植物或田間上。此外，可將植物的部分或整株植物涂上本發明的組合物，例如通過將植物浸入組合物中或用組合物刷涂植物或其部分。或者，或此外，可通過撒粉施加該組合物，即，(空中)施加粉末形式的組合物。此外，也可將該組合物引入植物生長的土壤中，例如以液體、顆粒、小丸或能夠隨著時間崩解以便釋放本發明的組合物的棒的形式引入。上述施加方式導致施加于葉面、施加于莖或芽、在施加于土壤的情況下施加于根(和通過根攝取)或施加于種子。本領域的技術人員將認識到，特定的施加方法必須根據相應的環境和治療目標進行選擇。
在一個實施方案中，施用的量為有效刺激植物產生物質(包括但不限于有效增加植物免疫力)的量。在一個實施方案中，該治療方法包括向植物遞送稀釋的水性殼寡糖組合物。在一個實施方案中，當局部施用給植物時，該稀釋的殼寡糖組合物具有在約0.1重量％至約1.0重量％范圍內的殼寡糖濃度。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.1重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.2重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.3重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.4重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.5重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.6重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.7重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.8重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約0.9重量％。在另一個實施方案中，該稀釋的殼寡糖組合物的殼寡糖濃度為約1.0重量％。
欲施用的本發明組合物的量取決于特定的植物和/或特定的物質。例如，該劑量將取決于植物的類型。例如，如果該植物為觀葉植物、果樹或開花植物，則該劑量可以不同。該劑量也可取決于施用該組合物的植物面積。例如，如果該組合物施用至植物的種子，則該劑量可以不同，并且如果該組合物施用至植物的根、莖、葉或果實，則該劑量也可不同。該劑量也可取決于組合物中的殼寡糖的濃度或殼寡糖的MW和DD。例如，如果殼寡糖的分子量在2.0×102至2.0×103的范圍內且脫乙酰化程度在84％至96％的范圍內，或者殼寡糖的分子量在4.0×104至4.0×105的范圍內且脫乙酰化程度在81％至92％的范圍內，或者殼寡糖的分子量在3.0×106至3.0×107的范圍內且脫乙酰化程度在75％至85％的范圍內，則該劑量可以不同。
本發明的方法可包括單獨施用本發明的制劑，或與其他調節或增強植物免疫力、刺激植物產生物質或者說是有利地影響植物的農業生產的其他作用劑組合。例如，在一個實施方案中，構成本發明的制劑的作用劑可與一種或多種肥料組合施用。在另一個實施方案中，構成本發明的制劑的作用劑可與下列一種或多種作用劑組合施用：殺蟲劑、除草劑、殺真菌劑、殺昆蟲劑、昆蟲生長調節劑、殺線蟲劑、殺白蟻劑(termiticide)、殺軟體動物劑、殺魚劑(piscicide)、殺鳥劑、殺鼠劑、毒殺藥(predacide)、殺菌劑、昆蟲驅逐劑、動物驅逐劑、抗微生物劑、消毒劑或抗微生物劑和消毒殺菌劑。如本文所使用，當兩種作用劑同時施用或以使所述作用劑同時作用的方式獨立施用時，這兩種藥劑被說成是組合施用。
本發明的套裝
本發明還涉及用于刺激植物產生物質的套裝。在一個實施方案中，該套裝包括一定量的本發明的組合物和使用說明手冊。本發明的組合物可連同說明性材料提供給負責將組合物施用給植物的專業人員。在一個實施方案中，該說明性材料為套裝的一部分。該說明性材料包括可用于傳達在套裝中的組合物和/或化合物在實行本發明時的用處的出版物、記錄、圖表或任何其他表現媒體。該套裝的說明性材料可例如固定在含有用于實行本發明的化合物和/或組合物的容器上或與含有該化合物和/或組合物的容器一起運送。或者，該說明性材料可與容器分開運送，但希望接收者配合使用該說明性材料和化合物。該說明性材料的提供可例如通過實體提供傳達該套裝的用處的出版物或其他表現媒體來實現，或者可通過電子傳輸，例如通過計算機，諸如通過電子郵件或從網站下載來實現。
可以想到的是，本說明書中所討論的任何實施方案可關于本發明的任何方法或組合物實施，反之亦然。此外，本發明的組合物可用來實現本發明的方法。
本發明的其他目的、特征和優點將從本文的詳細描述中變得顯而易見。然而，應當理解的是，該詳細描述和具體實例盡管指出了本發明的具體實施方案，但其僅通過舉例說明的方式給出，因為在本發明的精神和范圍內的各種變化和修改將通過該詳細描述對本領域的技術人員變得顯而易見。
實驗性實施例
本發明通過參考下列實驗性實施例進一步詳細說明。除非另外規定，否則這些實施例僅用于舉例說明而無意進行限制。因此，本發明不應以任何方式被解釋為限于下列實施例，而應解釋為涵蓋任何和所有由于本文所提供的教導而變得顯而易見的變型。
材料和方法
準備種植用的土壤后，將該面積劃分成13組且各組由1rai組成。然后，將種子或莖浸泡在與1升水混合的20ml植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑中6小時。隨后，將該種子或莖種植在這13組的地塊中并在幼苗生長14天后噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。另外的細節提供如下。
第1組：對照組(未噴灑)。
第2組：每3天通過使用每1rai 40cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第3組：每3天通過使用每1rai 80cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第4組：每3天通過使用每1rai 120cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第5組：每3天通過使用每1rai 160cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第6組：每6天通過使用每1rai 40cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第7組：每6天通過使用每1rai 80cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第8組：每6天通過使用每1rai 120cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第9組：每6天通過使用每1rai 160cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第10組：每12天通過使用每1rai 40cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第11組：每12天通過使用每1rai 80cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第12組：每12天通過使用每1rai 120cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
第13組：每12天通過使用每1rai 160cc的比率來噴灑植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑。
然后收集數據并如下收獲植物。
植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的檢查方法：
隨機從各組的1-rai地塊收集植物。然后，將樣品蒸餾或萃取以找出重要物質諸如類黃酮、酚類、生物堿等(取決于各植物的植物學特性)的量。之后，比較使用和不使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑之間的數據。
方差分析：使用99％可靠性水平下的鄧肯新多范圍檢驗(Duncan's new multiple range test，DMRT)和SPSS，關于完全隨機設計(randomized completely design，RCD)進行ANOVA以比較各組平均值的差異。
用于刺激觀葉植物產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備20ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與1升水混合。然后，混合在一起并將欲栽種在1rai中的種子/莖浸泡在該溶液中6小時。
2.將浸泡好的種子/莖栽種在準備好的地塊中。
3.當幼苗生長14天后，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。然后，將所有成分混合在一起并使用噴霧器噴灑在該地塊上。該混合物的量為每1rai 20升。每7至15天噴灑該溶液，直到收獲。如果移動了幼苗，則在移動后14天開始再次噴灑。
用于刺激果樹產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以噴灑1rai)。然后，將所有成分混合在一起并每15至30天噴灑在植物上，直到開花。將80ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑與20升水混合(以噴灑1rai)。噴灑15天后，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以噴灑1rai)。然后，每15至30天噴灑在植物上，直到開花。
用于刺激開花植物產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用說明：
1.制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑并與20升水混合(以噴灑1rai)。然后，混合在一起并將欲栽種在1rai中的種子/莖浸泡在該溶液中6小時。
2.將浸泡好的種子/莖栽種在所提供的地塊中。
3.在幼苗生長14天(幼苗期)后，制備40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。然后，將所有成分混合在一起以使用噴霧器噴灑在該地塊上。該混合物的量為每1rai 20升。每7至15天噴灑該溶液，直到出現花蕾。然后，制備80ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑以與20升水混合。將它們混合在一起并每15至30天使用噴霧器噴灑在該地塊上，直到供收獲的開花階段。然后，將40ml的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑與20升水混合以每15至30天噴灑在該地塊上，直到出現花蕾。
實施例1：用于刺激植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑
一升的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑含有：
1.殼寡糖0.6重量％；
2.有機酸0.6重量％；
3.氨基酸0.5重量％；和
4.礦物質1.68重量％。
實施例2：用于刺激植物(觀葉植物、果樹和開花植物)產生重要物質的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的制造過程
該制造過程由以下這些步驟組成：
1.使殼寡糖與有機酸反應；
2.產物為納米生物殼寡糖溶液；
3.使納米生物殼寡糖溶液與氨基酸反應；
4.產物為納米氨基生物殼寡糖物質；
5.使納米氨基生物殼寡糖物質與礦物質螯合；
6.產品為植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑；以及
7.包裝產品。
實施例3：使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑刺激羅勒產生精油的結果
根據所有比率的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的使用，結果顯示從羅勒提取的精油的量比對照組高。此外，還發現具有統計顯著性的差異。特別是，每12天每1rai使用40cc的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑使每單位重量的羅勒具最高含量的精油，即倍半萜烯。
實施例4：使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑刺激辣椒產生辣椒素和類胡蘿卜素的結果
對于在辣椒種植系統中從浸泡種子到收獲時使用所有比率的植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑，結果證明與對照組相比較，使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑，每15天以40cc的溶液和20升水的混合物處理植物，并在辣椒完全變成紅色時收獲可刺激產生更多的類胡蘿卜素，結果具有統計顯著性。
提取辣椒中的辣椒素證明：使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑能影響辣椒產生更高含量的辣椒素，結果具有統計顯著性。然而，該結果與另一對照組不同，因為刺激植物的免疫系統可激勵并誘導酚類和生物堿的產生(Freeman和Beattie，2008)。
實施例5：使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑刺激水稻產生葉毛的結果
該研究調查水稻葉毛的長度，該葉毛長度可代表產生更高量的角質。將未使用任何植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的對照組與使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的組進行比較。每15天，每1rai施加40cc溶液和20升水的混合物以噴灑地塊。然后，通過隨機選擇20片播種后60天的水稻葉子來收集數據。之后，檢查葉毛以測量其長度。研究結果表明：使用植物功能性經活化的納米免疫性肥料藥劑的組具有最長的葉毛(15微米)，與對照組(6微米)的差異具有統計顯著性。
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