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一種二酰甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質的制作方法

文檔序號:575458閱讀:568來源:國知局

專利名稱::一種二酰甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質的制作方法
技術領域
:本發明公開了--種二酰甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質,屬于基因工程領域,具體地涉及植物中油脂合成的關鍵酶及其編碼基因。
背景技術
:油料作物種子含油量的提高對于提高其產油量具有至關重要的作用,對于提高油料作物的經濟效益具有重要的意義。分離和克隆油脂合成積累的關鍵基因,通過生物工程的方法提高油料作物的含油量成為科學家追求的目標。植物油脂合成經過脂肪酸合成和脂肪酸組裝2個主要階段。油脂(TAG)組裝過程是通過Kennedy途徑完成的,參與該途徑主要包括4個酶,其中二脂酰甘油酰基轉移酶是催化三脂酰甘油生物合成最后一步,該步驟的酶具有限速作用。二脂酰甘油酰基轉移酶活性高,則脂肪酸能夠迅速與甘油結合,形成貯藏脂,從而提高油脂積累速率,進一步提高含油量。目前,已經從擬南芥、油菜(Gen:Bankaccessio翻.AF251794)、煙草(PierretteBouvier-Navelet.al.2000)、大豆(GenBankaccessionno.AAS78662)、水稻(GenBankaccessionno.BAD53762)等物種中分離出來了二脂酰甘油酰基轉移酶(DGAT)。我們首次報道了雙子葉植物播娘蒿的二酰甘油酰基轉移酶基因。
發明內容技術問題本發明的目的在于公開一種二酰甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質,該基因來自播娘蒿,可作為目的基因導入植物,提高植物種子含油量和產量,進行植物品種改良。技術方案本發明二酰甘油酰基轉移酶基因(DsDGAT),其核苷酸序列SEQIDNO.1為ATTGATGTTGTAGTGGTC。上述的二酰甘油酰基轉移酶基因(DsDGAT)基因來自播娘蒿,其編碼的蛋白質,來自播娘蒿(Descurainiasophia),它具有如下所示的氨基酸序列SEQIDNO.2:MAILDSGDVTLTTTTENVAGEFMDLDRLRRRKSRSDSNGLLSDSSSGIDNSPSDDVGAPTDVRRDRIDSVVNEGTANLAGDNVGAAEIRENDGGRDGGGERRVNTEATFTYRPSVPAHRRVRESPLSSMIFKQSHAGLFNLCVVVLVAVNSRLIIENLMKYGWEVLYPVYVTLRCDSAFLSGVTLMLLTCIVWLKLVSYAHTSYDIRSLANSADKANPFGDREFYKDWWNAKSVGI)YW:RMW雨:PVHKWMV:R:HIYFPCL:RSKI:PKTAA]:11:AFLVSAVFHELCIAVPCRLFKLWAFMG頂FQVPLVFITNYLQERFGSMVG雨IFWFIFCIFGQPMCTLLYYHDLMNRKGSMS。有益效果1、本發明公開了一種二酰甘油酰基轉移酶基因(DsDGAT基因)及其所編碼的蛋白質。二酰甘油酰基轉移酶基因是雙子葉植物播娘蒿中的首次報道,可應用于雙子葉植物的遺傳改良。該基因來自播娘蒿(Descurainiasophia),可作為目的基因導入植物,提高植物種子含油量和產量,以進行植物品種改良。所編碼的蛋白質具有二酰甘油酰基轉移酶功能。2、本發明人提供的DsDGAT基因功能是參與Ke皿edy途徑的脂肪酸組裝。mRNA表達分析表明DsDGAT基因屬于組成型表達,但是在播娘蒿角果上的表達量大。3、本發明的DsDGAT基因來自播娘蒿,具有適合于播娘蒿等雙子葉植物表達的優化密碼子,其基因工程受體植物除了單子葉植物,如小麥、玉米、水稻等之外更加適合于擬南芥、油菜、煙草、棉花等雙子葉植物。4、利用本發明DsDGAT基因作為目的基因構建植物表達載體,以種子特異性啟動子,遺傳轉化油菜等雙子葉植物,使種子變大,含油量顯著提高。轉化可經農桿菌介導法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉化植物。具體實施例方式實施例1根據GenBank中擬南芥和其它物種DGAT序列設計了播娘蒿中DsDGAT弓|物I)GAT:P1和DGATP2。以播娘蒿角果總RNA為起始材料,經反轉錄得到的cDNA作為PCR擴增的模板,運用引物組合DGATP1和DGATP2,進行PCR擴增,得到一條明亮的條帶,測序。利用RACE試劑盒的反轉錄體系,將播娘蒿角果總RNA反轉錄為cDNA作為模板,運用基因特異性引物GST和錨定引物,進行PCR擴增,DsDGAT的特異性引物為5'DGATGST和3'DGATGST,分別得到--條明亮的條帶。測序后序列比對顯示,它們都含有引物設計時保守區域重復的一段序列,Blast搜索顯示這些序列都很可能是這些基因所缺少的那一部分。根據....匕面的信息在DsDGAT非編碼區設計了它的全長引物DsDGAT.1和DsDGAT.2,上述所用引物如下DGATP1:5'-AGTTGGTTTCTTACGCTCATA-3'DGATP2:5'-CAATAATCTCCCACGCTTT-3'5'DGATGST:5'-ATTGACGAGCCACCCAACCCTTC-3'3'DGATGST:5'-CTGCATGTTCTACTGCTTCTTCCAC-3'DsDGAT.1:5'-GATTCTGATTCTCTTTTCGGC-3'DsDGAT.2:5'-TATCAGGACCACTACAACATC-3'并以全長引物DsDGAT.1、DsDGAT.2進行PCR擴增得到特異性條帶,獲得播娘蒿二酰甘油酰基轉移酶基因的全長序列。以總RNA為模板,經反轉錄合成cDNA第一條鏈后,用高保真Taq酶(購自大連寶生物工程有限公司)進行:PCR擴增。PCR程序如下94。C預變性3min,94。C變性60s,55。C復性90s,72。C延伸2min,32個循環后,72。C再延伸10min,最后(C保存。PCR回收產物連接到pMD19-T克隆載體....匕(購自大連寶生物工程有限公司),轉化到大腸桿菌T0P10(北京天為時代生物工程有限公司),以來自目的片段上的引物序列為引物,進行:PCR擴增,鑒定陽性克隆;序列的測定委托上海]:rwitrogen生物技術有限公司完成。(見SEQIDNO.1)。BLAST的結果及分子建模結果證明從播娘蒿中新得到的基因確為一個編碼二酰甘油酰基轉移酶基因(DiacylglycerolAcyltransferase,DGAT,EC2.3.1.20),該基因編碼產物為油脂合成關鍵酶,具有催化合成三酰甘油(TAG,triacylglycerol)的功能。實施例2上述獲得播娘蒿二酰甘油酰基轉移酶基因DsDGAT的cDNA序列SEQIDNO.1,其編碼的蛋白質,來自播娘蒿(Descurainiasophia),它的氨基酸序列為SEQIDNO.2,DsDGATcDNA全長1792bp,0RF1575bp編碼524個氨基酸,根據軟件預測它編碼蛋白的分子量為60.03KD,等電點PI為8.78。根據氨基酸序列比對的結果顯示,DsDGAT與其他作物中DGAT的一致性為80%-43%,其中它和擬南芥的相似性最高為80%,與油菜、芥菜、白菜、埃色俄比亞芥和甘藍的相似性都在70%及以上。進一步序列分析顯示DsDGAT氨基酸序列N端存在帶有正電荷的氨基酸(RRRR)/(RRRK),序列中有一個高保守的絲氨酸殘基,它被認為參與植物碳代謝的整個調控過程。和在油菜中DGAT一樣,DsDGAT基因中存在5個亮氨酸,它們都是有規律的被6個可變的氨基酸隔開,形成一典型的亮氨酸鏈。這個序列擁有一個典型的組氨酸殘基中心,在C端擁有高保守的自由脂肪酸結合位點(FGDREFYRPDWWNA),這個酶展示了一個完整膜蛋白的特性。根據生物信息學軟件分析,預測到9個跨膜區,在N端預測到一個細胞質內膜信號。DsDGAT也像其它物種中DGAT一樣沒有發現內質網信號肽。這些區域將促進DGAT和那些可能的亞單位相互結合,起到調節蛋白的結合位點或在TAG生物合成途徑中促進DGAT和其它酶相互作用。實施例3用DsDGAT轉基因引物P1、P2進行半定量RT-PCR分析播娘蒿根、莖、葉、花蕾、花和角果的表達,結果表明,播娘蒿DsDGAT在傷害和冷脅迫下是上調的。基因引物如下PI:5'-GCGGATCCTTCTGATTCTCTTTTCGGC-3'P2:5'-GCCCGGGTTCAGGACCACTACAACATC-3'實施例4利用全長引物進行PCR擴增,將PCR所得產物用BamHI和Smal進行雙酶切,回收酶切產物并將其插入植物轉化載體PBI121,構建重組轉基因載體PBI121-DsDGAT,將轉基因載體PBI121-DsDGAT轉化大腸桿菌JM109,提PCR陽性菌落的質粒進行酶切鑒定。雙酶切載體PBim-DsDGAT,酶切后分別得到了預期大小目的片段,對克隆到載體PBI121的DsDGAT進行測序,測序結果與基因的序列進行比對分析,發現DM序列完全相同。將驗證正確的轉基因載體PBI121-DsDGAT轉化農桿菌LBA44(M,對轉化后的抗性單菌落進行PCR檢測挑選陽性單克隆測序,將測序結果與DsDGAT基因序列比對,序列比對結果表明序列完全相同,表明轉基因載體已經轉入農桿菌LBA4404。采用根癌農桿菌介導法,將播娘蒿二酰甘油酰基轉移酶基因轉化甘藍型油菜NJ6292。對獲得的轉基因植株進行PCR,RT-PCR及Southern雜交驗證。對轉基因后代種子的脂肪酸含量進行測定,DsDGAT轉基因油菜種子含油量從40.6%提高到49.0%,平均提高了8.4%;千粒重從4.Og提高到5.lg,平均提高了27.5%;說明轉基因DsDGAT種子在含油量、粒重有很大的提高,DsDGAT基因的導入提高了含油量,同時也提高了油菜的產量。上述實施例1、2表明本發明中來源于播娘蒿的二酰甘油酰基轉移酶基因DsDGAT。實施例3、4表明該基因有提高種子含油量的功能。此類基因由于來源于雙子葉植物,具有雙子葉植物優化的密碼子,與單子葉植物來源的二酰甘油酰基轉移酶基因相比,更加適合于擬南芥、油菜、煙草、棉花等雙子葉作物的抗逆性遺傳改良。本發明人從雙子葉植物播娘蒿(Descurainiasophia)中克隆了一個cDNA,編碼二酰甘油酰基轉移酶基因,命名為DsDGAT。經在數據庫中比較發現,DsDGAT與其他作物中DGAT的一致性為80X-43%,其中它和擬南芥的相似性最高為80%,與油菜、芥菜、白菜、埃塞俄比亞芥和甘藍的相似性都在70%及以上。DsDGATcDNA全長1792bp,0RF1575bp編碼524個氨基酸,根據軟件預測它編碼蛋白的分子量為60.03KD,等電點PI為8.78。進一步序列分析顯示DsDGAT氨基酸序列N端存在帶有正電荷的氨基酸(RRRR)/(RRRK),序列中有一個高保守的絲氨酸殘基,它被認為參與植物碳代謝的整個調控過程。和在油菜中DGAT—樣,DsDGAT基因中存在5個亮氨酸,它們都是有規律的被6個可變的氨基酸隔開,形成一典型的亮氨酸鏈。這個序列擁有一個典型的組氨酸殘基中心,在C端擁有高保守的自由脂肪酸結合位點(FGDREFYRPDWWNA),這個酶展示了一個完整膜蛋白的特性。根據生物信息學軟件分析,預測到9個跨膜區,在N端預測到一個細胞質內膜信號。DsDGAT也像其它物種中DGAT—樣沒有發現內質網信號肽。mRNA表達分析表明播娘蒿DsDGAT在傷害和冷脅迫下呈現上調表達。轉基因研究表明,將DsDGAT基因轉入甘藍型油菜,發現轉基因DsDGAT種子在含油量、粒重上有很大提高,說明DsDGAT基因的導入提高了含油量,同時也提高了油菜的產量。綜上所述,本發明人提供的DsDGAT基因是首次在雙子葉植物中分離的新基因,其能催化三酰甘油的生物合成。本發明所述的一種植物二酰基甘油酰基轉移酶基因已經在很多植物中發現。可利用本發明DsDGAT基因作為目的基因構建植物表達載體,使用種子特異性的MPIN啟動子,使該基因特異的在種子中表達。所用的表達載體可為Ti質粒,:Ri質粒,植物病毒載體等。轉化方法可用農桿菌介導法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉化植物。本發明的DsDGAT基因來自播娘蒿,具有適合于播娘蒿等雙子葉植物表達的優化密碼子,其基因工程受體植物除了單子葉植物,如小麥、玉米、水稻等之外更加適合于擬南芥、油菜、煙草、棉花等雙子葉植物。本發明涉及的序列及記號分列如下(l)SEQIDNO.1的信息(i)序列特征(A)長度:1792bp(B)類型核苷酸(C)鏈性單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.1(2)SEQIDNO.2的信息(i)序列特征(A)長度:524a.a(B)類型氨基酸(C)鏈性單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型蛋白質(iii)序列描述SEQIDNO.2(3)SEQIDNO.3的信息(i)序列特征(A)長度:21b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構:線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.3(4)SEQIDNO.4的信息(i)序列特征(A)長度19b(B)類型核苷酸(C)鏈性單鏈(D)拓撲結構:線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.4(5)SEQIDNO.5的信息(i)序列特征:(A)長度23b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構:線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.5(6)SEQIDNO.6的信息(i)序列特征(A)長度:25b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構:線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.6(7)SEQIDNO.7的信息(i)序列特征(A)長度:21b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構:線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQIDNO.7(8)SEQIDNO.8的信息(i)序列特征(A)長度21b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型核苷酸序列描述SEQIDNO.8(9)SEQIDNO.9的信息(i)序列特征(A)長度:27b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型核苷酸序列描述SEQIDNO.9(10)SEQIDNO.10的信息(i)序列特征(A)長度:27b(B)類型核苷酸(C)鏈性:單鏈(D)拓撲結構線性(ii)分子類型核苷酸序列描述SEQIDNO.10SEQUENCELISTING〈110〉南京農業大學〈120〉一種二酰甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質〈130〉Ds:[)GAT〈140>2009-10-26〈141>2009-10-26〈150>2009-10-20〈151)2009-10-20〈160>10〈170>PatentInversion3.5〈210〉1〈211>1792〈212>薩〈213>Descurainiasophia〈400>1<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>SerArgSerAspSerAsnGlyLeuLeuSerAspSerSerSerGlylie354045AspAsnSerProSerAspAspValGlyAlaProThrAspValArgArg505560AspArglieAspSerValValAsnGluGlyThrAlaAsnLeuAlaGly65707580AspAsnValGlyAlaAlaGlulieArgGluAsnAspGlyGlyArgAsp859095GlyGlyGlyGluArgArgValAsnThrGluAlaThrPheThrTyrArg100105110ProSerValProAlaHisArgArgValArgGluSerProLeuSerSer115120125AspAlaliePheLysGinSerHisAlaGlyLeuPheAsnLeuCysVal130135140ValValLeuValAlaValAsnSerArgLeulielieGluAsnLeuMet145150155160LysTyrGlyTrpLeulieArgThrAspPheTrpPheSerSerArgSer165170175LeuArgAspTrpProLeuPheMetCysCysLeuSerLeuSerliePhe180185190ProLeuAlaAlaPheThrValGluLysLeuValLeuGinArgTyrlie195200205SerGluProValVallielieLeuIiislielielieSerThrThrGlu210215220ValLeuTyrProValTyrValThrLeuArgCysAspSerAlaPheLeu225230235240SerGlyValThrLeuMetLeuLeuThrCyslieValTrpLeuLysLeu245250255ValSerTyrAlaHisThrSerTyrAsplieArgSerLeuAlaAsnSer260265270AlaAspLysAlaAsnProGluValSerTyrTyrValSerPheLysSer275280285LeuAlaTyrPheMetValAlaProThrLeuCysTyrGinProSerTyr290295300ProArgSerProCyslieArgLysGlyTrpValAlaArgGinPheAla305310315320LysLeuValliePheThrGlyPheMet.GlyPhelielieGluGinTyr325330335lieAsnProlieValArgAsnSerLysIiisProLeuLysGlyAspLeu340345350Leu丁yrAlalieGluArgValLeuLysLeuSerValProAsnLeu丁yr355360365ValTrpLeuCysMetPheTyrCysPhePheHisLeuTrpLeuAsnlie370375380LeuAlaGluLeuLeuCysPheGlyAspArgGluPheTyrLysAspTrp385390395400TrpAsnAlaL.ysSerValGlyAspTyrTrpArgMetTrpAsnMetPro405410415ValHisLysTrpMetValArgHislie丁yrPheProCysLeuArgSer420425430lieProLysThrAlaAlalie:[le]::[eAlaPheLeuValSerAla435440445ValPheHisGluLeuCyslieAlaValProCysArgLeuPheLysLeu450455460TrpAlaPheMetG:lylieMetPheGinVa:[ProLeuVa:[PhelieThr465470475480Asn丁yrLeuGinGluArgPheGlySerMetValGlyAsnMetliePhe485490495TrpPheliePheCysliePheGlyGinProMetCysThrLeuLeuTyr500505510TyrHisAspLeuMetAsnArgLysGlySerMetSer515520〈21()>3〈211>21〈212>DNA〈213〉Descu:rainiEisophia〈4()()>3agt.tggt.ttc^ttacgctcata21〈210M〈211>19〈212>DNA〈213>Descurainiasophia〈400>4c股itaatctc(:cacgcttt19〈21()>5〈211>23〈212>DNA〈213>Descurainiasophia〈400>5attgacgagccacccaacccttc23〈210〉6〈211>25〈212>DNA<213〉Descuraini£isophia〈400>6ctgcatgttctactgcttcttccac25〈210>7<211>21〈212〉DNA〈213〉Descurainiasophia〈400>7gattct.gattctcttttcggc21〈210>8〈211)2]〈212>DNA〈213>Descurainiasophia〈400〉8tatcaggaccactac朋cfitc21〈210>9〈211>27〈212>DNA<213>Descurainiasophia〈400>9gcggatccttctgat.tctcttttcggc27〈210〉10〈211〉27〈212>DNA〈213>Descur£iiniasophia〈400〉10gcccgggttcaggaccactacaacatc2權利要求一種雙子葉植物二酰基甘油酰基轉移酶基因(DsDGAT),來自播娘蒿(Descurainiasophia),命名為DsDGAT基因,其核苷酸序列SEQIDNO.1為GCGGATCCTTCTGATTCTCTTTTCGGCATCTTTTTCTTCTTGAAACCTTTTTCCAAATTCAATTTTTCTTCTGCATGTGTCCGTGACGCTTTTCCTTCTGACGTTCTGAAGGACTCTTTGAAGCTGTTTCGTTGAACGCTTCGAAATGGCGATTTTGGATTCTGGAGACGTTACTTTGACCACCACGACGGAGAACGTTGCCGGAGAGTTTATGGATCTCGATAGGCTTCGTCGACGGAAATCTAGATCGGATTCTAATGGACTTCTTTCTGATTCTTCATCCGGTATCGATAATTCACCGTCGGATGATGTTGGAGCTCCGACCGACGTGAGGAGGGATCGGATTGATTCCGTTGTCAACGAGGGAACAGCCAATTTGGCCGGAGATAACGTCGGTGCTGCTGAAATTAGGGAAAACGATGGAGGAAGAGACGGCGGCGGAGAAAGAAGAGTTAACACCGAGGCTACGTTTACGTATCGACCGTCGGTTCCAGCTCATCGGAGGGTGAGGGAGAGTCCACTCAGCTCTGACGCAATCTTCAAACAGAGCCATGCCGGATTATTTAACCTCTGTGTAGTAGTTCTTGTTGCTGTGAACAGTAGACTCATCATTGAAAATCTCATGAAGTACGGTTGGTTGATCAGAACGGATTTCTGGTTTAGTTCAAGATCTCTGCGAGATTGGCCGCTTTTCATGTGTTGTCTTTCCCTTTCGATCTTTCCTTTGGCTGCCTTTACTGTAGAGAAATTGGTACTTCAGAGATACAIATCTGAACCTGTTGTCATCATTCTTCATATTATTATCTCTACGACAGAGGTTTTGTATCCAGTTTATGTCACACTGAGGTGTGATTCCGCCTTCTTATCAGGTGTCACATTGATGCTCCTCACTTGCATTGTGTGGCTAAAGTTGGTTTCTTACGCTCAIACTAGCTACGACATAAGATCTCTAGCCAATTCAGCTGATAAGGCCAATCCTGAAGTCTCTTACTACGTTAGCTTTAAGAGCTTGGCAIATTTCATGGTTGCTCCCACATTGTGTTATCAGCCGAGCTATCCACGTTCTCCATGTATCCGGAAGGGTTGGGTGGCTCGTCAATTTGCAAAACTGGTCAIATTCACTGGATTCATGGGATTTATCATAGAACAATATATAAATCCTATTGTTAGGAACTCAAAGCATCCTTTGAAAGGGGACCTTCTATACGCTATTGAAAGAGTGTTGAAACTTTCTGTTCCAAATTTATACGTGTGGCTCTGCATGTTCTACTGCTTCTTCCACCTTTGGTTAAACATATTGGCCGAGCTCCTCTGTTTCGGGGATCGTGAATTCTACAAAGATTGGTGGAATGCAAAAAGTGTGGGAGATTATTGGAGAATGTGGAATATGCCTGTCCATAAATGGATGGTTCGACATATATACTTCCCATGCCTACGCAGCAAGATACCGAAGACCGCCGCCATTATCATTGCTTTCTTAGTCTCTGCAGTCTTTCATGAGCTATGCATCGCAGTCCCTTGTCGTCTCTTCAAGCTATGGGCTTTTATGGGGATTATGTTTCAGGTGCCTTTGGTTTTTATCACAAACTATCTACAAGAAAGGTTTGGCTCAATGGTGGGGAACATGATCTTCTGGTTCATCTTCTGCATTTTCGGACAACCGATGTGTACACTTCTTTATTACCACGACCTGATGAACCGCAAAGGATCGATGTCATGAAACAACTGTTCGAAATCGACGTTCTTCAGACATCTATGACCTTGTTGGATCTCCATTGATGTTGTAGTGGTC2.權利要求1所述的一種雙子葉植物二酰基甘油酰基轉移酶基因所編碼的蛋白質,來自播娘蒿(Descurainiasophia),命名為DsDGAT蛋白質,它具有如下所示的氨基酸序列SEQIDNO.2:MAILDSGDVTLTTTTENVAGEFMDLDRLRRRKSRSDSNGLLSDSSSGIDNSPSDDVGAPTDVRRDRIDSWNESMIFKQSHAGLFNLCVVVLVAWLNILAELLCFGDREFYKD麗NAKSVGDYWRMW雨PV服麗VRHIYFPCLRSKIPKTAAIIIAFLVSAVFHELCIAVPCRLFKLWAFMGIMFQVPLVFITNYLQERFGSMVG雨IFWFIFCIFGQPMCTLLYYIiDLMNRKGSMS。全文摘要本發明公開了一種二酰基甘油酰基轉移酶基因及其所編碼的蛋白質,屬于基因工程領域。播娘蒿二酰基甘油酰基轉移酶基因DsDGAT的cDNA序列SEQIDNO.1及其編碼的氨基酸序列SEQIDNO.2。本發明基因為雙子葉植物播娘蒿的首次報道,參與播娘蒿種子貯藏油脂的生物合成,mRNA表達分析表明該基因受傷害和低溫誘導。轉基因實驗證明該基因的超量表達能夠顯著提高油菜籽的含油量和粒重。DsDGAT可作為目的基因導入植物,提高植物種子產量和產油量。文檔編號C12N9/10GK101698851SQ200910233688公開日2010年4月28日申請日期2009年10月28日優先權日2009年10月28日發明者唐三元,張紅生,田琳琳,管榮展,鄭秀,陳健美申請人:南京農業大學
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