一種檢測志賀氏菌的核酸側向流試紙條的制備方法及其應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了食源性病原微生物福氏志賀氏菌(Shigellaflexneri)的快速核酸試紙條檢測試劑盒及其應用方法，屬于分子生物學和免疫學領域。本發明將核酸檢測中的聚合酶鏈式反應的高靈敏度、高特異性方法與免疫學檢測中的免疫膠體金快速檢測技術相結合，通過設計獨特的引物，對引物加以標記，對提取的靶DNA進行特異性擴增以及擴增產物在展開液中與試紙條條上固定的金標記抗體結合而形成穩定、可見的檢測帶及質控帶，從而實現對主要食源性病原微生物快速、準確的檢測。
【專利說明】—種檢測志賀氏菌的核酸側向流試紙條的制備方法及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于分子生物學和免疫學領域，涉及食品及加工原料中福氏志賀氏菌的核酸擴增產物側向流免疫膠體金試紙條試劑盒的制備和應用方法。
【背景技術】
[0002]為有效控制食品生產和進出口貿易中因致病性微生物引起的食源性疾病，保證食品領域的公共安全，需要開發靈敏、便捷、準確的食源性病原微生物檢測方法。在食源性疾病危險因素中，在我國流行的食源性疾病中，微生物性食物中毒位居第一，而在食源性病原微生物中其中最典型的致病菌是志賀氏菌、阪崎腸桿菌、金黃色葡萄球、單增李斯特菌、大腸桿菌0157:H7等病原菌。志賀氏菌是革蘭氏陽性菌，廣泛分布于自然界或寄生于人體及動物體表和體內，金黃色葡萄球菌的致病力強，常可引起皮膚、組織和器官的炎癥，產生的腸毒素可污染食物導致食物中毒。
[0003]傳統的食品生產、質量監督和進出口檢驗檢疫中，常規的細菌培養及鑒定方法，檢驗步驟繁瑣，檢驗周期長，對有些細菌無法給出快速和準確的鑒定，不能完全滿足質量控制及進出口檢驗檢疫的要求。基于核酸擴增的方法檢測對象是來自病原微生物的DNA，經特異性擴增后進行產物鑒定，這類方法因靈敏度高，特異性好，耗時少而發展迅速，主要的方法包括普通/突光PCR和核酸環介導等溫擴增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)(發明專利:快速檢測志賀氏菌的LAMP試劑盒，
【發明者】鄭文杰, 趙良娟, 張宏偉, 劉培, 趙宏, 奚文輝, 杜敬, 韓宇寧, 尹長城, 劉斯奇 申請人:天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心