專利名稱：一種微囊藻培養基配方的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種藻類培養基，特別地涉及一種微囊藻的培養基配方。
背景技術：
微囊藻毒素(MCs)是一種環七肽化合物，其基本結構為環(D-丙氨酸-L-X-D-赤-甲基-β -D-異天冬氨酸-L-Z-Adda-D-異谷氨酸-N-甲基脫氫丙氨酸)， 其中N-甲基脫氫丙氨酸為一種特殊的氨基酸，含α、β不飽和雙鍵，Adda結構為3-氨基-9-甲氧基-2，6，8-三甲基-10-苯基-4，6- 二烯酸。Χ、Υ分別為兩種可變的L氨基酸， 其氨基酸的更替或者其它氨基酸的去甲基化，衍生出眾多的毒素類型，其中MC-LR (分子式為C49H75N13012)毒性最大。
近年來，我國太湖、松花江、淮河等飲用水源地藍藻水華污染嚴重，向水體釋放大量的MC-LR，由MC-LR引起的健康問題日益受到重視，大量科技工作人員正在深入研究 MC-LR各種毒理和分解特性。由于研究過程中MC-LR樣品嚴重缺乏，只能依賴進口。一支規格為IOug的MC-LR進口標準品售價高達3500元，使得實驗室研究成本較高，一般中小研究機構難以開展相關研究工作。
因此需要在實驗室中培養微囊藻以對其生理特性進行研究，并用于提取微囊藻毒素。但是目前微囊藻的培養方法少有報道，而專門用于微囊藻的培養基的報道就更少了。發明內容
本發明提供了一種用于微囊藻的培養基，該培養基的配方如下
NaNO3I I. 2g/L, NH4NO3IOO 105mg/L，KN03450 455mg/L，CaCl2. 2H20500 510mg/L, MgSO4. 7H20 170 175mg/L, K2HPO4 200 205mg/L, KIO. 5 0. 55mg/L, H3BO3 9. I 9. 3mg/L, MnSO4. 4H20 20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 3 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 02 0. 03mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 02 0. 03mg/L ；
檸檬酸鐵6 10mg/L，Na2-EDTA. 2H20 15 20mg/L，肌醇 15 20mg/L，煙酸 0· 2 O. 3mg/L,維生素 B12O. 7 0. 8mg/L, NNA 0· I 0. 15mg/L, IBA 0. 05 0. 08mg/L。
優選地，在上述培養基配方中再加入Mo (NO3) 3· 5H20 2 3mg/L。
本發明所述的培養基在培養微囊藻時具有存活率高，生長速率快的特點，而且不易被其他細菌污染。下面的實施例以及對比實驗可以清楚地反應本發明所述培養基的特具體實施方式
實施例I
配制如下配方的培養基
NaN03lg/L, NH4NO3100mg/L, KN03450mg/L, CaCl2. 2H20 500mg/L, MgSO4. 7H20 170mg/ L, K2HP04200mg/L, KI 0. 5mg/L, H3B039. lmg/L, MnSO4. 4H20 20mg/L，ZnSO4. 7H20 5. 3mg/L,Mo (NO3) 3- 5H202mg/LCuS04. 5H20 O. 02mg/L, CoCl 2· 6Η20 O. 02mg/L ；
朽1檬酸鐵 6mg/L, Na2-EDTA. 2H20 15mg/L,肌醇 15mg/L,煙酸 0. 2mg/L,維生素 B12 0. 7mg/L, NNA 0. lmg/L, IBA 0.05mg/L。
取對數生長期的銅綠微囊藻接種到該培養基中進行培養，每天光照8小時，培養箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養基中微囊藻的細胞密度。
實施例2
NaNO3L 2g/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl 2· 2H20 510mg/L, MgSO4. 7H20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI 0. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, Mo (NO3) 3. 5H20 3mg/L, CuSO4. 5H20 0. 03mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 03mg/L ；
檸檬酸鐵lOmg/L, Na2-EDTA. 2H20 20mg/L,肌醇 20mg/L,煙酸 0. 3mg/L,維生素 B12O. 8mg/L, NNA 0. 15mg/L, IBA 0. 08mg/L。
取對數生長期的銅綠微囊藻接種到該培養基中進行培養，每天光照8小時，培養箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養基中微囊藻的細胞密度。
實施例3
NaNO3L lg/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl 2· 2Η20 510mg/L, MgSO4. 7Η20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI O. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, Mo (NO3) 3. 5H20 2. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 025mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 025mg/L ；
梓檬酸鐵8mg/L, Na2-EDTA. 2H20 18mg/L,肌醇 18mg/L,煙酸 0. 25mg/L,維生素 B12O. 75mg/L, NNA 0. 12mg/L, IBA 0. 06mg/L。
取對數生長期的銅綠微囊藻接種到該培養基中進行培養，每天光照8小時，培養箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養基中微囊藻的細胞密度。
實施例4
NaNO3L lg/L, NH4N03105mg/L, KN03455mg/L, CaCl2. 2H20 510mg/L, MgSO4. 7H20 175mg/L, K2HP04205mg/L, KI 0. 55mg/L, H3B039 . 3mg/L, MnSO4. 4H20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 025mg/L, CoCl 2. 6H20 0. 025mg/L ；
梓檬酸鐵8mg/L, Na2-EDTA. 2H20 18mg/L,肌醇 18mg/L,煙酸 0. 25mg/L,維生素 B12O. 75mg/L, NNA 0. 12mg/L, IBA 0. 06mg/L。
取對數生長期的銅綠微囊藻接種到該培養基中進行培養，每天光照8小時，培養箱溫度控制在25攝氏度左右，每3天記錄培養基中微囊藻的細胞密度。
培養基對比實驗
使用BGlI，DM, JM這三種培養基作為對照培養基，與實施例I — 4進行對比，對比的結果如下表所示
權利要求
1.一種用于微囊藻的培養基，該培養基的配方如下NaNO3I I. 2g/L, NH4NO3IOO 105mg/L，KN03450 455mg/L，CaCl 2. 2H20500 510mg/L, MgSO4. 7H20 170 175mg/L, K2HP04200 205mg/L,KI0. 5 0. 55mg/L, H3B039. I 9. 3mg/L, MnSO4. 4H20 20 20. 5mg/L, ZnSO4. 7H20 5. 3 5. 5mg/L, CuSO4. 5H20 0. 02 0. 03mg/L,CoCl 2. 6H20 0. 02 0. 03mg/L ； 檸檬酸鐵 6 10mg/L，Na2-EDTA. 2H20 15 20mg/L，肌醇 15 20mg/L，煙酸 0· 2 O.3mg/L,維生素 B12O. 7 0. 8mg/L, NNA 0· I 0. 15mg/L, IBA 0. 05 0. 08mg/L。
2.權利要求I中所述的用于微囊藻的培養基，其特征在于在上述培養基配方中再加入Mo (NO3) 3- 5H20 2 3mg/L。
全文摘要
本發明提供了一種用于微囊藻的培養基，該培養基的配方如下NaNO31～1.2g/L，NH4NO3100～105mg/L，KNO3450～455mg/L，CaCl 2.2H2O 500～510mg/L，MgSO4.7H2O 170～175mg/L，K2HPO4200～205mg/L，KI0.5～0.55mg/L，H3BO39.1～9.3mg/L，MnSO4.4H2O 20～20.5mg/L，ZnSO4.7H2O 5.3～5.5mg/L，CuSO4.5H2O 0.02～0.03mg/L，CoCl2.6H2O 0.02～0.03mg/L；檸檬酸鐵6～10mg/L，Na2-EDTA.2H2O 15～20mg/L，肌醇15～20mg/L，煙酸0.2～0.3mg/L，維生素B120.7～0.8mg/L，NNA 0.1～0.15mg/L，IBA 0.05～0.08mg/L。本發明所述的培養基在培養微囊藻時具有存活率高，生長速率快的特點，而且不易被其他細菌污染。
文檔編號C12R1/89GK102978116SQ20121043575
公開日2013年3月20日 申請日期2012年11月5日 優先權日2012年11月5日
發明者彭江晨 申請人:溧陽市天目湖保健品有限公司