專利名稱:生產靈菌紅素的菌株及其方法
技術領域:
本發明涉及一種沙雷氏菌及其用途,尤其涉及一種生產靈菌紅素的沙雷氏菌株及 其方法。
背景技術:
靈菌紅素(Prodigiosins)具有以下所示的結構
權利要求
1.一種生產靈菌紅素的菌株,保藏號為CGMCC 4074。
2.根據權利要求1所述的生產靈菌紅素的菌株,其特征是所述菌株所成的菌落呈紅 色,不透明,菌體為0. 5 1. ΟμπιΧΟ. 8 1. 2μπι。
3.一種發酵生產靈菌紅素的方法,包括如下步驟1)菌種培養將權利要求1所述菌株在LB固體培養基于25-40°C恒溫培養;2)種子液的制備將步驟1)固體培養基上的單菌落接入裝有液體培養基的容器中,裝 液量為容器體積1/3-1/4,于20-40°C下恒溫培養10-24小時,轉速為150_220rpm ;3)搖瓶液體發酵將步驟2)種子液轉入滅菌后的液體發酵培養中,接種量為I-IOv/ v%,裝液量 50ml/250ml 搖瓶,于 28_38°C恒溫培養 48_72h,轉速 150_220rmp ;4)提取靈菌紅素。
4.根據權利要求3所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述提取靈菌紅素的方 法為把所述步驟3)的發酵液離心處理,上清液加等體積的乙酸乙酯萃取,振蕩20min,靜 置30min分層,SOOOrpm離心lOmin,收集上相乙酸乙酯,發酵液離心殘渣加與原發酵液等體 積的丙酮,振蕩lOmin,靜置lOmin,SOOOrpm離心lOmin,殘渣繼續用丙酮反復抽提3次,所 得上相與乙酸乙酯相混合,經旋轉蒸發濃縮,得到紅色素靈菌紅素粗品。
5.根據權利要求3所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的液體培養基的 組成,以重量體積百分比計,甘油0. 1-2. O%,蛋白胨0. 8-1. 2 %,酵母粉0. 5-1. O %,NaCl 1. 0-2. 0%,pH 值為 5. 0-9. O。
6.根據權利要求3所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的發酵培養基的 組成,以重量體積百分比計,碳源1-10%,氮源0.5-3%,氨基酸0.04-4%,NaCl 0-5%, MgCl2O. 01-0. 1%, pH 值為 5. 0-9. O。
7.根據權利要求6所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的碳源為甘油、甘 露醇、蔗糖、葡萄糖、果糖、豆油和芝麻油之一種或幾種。
8.根據權利要求6所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的氮源為蛋白胨、 酵母膏、玉米漿、豆餅粉、芝麻粉、花生粉、(NH4)2SO4和硝酸鹽之一種或幾種。
9.根據權利要求6所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的氮源含量為 0. 5-2%。
10.根據權利要求6所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的氨基酸為甘氨 酸、脯氨酸或天冬氨酸。
11.根據權利要求10所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的甘氨酸含量為 0. 2% -0. 4%。
12.根據權利要求10所述的發酵生產靈菌紅素的方法,其特征是所述的脯氨酸或所述 的天冬氨酸含量為0. 04-0. 2%。
全文摘要
一種生產靈菌紅素的菌株,屬于粘質沙雷氏菌,保藏號為CGMCC 4074。使用本發明菌株,可在液態發酵培養基中高效合成紅色素,生產效率較高。本發明的菌株對碳源和氮源要求較低,碳源可以是單一碳源或是混合碳源,氮源可以是單一氮源或是混合氮源。本菌株連續傳代10代以上,遺傳穩定性好,操作簡單。
文檔編號C12R1/43GK102002469SQ20101029555
公開日2011年4月6日 申請日期2010年9月28日 優先權日2010年9月28日
發明者劉曉俠, 胡星夏, 陳曉麗 申請人:嘉興學院