一種茄子花藥培養直接獲得植株的方法和培養基與流程

技術特征：

1.一種茄子花藥培養直接獲得植株的方法，包括下述步驟：

(1)、胚狀體的獲得：將單核靠邊期的無菌花藥接種于花藥培養固體培養基中，33～37℃黑暗培養2～8天，轉至25-28℃光照培養30-40天，可見胚狀體由裂開的花藥壁內萌發出來；

所述花藥培養固體培養基的組成為：950mg/L KNO₃、825mg/L NH₄NO₃、332.02mg/L CaCl₂、180.54mg/L MgSO₄、170mg/L KH₂PO₄、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H₃BO₃、16.9mg/LMnSO₄·H₂O、8.6mg/L ZnSO₄·7H₂O、0.25mg/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L CuSO₄·5H₂O、0.025mg/L CoCl₂·6H₂O、100mg/L肌醇、5mg/L煙酸、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L鹽酸硫氨(維生素B1)、0.5mg/L鹽酸吡哆素(維生素B6)、0.5mg/L葉酸、0.05mg/L生物素、800mg/L谷氨酰胺、100mg/L絲氨酸、30mg/L谷胱甘肽(GSH)、0.1～1mg/L KT、0.1～1mg/L IAA、0.01～0.05mg/L NAA、0.1％～0.3％活性炭、3％～6％蔗糖和0.6％～0.8％瓊脂；固體培養基的pH值為5.8；

(2)、再生單倍體植株的獲得：當胚狀體生長到子葉型胚狀體階段，將其轉接至健苗生根固體培養基中繼續培養，長成完整植株；

所述健苗生根固體培養基的組成為：1900mg/L KNO₃、1650mg/L NH₄NO₃、332.02mg/L CaCl₂、180.54mg/L MgSO₄、170mg/L KH₂PO₄、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H₃BO₃、16.9mg/L MnSO₄·H₂O、8.6mg/L ZnSO₄·7H₂O、0.25mg/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L CuSO₄·5H₂O、0.025mg/L CoCl₂·6H₂O、100mg/L肌醇、0.5mg/L煙酸、2mg/L甘氨酸、0.1mg/L鹽酸硫氨(維生素B1)、0.5mg/L鹽酸吡哆素(維生素B6)、0.01～0.1mg/L KT、0.1～0.5mg/L IBA、3％蔗糖和0.8％瓊脂；健苗生根固體培養基的pH值為5.8。

2.根據權利要求1所述的一種茄子花藥培養直接獲得植株的方法，其特征在于，在所述方法之前還包括下述步驟：

(1)、新鮮花蕾的選取：選取小孢子處于單核靠邊期的花蕾，通過DAPI染色確定花粉發育時期為單核靠邊期；

(2)、花蕾的表面消毒、無菌花藥的獲得：花蕾用75％酒精浸泡0.5-1分鐘，5％的次氯酸鈉溶液浸泡3-5分鐘，無菌水沖洗3-5次，無菌濾紙吸干水分。

3.權利要求1或2中所述培養方法中培養無菌花藥的培養基，其特征在于：所述無菌花藥培養固體培養基的組成為：950mg/L KNO₃、825mg/L NH₄NO₃、332.02mg/L CaCl₂、180.54mg/L MgSO₄、170mg/L KH₂PO₄、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H₃BO₃、16.9mg/L MnSO₄·H₂O、8.6mg/L ZnSO₄·7H₂O、0.25mg/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L CuSO₄·5H₂O、0.025mg/L CoCl₂·6H₂O、100mg/L肌醇、5mg/L煙酸、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L鹽酸硫氨(維生素B1)、0.5mg/L鹽酸吡哆素(維生素B6)、0.5mg/L葉酸、0.05mg/L生物素、800mg/L谷氨酰胺、100mg/L絲氨酸、30mg/L谷胱甘肽(GSH)、0.1～1mg/L KT、0.1～1mg/L IAA、0.01～0.05mg/L NAA、0.1％～0.3％活性炭、3％～6％蔗糖和0.6％～0.8％瓊脂；固體培養基的pH值為5.8。

4.權利要求1或2中所述培養方法中健苗生根的培養基，其特征在于：所述健苗生根固體培養基的組成為：1900mg/L KNO₃、1650mg/L NH₄NO₃、332.02mg/L CaCl₂、180.54mg/L MgSO₄、170mg/L KH₂PO₄、36.7mg/L FeNaEDTA、0.83mg/L KI、6.2mg/L H₃BO₃、16.9mg/L MnSO₄·H₂O、8.6mg/L ZnSO₄·7H₂O、0.25mg/L Na₂MoO₄·2H₂O、0.025mg/L CuSO₄·5H₂O、0.025mg/L CoCl₂·6H₂O、100mg/L肌醇、0.5mg/L煙酸、2mg/L甘氨酸、0.1mg/L鹽酸硫氨(維生素B1)、0.5mg/L鹽酸吡哆素(維生素B6)、0.01～0.1mg/L KT、0.1～0.5mg/L IBA、3％蔗糖和0.8％瓊脂；健苗生根固體培養基的pH值為5.8。