專利名稱：一種生產高活性真菌α-淀粉酶的方法
技術領域：
本發明涉及廢棄資源再生利用技術領域，具體是一種利用花生四烯酸工業廢棄菌 絲體生產高活性真菌a-淀粉酶的方法。
背景技術：
真菌a _淀粉酶是一種廣泛地應用于淀粉糖漿、低聚糖、啤酒、烘焙食品、面制品 工業生產的重要酶制劑，銷售額占酶制劑市場的20%以上。目前，真菌a-淀粉酶的生產
技術為少數幾個國際大公司所壟斷，我國自主生產能力較弱，每年都要大量進口 ，且價格昂
蟲 貝° 而目前國內真菌a-淀粉酶研發生產的瓶頸是高產菌株的獲得和昂貴的工業化 生產成本。國內報道的真菌a-淀粉酶的酶活水平僅為200 600y/g，而世界上處于領先 地位的幾家酶制劑公司真菌a-淀粉酶的酶活水平已達到1500 2000ii/g。并且由于真 菌a-淀粉酶固體發酵過程中所必須添加的氮源多為價值較高的蛋白胨，酵母粉等，限制 了工業化生產。 因此，研制開發生產高活性真菌a -淀粉，降低產業成本，盡快實現大規模國產化 生產，對于滿足市場需求，調整我國酶制劑工業的產業結構，節約外匯支出等都具有十分重 要的意義。 食品工業廢棄物是一類特殊垃圾，含有大量的營養物質，但因為其營養豐富，容易 成為各種病菌的溫床，并且容易腐爛變質造成環境污染。如果不對這些廢棄物進行綜合利 用，勢必造成資源的浪費和環境的嚴重污染。 花生四烯酸是人體必備不飽和脂肪酸，但由于人體不能自身合成，主要依賴于從 飲食中攝取。在食品市場上有很大的需求量。而工業化發酵生產花生四烯酸的同時，也造 成了大量的發酵廢棄物的產生。對這些廢棄發酵菌絲體進行妥善處理、開發和再生利用，不 但可以消除環境污染，還可以減少蛋白胨，酵母膏的用量，降低生產成本。因此，加強對廢棄 發酵菌絲體的開發、利用，具有很大的經濟效益和社會效益。
發明內容
本發明提供了一種利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌a -淀粉酶
的方法，降低了生產成本，且操作簡單易行，生產條件溫和，能耗低，無二次污染。 本發明的技術方案為 —種利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌a -淀粉酶的方法，是將發 酵生產花生四烯酸后的廢棄發酵菌絲體作為發酵培養基基質生產高活性真菌a-淀粉酶， 其特征在于具體包括以下步驟 (1)、對發酵生產花生四烯酸后的廢棄發酵菌絲體進行干燥處理，得到菌絲體粉；
(2)、以菌絲體粉為氮源，按1 : 0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將
混合料按i : l-3的重量份比與表面活性劑溶液充分混勻得培養基，然后在i20-i25t:滅菌25-35分鐘； (3)、將真菌a-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養基上，接種量為 10-50% ，發酵溫度28-34°C ，發酵時間3-6天，然后浸提a -淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、將粗酶液經醇提、過濾、冷凍干燥得酶餅。 所述的利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌a -淀粉酶的方法，其特 征在于所述的表面活性劑溶液選用吐溫-SO，質量濃度為0. 5-1. 5% ;所述的醇提是將粗 酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 1. 5-2. 5的比例進行醇提。 本發明所述的菌絲粉中含有粗蛋白含量15-45%，水分含量5-10%，總糖含量
20_40%，氨基氮含量1-5%，并且還富含氮、磷、鉀、鈣以及各種微量元素，且均為天然營養
物，較易被微生物吸收利用，具有營養元素齊全、再利用價值高的特點。 本發明不僅成功解決了花生四烯酸工業廢棄物的處理問題，降低了生產成本和環
境污染，而且成功地利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體粉，代替了造價昂貴的工業營養物質
作為生產高活性真菌a-淀粉酶的原料，利用高活性米曲霉菌株生產出真菌a-淀粉酶。 本發明利用米曲霉菌株，生產出高活性的真菌a-淀粉酶，已達到國際先進水平，
而且成功實現了生產成本的降低，為我國淀粉酶工業化生產奠定了基礎。具有很大的經濟
效益和社會效益。 本發明操作簡單易行，生產條件溫和，能耗低，無二次污染，實現了工業廢棄物的 無害化、減量化、資源再生利用化。
圖1是本發明的工藝流程圖。
具體實施例方式
本發明所用花生四烯酸工業廢棄菌絲體粉為武漢烯王生物工程有限公司提供。
—種利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌a —淀粉酶的方法
(1)、對發酵生產花生四烯酸后的廢棄發酵菌絲體進行干燥處理，得到菌絲體粉；
(2)、以菌絲體粉為氮源，按1 : 0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將 混合料按l : 1-3的重量份比與質量濃度為1%的表面活性劑溶液(吐溫_80)充分混勻得 培養基，然后在12rC滅菌30分鐘； (3)、將真菌a-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養基上，接種量為 10-30% ，發酵溫度28-34°C ，發酵時間3-6天，然后浸提a -淀粉酶，得到粗酶液；
(4)、將粗酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 2的比例進行醇提、過濾、冷凍干燥得 酶餅。
權利要求
一種利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌α-淀粉酶的方法，是將發酵生產花生四烯酸后的廢棄發酵菌絲體作為發酵培養基基質生產高活性真菌α-淀粉酶，其特征在于具體包括以下步驟(1)、對發酵生產花生四烯酸后的廢棄發酵菌絲體進行干燥處理，得到菌絲體粉；(2)、以菌絲體粉為氮源，按1∶0.5-10的重量份比與麩皮混合得混合料，然后將混合料按1∶1-3的重量份比與表面活性劑溶液充分混勻得培養基，然后在120-125℃滅菌25-35分鐘；(3)、將真菌α-淀粉酶的米曲霉菌株接種于滅菌后的培養基上，接種量為10-50％，發酵溫度28-34℃，發酵時間3-6天，然后浸提α-淀粉酶，得到粗酶液；(4)、將粗酶液經醇提、過濾、冷凍干燥得酶餅。
2. 根據權利要求l所述的利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌a-淀粉酶 的方法，其特征在于所述的表面活性劑溶液選用吐溫-SO，質量濃度為0. 5-1. 5% ;所述的 醇提是將粗酶液按酶與乙醇的重量份比為1 : 1.5-2.5的比例進行醇提。
全文摘要
本發明公開了一種利用花生四烯酸工業廢棄菌絲體生產高活性真菌α-淀粉酶的方法，是以花生四烯酸工業廢棄菌絲粉代替價格昂貴的蛋白胨等氮源作為培養基基質，利用米曲霉菌株固態發酵生產高活性真菌α-淀粉酶。本發明操作簡單易行，生產條件溫和，能耗低，無二次污染，實現了工業廢棄物的無害化、減量化、資源再生利用化。
文檔編號C12N9/30GK101748106SQ201010101850
公開日2010年6月23日 申請日期2010年1月26日 優先權日2010年1月26日
發明者吳金勇, 姚建銘, 李俊, 王姍姍, 陳祥松 申請人:中國科學院等離子體物理研究所