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一種羽裂唇柱苣苔的組織培養方法與流程

文檔序號:11113232閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種羽裂唇柱苣苔的組織培養方法,其特征在于,包括如下步驟:

(1)外植體的消毒滅菌:春季取羽裂唇柱苣苔的幼嫩葉片,先用0.1-0.5%洗衣粉溶液浸泡25-30min后在流水下沖洗30min,并用軟毛刷輕輕刷洗葉片,然后轉入超凈工作臺進行滅菌操作,先用棉球蘸取75%酒精拭擦葉片表面,無菌水沖洗2次,然后將葉片在75%酒精中浸泡10s,無菌水沖洗3次,再用0.1%氯化汞溶液處理6min,無菌水沖洗3次,最后再用0.1%氯化汞溶液處理6min,無菌水沖洗3次,氯化汞滅菌過程中輕輕震蕩使氯化汞充分接觸葉片;葉片切成2cm×2cm大小,接種在MS培養基,得到無菌葉片;

(2)不定芽的誘導:將獲得的無菌葉片切成1cm×1cm大小,并在葉片四周留有切口,接種在不定芽誘導培養基中,經過20-25d的培養,從葉片四周的傷口誘導出不定芽;

(3)繼代培養:將獲得的不定芽切取下來,接種在繼代培養基中培養25-30d,得到組培小苗;

(4)生根培養:選取高度為1.5-3.0cm的組培小苗,接種在生根培養基中培養18-20d,得到組培生根苗;

(5)煉苗移栽:將高度為2.5-4.0cm的生根苗移出培養室后揭去組培瓶蓋在自然條件下煉苗4-5d;洗凈培養基移栽到裝有基質的50孔穴盤中;澆透定根水后,將移栽小苗置于有遮陽網的蔭棚下,透光率為40-50%,并采用間歇性噴霧系統控制空氣濕度,每2h噴霧1次,噴霧時間每次40s,確保空氣濕度85%以上,早晚澆透水各1次,移栽后7-10d,即可成活。

2.根據權利要求1所述的羽裂唇柱苣苔的組織培養方法,其特征在于,步驟(2)中的不定芽誘導培養基為MS+6-BA1.0-2.0mg/L+NAA0.01-0.1mg/L。

3.根據權利要求1所述的羽裂唇柱苣苔的組織培養方法,其特征在于,步驟(3)中的繼代培養基為MS+6-BA1.0-2.0mg/L+NAA0.05mg/L+活性炭0.1g/L。

4.根據權利要求1所述的羽裂唇柱苣苔的組織培養方法,其特征在于,步驟(4)中的生根培養基為MS+IBA0.1-0.5mg/L+活性炭0.1g/L。

5.根據權利要求1所述的羽裂唇柱苣苔的組織培養方法,其特征在于,步驟(5)中的基質是由泥炭和珍珠巖按照體積比為2:1組成。

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