專利名稱：一種腦蛋白水解物注射液制備方法
技術領域：
本發明屬于醫藥技術領域背景技術腦蛋白水解物注射液系健康豬腦經酶解制得的滅菌水溶液，每1ml中含游離氨基酸為28.08-42.14mg，含總氮(N)應為5.49-6.71mg，用于顱腦外傷，腦血管病后遺癥伴有記憶減退及注意力集中障礙的癥狀改善。對腦功能不全有輔助改善作用，也用于蛋白質缺乏，神經衰弱病人以用對一般蛋白質消化吸收障礙的病例。
該品種最早由奧地利進口，后來國內陸續生產。其工藝過程文獻報道很多，其過程大致為脫脂、水解、超濾、層析、調配氨基酸的過程。但在實踐中我們按報道的工藝操作不能生產出合格產品，主要是標準〖檢查〗項中其他物質大于15％，顏色尤其在儲存過程中也達不到淺黃色澄明液體的要求。另外脫脂步驟需防爆車間，一方面增加了成本，一方面工藝中確實不需要。層析過程在實際中也不現實。
發明內容
本發明的過程是a、化凍清洗取符合質量標準的豬腦于投料前日從冷庫中取出，室溫化凍、用飲用水洗凈血水及污物，除去皮膜，以注射用水洗二次。
b、勻漿將豬腦加入1.5倍新鮮注射用水，以細度3檔用膠體磨絞碎，制成勻漿。
c、胃蛋白酶水解將勻漿置入蒸汽夾層鍋內加熱至85℃保持15分鐘，然后降溫。當溫度為42±2℃，向勻漿中加入鹽酸調節pH3.5左右，然后按豬腦重量3％加入胃蛋白酶，在42±2℃條件下水解6小時，分裝于不銹鋼桶中冷凍，次日凍透后取出室溫慢化。
d、胰酶水解c步的上清液用NaOH溶液調pH至8.5左右，將胰酶加注射用水溶解，平均1g胰酶加水2ml，加入氯化鈣至0.025N，室溫或0-4℃活化1小時左右。將上述胰酶按豬腦重量的2％加入上清液中，于42±2℃水解4小時左右，水解液于100℃煮沸20分鐘，冷水冷卻即得上清液。
e、超濾及納濾d步驟的上清液過一萬分子量的超濾柱，得超濾液然后將上述超濾液用分子量300--1000道爾頓的納濾器納濾，濾出原體積的一半左右，得截留液或稱納濾截留液。再將納濾截留液過一萬分子量的超濾器一次。
f、將e步超濾液進行肽圖及氨基酸測定，通過小樣制備確定稀釋倍數，補充各種氨基酸至標準中限，同時加入終體積千分之二以下的亞硫酸氫鈉，加水補足體積，調節pH，檢測溶液的折光率及含氮量g、上述溶液再過一萬分子量超濾柱，除菌過濾，灌封、滅菌、燈檢、檢測即得腦蛋白水解物注射液。
本發明的優點是a、在胃蛋白酶水解后進行深凍，有利于制劑最終澄明度合格。
b、用分子量300-1000的納濾柱納濾，除去了其他物質，無機鹽等，使制劑的折光率合格。
c、在過程中根據實際情況加入2‰以下的亞硫酸氫鈉，保證了制劑及在有效期呈淺黃色，防止了有效成份的氧化。
d、做為一個完整的工藝過程，能生產出符合質量標準(國家藥品標準WS-XG-025-2000)的合格產品。
具體實施實例一、取新鮮豬腦80kg，去筋膜，洗凈后，加入1.5倍的注射用水，用膠體磨勻漿，置于夾層鍋中，加熱至85℃保持15分鐘后冷卻至42℃，用鹽酸調節pH值3.5左右，加入胃蛋白酶2.4公斤攪勻，分裝于不銹鋼桶中，于42±2℃的水浴箱中水解6小時左右，取出放置于-20℃冷庫中過夜凍透，次日取出室溫自然化透，吸取上清。取1.6kg胰酶加水3.2kg溶解，加入7g氯化鈣，攪勻于室溫放置1小時，于42±2℃水解4小時。將上述水解液置于夾屋鍋中加熱至沸持續20分鐘，迅速冷卻，即得上清液。將上述上清液過1萬分子量超濾柱超濾一次，得溶液約160kg，再經分子量300---1000的道爾頓的納濾器納濾，濾出體積80kg，保留截留液80kg，再經一萬分子量超濾器超濾。取樣測定各種氨基酸濃度及肽圖，經小樣實驗，確定稀釋2.4倍，按終體積每升加入0.85g亞硫酸氫鈉，同時按濃度中限補足各種氨基酸，調節終體積為192升即可，過1萬分子量超濾柱一次，調pH7.2，除菌過濾，灌封，105℃40分鐘滅菌即得腦蛋白水解物注射液。
權利要求
1.一種腦蛋白水解物注射液制備工藝，其過程是a、清洗、勻漿取新鮮健康豬腦，洗凈，以注射用水洗二次，加入1.5倍注射用水，用膠體磨勻漿。b、胃蛋白酶水解勻漿加熱至85℃保持15分鐘，降溫至42±2℃用鹽酸調節pH3.5左右，按豬腦重量3％加入胃蛋白酶，水解完畢后低溫冷凍，凍透后室溫慢化，吸取上清。c、上述上清液調pH至堿性，按豬腦重量2％加入用0.025N氯化鈣活化60分鐘的胰酶，水解，調pH中性，加熱至沸，冷卻，吸取上清過濾。d、上述清液過1萬分子量超濾柱。e、上述超濾液過納濾器，保留一定比例的截留液。f、檢測，確定稀釋倍數，并按濃度中線補足各種氨基酸。按終體積的千分之二(W/V)以下加入亞硫酸氫鈉，同時調節折光率和氮含量。g、上述溶液過1萬分子量超濾柱，灌封、滅菌、燈檢、檢測即得腦蛋白水解物注射液。其特征是a、胃蛋白酶水解后低溫冷凍，凍透后室溫化凍，吸上清，有利于最終產品澄明度合格。b、工藝中采用了納濾技術，即分子量為300---1000道爾頓的過濾柱，除去了原料中的其他物質，及無機鹽等，同時使制劑的折光率合格。c、原料中加入了亞硫酸氫鈉，防止了生產及儲存過程中成份的氧化，使〖性狀〗項在有效期內為淺黃色澄明液體。d、主要為上述過程作為一個完整的工藝過程，能生產出完全合乎質量標準的腦蛋白水解物注射液。
全文摘要
腦蛋白水解物注射液系健康豬腦經酶解制成的滅菌制劑，內含約16種游離氨基酸并含少量肽，用于顱腦外傷，腦血管病后遺癥伴有記憶減退及注意力集中障礙的癥狀改善。對腦功能不全有輔助改善作用，也用于蛋白質缺乏，神經衰弱病人以及對蛋白質消化吸收障礙的病例。本發明介紹了一種其制造方法，其過程為清洗、勻漿、熱變、胃蛋白酶水解、深凍、化凍、胰酶水解、熱變、超濾，300－1000分子量納濾截留，再超濾，稀釋補充氨基酸至中線，加入亞硫酸氫鈉抗氧化，除菌過濾，灌封，滅菌。整個過程完整，簡便且保證了折光率，性狀合格，從而使產品合乎國家標準，尤其在儲存過程中性狀仍能保持淺黃色。
文檔編號C12P21/02GK101019889SQ20071005542
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月16日 優先權日2007年3月16日
發明者石海 申請人:石海