專利名稱：一種從槐角中制備染料木素的方法
技術領域：
本發明涉及一種從新鮮槐角制備染料木素方法，尤其是一種采用生物酶解制備染
料木素的方法。
背景技術：
染料木素 別名染料木黃酮，金雀異黃酮 化學名5，7-二羥基-3-(4-羥苯基)-4H-l-苯并吡喃-4-酮；4' ，5，7_三羥基異
黃酮 分子式Q孔。0s 分子量270. 24 分子結構
仁15H1005 2T0.24 染料木素屬于黃酮類物質，具有雌性激素及抗雌激素性質，具有抗氧化作用，可以 抑制酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性，可以抑制拓撲異購酶II的活性，具有誘發細胞程序性 死亡、提高抗癌藥效、抑制血管生成等作用。是一種很有潛力的癌癥化學預防劑，其抗癌作 用及機制具有廣泛的應用前景。 染料木素廣泛存在于植物的葉子和種子，但是含量都十分低，遠不能市場滿足需 求。現在市場上的染料木素多是槐角水解的得到產物。 槐角資源豐富，遍及全國各地。槐角含有大量的槐角苷，含量高達9%。《中藥材》 (第1期_2007)房敏峰、曲歡歡等人發表的"槐角不同炮制品中槐角苷的含量測定"文獻中 報道河南產地的生槐角中槐角苷含量達9. 14%。
槐角苷又叫染料木苷，分子式及分子量C21H2。01Q ;432. 37。 現有工藝多是乙醇提取，酸水解，氯仿丙酮乙酸乙酯萃取生產染料木素。酸水解對 設備腐蝕嚴重，多種有機試劑的應用給回收試劑和產品溶劑殘留控制造成困難，產品成本 高。如中國專利CN1269810C(授權號)"染料木素的提取方法"中公開的方法中就是采用 了酸水解、氯仿萃取等工序，再如中國專利CN1216878C"染料木素的制備工藝及藥物組合應 用"公開的方法中也采用了酸水解，有機試劑萃取等工序。現有生產染料木素的工藝，操作 難度大，設備要求程度高，產業化程度不高。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種從槐角制備染料木素的方法。該方法能夠降
低生產成本，提高產品收率，便于工業化操作。 為了解決上述技術問題，本發明提取技術方案如下 1)酶解將槐角粉碎30-60目，加入水調節pH，再加生物酶，保溫酶解；
2)提取酶解的槐角加入6-8倍乙醇提取，得提取液； 3)結晶提取液減壓濃縮，放置結晶，熱水洗滌結晶物，得染料木素粗品； 4)重結晶染料木素粗品用乙醇回流溶解，調節pH放置結晶，收集結晶物洗滌干
燥即得產品。
所述生物酶可選淀粉酶、纖維素酶、13 -葡聚糖苷酶中的一種或幾種。
所述調節pH的酸可選鹽酸、硫酸、磷酸的一種，優選鹽酸。 所述酶解條件為加水量是原料重量的1-2倍，pH調節為4. 5-5. 5，保溫溫度 45-55。C，加酶量為原料重量的1_2%，酶解時間10-15小時。 所述提取條件為乙醇濃度為90-95% ，回流提取2-3次，每次1_2小時。 所述結晶條件為染料木素提取液濃縮至乙醇濃度為60-70%，放置8-12小時，洗
滌熱水用量為結晶物量的5-6倍，熱水溫度70-80°C。 所述重結晶條件為乙醇濃度90-95X，ra調節4-5，結晶時間12-14小時，洗滌試 劑為50-70%乙醇，用量為結晶物的1-2倍
綜上所述，本發明存在以下優點 1)以槐角為原料，槐角中槐角苷含量高，更易提高產品收率和含量。
2)生物酶解工序，易操作，設備要求程度低。
3)乙醇結晶，試劑容易回收，產品易控制試劑殘留。 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限 于下列實施方式。
具體實施例方式 實施例1 : 槐角粉碎到30目，取10kg(槐角苷苷含量9. 5% )，加入20L水，調節ra至5，加 入200克纖維素酶，加熱至5(TC，保溫10小時。加入60L90X乙醇，回流提取2小時，提取 兩次，合并提取液減壓濃縮至醇濃度70%，放置結晶8小時，過濾結晶體加入其重量的5倍 8(TC熱水攪拌洗滌，濾過得染料木素粗品。染料木素粗品用95 %乙醇回流飽和溶解，調pH 至4，放置結晶12小時，過濾，得結晶體，加入結晶體重量2倍的50%的乙醇攪拌洗滌，濾 過，干燥得成品360克含量99%。
實施例2 : 槐角粉碎到60目，取10kg (槐角苷苷含量9% )，加入10L水，調節PH至5. 5，加入 100克P-葡聚糖苷酶，加熱至45t:，保溫12小時。加入80L90X乙醇，回流提取1小時，提 取兩次，合并提取液減壓濃縮至醇濃度65% ，放置結晶12小時，過濾結晶體加入其重量的6 倍7(TC熱水攪拌洗滌，濾過得染料木素粗品。染料木素粗品用93%乙醇回流飽和溶解，調 pH至4.5，放置結晶14小時，過濾，得結晶體，加入結晶體重量2倍的70X的乙醇攪拌洗滌，濾過，干燥得成品330克含量98%。
實施例3 : 槐角粉碎到40目，取10kg (槐角苷苷含量9% )，加入10L水，調節ffl至4. 5，加入 200克淀粉酶，加熱至55t:，保溫15小時。加入60L95X乙醇，回流提取1小時，提取三次， 合并提取液減壓濃縮至醇濃度60% ，放置結晶10小時，過濾結晶體加入其重量的6倍80°C 熱水攪拌洗滌，濾過得染料木素粗品。染料木素粗品用90%乙醇回流飽和溶解，調pH至5， 放置結晶14小時，過濾，得結晶體，加入結晶體重量2倍的70%的乙醇攪拌洗滌，濾過，干燥 得成品340克含量98%。
實施例4 : 槐角粉碎到40目，取10kg(槐角苷苷含量8. 5% )，加入10L水，調節ffl至5. 5，加 入100克纖維素酶和50克13 -葡聚糖苷酶，加熱至50°C ，保溫12小時。加入70L90%乙醇， 回流提取2小時，提取三次，合并提取液減壓濃縮至醇濃度60%，放置結晶12小時，過濾結 晶體加入其重量的5倍7(TC熱水攪拌洗滌，濾過得染料木素粗品。染料木素粗品用95%乙 醇回流飽和溶解，調PH至5放置結晶14小時，過濾，得結晶體，加入結晶體重量1倍的70% 的乙醇攪拌洗滌，濾過，干燥得成品320克含量99% 。
權利要求
一種從槐角中制備染料木素的方法，其特征在于包含以下步驟1)酶解將槐角粉碎30-60目，加入水調節pH，再加生物酶，保溫酶解；2)提取酶解的槐角加入6-8倍乙醇提取，得提取液；3)結晶提取液減壓濃縮，放置結晶，熱水洗滌結晶物，得染料木素粗品；4)重結晶染料木素粗品用乙醇回流溶解，調節pH放置結晶，收集結晶物洗滌干燥即得產品。
2. 如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述生物酶可選淀粉酶、纖維素酶、 P _葡聚糖苷酶中的一種或幾種。
3. 如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述調節pH的酸可選鹽酸、硫酸、磷酸的 一種，優選鹽酸。
4. 如權利要求1所述的制備方法，其特征在于所述酶解條件為加水量是原料重量的 l-2倍，pH調節為4. 5-5. 5，保溫溫度45-55。C，加酶量為原料重量的1_2%，酶解時間10-15 小時。
5. 如權利要求l所述的制備方法，其特征在于所述的提取條件為乙醇濃度為 90-95%，回流提取2-3次，每次1-2小時。
6. 如權利要求所述的制備方法，其特征在于所述結晶條件為染料木素提取液濃縮 至乙醇濃度為60-70%，放置8-12小時，洗滌熱水用量為結晶物量的5-6倍，熱水溫度 70-80°C。
7. 如權利要求所述的制備方法，其特征在于所述重結晶條件為乙醇濃度90-95%， PH 調節4-5，結晶時間12-14小時洗滌試劑為50-70%乙醇，用量為結晶物的1_2倍。
全文摘要
一種制備染料木素的方法，以槐角為原料，加入原料量的1-2％的生物酶，45-55℃保溫酶解10-15小時，乙醇回流提取2-3次，減壓濃縮放置結晶，熱水洗滌結晶，再回流溶解，調節pH至4-5放置結晶。采用該方法生產的產品含量高、收率高、成本低。該工藝易放大和產業化。
文檔編號C12P17/02GK101760488SQ200910234070
公開日2010年6月30日 申請日期2009年11月20日 優先權日2009年11月20日
發明者劉東鋒, 張翼, 楊成東 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司