專利名稱：無菌小鼠人工喂養乳及其制備方法
技術領域：
本發明涉及動物人工祠養用乳制品，尤其是涉及一種無菌小鼠人工喂養乳 及其制備方法。
背景技術：
實驗動物是生命科學發展的基礎和條件，不僅在生物醫學研究中具有非常 重要的地位，還廣泛用于農業、化工、環保、航天、商檢等諸多領域。通常， 普通動物的體內和體外帶有寄生蟲，體內常帶有細菌和病毒，并且血清中存在 抗體，用于科學研究時會存在各種干擾，導致實驗結果不準確，使用無菌動物 則可克服上述缺點，保證實驗結果的一致性與可靠性。無菌動物，是指不攜帶 其它種生命體(包括一切微生物和寄生蟲)的實驗動物。小鼠是應用最廣泛的實 驗動物之一，目前，無菌小鼠人工繁殖困難，發病率高，成活率低，價格昂貴。 人工喂養乳的配制，是無菌動物飼養成功的關鍵之一，特別是對免疫能力較差 的無菌小鼠，不僅要營養結構和鼠乳相近，而且要適合小鼠的消化吸收。現有 的無菌小鼠人工喂養乳營養搭配不合理，制備方法復雜，成本昂貴，用其飼養 無菌小鼠，小鼠成活率低，即使成活也存在生長發育不良、體格不健壯、易發 病等問題。
發明內容
有鑒于此，本發明的目的在于提供一種營養結構合理、制備方法簡便的無 菌小鼠人工喂養乳及其制備方法，以提高人工喂養無菌小鼠的生長發育水平和 成活率，降低無菌小鼠的人工喂養成本。
為實現上述目的，本發明采用以下技術方案
無菌小鼠人工喂養乳，以102ml計，由下述原料組成45. 0-55. Og嬰兒 奶粉、3. 0-5. 0 mg維生素Bl、 0. 7-0. 9 mg維生素B2、 3. 0-5. 0 mg維生素B6、 30. 0-50. 0 Pg維生素B12、 11. 0-13. G mg維生素C,余量為水。進一步，所述無菌小鼠人工喂養乳，以102ml計，由下述原料組成50.0 g嬰兒奶粉、4. Omg維生素Bl、 0. 8mg維生素B2、 4. 0 mg維生素B6、 40. 0 Hg 維生素B12、 12. 0 mg維生素C，余量為水；
進一步，所述嬰兒奶粉，以100g計，其組分含量為16. lg蛋白質、28.7 g脂肪、51.0 g碳水化合物、1541.0 IU維生素A、 258.0 IU維生素D、 7.0 IU 維生素E、 27. OPg維生素Kl、 518. Opg維生素Bl、 781. 0 Pg維生素B2、 340.0 Pg維生素B6、 1. 8 Pg維生素B12、 4445. 0 Pg煙酸、39. 6 Pg葉酸、2780. 0 Pg 泛酸、12. 7gg生物素、50. Omg維生素C、 72. 0 mg膽石威、407. Omg鉤、313.0 mg磷、68, Omg鎂、8. 3mg鐵、4. lmg鋅、357. Ogg銅、250. 9 mg鈉、587.0 mg鉀、543. 0 mg氯。
無菌小鼠人工喂養乳的制備方法，包括以下步驟
a. 對容器及濾器進行高溫高壓消毒，壓力為1.05 kg/cm2,溫度為121°C, 時間為30分4中；
b. 按配方取嬰兒奶粉，置經過步驟a消毒的容器中，加塞密封，進行40 KGy Co"輻照，輻照完畢后，加入75 ml無菌水，加塞振搖，使嬰兒奶粉充分溶解， 再加水稀釋至100ml，制得乳液，將所得乳液置溫度37。C培養箱中，培養7天， 取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；
c. 按2. 5倍配方量取維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12和維生 素C，加入5ml蒸餾水使溶解，制得維生素溶液，將所得維生素溶液過濾滅菌， 置經過步驟a消毒的容器中，取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；
d. 將步驟b所得乳液100 ml與步驟c所得維生素溶液2 ml充分混合，制 得無菌小鼠人工喂養乳。
本發明的有益效果在于采用本發明所述原料配比制得的無菌小鼠人工喂 養乳，在嬰兒奶粉中加入無菌小鼠生長必需的維生素，滿足了無菌動物無法在 腸道內合成部分維生素的需要，配方成分不復雜且營養全面；本發明所述無菌 小鼠人工喂養乳的制備方法簡便，制備過程中采用輻照消毒，大大降低了營養 成分的損失，制得的喂養乳形成有一定粘稠度、均勻的液體，無明顯顆粒，不 需碾磨，新生鼠吸吮容易，胃排空較快，不形成凝乳塊，用其喂養無菌小鼠， 小鼠成活率高，生長發育良好；本發明所述人工喂養乳成本較低，既可用于強 飼法，也可用于自然吸吮法。本發明的其他優點、目標，和特征在某種程度上將在隨后的說明書中進行 闡述，并且在某種程度上，基于對下文的考察研究對本領域技術人員而言將是 顯而易見的，或者可以從本發明的實踐中得到教導。本發明的目標和其他優點 可以通過下面的說明書和權利要求書來實現和獲得。
具體實施例方式
為了使本發明的目的、技術方案和優點更加清楚，下面將對本發明的優選 實施例進行詳細的描述。應當理解，優選實施例僅為了說明本發明，而不是為 了限制本發明的保護范圍。
實施例1、無菌小鼠人工喂養乳(102 ml)的制備
a. 對容器和濾器進行高溫高壓消毒，壓力為1.05 kg/cm2,溫度為121°C， 時間為30分鐘；
b. 嬰兒奶粉，以IOO g計，其組分含量為16.1 g蛋白質、28.7 g脂肪、 51. Og碳水化合物、1541. 0 IU維生素A、 258. OIU維生素D、 7. 0 IU維生素E、 27.0 Pg維生素Kl、 518.0 Pg維生素Bl、 781.0 Pg維生素B2、 340.0 Pg維生 素B6、 1.8 Pg維生素B12、 4445.0 Pg煙酸、39.6 Pg葉酸、2780.0 Pg泛酸、 12. 7(xg生物素、50. Omg維生素C、 72. Omg膽堿、407. Omg鈣、313. Omg磷、 68.0 mg4美、8.3 mg 4失、4.1 mg4辛、357.0 Pg銅、250.9 mg鈉、587.0 mg4甲、 543. Omg氯；取45. 0 g嬰兒奶粉，置經過步驟a消毒的塑料瓶中，加塞密封， 進行40 KGy Co"輻照，輻照完畢后，加入75 ml無菌水，加塞振搖，使嬰兒奶 粉充分溶解，再加水稀釋至100 ml，制得乳液，將所得乳液置溫度37。C培養箱 中，培養7天，取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；
c. 取7. 5 mg維生素Bl、 1. 75 mg維生素B2、 7. 5 mg維生素B6、 75. 0 Pg 維生素B12、 27. 5mg維生素C，加入5 ml蒸餾水使溶解，制得維生素溶液，將 所得維生素溶液過濾滅菌，置經過步驟a消毒的容器中，取樣作無菌檢查，取 檢查結果合格者，備用；
d. 將步驟b所得乳液100 ml和步驟c所得維生素溶液2 ml充分混合，制 得無菌小鼠人工喂養乳。
實施例2、無菌小鼠人工喂養乳(102 ml)的制備
a.對容器和濾器進行高溫高壓消毒，壓力為1.05 kg/cm2，溫度為121°C,時間為30分鐘；
b. 嬰兒奶粉，以100 g計，其組分含量為16.1 g蛋白質、28.7 g脂肪、 51. Og碳水化合物、1541. 0 IU維生素A、 258. OIU維生素D、 7. 0 IU維生素E、 27.0 lig維生素Kl、 518.0 Pg維生素Bl、 781.0 Pg維生素B2、 340.0 Pg維生 素B6、 1.8 ^g維生素B12、 4445.0 Pg煙酸、39.6 Pg葉酸、2780.0 Pg泛酸、 12. 7Pg生物素、50. Omg維生素C、 72. Omg膽堿、407. Omg鈣、313. Omg磷、 68. 0 mg鎂、8. 3 mg鐵、4. 1 mg鋅、357. 0 Pg銅、250. 9 mg鈉、587. 0 mg鉀、 543. Omg氯；取55. 0 g嬰兒奶粉，置經過步驟a消毒的塑料瓶中，加塞密封， 進行40 KGy Co"輻照，輻照完畢后，加入75 ml無菌水，加塞振搖，使嬰兒奶 粉充分溶解，再加水稀釋至IOO ml，制得乳液，將所得乳液置37。C培養箱中， 培養7天，取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；
c. 取12. 5 mg維生素Bl、 2. 25mg維生素B2、 12. 5mg維生素B6、 125. 0 Pg 維生素B12、 32. 5 mg維生素C,加入5 ml蒸餾水使溶解，制得維生素溶液，將 所得維生素溶液過濾滅菌，置經過步驟a消毒的容器中，取樣作無菌檢查，取 檢查結果合格者，備用；
d. 將步驟b所得乳液100 ml和步驟c所得維生素溶液2 ml充分混合，制 得無菌小鼠人工喂養乳。
實施例3、無菌小鼠人工喂養乳(102 ml)的制備
a. 對容器和濾器進行高溫高壓消毒，壓力為1.05 kg/cm2，溫度為121°C, 時間為30分鐘；
b. 嬰兒奶粉，以100 g計，其組分含量為16.1 g蛋白質、28.7 g脂肪、 51.0g碳水化合物、1541.0 IU維生素A、 258. OIU維生素D、 7. 0 IU維生素E、 27.0 Pg維生素Kl、 518.0 Pg維生素Bl、 781. G 維生素B2、 340. G 維生 素B6、 1.8 ^g維生素B12、 4445.0 煙酸、39.6 葉酸、2780.0 泛酸、 12. 7Pg生物素、50. Omg維生素C、 72. 0 mg膽堿、407. Omg鈣、313. Omg磷、 68. Omg鎂、8. 3mg鐵、4, lmg鋅、357. OPg銅、250. 9 mg鈉、587. 0 mg鉀、 543. Omg氯；取50. 0 g嬰兒奶粉，置經過步驟a消毒的塑料瓶中，加塞密封， 進行40 KGy Co"輻照，輻照完畢后，加入75 ml無菌水，加塞振搖，使嬰兒奶 粉充分溶解，再加水稀釋至IOO ml，制得乳液，將所得乳液置37。C培養箱中， 培養7天，取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；c. 取10. 0 mg維生素Bl、 2. 0mg維生素B2、 10. 0mg維生素B6、 100. 0 Pg 維生素B12、 30. 0 mg維生素C,加入5 ml蒸餾水使溶解，制得維生素溶液，將 所得維生素溶液過濾滅菌，置經過步驟a消毒的容器中，取樣作無菌檢查，取 檢查結果合格者，備用；
d. 將步驟b所得乳液100 ml和步驟c所得維生素溶液2 ml充分混合，制 得無菌小鼠人工喂養乳。
無菌小鼠人工喂養乳應用效果
方法采用本發明所述無菌小鼠人工喂養乳，喂養由SPF級KM孕鼠經剖腹 產手術而得的20只無菌KM小鼠，并與采用普通人工喂養乳喂養結果相比較； 所述普通人工喂養乳，以100 ml計，由下述原料組成24.0 g蛋白質、5.8 g 礦物質、39. Og碳水化合物、2100. 0 IU維生素A、 340. OIU維生素D、 720. Omg 磷，余量為水。
結果兩種人工喂養乳的喂養結果比較見表1。
表1、兩種人工喂養乳喂養的無菌小鼠的生理學特性對比
小鼠曰齡
人工喂養乳
本發明所述喂養乳
普通喂養乳
初生 3曰
4-6曰
體重1.4-1.5g，全身皮膚發紅體重1.5-1.6g,全身皮膚發紅
7-9曰
10 — 14曰
18-22曰
體重1.6-1.7g,皮膚由紅轉白，
頸部有不明顯;^皮毛長出
體重1. 9-2. lg，耳微張，四肢明 顯長長，喜四處爬動，頸部、眼 四周^皮毛明顯
體重2. 2-2. 5g,耳完全張開，被 毛明顯，體積及采食量增大，開 始長下門齒
體重2. 6-3. 0g,全身覆蓋被毛， 長出下門齒，目艮微張，能舔食
體重4. 5-7. 0g,長出上門齒，崢 眼，開始采食半固體飼料
體重1. 4-1.5g，皮膚未變白， 頸部出現下陷，體重未增反降
體重1.4-1.6g，開始長毛，但 體態明顯消瘦，排便快
體重1.6-1.8g，體重增長不快: 出現明顯營養不良癥狀
體質虛弱，全部死亡
死亡
25 - 30日體重9. 0-12. 0g，離乳
死亡存活情況成功離乳9只 離乳0只
離乳率 45% 0%
結論對比上表中無菌小鼠的生理學指標，可見采用本發明所述喂養乳喂 養取得良好的人工喂養效果，無菌小鼠成活率高，生長發育良好，表明本發明 所述喂養乳的原料配比合理，營養均衡，制備過程符合無菌小鼠的生理特征條 件，有利于無菌小鼠的生長發育。
盡管通過參照本發明的某些優選實施例，已經對本發明進行了描述，但本 領域的普通技術人員應當理解，可以在形式上和細節上對其作出各種各樣的改 變，而不偏離所附權利要求書所限定的本發明的精神和范圍。
權利要求
1. 一種無菌小鼠人工喂養乳，其特征在于以102ml計，由下述原料組成45.0-55.0g嬰兒奶粉、3.0-5.0mg維生素B1、0.7-0.9mg維生素B2、3.0-5.0mg維生素B6、30.0-50.0μg維生素B12、11.0-13.0mg維生素C，余量為水。
2、 根據權利要求1所述的無菌小鼠人工喂養乳，其特征在于以102 ml計， 由下述原料組成50. Og嬰兒奶粉、4. Omg維生素Bl、 0. 8mg維生素B2、 4.0 mg維生素B6、 40.0 Pg維生素B12、 12.0 mg維生素C，余量為水。
3、 根據權利要求1或2所述的無菌小鼠人工喂養乳，其特征在于所述的嬰 兒奶粉，以100g計，其組分含量為16. lg蛋白質、28. 7g脂肪、51. Og碳 水化合物、1541. 0 IU維生素A、 258. OIU維生素D、 7. 0 IU維生素E、 27. 0 Pg 維生素K1、 518. 0 Pg維生素Bl、 781. 0 Pg維生素B2、 340. 0 Pg維生素B6、 1.8 Pg維生素B12、 4445.0 煙酸、39.6 Hg葉酸、2780.0 Pg泛酸、12.7 Pg生 物素、50. 0 mg維生素C、 72. 0 mg膽堿、407. 0 mg 4丐、313. 0 mg磷、68. 0 mg 鎂、8. 3mg鐵、4. lmg鋅、357. Opg銅、250. 9 mg鈉、587. Omg鐘、543. 0 mg 氯。
4、 權利要求1或2所述的無菌小鼠人工喂養乳的制備方法，包括以下步驟a. 對容器及濾器進行高溫高壓消毒，壓力為1.05 kg/cm2,溫度為121°C， 時間為30分鐘；b. 按配方取嬰兒奶粉，置經過步驟a消毒的容器中，加塞密封，進行40KGy Co"輻照，輻照完畢后，加入75 ml無菌水，加塞振搖，使嬰兒奶粉充分溶解， 再加水稀釋至100ml，制得乳液，將所得乳液置溫度37。C培養箱中，培養7天， 取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；c. 按2. 5倍配方量取維生素B1、維生素B2、維生素B6、維生素B12和維生 素C,加入5ml蒸餾水使溶解，制得維生素溶液，將所得維生素溶液過濾滅菌， 置經過步驟a消毒的容器中，取樣作無菌檢查，取檢查結果合格者，備用；d. 將步驟b所得乳液100 ml與步驟c所得維生素溶液2 ml充分混合，制 得無菌小鼠人工喂養乳。
全文摘要
本發明公開了一種無菌小鼠人工喂養乳及其制備方法，該喂養乳以102ml計，由下述原料組成45.0-55.0g嬰兒奶粉、3.0-5.0mg維生素B1、0.7-0.9mg維生素B2、3.0-5.0mg維生素B6、30.0-50.0μg維生素B12、11.0-13.0mg維生素C，余量為水；本發明喂養乳的制備方法包括以下步驟取嬰兒奶粉，經輻照消毒后溶解于無菌水中制得乳液，再取維生素B1、B2、B6、B12及C，加水制成維生素溶液，經過濾除菌后，按比例與乳液充分混合，制得無菌小鼠人工喂養乳；本發明無菌小鼠人工喂養乳營養結構合理，制備工藝簡便，提高了人工喂養無菌小鼠的生長發育水平和成活率，降低了人工喂養成本。
文檔編號A23C9/152GK101283704SQ200810069729
公開日2008年10月15日 申請日期2008年5月23日 優先權日2008年5月23日
發明者歡 唐, 曾本華, 李文霞, 榮 牛, 靜 袁, 泓 魏 申請人:中國人民解放軍第三軍醫大學