以羅漢果苦果、落地果為原料合成甜味皂苷的方法
【專利摘要】本發明公開了一種以羅漢果苦果、落地果為原料合成甜味皂苷的方法，包括以下步驟：1)取羅漢果苦果或落地果，破碎，加水或45%～55%體積的乙醇提取，提取液過大孔樹脂柱層析，得到羅漢果苦味皂苷，其中羅漢果苷Ⅱ和/或苷Ⅲ的含量≥50%；2)取羅漢果苦味皂苷溶于水中，加入淀粉和環糊精葡萄糖基轉移酶，于60～65℃條件下酶催化反應至完全，滅酶活，過濾，收集濾液；3)所得濾液過大孔樹脂柱或硅膠柱層析，水洗，收集30～40%體積的乙醇洗脫液；或者是將濾液直接過氧化鋁柱或活性炭柱，收集流出液；將收集的30～40%體積的乙醇洗脫液或流出液濃縮、干燥，即得。本發明從根本上解決羅漢果生長過程中的苦果和落地果問題。
【專利說明】以羅漢果苦果、落地果為原料合成甜味皂苷的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于食品化學領域，具體涉及一種以羅漢果苦果、落地果為原料合成甜味 皂苷的方法。
【背景技術】
[0002] 羅漢果（Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffrey)，原產桂北山區，用其成熟 干果泡制的飲品味甜清新、風味獨特，是廣西著名的藥食兩用特產。其甜味成分羅漢果皂苷 (mogrosides)已被提取并開發成為高級的甜味劑使用。羅漢果甜苷的甜度達到蔗糖的約 300倍，其甜味純正無后苦味，并且熱量幾乎為零，因而作為功能性無糖甜味劑現已廣泛應 用于保健食品及飲料添加行業，具備極佳的市場開發前景。
[0003] 羅漢果皂苷是一類葫蘆烷型的四環三萜皂苷，目前已經從羅漢果中提取出了二十 多種不同的天然羅漢果皂苷成分，不同羅漢果皂苷的區別主要是苷元3位和24位連接的葡 萄糖鏈結構不同，通過分析羅漢果皂苷的結構與味覺的關系可以發現：苷元本身是苦味的， 而苷元的3位和24位連接的葡萄糖殘基總數為1?3個時是苦味（苦苷）或無味的，連接 4?6個葡萄糖殘基則是甜味的（甜苷），其口味的苦與甜是由苷元所連接的葡萄糖殘基數 目所決定的，而糖鏈上葡萄糖殘基相互連接的不同位置只能改變皂苷的相對甜度。羅漢果 皂苷的結構式如下所示：
[0004]
【權利要求】
1. 以羅漢果苦果、落地果為原料合成甜味皂苷的方法，其特征在于包括以下步驟： 1) 苦味皂苷的制備：取羅漢果苦果或落地果，破碎，加水或45%?55%體積的乙醇提 取，提取液過大孔樹脂柱層析，水洗樹脂柱至流出液無色，然后用70?90%體積的乙醇 洗脫，洗脫液回收乙醇，干燥，得到羅漢果苦味皂苷，其中羅漢果苷II和/或苷III的含量 ^ 50% ； 2) 酶催化反應：取羅漢果苦味皂苷溶于水中，加入羅漢果苦味皂苷重量1?4倍的淀 粉，再按400?650U/g羅漢果苦味皂苷的量加入環糊精葡萄糖基轉移酶，于60?65°C條件 下酶催化反應至完全，滅酶活，反應液過濾，收集濾液； 3) 后處理：所得濾液過大孔樹脂柱或硅膠柱層析，水洗，乙醇梯度洗脫，收集30? 40%體積的乙醇洗脫液；或者是將濾液直接過氧化鋁柱或活性炭柱，收集流出液；將收集的 30?40%體積的乙醇洗脫液或流出液濃縮、干燥，得到羅漢果甜味皂苷混合物。
2. 根據權利要求1所述的用環糊精葡萄糖基轉移酶催化羅漢果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步驟1)中，所述大孔樹脂為聚苯乙烯型。
3. 根據權利要求1所述的用環糊精葡萄糖基轉移酶催化羅漢果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步驟2)中，所述的淀粉選自糊精、水溶性淀粉、馬鈴薯淀粉和玉米 淀粉中的一種或兩種以上的組合。
4. 根據權利要求1所述的用環糊精葡萄糖基轉移酶催化羅漢果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步驟2)中，所述環糊精葡萄糖基轉移酶的加入量為550?650U/g 羅漢果苦味皂苷。
5. 根據權利要求1所述的用環糊精葡萄糖基轉移酶催化羅漢果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步驟3)中，所述大孔樹脂為聚苯乙烯型。
【文檔編號】C12P33/00GK104059959SQ201310089329
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2013年3月20日 優先權日:2013年3月20日
【發明者】王磊, 劉金磊, 盧鳳來, 楊子明, 李典鵬, 宋云飛, 李元元 申請人:廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所, 桂林萊茵生物科技股份有限公司