植物促生菌、含有植物促生菌的微生物制劑及其制備方法

專利名稱：：植物促生菌、含有植物促生菌的微生物制劑及其制備方法
技術領域：
：本發明關于一種微生物肥料，具體地說是一種植物促生菌以及微生物制劑，尤其是含有多功能植物促生菌成分的生物制劑。體絲微生物肥料是指一類含有活微生物的特定制劑，應用于農業生產中能夠獲得特定的肥料效應。微生物肥料可分為兩類，一類是通過其中所含微生物的生命活動，增加了植物營養元素的供應量，改善植物的營養狀況，進而增加產量，代表品種是菌肥；另一類是廣義的微生物肥料，其制品雖然也是通過其中所含的微生物生命活動作用使作物增產，但它不僅僅限于提高植物營養元素的供應水平，還包括了它們所產生的次生代謝物質，如激素類物質對植物的刺激作用，促進植物對營養元素的吸收利用，或者能夠拮抗某些病原微生物的致病作用，減輕病蟲害而使作物的產量增加。微生物肥料的種類很多，如果按其制品中特定的微生物種類可分為細菌肥料(如根瘤菌肥、固氮菌肥)、放線菌肥(如抗生菌類、5406)、真菌類肥料(如菌根真菌)等；按其作用機理又可分為根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌類肥料、解鉀菌類肥料等；按其制品中微生物的種類又可分為單純的微生物肥料和復合微生物肥料。微生物肥料的功效主要是與營養元素的來源和有效性有關，或與作物吸收營養、水分和抗病有關，概括起來有以下幾個方面l.增加土壤肥力，這是微生物肥料的主要功效之一如各種自生、聯合、共生的固氮微生物肥料,可以增加土壤中的氮素來源，多種解磷、解鉀微生物的應用,可以將土壤中難溶的磷、鉀分解出來，從而能為作物吸收利用。2.產生植物激素類物質刺激作物生長，許多用作微生物肥料的微生物可產生植物激素類物質，能刺激和調節作物生長，使植物生長健壯，營養狀況得到改善。3.對有害微生物的生物防治作用由于在作物根部接種微生物肥料，微生物在作物根部大量生長繁殖，作為作物根際的優勢菌，限制了其它病原微生物的繁殖機會。同時有的微生物對病原微生物還具有拮抗作用，起到了減輕作物病害的功效。我國微生物肥料的研究、應用和國際上一樣，是從豆科植物上應用根瘤菌接種劑開始的，起初只有大豆和花生根瘤菌劑。20世紀50年代，從原蘇聯引進自生固氮菌、磷細菌和硅酸鹽細菌劑，稱為細菌肥料；20世紀60年代又推廣使用放線菌制成的"5406"抗生菌肥料和固氮藍綠藻肥;20世紀7080年代中期，又開始研究VA菌根，以改善植物磷素營養條件和提高水分利用率；20世紀80年代中期至90年代，農業生產中又相繼應用聯合固氮菌和生物鉀肥作為拌種劑；近幾年來又推廣應用由固氮菌、磷細菌、鉀細菌和有機肥復合制成的生物肥料做基肥施用。由此可見，我國微生物肥料種類很多，主要有以下種類根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷細菌肥料、硅酸鹽細菌肥料、增產菌肥料、復合微生物肥料。綜上所述，在農業生產中，仍然需要開發出同時可以促進植物生長，提高肥效和提高植物的抗逆能力如抗干旱、鹽堿、藥殘(主要針對土壤沙漠化、鹽堿化以及農藥殘留污染的生物治理和生態修復)能力的優質高效的微生物制劑。
發明內容本發明以植物促生菌為主要功能成分，研發出一種植物促生菌和含有該植物促生菌的微生物制劑(也可稱為生物制劑)，該植物促生菌為尸w"Amowwp幼'^UW4,該生物制劑為一種利用優篩訓化多功能植物促生菌UW4生產的生物制劑，用于農業生產可以促進植物生長，提高產量，提高肥效，提高植物的抗逆能力。本發明的目的在于提供了植物促生菌尸se"fifowo"wUW4，該促生菌可以促進植物吸收營養、調節植物生長以及增強植物根系對營養及空間的競爭。本發明的目的還在于提供一種含有植物促生菌的生物制劑，該生物制劑主要用于農業，可以達到促進植物生長，提高產量，提高肥效，節省肥料和提高植物的抗逆能力的效果。本發明的目的還在于提供一種植物促生菌UW4的獲得方法，通過該方法可以得到促進植物吸收營養的植物促生菌。本發明的目的還在于提供一種制備含有植物促生菌的生物制劑的方法，采用該方法生產的生物制劑可以達到促進植物生長，提高產量，提高肥效，節省肥料和提高植物的抗逆能力的效果。本發明的目的還在于提供一種含有植物促生菌的生物制劑在農業上促進植物生長方面的應用。為了達到上述目的和效果，本發明提供了一種植物促生菌/^e"Amo"m/^^foUW4，在美國農業研究菌種保藏中心保藏，保藏編號為NRRLB-50193，保藏日為2008年6月9曰。該促生菌具有促進作物生長，提高作物營養，增加肥料效果，可以提高抗旱、澇，抗鹽堿能力，是促進作物根際解毒微生物生長的多功能菌菌種。美國農業研究菌種保藏中心位于伊利諾伊州皮契里亞，是由美國農業部農業研究中心支持的政府性質的菌種保藏中心。主要從事農業、應用微生物、基因工程、工業微生物、菌種保藏方法、環境保護、分子生物學、食品安全、普通微生物、分類學的研究。該中心保藏有細菌10500株，真菌45000株，酵母14500株，放線菌9500株。另外，該中心還提供細菌、真菌、酵母的鑒定服務。美國農業研究菌種保藏中心英文全稱AgriculturalResearchServiceCultureCollection,簡稱NRRL。本發明的提供的植物促生菌UW4已經保藏在美國農業硏究菌種保藏中心，8保藏編號為NRRLB-50193,保藏日為2008年6月9日；其拉丁名為尸sei^owo"os/i^zWaUW4，為i^et^fowowospwfz'c^菌種的小禾中UW4。本發明的植物促生菌UW4與植物根際土壤中其他菌的分離是基于UW4含有ACC(l-氨基環丙烷-l-羧酸)脫氨酶，可利用ACC的氨基為氮源分離制備植物促生菌UW4的選擇性平板培養基。把含有土壤微生物的浸出液接種在選擇性平板培養基上，所生長的菌落，即為含有ACC脫氨酶的UW4，其具有對植物的促生作用(Penrose&Glick，2003PhysiologiaPlantarum118pp10-15)。該植物促生菌UW4的制備方法包括(1).取l克植物根際土壤，浸入50mlPAF提取溶液中，再置入250ml容器中；該PAF提取溶液為含有朊間質蛋白胨、干酪素水解物、MgS04、K2HP04和甘油的組合物溶液；(2).將上述含有50mlPAF提取溶液的三角瓶在25^h2。C下震蕩；(3).取lml上述步驟(2)震蕩后的PAF提取溶液，再溶入含有50mlPAF提取溶液的250ml容器中，在25;fc2"C下，震蕩；(4).取lml上述步驟(3)得到的PAF提取溶液，溶入含有50mlDF鹽溶液的250ml容器中，在25;b2X:下震蕩；該DF鹽溶液為含有磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、葡糖酸、檸檬酸、硫酸亞鐵、硼酸、硫酸錳、硫酸鐸、硫酸銅、三氧化鉬和硫酸銨的溶液；(5).取lml上述步驟(4)得到的提取溶液，再溶入50ml不含硫酸銨但含有3.0mMl-氨基環丙烷-l-羧酸的上述DF鹽溶液的容器中，在25力2"C震蕩；(6).取0.01ml上述步驟(5)得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DF鹽的平板凝膠培養基上，在30去2'C培養2-4天；(7).取步驟(6)的培養基上生長的菌落，其為植物促生菌/^e^fo,"氾pwWaUW4的菌種；(8).取上述步驟7得到的菌種，接種在胰蛋白胨大豆肉湯培養基中，在25;h2"C溫度下培養震蕩24小時，得到培養溶液；(9).在4匸下離心步驟(8)的培養溶液；(10).用DF液沖洗步驟(9)離心沉淀的細胞；該DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鎂；(11).在4"C下再離心步驟(10)得到的DF細胞溶液；(12).用DF鹽液溶解離心沉淀的細胞，加入3.0mM的ACC，得到含菌細胞DF鹽溶液；(13).步驟(12)得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25;fc2"C下培養、震蕩；(14).在4"離心步驟(13)得到的DF培養溶液，得到離心沉淀的細胞；(15).用10mlDF鹽液溶解步驟(13)得到的離心沉淀的細胞得到含菌細胞DF鹽溶液；(16).將步驟(15)得到的含菌細胞DF鹽溶液于28;h2T:接種發酵，得到工業發酵后的植物促生菌UW4的菌液；該植物促生菌UW4的菌液中UW4的菌數達到20-30億/ml。在經過上述步驟(1)-(6)的分離后一般可得到的一個或者多個單一菌落，每個特定形態的菌落在通過鑒定以前，可暫時認為其是單一的種或小種，若存在多個菌落，UW4是其中之一。本發明的發明人利用16srRNA基因程序的方法來鑒定UW4的存在并將其分離(可再與基因庫或者其他權威認證的i^ew&wo"w;^"Ja種的基因序列進行比對)。16srRNA基因程序的方法是本領域公知方法，16srRNA基因程序的具體方法可參見2006年4月1日科學出版社出版的《堆肥環境生物與控制》以及收載于2005年7月19日的《環境分子生物學技術》實驗報告"用16Si:RNA基因文庫法鑒定土壤微生物(土壤總DNA提取)"一文。上述鑒定方法即可將本發明上述步驟(1)-(6)得到的與土壤中的其他菌分離出來的植物促生菌UW4確定為Pseudomonasputida屬種。從形態學上分析，UW4是粉色到桃紅色的菌落群，因此，將UW4與其他菌借助16srRNA基因程序的方法來鑒定和分離出來后，再憑借形態學的菌落特征，即可將UW4單獨分離開來。PseudomonasputidaUW4屬于革蘭氏陰性菌，為土壤中分離出的桿狀的細菌，16srRNA基因程序分析鑒定后，歸于Pseudomonasputida屬種(P.fluorescensgroup)。其為粉色到桃紅色的菌落群。也可再經過本領域常規的檢測ACC脫氨酶的方法，鑒定上述步驟7得到的菌為本發明的植物促生菌UW4，該UW4中含有ACC脫氨酶。上述的植物根際土壤為不受地理位置限制的任何區域的植物根際土壤。本發明還提供了上述植物促生菌UW4在促進植物生長方面的應用。本發明還提供了一種含有植物促生菌的生物制劑，該生物制劑含有復合載體材料和植物促生菌的菌液(0.05ml達到2億菌數)，其中，該植物促生菌的菌液為含有植物促生菌Ae"^w70"m/n^'c/aUW4的溶液，該復合載體材料包括有機質、腐殖酸、腐熟有機質、絡合置換劑、包埋材料，上述復合載體材料和菌液的比例為植物促生菌UW4的菌數至少1億/每克復合載體材料。上述生物制劑中植物促生菌的菌數一般達到至少1-20億/每克復合載體材料，優選每克復合載體材料菌數為2億或者2億以上，該生物制劑更優選為1-20億菌數/每克復合載體材料；植物促生菌的菌液優選由Aet^omow^/^ft'^faUW4組成，UW4已經在美國農業研究菌種保藏中心保藏，尸je^owo"oyUW4在NRRL(美國農業研究菌種保藏中心)的保藏編號為NRRLB-50193;該菌液為發酵菌液，一般lml菌液中含有的植物促生菌的菌數至少為10億，例如，可以含有20億、40億、60億、80億、100億、甚至可以達到200億或者更高。本發明的含有植物促生菌UW4的生物制劑中，所含有的復合載體材料包括1535%的有機質、1232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質、522%的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料，以上重量百分比均以復合載體材料的重量為100%計；所含有的有機質優選為草炭；所述的復合載體材料還優選包括828%的成粒劑。上述生物制劑主要用于農業，可與作物根共生，以ACC(氨基環丙烷朔酸)為生存氮源可以達到促進植物生長，提高產量，提高肥效，節省肥料和提高植物的抗逆能力的效果。上述生物制劑的產品若為顆粒狀，則該生物制劑的組成中還含有成粒劑，目的是制成顆粒狀的微生物肥料。本發明的生物制劑中的復合載體材料包括1535%的有機質、232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質或腐殖質、828%的成粒劑、522%的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料，以上重量百分比均以復合載體材料的重量為100%計，并且以上各組分之和滿足100%。本發明所述的有機質包括草炭(或稱草木灰、草木炭)。所述的腐植酸(HumicAcid，簡寫HA)是動植物遺骸，主要是植物的遺骸，經過微生物的分解和轉化，以及一系列的化學過程和積累起來的一類有機物質。其組成成分是由芳香族及其多種官能團構成的高分子有機酸，具有良好的生理活性和吸收、絡合、交換等功能，廣泛存在于土壤、湖泊、河流、海洋以及泥炭(又稱草炭)、褐煤、風化煤中，本發明主要采用的是土壤腐植酸、水體腐植酸和煤炭腐植酸。所述的腐熟有機質是經過腐熟的農業上應用的有機質材料，所謂腐熟是將備足的有機質材料充分混合后平攤開，保持一定厚度(一般40厘米左右)，將需要的發酵菌(例如有機質原料發酵菌=5000:l)分成3分以上，與少量有機質原料拌勻后，再撒到已混合的有機質原料上，并做充分攪拌；將一定量的尿素溶于水中均勻拌入已混合的有機質原料中，使有機質原料的含水量達到60%左右；以上操作完成后進行自然堆放(堆的高度一般在80-100厘米，寬度應在100-150厘米，長度不限)，或自然狀態裝入袋中，溫度由低到高再降到常溫，測定水分含量適宜即證明有機質原料已充分腐熟，即為腐熟有機質。所述的本發明的生物制劑中還可以包括腐殖質，其是指新鮮有機質經過微生物分解轉化所形成的黑色膠體物質，腐殖質是一種有機膠體，吸水保肥能力很強，吸水率高達400-600%(—般粘粒的吸水率為50-60%),而保肥能力是粘粒的6-10倍，腐殖質既含有氮、磷、鉀、疏、鈣等大量元素，還有微量元素，經微生物分解可以釋放出來供作物吸收利用；另外，腐殖質是形成團粒結構的良好膠結劑，可以提高粘重土壤的疏松度和通氣性，改變砂土的松散狀態。同時，由于它的顏色較深，有利吸收陽光，提高土壤溫度，促進土壤微生物的活動，為微生物活動提供了豐富的養分和能量，又能調節土壤酸堿反應，因而促進土壤養分的轉化，而且，其在分解過程中產生的腐殖酸、有機酸、維生素及一些激素，對作物生育有良好的促進作用，可以增強呼吸和對養分的吸收，促進細胞分裂，從而加速根系和地上部分的生長。一般情況下，也可以將其劃歸為腐植酸中。所述的成粒劑英文名稱是graphiteaggregate,是制成顆粒劑有機或無機或者有機無機復合肥料的常規輔料，屬于本領域公知的輔料。所述的絡合置換劑包括有機絡合劑，例如酶解蛋白(或稱酶解消化蛋白)或者無機置換劑，例如硫酸鈣，或者二者的混合，其中，若絡合置換劑為有機絡合劑和無機置換劑的混合物，二者比例可以為51:1，即51重量份的有機絡合劑和1份的無機置換劑共同組成本發明的絡合置換劑。所述的包埋材料為有機大分子包埋材料，如甲基纖維素。本發明的生物制劑為含有植物促生菌的微生物肥料(微生物制劑)，具有以下特征和優勢第一，優良的菌種植物促生菌戶Sew/o/7KWM/W"ofeUW4是產生植物生長激素的根際微生物，有很好的溶解性、利用率、轉化和儲存營養功效，對改善作物營養條件，提高化肥利用率和化肥生物有效率的效果十分明顯。第二，本發明的復合載體材料形成菌劑利用了廉價有機和無機復合載體材料形成生物菌劑的固體產品，方便于儲存，銷售，運輸和使用，保證菌種的數量和活性。在本發明的優選實施例中，所述的生物制劑的組成包括2030%的草炭、2025%的腐殖酸、2025%的腐熟有機質、1520%的成粒劑、1015°/。的絡合置換劑(其中有機絡合劑酶解(消化)蛋白為712%，無機置換劑硫酸鈣38%)、0.05%的有機大分子包埋材料(如甲基纖維素)。上述組分之和應該滿足100%。其中，每克復合載體材料加發酵菌液(例如可以是0.030.08ml)達到15億菌數，制粒后即可得到本發明的含有植物促生菌的生物制劑。本發明利用優篩訓化多功能植物促生菌P^Womo"oy，^aUW4生產生物制劑，用于農業生產中可以促進植物生長(提高產量)，提高肥效(節肥)和提高植物的抗逆能力如干旱、鹽堿、藥殘(土壤沙漠化，鹽堿化以及農藥殘留污染的治理和修復)。這種新的生物制劑和微生物肥料在作用機理上有原則上的不同，本發明利用植物根際促生菌，可大幅度地提高植物的抗逆性，促進作物生長，增加產量。本發明的植物促生菌特殊功能體現在以下幾個方面1.促進植物營養功能。除了目前菌肥的功能溶磷，固氮外，本發明的植物促生菌可以生產嗜鐵素(Siderophore)嗜鐵和其他植物難以吸收的微量元素，提高作物營養。地球表面礦物含鐵豐富，但土壤中能夠直接為植物和微生物利用的鐵卻不多。土壤中鐵的主要以三價鐵(Fe,狀態存在，在pH為7.4時其溶解度為10"8M，此濃度下的鐵一般無法滿足土壤微生物繁衍和植物生長發育的需要。然而，這些植物促生菌可分泌一種專門結合鐵的小分子蛋白可從土壤中收集鐵，這種物質被稱之為嗜鐵素，鐵一旦于嗜鐵素相結合則形成可溶性"鐵-嗜鐵素"復合體，并可通過植物和微生物細胞膜的特殊通道進入生物體內，氧化鐵在體內還原后被釋放并參與生物代謝活動。2.植物生長調節功能。植物組織的分化生長均依賴與其生物化學信號-植物激素的調節，這些激素可以來自于植物體內的自身分泌，稱之為內源激素；亦可以來自于體外的其他來源，稱之為外源激素。植物激素主要分為生長素、赤霉素和乙烯三大類，這些促生菌可通過干擾植物的內源激素或提供外源激素而影響作物生長發育，植物促生菌主要通過調節植物生長素和乙烯水平來達到促進作物生長發育目的。1)植物促生菌利用植物根際的分泌物質，包括對植物生長有害的分泌物，轉化有害的分泌物為對植物生長有利的生長激素如吲哚-3-乙酸(IAA)，提供給植物，促進植物生長發育。促進植物根系生長是植物促生菌的一個主要特征。植物根圍的促生菌可合成吲哚3-乙酸并提供給植物根系，成為促進根系生長的外源吲哚3-乙酸。研究表明，低水平的吲哚3-乙酸(10-9-10—12M)可促進植物初生根生長，而更高濃度的吲哚3-乙酸可促進植物次生根和不定根生長。無論初生根還是次生根與不定根的快速生長發育，都將使植物幼苗的根系吸收系統得到迅速的建立，從而使植物幼苗快速獲得定植和同化環境的能力。2)植物促生菌調節和控制植物體內的植物生長抑制物質乙稀的產生。乙烯的正常生理功能是協助打破種子休眠、促進植物成熟和衰老。植物在一生大部分生長發育階段只需很低水平的的乙烯，只是在接近成熟和衰老階段才大量合成乙烯。然而，當植物在生長發育階段如遇不良環境因素如干旱，高鹽，有毒污染物、機械損傷或病蟲害侵襲時會產生大量乙烯作為植物對環境的一種生理應激反應。乙烯的過量產生將導致植物生長發育受阻或死亡。在大多數農作物生產中大量乙烯的產生將導致農業生產遭受嚴重的經濟損失。高等植物體內乙烯的合成途徑為ACC(l-氨基環丙烷-l-羧酸)，經ACC氧化酶氧化后形成乙烯和氫氰酸。這種植物促生菌(UW4)可分泌ACC脫氨酶。這種酶可將植物乙烯前體ACC分解成為a-丁酮酸和氨。通過ACC脫氨酶,植物促生菌將ACC作為N源利用，從而可大大減少了植物有害乙烯的產生，促進植物的生長發育。3.這種植物促生菌與植物根系的共生形成很強的營養及空間競爭力。這種植物促生菌與植物根系的共生關系在植物根或種子周圍具有很強的營養及空間競爭能力，并通過此方式抑制病原菌的繁衍和發展。競爭機制有1.合成抗生素有效地抑制周圍其他微生物的繁衍。2.產生一系列低分子代謝物抑制病原真菌的生存和繁衍。3.合成產生抗真菌酶類如幾丁質酶，(3-1,3葡聚酶，蛋白酶，S旨肪酶等來消滅或抑制真菌。4.通過植物促生菌的處理誘導植物系統抗病性能。本發明的生物制劑的具體指標如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>嗜鐵素測定方法嗜鐵素測定是基于嗜鐵素對鐵的高度親和性的原理。利用含有S/Fe3+的染料HDTMA(hexadecyltrimethylammoniumbromide),當HDTMA中Fe"被更高度親和性的化合物置換后，HDTMA的藍色會變為桔黃色。當量的HDTMA加入定量的菌細胞溶液中，20hr后，利用分光儀檢測630nm光吸收值變化，用當量的HDTMA的標準曲線計算HDTMA中的Fe"皮置換的當量，是定量菌細胞可生產嗜鐵素的量(B.Schwyn&J.B.Neilands，1987Anal.Biochem.l60pp47-56)。IAA測定方法促生菌細胞含有IAA合成酶，可利用L-色氨酸為底物合成IAA。IAA的測定是利用L-色氨酸為底物促生IAA合成。當量的L-色氨酸溶液加入定量的菌細胞溶液中，20分鐘后，把菌細胞濾出，利用分光儀檢測上清液在535nm光區吸收值的變化，利用IAA的當量標準曲線，計算出IAA產生的當量(C丄.Patten&B.R.Glick，2002AppliedEnviron.Microbiol.68-8pp3795-3801)。ACC脫氨酶測定方法促生菌細胞含有l-氨基環丙垸-l-羧酸的脫氨酶，分解l-氨基環丙垸-l-羧酸為氨基和丁酮酸。定量蛋白濃度的細胞溶液加入當量的ACC溶液中，20分鐘后，加入2.4-DNP停止反應，利用分光儀檢測在540nm光區吸收值的變化，利用的丁酮酸當量標準曲線，計算出丁酮酸產生的當量，而得知ACC脫氨酶的活性(D.M.Penrose&B.R.Glide,2003Physio.Plant118pp10-15)。本發明還提供了植物促生菌Aew^w70"w/^WaUW4的植物促生菌的菌液以及含有植物促生菌尸ww^w70"wpwri^UW4的菌液的生物制劑的獲得方法，該方法包括植物促生菌的菌液的制備和生物制劑的制備，該植物促生菌的菌液為含有Ae^fomo"mp"^/"UW4的溶液，該生物制劑為包括植物促生菌UW4的菌液和復合載體材料(包括有機質、腐殖酸、腐熟有機質、絡合置換劑、包埋材料中任意兩種或兩種以上的組合)的混合物，上述復合載體材料和植物促生菌的菌液的比例為植物促生菌UW4的菌數至少1億/每克復合載體材料。本發明的生物制劑的制備方法包括將含有植物促生菌Ae^fomo"^;w^^UW4的溶液，與有機質、腐殖酸、腐熟有機質、絡合置換劑以及包埋材料混合，再加入成粒劑，成粒，干燥，即得。上述生物制劑的制備方法其實質上包括植物促生菌的菌液的制備以及其后的生物制劑的制備兩部分，促生菌的分離是基于促生菌含有ACC(l-氨基環丙垸-l-羧酸)脫氨酶，可利用ACC的氨基為氮源制備促生菌的選擇性平板培養基。把含有土壤微生物的浸出液接種在選擇性平板培養基上，所生長的菌落，即為含有ACC脫氨酶的本發明的植物促生菌，其具有對植物的促生作用。在本發明的優選實施例中，具體的植物促生菌的獲得方法以及本發明的含有植物促生菌的菌液的生物制劑的制備方法步驟如下1.取l克植物根際土壤浸入50ml提取溶液(PAF)中，置入250ml三角瓶中；其中該提取溶液(PAF)中含有10克朊間質蛋白胨(proteosepeptone),10克干酪素水解物(caseinhydrolysate)，1.5克MgS04，1.5克K2HP04，10ml甘油(glycerol);以上組成以l-100mlPAF計，例如可以是以1、10、50或者lOOmlPAF溶液計；2.將上述含有50ml提取溶液的250ml三角瓶在25;h2。C室溫下，200rpm，震蕩24小時；3.取lml上述步驟2震蕩后的提取溶液,再溶入含有50ml提取溶液(PAF)的250ml三角瓶中，在25;t2。C室溫下，200rpm，震蕩24小時；4.取1ml上述步驟3得到的提取溶液，溶入含有50mlDFsalt溶液的250ml三角瓶中，在25;t2匸室溫下，200rpm，震蕩24小時；其中，DFsalt溶液含有4.0gK2HPO4，6.0gNa2HPO4，0.2gMgSO4,，2.0g葡萄糖(glucose),2.0g葡糖酸(gluconicacid)，2.0g檸檬酸(citricacid),1mgFeSO4,0.01mgH3B03,1mgMnS04,0.2mgZnS04，0.1mgCuS04，0.01mgMo03,，pH7.2，2.0g(4;以上組成以l-100mlDF溶液計，例如可以是以l、10、50或者100mlDF溶液計；5.取lml上述步驟4得到的提取溶液，再溶入50ml不含有2.0g(NH4)2SO4.含有3.0mMACC的上述DFsalt溶液，該溶液裝在三角瓶中，在25;h2。C室溫下，200rpm，震蕩24小時；6.取0.01ml上述步驟5得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DFsalt平板凝膠培養基上，在30pt:室溫培養3天；7.取步驟6的培養基上生長的單一的菌落，即為本發明的植物促生菌尸"W(i9/no"ayUW4。上述方法即可將本發明的植物促生菌UW4與土壤中的其他菌分離。采用16srRNA基因程序的方法鑒定其為i^ez^omoww屬種的小種。經過本領域常規的檢測ACC脫氨酶的方法，即可鑒定上述步驟7得到的菌為本發明的單一菌——植物促生菌UW4，該UW4含有ACC脫氨酶。上述的植物根際土壤為不受地理位置限制的任何區域的植物根際土壤。UW4可于以下步驟中接種在Trypticsoybeanbroth(TSB)培養溶液中。胰蛋白胨大豆肉湯培養基(TSB):胰蛋白胨1.5%(g/100ml)，大豆蛋白胨0.5%(g/100ml)，氯化鈉0.5%(g/100ml)，用蒸餾水配制而成，調節pH為7.2±0.2，經12rC壓力蒸汽滅菌后使用。促生菌的制備分為兩步ACC脫氨酶的誘導和生產用菌液的制備。在菌液發酵生產以前，準備好的種菌接種在誘導的培養基中，發酵誘導24小時，誘導的培養基是由DF培養基和ACC組成。經過誘導種菌接種在生產發酵胰蛋白胨大豆肉湯培養基(Trypticsoybeanbroth(TSB，DifcoLaboratoies)培養基)中震蕩發酵24小時，28^2。C，200r.p.m，發酵菌液中菌數達到20-30億/毫升(Penrose&Glick,2003PhysiologiaPlantarum118pp10-15)。方法步驟l.取上述分離步驟7得到的單一菌種，接種20ml上述胰蛋白胨大豆肉湯培養基(Trypticsoybeanbroth(TSB))培養溶液，在25;t2。C室溫培養震蕩24小時；2之后，在4。C下離心(TSB)培養溶液，畫rpm，IO分鐘;3.用10mlDF液洗離心沉淀的細胞；該DF液主要用于棒狀桿菌原生質體制備和融合，其主要成分是蔗糖0.25M,琥珀酸0.25M,EDTA0.001M,K2HPO40.02M,KH2PO40.11M，MgCl20.01M;4.在4。C下再離心DF細胞溶液，8000rpm，5分鐘；5.用10mlDF鹽液溶離心沉淀的細胞，加入3.0mMACC;6.步驟5得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25;b2'C室溫培養，震蕩24小時；7.在4。C下離心步驟6得到的DF培養溶液，8000rpm，10分鐘；8.用10mlDF鹽液溶解步驟7的離心沉淀的細胞；9.得到含菌細胞DF鹽溶液；其可加入15%甘油在-80°0保存，用于接種發酵，接種發酵2財2t:，200r.p.m，24小時，發酵菌液中菌數可達20-30億廣升。對于不同微生物，原生質體的高滲穩定液組成也是不同的。如細菌的穩定液常用SMM液(用于芽孢桿菌原生質體制備和融合，其主要成分是蔗糖0.5M,順丁烯二酸0.02M,MgCl20.02M)，而本發明的促生菌則需要采用DF溶液。本發明還提供了含有植物促生菌UW4的生物制劑的制備方法，該方法包括以下步驟將上述得到的工業發酵后的菌液(UW4的菌數可達到20-30億廣升)與1535%的有機質、1232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質、522。％的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料混合，再加入828%的成粒劑，圓盤造粒機成粒，干燥(優選風干的干燥方式)，即可得到本發明的顆粒狀的微生物肥料。具體包括(1).取1克植物根際土壤，浸入50mlPAF提取溶液中，再置入250ml容器中；該PAF提取溶液為含有朊間質蛋白胨、干酪素水解物、MgS04、K2HP04和甘油的組合物溶液；(2).將上述含有50mlPAF提取溶液的三角瓶在25力2。C下震蕩；(3).取lml上述步驟(2)震蕩后的PAF提取溶液，再溶入含有50mlPAF提取溶液的250ml容器中，在25去2'C下，震蕩；(4).取lml上述步驟(3)得到的PAF提取溶液，溶入含有50mlDF鹽溶液的250ml容器中，在25-'C下震蕩；該DF鹽溶液為含有磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、葡糖酸、檸檬酸、硫酸亞鐵、硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、三氧化鉬和硫酸銨的溶液；(5).取lml上述步驟(4)得到的提取溶液，再溶入50ml不含有硫酸銨但含有3.0mMl-氨基環丙烷-l-羧酸的上述DF鹽溶液的容器中，25主2。C下震蕩；(6).取0.01ml上述步驟(5)得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DF鹽的平板凝膠培養基上，在30;h2。C培養2-4天；(7).取步驟(6)的培養基上生長的菌落，其為植物促生菌尸"z^o/no"cw/wfefeUW4的菌種；(8).取上述步驟7得到的菌種，接種在胰蛋白胨大豆肉湯培養基中，在25p。C溫度下培養震蕩24小時，得到培養溶液；(9).在4'C下離心步驟(8)的培養溶液；(10).用DF液沖洗步驟(9)離心沉淀的細胞；該DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鎂；(11).在4'C下再離心步驟(10)得到的DF細胞溶液；(12).用DF鹽液溶解離心沉淀的細胞，加入3.0mM的ACC，得到含菌細胞DF鹽溶液；(13).步驟(12)得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25主2'C下培養、震蕩；(14).在4'C離心步驟(13)得到的DF培養溶液，得到離心沉淀的細胞；(15).用10mlDF鹽液溶解步驟(13)得到的離心沉淀的細胞得到含菌細胞DF鹽溶液；(16).將步驟(15)得到的含菌細胞DF鹽溶液于28;h2'C接種發酵，得到工業發酵后的植物促生菌UW4的菌液；該植物促生菌UW4的菌液中UW4的菌數達到20-30億/ml;(17).將步驟(16)得到的植物促生菌UW4的菌液與1535%的有機質、1232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質、522%的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料混合，再加入828%的成粒劑，造粒，干燥，得到生物制劑。本發明還提供上述植物促生菌UW4在制備促進植物生長的制劑上的應用。本發明還提供了上述生物制劑在農業上的應用，尤其是對于促進植物生長方面的作用。本發明的植物促生菌UW4以及含有該植物促生菌UW4的生物制劑可減少30%化肥使用，并可以保持和提高作物的產量；可減少50%的抗病農藥使用量，而且增產效果好于100°/。化學農藥；可以明顯的提高植物抗鹽堿能力和鹽堿土改良的功能、可提高作物抗鹽堿程度0.3。/。鹽份(導電率(ECe):5dS/m);可以恢復鹽堿化土地的植被覆蓋，恢復因鹽堿對作物的影響而造成的減產，修復鹽堿土地；恢復因藥殘對作物的影響而造成的減產；可大幅度增加產量，提高作物抗藥殘的能力，促進植物根際解毒微生物的生長和土壤的降殘解毒的功能。本發明的生物制劑做為作物抗旱澇災害的生理調節劑，提高了作物在極端的逆環境下的適宜能力，有明顯的提高植物抗旱澇災害的能力，而減少因旱澇災害的影響而造成的減產。本發明的有益效果根據上述方案，利用優篩訓化多功能植物促生菌/^"cb膨/7M聲&WsUW4生產生物制劑，用于農業生產可以促進植物生長(提高產量)，提高肥效(節肥)和提高植物的抗逆能力如旱澇災害，鹽堿，藥殘(土壤沙漠化，鹽堿化以及農藥殘留污染的治理和修復)，這種細菌的特殊功能在以下幾個方面對作物生產，可達到如下有益效果一，提高作物營養和肥料增效的功能利用植物促生菌UW4生產生長素IAA功能促進植物根系生長以促進并調節作物的營養功能，因此，利用植物促生菌(UW4)生產的生物制劑可用于農業生產做化肥增效劑。除了他們的良好溶磷，固氮功能外，這種菌可以嗜鐵和其他植物難以吸收的微量元素，提高作物營養。促生菌生產生長素IAA可促進植物初生根和次生根與不定根的快速生長發育，使植物幼苗的根系吸收系統得到迅速的建立，從而使植物幼苗快速獲得定植和同化環境中各種營養元素的能力。利用植物促生菌UW4生產的生物制劑做化肥增效劑畝用量2公斤或10%化肥用量與化肥如二銨、尿素施用，可減少化肥施量30%，達到或超過100%化肥用量的作物產量和生物量。二，提高作物抗鹽堿和鹽堿土改良的功能利用植物促生菌UW4調節和控制植物體內乙稀的產生，做鹽堿地土壤改良劑，提高作物對鹽堿的抵抗能力，促進作物生長，增加產量。當植物生長在鹽堿土地上，會生產大量乙烯，乙烯的過量產生抑制植物生長和發育。在農作物生產中大量乙烯的產生將導致農業生產遭受嚴重的經濟損失。而接種植物促生菌的植物，體內乙烯的合成途徑會被植物促生菌分泌1-氨基環丙烷-卜羧酸(ACC)脫氨酶將植物乙烯前體ACC分解成為丁酮酸和氨。通過ACC脫氨酶，植物促生菌將ACC作為N源利用，從而可大大減少了植物生長抑制物資乙烯的產生，促進植物在鹽堿條件下的生長發育，提高植物抗鹽堿能力，促進作物生長，增加產量。利用植物促生菌UW4生產鹽堿地土壤改良劑，有明顯提高植物抗鹽堿能力，可提高作物抗鹽堿程度0.3%鹽份，導電率(ECe):5dS/m。本改良劑可達到如下效果l)在鹽堿化無植物覆蓋的土地上，可減輕鹽堿對作物的影響，恢復土地的植被覆蓋；2)在鹽堿化的嚴重的低產土地，可控制鹽堿對作物的影響，提高作物抗鹽性，大幅度地增加產量；3)在輕度鹽堿化作物生產的土地上，可修復鹽堿，恢復因鹽堿對作物的影響而造成的減產。三，提高作物抗藥殘的能力和土壤降殘解毒的功能這種植物促生菌UW4與植物根共生的關系在植物根或種子周圍具有很強的營養及空間競爭能力，并通過此方式在菌和作物根系形成共生后，生長在根系周圍的微生物形成個微生物"膜"可有效的降解土壤農藥殘留和解出藥殘的毒害作用。此外，所選用的這種促生菌屬于假單胞桿菌屬，通過優化篩選和誘導后，22具有很強的降解藥殘的能力，可用作良好的土壤降殘解毒劑，解出藥殘的毒害作用，加快土壤農藥殘留的降解速率。四，提高作物抗病的能力和抑制病菌的侵染的功能這種植物促生菌(UW4)與植物根共生的關系在植物根或種子周圍具有很強的營養及空間競爭能力，并通過此方式抑制病原菌的繁衍和發展。競爭機制有1，合成抗生素有效地抑制周圍其他微生物的繁衍。2，產生一系列低分子代謝物抑制病原真菌的生存和繁衍。3，合成產生抗真菌酶類如幾丁質酶，P-l，3葡聚酶，蛋白酶，脂肪酶等來消滅或抑制真菌。4,通過植物促生菌的處理誘導植物系統抗病性能。五，做作物抗災害的生理調節劑利用植物促生菌UW4調節和控制植物體內乙稀的產生，提高作物在極端的逆環境下的適宜能力，促進作物生長，增加產量。當植物生長在旱澇環境的壓力下，會生產大量乙烯抑制植物生長和發育，將導致農作物減產。而接種植物促生菌的植物，可大大減少了植物生長抑制物資乙烯的產生，促進植物在旱災、澇災條件下的生長發育，促進作物生長，增加作物產量，提高產品品質。本發明的植物促生菌UW4以及含有該植物促生菌UW4的生物制劑可減少化肥使用，并可以保持和提高作物的產量；可減少抗病農藥使用量，而且增產效果好于100%化學農藥；可以明顯的提高植物抗鹽堿能力和鹽堿土改良的功能、可提高作物抗鹽堿程度；可以恢復鹽堿化土地的植被覆蓋，恢復因鹽堿對作物的影響而造成的減產，修復鹽堿土地；恢復因藥殘對作物的影響而造成的減產；可大幅度增加產量，提高作物抗藥殘的能力，促進植物根際解毒微生物的生長和土壤的降殘解毒的功能。本發明的生物制劑做為作物抗旱澇災害的生理調節劑，提高了作物在極端的逆環境下的適宜能力，有明顯的提高植物抗旱澇災害的能力，而減少因旱澇災害的影響而造成的減產。具體實施例方式以下結合實施例詳細說明本發明，但不限定本發明的實施范圍。23實施例l本發明的生物制劑的組成復合載體材料25%的草炭(有機質)、22%的腐殖酸、22%的腐熟有機質、12%的絡合置換劑(酶解(消化)蛋白8%+硫酸鈣4%)、0.05%的甲基纖維素、余量的成粒劑；菌液含有UW4的菌種溶液，濃度為0.05ml達到2億菌數。制備方法先將UW4菌種進行上述的工業發酵，制成發酵菌液；再將復合載體材料25%的草炭(有機質)、22%的腐殖酸、22%的腐熟有機質、12%的絡合置換劑、0.05%的甲基纖維素混合；將每克復合載體材料加發酵菌液0.05ml，達到2億菌數/l克復合載體材料；再加入成粒劑制成顆粒，干燥后即為含有植物生菌UW4的生物制劑。具體包括1.先將UW4的菌種進行工業發酵，制成發酵菌液，方法如下-(1).取1克植物根際土壤，浸入50mlPAF提取溶液中，再置入250ml容器中；該PAF提取溶液為含有朊間質蛋白胨、干酪素水解物、MgS04、K2HP04和甘油的組合物溶液；(2).將上述含有50mlPAF提取溶液的三角瓶在25;h2。C下震蕩；(3).取lml上述步驟(2)震蕩后的PAF提取溶液，再溶入含有50mlPAF提取溶液的250ml容器中，在25古2'C下，震蕩；(4).取lml上述步驟(3)得到的PAF提取溶液，溶入含有50mlDF鹽溶液的250ml容器中，在25*2"下震蕩；該DF鹽溶液為含有磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、葡糖酸、檸檬酸、硫酸亞鐵，硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、三氧化鉅和硫酸銨的溶液；(5).取lml上述步驟(4)得到的提取溶液，再溶入50ml不含有硫酸銨但含有3.0mMl-氨基環丙烷-l-羧酸的上述DF鹽溶液的容器中，25^:2。C下震蕩；(6).取0.01ml上述步驟(5)得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DF鹽的平板凝膠培養基上，在30;t2。C培養2-4天；(7).取步驟(6)的培養基上生長的菌落，其為植物促生菌尸化t^omonw;w^bUW4的菌種；(8).取上述步驟7得到的菌種，接種在胰蛋白胨大豆肉湯培養基中，在25-"C溫度下培養震蕩24小時，得到培養溶液；(9).在4'C下離心步驟(8)的培養溶液；(10).用DF液沖洗步驟(9)離心沉淀的細胞；該DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鎂；(11).在4。C下再離心步驟(10)得到的DF細胞溶液；(12).用DF鹽液溶解離心沉淀的細胞，加入3.0mM的ACC，得到含菌細胞DF鹽溶液；(13).步驟(12)得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25-'C下培養、震蕩；(14).在《C離心步驟(13)得到的DF培養溶液，得到離心沉淀的細胞；(15).用10mlDF鹽液溶解步驟(13)得到的離心沉淀的細胞得到含菌細胞DF鹽溶液；(16).將步驟(15)得到的含菌細胞DF鹽溶液于28^TC接種發酵，得到工業發酵后的植物促生菌UW4的菌液；該菌液中菌數達到20-30億/ml;(17).再將復合載體材料25%的草炭(有機質)、22%的腐殖酸、22%的腐熟有機質、12%的絡合置換劑、0.05%的甲基纖維素混合；(18).將每克復合載體材料加發酵菌液0.05ml，達到2億菌數/l克復合載體材料；再加入成粒劑，制成顆粒，干燥后即得到生物制劑。經16srRNA基因程序的方法鑒定驗證，上述得到的發酵菌液以及生物制劑中含有的菌株為UW4。從形態學上分析，UW4是粉色到桃紅色的菌落群，因此，可將UW4單獨分離開來。實施例2本發明的生物制劑的組成復合載體材料27%的草炭(有機質)、20%的腐殖酸、20%的腐殖質、13%的絡合置換劑(其中酶解(消化)蛋白10%+硫酸鈣3%)、0.05%的甲基纖維素、余量的成粒劑；菌液含有UW4的菌種溶液，濃度為0.01ml達到2億菌數。制備方法參照實施例l，制備發酵菌液的土壤與實施例l的植物根際土壤不同，與實施例l的土壤所處地理位置的經緯度相差很大，屬于不同地域的植物根際土壤。經16srRNA基因程序的方法鑒定驗證，上述得到的發酵菌液以及生物制劑中含有的菌株為UW4。該UW4為粉色到桃紅色的菌落群。實施例3本發明的生物制劑的組成復合載體材料22%的草炭(有機質)、22%的腐殖酸、22%的腐殖質、16%的絡合置換劑(其中酶解(消化)蛋白11%+硫酸鈣5%)、0.05%的甲基纖維素、余量的成粒劑；菌液含有UW4的菌種溶液，濃度為0.1ml達到2億菌數。制備方法參照實施例l，制備發酵菌液的土壤與實施例l植物根際土壤不同，與實施例l土壤的地理位置經緯度相差很大，屬于不同地域的植物根際土壤。經16srRNA基因程序的方法鑒定驗證，上述得到的發酵菌液以及生物制劑中含有的菌株為UW4。利用實施例1、2和3得到的含有植物促生菌UW4的生物制劑生產鹽堿地土壤改良劑，有明顯提高植物抗鹽堿能力，可提高作物抗鹽堿程度0.3%鹽份，導電率(ECe):5dS/m。而且，該生物制劑可做化肥增效劑，減少化肥施量30%，達到或超過100%化肥用量的作物產量和生物量；可提高作物抗藥殘的能力和土壤降殘解毒的功能；可提高作物抗病的能力和抑制病菌的侵染的功能。不同施肥處理的作物生物量和產量的對比<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>不同農藥殘留土地的生物菌劑處理的出苗、生物量和產量的對比<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>不同農藥殘留土地的生物菌劑處理后的藥殘量的對比<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>生物菌劑對不同類作物的根腐病的防治效果和農藥處理的對比<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>由此可見，本發明的上述實施例得到的生物制劑的主要功能成分植物促生菌UW4可與作物根共生，以ACC(氨基環丙烷朔酸)為生存氮源可以達到促進植物生長，可調節和控制植物體內乙稀的產生，做鹽堿地土壤改良劑，提高作物對鹽堿的抵抗能力，促進作物生長，增加產量，提高肥效，節省肥料和提高植物的抗逆能力的效果。權利要求1.一種植物促生菌，其為PseudomonasputidaUW4，在美國農業研究菌種保藏中心保藏，保藏編號為NRRLB-50193。2.權利要求1所述的植物促生菌的制備方法，其中，該方法包括(1).取l克植物根際土壤，浸入50mlPAF提取溶液中，再置入250ml容器中；該PAF提取溶液為含有朊間質蛋白胨、干酪素水解物、MgS04、K2HP04和甘油的組合物溶液；(2).將上述含有50mlPAF提取溶液的三角瓶在25玄2。C下震蕩；(3).取lml上述步驟(2)震蕩后的PAF提取溶液，再溶入含有50mlPAF提取溶液的250ml容器中，在25^fc2"C下，震蕩；(4).取lml上述步驟(3)得到的PAF提取溶液，溶入含有50mlDF鹽溶液的250ml容器中，在25f2'C下震蕩；該DF鹽溶液為含有磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、葡糖酸、檸檬酸、硫酸亞鐵、硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、三氧化鉬和硫酸銨的溶液；(5).取lml上述步驟(4)得到的提取溶液，再溶入50ml不含有硫酸銨但含有3.0mMl-氨基環丙烷-l-羧酸的上述DF鹽溶液的容器中，在25;h2。C下震蕩；(6).取0.01ml上述步驟(5)得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DF鹽的平板凝膠培養基上，在30;fc2t:培養2-4天；(7).取步驟(6)的培養基上生長的菌落，其為植物促生菌尸化Wo,"w/m"(^UW4的菌種；(8).取上述步驟7得到的菌種，接種在胰蛋白胨大豆肉湯培養基中，在25-C溫度下培養震蕩24小時，得到培養溶液；(9).在4'C下離心步驟(8)的培養溶液；(10).用DF液沖洗步驟(9)離心沉淀的細胞；該DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鎂；(11).在4。C下再離心步驟(10)得到的DF細胞溶液；(12).用DF鹽液溶解離心沉淀的細胞，加入3.0mM的ACC，得到含菌細胞DF鹽溶液；(13).步驟(12)得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25去2"C下培養、震蕩；(14).在4'C離心步驟(13)得到的DF培養溶液，得到離心沉淀的細胞；(15).用10mlDF鹽液溶解步驟(13)得到的離心沉淀的細胞得到含菌細胞DF鹽溶液；(16).將步驟(15)得到的含菌細胞DF鹽溶液于2坊2'C接種發酵，得到工業發酵后的植物促生菌UW4的菌液；該植物促生菌UW4的菌液中UW4的菌數達到20-30億/ml。3.權利要求l所述的植物促生菌在促進植物生長方面的應用。4.一種含有權利要求1所述的植物促生菌的生物制劑，該生物制劑含有植物促生菌的菌液和復合載體材料，其中，該植物促生菌的菌液為含有植物促生菌尸化t^omo"wp^JaUW4的溶液，該復合載體材料包括有機質、腐殖酸、腐熟有機質、絡合置換劑、包埋材料，上述復合載體材料和菌液的比例為植物促生菌UW4的菌數至少1億/每克復合載體材料。5.權利要求4所述的生物制劑，其中，所述的復合載體材料包括1535%的有機質、1232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質、522%的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料，以上重量百分比以復合載體材料的重量為100%計。6.權利要求4所述的生物制劑，其中所述的有機質包括草炭。7.權利要求4所述的生物制劑，其中，以復合載體材料的重量為100%計，所述的復合載體材料還包括828%的成粒劑。8.權利要求4所述的生物制劑的制備方法，其中，該方法包括(l).取l克植物根際土壤，浸入50mlPAF提取溶液中，再置入250ml容器中；該PAF提取溶液為含有朊間質蛋白胨、干酪素水解物、MgS04、K2HP04和甘油的組合物溶液；(2).將上述含有50mlPAF提取溶液的三角瓶在25;h2。C下震蕩；G).取lml上述步驟(2)震蕩后的PAF提取溶液，再溶入含有50mlPAF提取溶液的250ml容器中，在25±2"下，震蕩；(4).取lml上述步驟(3)得到的PAF提取溶液，溶入含有50mlDF鹽溶液的250ml容器中，在25;h2'C下震蕩；該DF鹽溶液為含有磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、硫酸鎂、葡萄糖、葡糖酸、檸檬酸、硫酸亞鐵、硼酸、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、三氧化鉬和硫酸銨的溶液；(5).取lml上述步驟(4)得到的提取溶液，再溶入50ml不含有硫酸銨但含有3.0mMl-氨基環丙烷-l-羧酸的上述DF鹽溶液的容器中，在25;t2'C下震蕩；(6).取0.01ml上述步驟(5)得到的提取溶液，接入含有0.03mMACC的DF鹽的平板凝膠培養基上，在30^TC培養2-4天；(7).取步驟(6)的培養基上生長的菌落，其為植物促生菌Aew^wo"as/w^faUW4的菌種；(8).取上述步驟7得到的菌種，接種在胰蛋白胨大豆肉湯培養基中，在25^2'C溫度下培養震蕩24小時，得到培養溶液；(9).在4'C下離心步驟(8)的培養溶液；(10).用DF液沖洗步驟(9)離心沉淀的細胞；該DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和氯化鎂；(11).在《C下再離心步驟(10)得到的DF細胞溶液；(12).用DF鹽液溶解離心沉淀的細胞，加入3.0mM的ACC，得到含菌細胞DF鹽溶液；(13).步驟(12)得到的含菌細胞DF鹽溶液，在25去2'C下培養、震蕩；(14).在4。C離心步驟(13)得到的DF培養溶液，得到離心沉淀的細胞；(15).用10mlDF鹽液溶解步驟(13)得到的離心沉淀的細胞得到含菌細胞DF鹽溶液；(16).將步驟(15)得到的含菌細胞DF鹽溶液在28土2X:下接種發酵，得到工業發酵后的植物促生菌UW4的菌液；該植物促生菌UW4的菌液中UW4的菌數達到20-30億/ml;(17).將步驟(16)得到的植物促生菌UW4的菌液與1535%的有機質、1232%的腐殖酸、1232%的腐熟有機質、522%的絡合置換劑以及0.011%的包埋材料混合，再加入8~28%的成粒劑，造粒，干燥，得到所述的生物制劑。9.權利要求4所述的生物制劑在促進植物生長方面的應用。全文摘要本發明提供了一種植物促生菌和含有該植物促生菌的生物制劑，以及上述菌種和生物制劑的制備方法；該生物制劑含有復合載體材料和菌液，復合載體材料包括有機質、腐殖酸、腐熟有機質、絡合置換劑、包埋材料，菌液為含有植物促生菌UW4的溶液，復合載體材料加菌液使植物促生菌的菌數達到至少1億/每克復合載體材料，得到該生物制劑；該生物制劑用于農業生產可以促進植物生長，提高產量，提高肥效和提高植物的抗逆能力。文檔編號C12N1/20GK101481666SQ200810181319公開日2009年7月15日申請日期2008年11月19日優先權日2008年11月19日發明者黃曉東申請人:黃曉東