專利名稱：：一種生物復合型破乳劑的制備方法
技術領域：
：本發明涉及一種破乳劑的制備方法。
背景技術：
：破乳劑在原油生產、運輸以及油污分離、去除等領域具有重要的作用。長期以來工業中主要使用化學破乳劑進行油水分離。然而，化學破乳劑表現出較強的專一性，且會將大量無機鹽或有機殘留物帶進原油廢水中。排放含有化學殘留物的廢水會對環境造成嚴重危害，而對這樣的廢水進行處理又會大大提高生產成本。生物破乳技術利用微生物細胞本身或者其代謝過程、代謝產物實現乳狀液破乳，具有生產工藝簡單，能耗小的優點。更重要的是，生物破乳劑無毒、易被降解，它的環保性是化學破乳劑無法比擬的，是破乳劑研發的重要方向之一。有報道將生物破乳劑與化學破乳劑或其他功能的助劑進行復配，以減少化學破乳劑的用量，但仍不能避免化學破乳劑對環境造成的危害。目前，生物破乳劑存在破乳效率低，穩定性較差的問題，而且由于使用量較大導致成本高，這些均制約了生物破乳劑大規模生產和應用。
發明內容本發明目的是為了解決現有將生物破乳劑與化學破乳劑或其他功能的助劑進行復配，但依然存在化學破乳劑對環境造成危害；以及生物破乳劑存在破乳效率低，穩定性較差，成本高的問題，而提供的一種生物復合型破乳劑的制備方法。生物復合型破乳劑的制備方法按以下步驟進行一、將莫海威芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)接種于匪SM液體培養基中，在溫度為2832°C、140r/min的條件下培養24h，得莫海威芽孢桿菌種子液；二、將枯草芽胞桿菌(Bacillussubtilis)接種于匪SM液體培養基中，在溫度為2832°C、140r/min的條件下培養20h，得枯草芽胞桿菌種子液；三、將34ml的莫海威芽孢桿菌種子液與1.52.5ml的枯草芽胞桿菌種子液分別接種于100ml的MMSM液體培養基中，在溫度為3235t:、搖床轉數為80160r/min、pH值為78的條件下培養1016h，即得生物復合型破乳劑；其中步驟一中莫海威芽孢桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為3.44.7;步驟二中枯草芽胞桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為0.080.3;步驟一、二和三中匪SM液體培養基成分相同，匪SM液體培養基由3.04.0g的NH4N03、3.04.0g的K2HP04、4.06.0g的KH2P04、0.10.2g的MgS04H20、0.5lmL的微量元素溶液、40mL的液體石蠟、0.51.0g的酵母膏和8.010.0g的葡萄糖溶于1000mL的蒸餾水中組成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl2^CKlOOOmg的FeS047H20和1400mg的EDTA溶于lOOOmL的蒸餾水中組成。本發明生物復合型破乳劑與單一菌種組成的破乳劑相比，提高了生物破乳劑的破乳效率，在相同條件下，較低的投加量即可達到破乳最高效率，排油率高達100%。本發明生物復合型破乳劑可以直接用于對油田廢水的處理，整個過程在常溫下進行，降低了工藝的運行費用。本發明生物復合型破乳劑與目前廣泛使用的化學破乳劑相比，破乳效果完全達到甚至超過化學破乳劑。本發明復合型生物破乳劑完全采用微生物進行復合破乳，不含任何化學破乳劑或助劑，完全避免了化學破乳劑對環境造成危害，可以完全降解，且破乳后，廢水中不會有大量化學物質殘留，降低了后續廢水處理的難度，節約了成本。本發明生物復合型破乳劑比使用單一細菌培養液破乳降低了破乳劑的加入量，提高了破乳效率，可以大幅度降低生產成本。本發明生物復合型破乳劑在pH值為39的條件下對0/W型模型乳狀液均有較好的破乳效果。本發明中生物復合型破乳劑的破乳能力隨溫度的變化浮動小，乳狀液溫度在2012(TC內變化，破乳劑的排油率變化不超過10%，可見本發明生物復合型破乳劑的穩定性高，有利于位于高寒地區油田原油采出液冬季的破乳，可以節省加熱所需的能源消耗進一步降低成本，同時可利用油田現有設備進行投加，易于大規模應用。圖1為具體實施方式四中生物復合型破乳劑與單一細菌培養液在投加量不同時對0/W型模型乳狀液的破乳效果對比圖，其中B為生物復合型破乳剤的破乳效果曲線，A為莫海威芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線；參為枯草芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線；圖2為具體實施方式四中生物復合型破乳劑與單一細菌培養液在不同pH值條件下對0/W型模型乳狀液的破乳效果對比圖，其中B為生物復合型破乳劑的破乳效果曲線，A為莫海威芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線；參為枯草芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線；圖3為具體實施方式四中生物復合型破乳劑與單一細菌培養液在不同溫度條件下對o/w型模型乳狀液的破乳效果對比圖，其中B為生物復合型破乳劑的破乳效果曲線，A為莫海威芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線；參為枯草芽胞桿菌培養液的破乳效果曲線。具體實施例方式本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。具體實施方式一本實施方式生物復合型破乳劑的制備方法按以下步驟進行一、將莫海威芽孢桿菌接種于匪SM液體培養基中，在溫度為2832°C、140r/min的條件下培養24h，得莫海威芽孢桿菌種子液；二、將枯草芽胞桿菌接種于匪SM液體培養基中，在溫度為2832°C、140r/min的條件下培養20h，得枯草芽胞桿菌種子液；三、將34ml的莫海威芽孢桿菌種子液與1.52.5ml的枯草芽胞桿菌種子液分別接種于100ml的匪SM液體培養基中，在溫度為3235t:、搖床轉數為80160r/min、pH值為78的條件下培養1016h，即得生物復合型破乳劑；其中步驟一中莫海威芽孢桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為3.44.7;步驟二中枯草芽胞桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為0.080.3;步驟一、二和三中匪SM液體培養基成分相同，匪SM液體培養基由3.04.08的朋4冊3、3.04.Og的K2HP04、4.06.Og的KH2P04、0.10.2g的MgS04*H20、0.5lmL的微量元素溶液、40mL的液體石蠟、0.51.Og的酵母膏和8.010.Og的葡萄糖溶于1000mL的蒸餾水中組成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl2化20、10001^的FeS04*7H20和1400mg的EDTA溶于lOOOmL的蒸餾水中組成。本實施方式中枯草芽胞桿菌為直接購買得到。本實施方式中莫海威芽孢桿菌為自行采集，也可直接購買得到。4本實施方式中匪SM液體培養基在112t:下滅菌20min。具體實施方式二本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟三中將3.5ml的莫海威芽孢桿菌種子液與2ml的枯草芽胞桿菌種子液混合。其它步驟及參數與具體實施方式一相同。具體實施方式三本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟三中將3ml的莫海威芽孢桿菌種子液與1.5ml的枯草芽胞桿菌種子液混合。其它步驟及參數與具體實施方式一相同。具體實施方式四本實施方式生物復合型破乳劑的制備方法按以下步驟進行一、將莫海威芽孢桿菌接種于匪SM液體培養基中，在溫度為3(TC、140r/min的條件下培養24h，得莫海威芽孢桿菌種子液；二、將枯草芽胞桿菌接種于匪SM液體培養基中，在溫度為3(TC、140r/min的條件下培養20h，得枯草芽胞桿菌種子液；三、將3.5ml的莫海威芽孢桿菌種子液與2ml的枯草芽胞桿菌種子液分別接種于100ml的匪SM液體培養基中，在溫度為3(TC、搖床轉數為140r/min、pH值為8的條件下培養1016h，即得生物復合型破乳劑；其中步驟一中莫海威芽孢桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為4.0;步驟二中枯草芽胞桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為0.1;步驟一、二和三中匪SM液體培養基成份相同，匪SM液體培養基由3.5g的NH4N03、3.5g的K2HP04、5.0g的KH2P04、0.15g的MgS04*H20、0.8mL的微量元素溶液、40mL的液體石蠟、0.8g的酵母膏和9.0g的葡萄糖溶于1000mL的蒸餾水中組成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl2H20、1000mg的FeS047H20和1400mg的EDTA溶于lOOOmL的蒸餾水中組成。本實施方式所得生物復合型破乳劑與采用單一的莫海威芽胞桿菌培養液或枯草芽胞桿菌培養液的破乳效果對比，結果如圖1所示，本實施方式所得生物復合型破乳劑在用量2.5ml的情況下就可以達到破乳最佳效果，排油率達100%，；莫海威芽胞桿菌培養液的加入量為4ml可以達到最佳排油效果，48h排油率63X;枯草芽胞桿菌培養液的最佳加入量則更高，加入6ml全培養液時，排油率達到65%;由此可見，本實施方式所得生物復合型破乳劑比使用單一細菌培養液破乳降低了破乳劑的加入量，提高了破乳效率，可以大幅度降低成本。本實施方式所得生物復合型破乳劑對乳狀液pH值變化的適應能力，如圖2所示，本實施方式所得生物復合型破乳劑在pH值為39的條件下對0/W型模型乳狀液均有較好的破乳效果。本實施方式所得生物復合型破乳劑對的破乳能力隨溫度的變化浮動小，如圖3所示，乳狀液溫度在2012(TC內變化，本實施方式所得生物復合型破乳劑的排油率變化不超過10%;由此可見，本實施方式所得生物復合型破乳劑的穩定性高，有利于位于高寒地區油田原油采出液冬季的破乳，可以節省加熱所需的能源消耗進一步降低成本。本實施方式所得生物復合型破乳劑對于大慶油田含油廢水(原油廢水含油量為153.217mg/L)的處理效果，如表1所示，本實施方式所得生物復合型破乳劑與單獨使用莫海威芽胞桿菌培養液或枯草芽胞桿菌培養液的破乳效果相比，同等條件下，可以將排油率提高13%以上；與目前廣泛使用的化學破乳劑(化學-l成分為聚氧丙烯聚氧乙烯丙二醇醚，化學_2成分為聚乙撐基聚季銨鹽)相比，破乳效果完全達到甚至超過化學破乳劑。表15<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權利要求一種生物復合型破乳劑的制備方法，其特征在于生物復合型破乳劑的制備方法按以下步驟進行一、將莫海威芽孢桿菌接種于MMSM液體培養基中，在溫度為28～32℃、140r/min的條件下培養24h，得莫海威芽孢桿菌種子液；二、將枯草芽胞桿菌接種于MMSM液體培養基中，在溫度為28～32℃、140r/min的條件下培養20h，得枯草芽胞桿菌種子液；三、將3～4ml的莫海威芽孢桿菌種子液與1.5～2.5ml的枯草芽胞桿菌種子液混合，然后接種于100ml的MMSM液體培養基中，在溫度為32～35℃、搖床轉數為80～160r/min、pH值為7～8的條件下培養10～16h，即得生物復合型破乳劑；其中步驟一中莫海威芽孢桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為3.4～4.7；步驟二中枯草芽胞桿菌種子液在620nm波長處的吸光度為0.08～0.3；步驟一、二和三中MMSM液體培養基成分相同，MMSM液體培養基由3.0～4.0g的NH4NO3、3.0～4.0g的K2HPO4、4.0～6.0g的KH2PO4、0.1～0.2g的MgSO4·H2O、0.5～1mL的微量元素溶液、40mL的液體石蠟、0.5～1.0g的酵母膏和8.0～10.0g的葡萄糖溶于1000mL的蒸餾水中組成，所述的微量元素溶液由1000mg的CaCl2·H2O、1000mg的FeSO4·7H2O和1400mg的EDTA溶于1000mL的蒸餾水中組成。2.根據權利要求1所述的一種生物復合型破乳劑的制備方法，其特征在于步驟三中將3.5ml的莫海威芽孢桿菌種子液與2ml的枯草芽胞桿菌種子液混合。3.根據權利要求1所述的一種生物復合型破乳劑的制備方法，其特征在于步驟三中將3ml的莫海威芽孢桿菌種子液與1ml的枯草芽胞桿菌種子液混合。全文摘要一種生物復合型破乳劑的制備方法，它涉及一種破乳劑的制備方法。它解決了現有將生物破乳劑與化學破乳劑或其他功能的助劑進行復配，但依然存在化學破乳劑對環境造成危害；以及生物破乳劑存在破乳效率低，穩定性較差，成本高的問題。方法一、制備莫海威芽孢桿菌種子液；二、制備枯草芽胞桿菌種子液；三、莫海威芽孢桿菌種子液與枯草芽胞桿菌種子液混合，接種于培養基中培養，即得。本發明生物復合型破乳劑的排油率高達100％，降低了加入量，降低成本，穩定性高，表現為在pH值為3～9的條件下對乳狀液均有較好的破乳效果，以及乳狀液溫度在20～120℃內變化，排油率變化不超過10％。文檔編號C12R1/125GK101709277SQ20091007313公開日2010年5月19日申請日期2009年11月3日優先權日2009年11月3日發明者代陽,侯寧,劉暢,徐暘,李旭,馬放申請人:哈爾濱工業大學